家蚕第26连锁群:煤灰色—石河不眠蚕

迄今,家蚕已确定了25个连锁群,但其染色体数为2n=28,即还余有3个未知连锁群(Doira,1983)。著者等以确定新连锁群及充实连锁图为目的,进行新基因的寻找及其连锁分析。而这次从实验饲育中的一杂交区中,发现了幼虫一龄经过约1周后毙死的隐性致死突变。形态特征类似的遗传不眠     

家蚕性连锁致死突变的诱发

<正> 家蚕是雌性异型昆虫,雌蚕性染色体组成为ZW,雄蚕为ZZ。W染色体除了有决定雌性的功能外,还没有确认存在其他的生理或形态基因。已知有许多形态和生理的基因位于Z染色体上。凡是Z染色体上的基因所支配的性状表现为性连锁遗传。如果隐性致死突变发生在Z染色体上,就表现     

家蚕虎斑易位系（ZW·^Ze）染色体的研究

以家蚕虎斑易位系ＺＷ·＾Ｚｅ的卵巢为材料，仿今井（１９８０）涂片法制片，Ｇｉｅｍｓａ染色，光学显微镜下观察粗线期染色体，发现末端分开呈不对称的“Ｙ”字形二价染色体或提前分离的二价染以体，其分离较其它二价体显著提前，推测其为性（ＺＷ）染色体，组型分析该特异性二价染色体位于第１３号，这对于利用家蚕丰富的突变材料，进行染色体研究，进而绘制细胞学染色体图具有重要意义。     

家蚕新突变楔形眼纹(Wes)的遗传与基因定位研究

在家蚕遗传资源系统保存和性状调查中,发现一种新的幼虫眼状纹变异——楔形眼纹(wedge eye-spot,Wes),其特征是:杂合体(Wes/+)成活,幼虫眼状纹只有中间部分,并特化成狭窄的倒三角形,半月纹、星状纹正常;纯合体(Wes/Wes)胚胎后期致死,解剖蚕卵可见胚胎第1、2胸节愈合,第1、2胸足退化,其它部位未见异常。该突变为显性遗传。通过与各染色体标记基因进行连锁分析,发现突变基因Wes在第6染色体上;通过与EKp进行两点测验,显示Wes位于EKp附近,相距约3.0 cM;通过与ve和EKp的三点测验,将Wes基因定位于家蚕连锁图谱第6连锁群的24.3 cM位点,表示为Wes(6-24.3)。     

家蚕平衡致死系S-14的性连锁致死基因对生命力和全茧量的影响研究

利用从俄罗斯引进的性连锁平衡致死系S-14与普通家蚕品种的回交世代,初步查明：S－14平衡致死系的2个性连锁致死基因对家蚕生命力和全茧量2项性状无明显的不良作用。     

家蚕突变体相关研究进展

家蚕突变体的发现与鉴定对家蚕功能基因组研究具有十分重要的意义。目前通过自然突变或人工诱导的方式获得了大量的突变材料,涉及家蚕体色、卵色、致死等多个方面。重点介绍了家蚕突变体的鉴定与筛选,基于非定位克隆或定位克隆技术在分子水平上对家蚕突变体进行的相关研究,以及利用家蚕突变品种来鉴定分析突变基因,并展望了家蚕突变种质资源在育种方面的广阔前景。     

家蚕性连锁平衡致死系性别控制基因的导入方法

本发明公开了一种家蚕性连锁平衡致死系性别控制基因的导入方法，采用通过平衡致死系与现行品种的杂交把平衡致死系的性别控制基因分散在3个子系统中；接着对每个子系统中现行品种连续回交，使3个子系统基本上全为现行品种血缘；最后通过3次不同型式的交配，把性别控制基因组合到一个新的品种，形成新的平衡致死系品种。由于家蚕性连锁平衡致死系是用特殊基因来控制原种和杂交种的性别，使其自交能繁殖继代，与其他品种杂交保证下一代只有雄蚕孵化。本发明能育成经济性状优良，雄蚕率在98％以上的新型雄蚕品种。     

家蚕Z染色体遗学图谱以及W染色体特殊标记的鉴定

家蚕的ZW异型配子是雌性，ZZ同型配子是雄性。雌性异型配子是鳞翅目昆虫中的典型。尽管家蚕中W染色体决定雌性，但是到现在还没有发现与W染色体连锁的形态特征基因。Z染色体带有重要经济价值基因和多种表型特征基因，但是我们只知道相对2％大小的分子信息。迄今为止，研究表明Z染色体连锁基因没有剂量补偿效应。     

家蚕虎斑易位系(ZW·~(⌒Ze))染色体的研究

以家蚕虎斑易位系ＺＷ·Ｚｅ⌒的卵巢为材料,仿今井（１９８０）涂片法制片,Ｇｉｅｍｓａ染色。光学显微镜下观察粗线期染色体,发现末端分开呈不对称的“Ｙ”字形二价染色体或提前分离的二价染色体,其分离较其它二价体显著提前,推测其为性（ＺＷ）染色体,组型分析该特异性二价染色体位于第１３号。这对于利用家蚕丰富的突变材料,进行染色体研究,进而绘制细胞学染色体图具有重要意义。     

