药用真菌"双向发酵"的起源、发展及其优势与潜力

笔者上世纪80年代末提出用药用真菌发酵药材的设想,实验证实在农副产品构成的营养基质内掺入适量经特选的含有活性成分的中药材作为药性基质,致使发酵具有双向性,其产物由药用菌质(如槐耳菌质)转为药性菌质(如槐芪菌质○F),可以显著增强其免疫活性,提高药效与疗效,这是现代“双向发酵”工程的起源,此后因理论与技术发展,使它被认为是生物技术的新起点,中药新药研制的新途径,各种菌质必将成为中药内菌物药的重要组成。较深入和更扩大的研究认为,它有增效、扩用、解毒持效等作用可发展为用中药二次开发和兽药领域。与其它有关生物技术比较,在现阶段有一定的优势与潜力。“双向发酵”研发道路宽广,前景良好,也还存在需要研究解决的问题,如怎样以中医药理论指导构成发酵组合和对各种菌质的科学定性等,尤其需要从基质发酵为菌质的大规模生产的机械化、自动化设备。     

槐耳菌质成分对小鼠免疫功能的影响

中国古代著名药用菌槐耳在营养基质上进行固体发酵，产生槐耳菌质，从中提取的清膏及进一步提取的蛋白多糖，都有明显的抑制动物体内瘤和延长生命等作用，抑瘤率可达５０％左右，清膏治疗中晚期发性肝癌总有效率达７５．７１％，它们具有促进多种免疫功能的作用，是良好的生物反应调节剂，并有可能进一步扩大其适应症。     

灵雷菌质的急性毒性实验研究

研究双向性固体发酵后灵雷菌质的急性毒性。用双向性固体发酵技术获得灵雷菌质,用Bliss法计算小鼠的半数致死量（LD50）。结果表明各灵雷菌质组的LD50均高于雷公藤生药组,尤以3G30组最高。双向性固体发酵技术可降低雷公藤的急性毒性。     

桦褐孔菌菌质提取物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究

目的:研究桦褐孔菌菌质不同溶剂提取组分对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的抑制作用。方法:将桦褐孔菌菌质醇提后分别梯度萃取获得石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水提物,将残渣沸水浸提醇沉得粗多糖;将获取的各活性组分分别用于α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定,同时与桦褐孔菌菌核进行比较。结果:桦褐孔菌菌质和菌核各组分对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶均有一定的抑制作用,且随其质量浓度的递增而增强(其中石油醚提取组分的抑制率为0);菌质和菌核粗多糖组分对这两种酶的抑制作用明显优于各自的其它组分(P0.01);菌质粗多糖对这两种酶的抑制率比菌核粗多糖低(P0.05)。结论:运用双向固体发酵技术获得的桦褐孔菌菌质粗多糖有较好的抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的作用。     

红栓菌和槐耳菌菌体蛋白对硒富集的比较

主要研究了红栓菌和槐耳菌对硒的耐受力以及菌丝体蛋白对硒的富集作用。结果表明．红栓菌的生长速率明显要快于槐耳菌．蛋白质富集硒的能力比槐耳菌强．但对硒的敏感性较强。当发酵培养基中硒的添加量达到25μg／ml时．对菌丝体生长的抑制率最小。且在发酵初期添加无机硒．红栓菌蛋白质富硒能力最强．其中蛋白总硒量为255.87μg．蛋白质中硒含量为6．40μg／mg。     

药用真菌新型(双向型)固体发酵工程

简述药用真菌从制曲工艺到固体发酵、新型（双向性）固体发酵的发展情况，着重介绍新固体发酵工程的理论依据、工艺特色等以及将它研制新药的基本程序，充分说明药用真菌的远大前景。     

双向固体发酵后雷公藤菌质化学成分研究

目的：在前期药理实验基础上,分析双向性固体发酵后雷公藤菌质的化学成分。方法：采用高效液相色谱法和薄层色谱法,研究雷公藤药材和不同发酵时间药性菌质的化学成分动态变化规律。结果：药性菌质的雷公藤甲素含量低于原药材低;分别在218nm和250nm波长下,高温灭菌药材和发酵30d的药性菌质的液相图谱有3处明显的变化;乙酸乙酯提取物的薄层层析发现有一蓝色斑点为发酵后新增成分,而甲醇提取物薄层层析发现有2个斑点随发酵时间的延长含量降低。结论：雷公藤经药用真菌发酵后化学成分发生变化,其中一些化学成分的变化规律与药理实验结果存在相关性,可作为发酵终点判断标准。     