家蚕体形突变第2数珠蚕(mf-2)的遗传学研究

经X射线诱导发现的家蚕体形突变第2数珠蚕(mf-2)在形态上与数珠蚕(mf:12-39.8)相似。通过二者间的杂交实验表明,mf-2与mf为独立遗传;与各染色体的标记基因进行连锁分析,发现mf-2与第15染色体的眼纹全黑(bl:15-0.0)连锁,说明mf-2基因属于第15连锁群;初步测定mf-2与bl间的遗传距离为27.7 cM。     

家蚕有丝分裂染色体研究

以家蚕品种Y1000、Y2000的早期胚胎（蚕卵）为材料，空气干燥法制片，得到具一定长度和缢痕为特征的胚胎体细胞早中期染色体，并对其进行相对长度计算和核型分析。经对23个分散好、完整的分裂相的分析表明：家蚕早期胚胎（蚕卵）有丝分裂早中期染色体中有异型性染色体存在，Z染色体是核型中最长的，通常具有亚端和亚中部次缢痕，W染色体很短，约相当干Z染色体的1／3长。     

家蚕性连锁平衡致死系雌性胚胎的组织形态学初步研究

为了调查家蚕性连锁平衡致死系中Z染色体携带致死基因l2的雌性胚子(简称l2胚子)致死的时间和原因,收集家蚕性连锁平衡致死系品种平2不同胚胎发育时期的雌性黑卵,解剖获取胚胎后用光学显微镜对不同发育时期的l2胚子进行组织形态学观察。形态观察可见l2胚子在胚胎发育早期和能正常发育的雌性胚子没有区别,但l2胚子发育至晚期的己2期,约有一半胚子的体表未能正常着色,因此推断那些仍没有正常着色的胚子即为致死的l2胚子。通过胚胎的半薄切片观察发现,己2期l2胚子的组织器官结构完整,与正常发育的雌性胚子之间无明显的差异。观察结果提示:l2胚子死亡可能不是由于胚胎组织结构异常造成的,有可能是在己2期胚子停滞发育致死。     

家蚕心形眼纹(ces)的遗传与基因定位研究

通过对家蚕基因资源库保存品系的性状调查,发现一种幼虫眼状纹变异——心形眼纹(cordiform eye-spot,ces),其特征是:幼虫眼纹呈倒心型,相当于正常型眼纹的中间部分,色浅。与正常型进行杂交试验,表明该突变为隐性遗传,外显率稍低;与各染色体标记基因进行连锁分析,确认突变基因ces属于第14染色体;育成青熟油蚕(oa)与ces的双隐性系统后,通过ces与oa和Nd-s(丝胶茧)的三点测验,初步将ces基因定位于家蚕连锁图谱第14连锁群的50.7 cM位点,表示为ces(14-50.7)。     

对家蚕第2隐性赤蚁基因(ch-2)的SSR标记定位及连锁分析

家蚕蚁蚕体色突变之一的第2隐性赤蚁(ch-2)有作为特殊遗传系统的实用价值。采用家蚕正常黑蚁品种P50和第2隐性赤蚁品种k04为亲本组配正反交群体,回交后获得回交群体(k04×P50)×k04和k04×(k04×P50),分别记作BC1F和BC1M,基于雌性家蚕的W与Z染色体不发生交换的特点,用已构建的家蚕SSR分子标记连锁图谱对ch-2基因进行定位和连锁分析。在第18连锁群上的20个多态性标记中共筛选出7个与ch-2基因连锁的SSR标记。根据第18连锁群上已有但不表现多态性的微卫星序列,寻找其所在Scaffold上的其他SSR位点并设计引物,结果找到2个新的多态性SSR标记。BC1F群体中的所有黑蚁个体均表现出与F1(k04×P50)相同的杂合型带型,而所有赤蚁个体带型与亲本k04一致,为纯合型,说明家蚕ch-2基因位于第18连锁群。利用另一个群体BC1M构建了ch-2基因的SSR分子标记遗传连锁图,连锁图的遗传距离为70.7cM,ch-2基因位于69.6 cM处。2个与ch-2最近的SSR标记为S1814和S1819,与ch-2的距离分别为7.9、1.1 cM。     