桑黄燕麦固体发酵菌质多酚含量及其抗氧化活性分析

利用燕麦作为基质对桑树桑黄菌丝进行固体发酵,测定固体发酵菌质中的多酚含量及其抗氧化活性,研究分析固体发酵培养时间、通气培养条件与多酚含量及其抗氧化能力的关系。试验结果:固体发酵不同培养时间和满瓶后不同通气培养条件对菌质中的多酚含量及其抗氧化活性的影响显著,桑黄固体发酵最佳条件为满瓶后开盖继续培养7~14 d。     

两种茯苓固体发酵菌质的制备及其主要成分含量测定

采用固体发酵技术,得到两种茯苓固体发酵菌质。以茯苓(Poria coco)为发酵菌株,分别以山药(Dioscorea opposita)和面粉为培养基进行发酵,分别在茯苓菌丝满瓶后40 d、50 d、60 d、70 d、80 d时取样,测定样品中茯苓酸、尿囊素、浸出物和水分的含量。结果表明,以山药为基质发酵茯苓,基质含水量50%,转化温度25℃,转化时间为茯苓菌丝满瓶后60 d,可以制备良好的茯苓-山药固体发酵菌质;以面粉为基质发酵茯苓,基质含水量40%,转化温度25℃,转化时间为菌丝满袋后60 d,可制成良好的茯苓-面粉固体发酵菌质。     

菌物挺进兽药域菌质制抗禽流感

报告药用真菌开始应用在畜牧业中的研究情况．试验结果显示：在从肉鸡的全价日粮中添加一定量的经固体发酵或双向性固体发酵产生的药用菌质和药性菌质．能够显著挺高动物的生产性能和机体免疫力。在饲喂了42d后（菌质添加天数为5-35日龄）．试验一组即药用菌质组平均每只比对照组体增重（终重-初始重）增加了0．174Kg（提高了10.3％）．禽流感-H5亚型的血清抗体滴度比对照组提高了1．9个滴度：试验二组即药性茼质组禽流感-H5亚型的血清抗体滴度比对照组挺高了3．2个滴度。体增重增加了0．058Kg（提高了3．5％）。试验将为防治禽流感等的后继研究和生产性与临床试验提供理论依据和实验基础．     

基于响应面的蛹虫草菌质固体发酵工艺条件优化

优化蛹虫草固体发酵菌质工艺以缩短发酵周期,提高有效成分含量,有效节约成本。通过单因素筛选和响应面优化法对碳源、氮源、料液比、小麦装料量、接种量、培养时间和腺苷浓度等培养条件进行优化。结果显示,蛹虫草固体发酵菌质最佳培养方案的小麦装料量为15 g,料液比为1.0∶1.3,接种量为2 mL,培养时间为17 d,营养液碳源为可溶性淀粉、氮源为黄豆粉,腺苷的质量浓度为76 g·L^-1。此条件下虫草素含量为3.718mg·g^-1,与初始配方相比,含量提高了4.47倍。工艺优化后的蛹虫草菌质固体发酵周期短,有效成分含量提高,研究结果为后期发酵菌质的开发利用奠定了基础。     

赭鳞蘑菇固体发酵培养基优化及发酵特性

分别以菌丝生长速度和麦角甾醇含量为指标,采用单因素和正交实验优化赭鳞蘑菇(Agaricus subrufescens)固体发酵培养基,用优化后的固体发酵培养基培养,测定期间菌质干重及麦角甾醇含量,判定发酵终点。结果表明:赭鳞蘑菇最优固体发酵培养基为50 g玉米糁添加50 mL含35 g/L白砂糖和80 g/L麸皮(煮汁)的营养液,最佳发酵终点为培养40 d,此时菌质干重为91.45 g,麦角甾醇总量为31.426 mg。     

槐耳菌液体培养富硒的研究

当发酵培养基中的硒浓度达到20μg/mL时。对菌丝体生长的抑制率最小，多糖含量达到51．3mg／g。同时进行了槐耳菌富硒条件的优化：pH5．5，接种量10％。装液量80mL/500mL三角瓶。28℃。200r／min发酵培养9d。且在发酵第5d加入硒溶液。槐耳多糖含量达到50．3mg／g，多糖中硒含量达到761．9μg／g，多糖对硒的转化率达到35．8％。     