家蚕jc油蚕基因座的确定及pe-wb-ok~c三隐性系的建立

jc油蚕(ojc)是中国农业科学院蚕业研究所报道的油蚕自然突变体,隐性,基因位于第5染色体,但其基因座未确定。本研究选择家蚕第5染色体上的隐性油蚕突变"金鸡龙油"(kin-shiryu translucent,ok)与jc油蚕进行杂交,结果F1代全部表现油蚕性状,F1自交后观察F2代,也无性状分离,仍然全部为油蚕。这一结果说明jc油蚕与金鸡龙油蚕(ok)是同一个基因座上的突变。同等条件饲养金鸡龙油蚕与jc油蚕,其幼虫期致死率ok油蚕比jc油蚕高。形态观察发现,两油蚕突变的皮肤透明度相当,并且都是高度油蚕。把jc油蚕基因符号修改为okc。本研究还通过杂交实验育成了同一连锁群上的三隐性系pe-wb-okc,是家蚕第5连锁群基因分析的重要标记基因系统。     

一种新的家蚕突变体——4龄幼虫致死突变的发现

在对家蚕品种P33的饲养过程中发现一种新的幼虫致死型突变体,其幼虫在3龄第2天就表现出体型较正常个体小,生长发育缓慢的特征,3龄期延长约2 d,4龄起蚕后极少取食,生长发育基本停滞,并于4龄第3~4天陆续死亡。将此突变体命名为4龄幼虫致死突变(lethal mutant in the fourth instar larvae,l-4i)。经遗传分析初步判断该突变体由常染色体上的一个隐性遗传基因控制,为纯合致死。该突变体可以作为解析家蚕生长发育机制的重要素材。     

性连锁平衡致死雄蚕品种培育的实践与追求

自引进性连锁平衡致死家蚕基础材料开展雄蚕品种培育至今，已经历了三个阶段，本文对雄蚕品种培育的历程进行了回顾，并对目前育种工作中存在的问题和不足进行了分析，并在此基础上提出了培育雄蚕品种的几点设想。     

夏秋用雄蚕品种限7×平48的育成

饲养雄蚕品种是提高蚕丝品质和蚕茧生产效益的重要途径之一。以引进的性连锁平衡致死系S-14为母本,用普通家蚕品种夏6为优良性状基因供体回交改良性连锁平衡致死系,经2轮杂交、自交、回交组成的循环改良和纯化,育成经济性状优良的家蚕性连锁平衡致死系平48,将该品种与家蚕限性皮斑品种限7组配成夏秋用雄蚕杂交组合限7×平48。经浙江省家蚕新品种实验室联合鉴定,该雄蚕品种的雄蚕率达99%以上,在农村生产鉴定试验中表现出强健好养、产量高、丝质优等特点:张种产茧量和50 kg桑产值分别较对照品种秋丰×白玉提高8.4%和9.4%;茧丝长、解舒丝长、解舒率和干茧出丝率分别较对照种提高7.9%、12%、2.57个百分点、1.54个百分点。新品种2009年通过浙江省家蚕新品种审定,适合在长江中下游蚕区的夏秋季饲养。     

对家蚕多星纹基因ms的SSR标记定位分析

对家蚕幼虫斑纹突变多星纹基因ms进行分子标记定位,有益于对多星纹性状的分子标记辅助选择和对该基因的定位克隆研究。利用家蚕雌性染色体在减数分裂过程中不发生交换的特点,采用幼虫斑纹为素斑(p)的家蚕品系C108,幼虫斑纹为多星纹(ms)的家蚕品系g02,组配正反交群体(g02×C108)F1♀×g02♂和g02♀×(g02×C108)F1♂,分别记作BC1F和BC1M,利用已经构建的家蚕SSR分子标记连锁图谱中第12连锁群上的18对SSR标记引物在亲本间进行多态性筛选。BC1F群体中的普通斑个体均表现出与(g02×C108)F1相同的杂合型带型;而所有多星纹个体的带型与亲本g02一致,为纯合型。结果筛选出S1206、S1208、S1210、C5553S3共4个与家蚕ms连锁的SSR标记。利用BC1M群体构建家蚕ms及其连锁的SSR标记遗传连锁图,连锁图的图距为34.5 cM,4个SSR标记及ms的排列次序为S1206—S1208—S1210—C5553S3—ms,ms位于34.5 cM处,与ms最近的标记为C5553S3,遗传距离为12.4 cM。依据该SSR标记遗传连锁图谱可对ms进一步精确定位。     

家蚕体形突变新缢蚕(co-n)的遗传分析与基因定位研究

从西南大学家蚕基因库中发现体形自然突变"新缢蚕"。幼虫表型特征为:环节中央部位呈缢缩状,色素聚集,腹部节间膜呈隆起状,5龄中后期最明显,与缢蚕(constricted,co)相似。至成虫期观察,腹背通常少有鳞毛。经遗传分析,新缢蚕为隐性基因支配,将其命名为new constricted,基因符号:co-n。连锁分析结果表明,co-n与黄血(Y)基因连锁,故判定该基因属于第2连锁群。这是家蚕第2连锁群30多个突变中发现的第一个体形突变。经过新缢蚕(co-n)与灰色卵(Gr)、黄血(Y)基因间的三点测验定位实验,结合伴野丰2005年最新公布的家蚕连锁遗传图的第2连锁群基因座数据,将co-n基因座确定为:2-5.7。