槐栓菌液体培养的研究

槐栓菌(Trametes robiniophila)是一种药用真菌,属于担子菌纲,多孔菌目,多孔菌科,栓菌属。菌盖无柄,半圆形,白色,生长在槐、洋槐及青檀等树干上,产于我国河北、陕西等地。槐栓菌主要用于治疗扁桃腺炎、肺炎和肝炎等疾病。目前临床应用的槐栓菌,均以固体培养法制得,数量有限。为了扩大药源,我们于1980年开展了槐栓菌液体培养的研究,结果如下。     

灵雷菌质提取物体内抗肿瘤作用的实验研究

采用小鼠肉瘤(S180)移植性肿瘤模型,观察灵雷菌质乙酸乙酯部位、正丁醇部位、石油醚部位和水部位提取物的肿瘤抑制作用,并测定小鼠的胸腺指数及脾脏指数。结果表明所有的提取物都呈现出明显的抑瘤效果,抑瘤率均大于35%,其中部分正丁醇部位的抑瘤率达到了68.88%。抑瘤效果由弱至强的顺序为石油醚部位<水部位<乙酸乙酯部位<正丁醇部位,而胸腺指数与脾脏指数则显示只有乙酸乙酯部位组有较明显的免疫抑制效果。双向性固体发酵可降低雷公藤的毒性,尤其正丁醇部位和水部位的毒性可能较弱。     

平菇"两菌结合"栽培法

平菇“两菌结合”栽培法 ,是河北省科学院微生物研究所李育岳研究员等人研究提出 ,用酵素菌发酵作物秸秆栽培平菇的新技术。1　特点1 1　酵素菌在发酵过程中产生多种活性酶 ,能将作物秸秆、谷壳、藤蔓、树叶、杂草等植物纤维质进行充分发酵 ,催化分解成容易被平菇菌丝分解吸收     

灵丹菌质双向发酵工艺及药效品质研究

采用双向固体发酵工程技术,以灵芝为发酵菌株,在含有不同比例丹参边角料的培养基中进行发酵,观察了不同培养基中菌丝的生长情况,测定了发酵产物（灵丹菌质）中多糖、蛋白质、三萜、丹参酮的含量变化,并研究了其提取物对小鼠活血化瘀功效的影响。结果表明灵丹菌质的最佳发酵组合为组合4,发酵40d,多糖含量26.48μg·g-1,蛋白质含量为397.24μg·g-1,灵芝酸三萜含量为4.92%。药效学实验显示,灵丹菌质组合4具有活血化瘀的药效,优于丹参药材。     

长柄侧耳人参菌质多糖预防小鼠高血脂的研究

目的:研究长柄侧耳菌质多糖以及培养基中加人参药渣的菌质混合多糖对小鼠高脂血症的预防作用。方法:将健康昆明小鼠随机分为5组,分别为空白组、模型组、阳性对照组、长柄侧耳菌质多糖组、长柄侧耳人参菌质多糖组,除空白组外均喂高脂饲料。各组小鼠每天灌胃给药一次,连续灌胃45d后,小鼠断头取血,分离血清,测血清中的总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)含量。结果:长柄侧耳菌质多糖和长柄侧耳人参菌质多糖都能显著降低高脂小鼠CHO、TG、LDLC含量,有显著性升高HDLC含量的作用。结论:长柄侧耳菌质多糖、长柄侧耳人参菌质多糖均能有效调节机体脂质代谢,对小鼠高脂血症具有预防作用。     

复方灵芝虫草胶囊的研制和临床初步观察

以中草药为培养基质,在无菌条件下分别接种蛹虫草和灵芝菌种,通过优化条件,定向强化发酵,互相作用,强强联合,获得具有明显治疗效果的新的菌质。经干燥、粉碎、分装构成一定剂型的新药,定名为复方灵芝虫草胶囊。毒理及动物试验,证明该药安全、无毒副作用。又经具完整资料的32名病例的临床观察,证明其疗效确凿。     

一株产纤维素酶硫磺菌的生物学特性及其对松针降解效果研究

为提高松针堆肥中纤维素的降解效率,缩短堆肥腐熟时间,鉴定从大型真菌中筛选出的1株产纤维素酶活性较强的硫磺菌菌株LS,并综合菌丝生长速度和长势,确定其最适生长条件;采用固体发酵工艺,通过测定松针中木质纤维素的含量,探究硫磺菌对松针中木质纤维素的降解作用.结果表明:该大型真菌为非褶菌目Aphyllophorales,多孔菌...