肉犊牛小肠黏膜免疫相关细胞的数量变化研究

分别选择1、4、6月龄各4头利杂犊牛的十二指肠、空肠、回肠,利用组织化学法和图像分析法研究犊牛小肠的上皮内淋巴细胞、杯状细胞和肥大细胞的数量变化.结果显示在同一月龄犊牛的小肠的上皮内淋巴细胞数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐减少,而杯状细胞的数量逐渐增加,肥大细胞的密度逐渐降低.在1、6月龄犊牛十二指肠、空肠、回肠的上皮内淋巴细胞数量之间差异极显著(P＜0.01);4月龄十二指肠的上皮内淋巴细胞数量最多(P＜0.01).在1月龄犊牛十二指肠、空肠、回肠杯状细胞的数量差异极显著(P＜0.01);4和6月龄犊牛十二指肠和空肠之间的杯状细胞的数量差异不显著(P＞0.05),但二者与犊牛回肠杯状细胞的数量差异极显著(P＜0.01).各年龄犊牛十二指肠、空肠、回肠的肥大细胞密度差异极显著(P＜0.01),4月龄时犊牛小肠的肥大细胞密度最低.结果提示犊牛的黏膜免疫水平可能与其机体的发育相一致.     

新生犊牛小肠黏膜结构的早期发育及上皮内淋巴细胞和杯状细胞的数量变化

应用组织学和组织化学方法研究了1日龄和20日龄新生犊牛小肠黏膜结构的早期发育及部分黏膜免疫相关细胞的分布与数量变化规律。结果显示，从1日龄到20日龄，小肠绒毛变短，尤其十二指肠的绒毛长度约缩短了61．58％（P〈0．05），绒毛长度与隐窝深度比值（V／C比值）减小了59．04％～91．32％（P〈0．05）；而黏膜和肌层厚度分别增加了8．66％～41．28％和36．22％～299．10％。小肠各段上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量随年龄增长而逐渐增多（P〈0．05），20日龄比1日龄分别增加了78．80％～163．05％和28．23％～101．46％；但比较同一年龄的小肠不同肠段，从十二指肠至回肠，上皮内淋巴细胞的数量逐渐减少，而杯状细胞的数量则呈增多趋势。     

藏山羊和藏绵羊小肠黏膜免疫相关细胞的比较研究

为了探讨藏山羊和藏绵羊在低氧环境中小肠黏膜免疫屏障结构的适应特征,本试验采用组织化学方法和图像分析法对4只成年藏山羊和4只成年藏绵羊小肠不同肠段的上皮内淋巴细胞、杯状细胞和肥大细胞的数量进行比较研究。结果显示:藏山羊小肠各段杯状细胞和肥大细胞的数量均高于藏绵羊(P<0.05),其中藏山羊十二指肠、空肠和回肠的上皮内杯状细胞数量分别比藏绵羊多37.87%(P<0.05)、21.43%(P>0.05)和31.68%(P<0.05),藏山羊十二指肠、空肠和回肠的肥大细胞数量分别比藏绵羊多85.20%(P<0.05)、50.73%(P<0.05)和22.52%(P>0.05);而藏山羊小肠各段上皮内淋巴细胞的数量(36.35±0.98)低于藏绵羊(48.84±2.12)(P<0.05)。结果提示,成年藏山羊的小肠黏膜免疫屏障功能强于藏绵羊;藏绵羊小肠中上皮内淋巴细胞起重要的黏膜防御功能,而在藏山羊小肠中杯状细胞和肥大细胞起重要的黏膜防御功能。     

绵羊自然感染贝氏莫尼茨绦虫对小肠黏膜免疫相关细胞的数量变化

运用组织学和组织化学染色法,分别对自然感染贝氏莫尼茨绦虫的成年绵羊（感染组）与正常成年绵羊（对照组）的小肠各肠段的上皮内淋巴细胞、浆细胞、杯状细胞和嗜酸粒细胞的分布和数量变化进行了比较研究。结果显示：感染组小肠各段上皮内淋巴细胞、浆细胞、杯状细胞和嗜酸粒细胞数量均显著高于对照组,其中感染组十二指肠、空肠和回肠的上皮内淋巴细胞数量分别比对照组增加了169.11%、230.38%和233.42%（P〈0.01）;嗜酸粒细胞数量分别比对照组增加了116.78%、123.87%和164.51%（P〈0.01）;浆细胞数量分别比对照组增加了127.34%、72.97%和328.26%（P〈0.01）;杯状细胞数量分别比对照组增加了33.40%、41.42%和133.17%。对照组和感染组上皮内淋巴细胞和杯状细胞从十二指肠到回肠均逐渐减少,相反,对照组和感染组嗜酸粒细胞数量从十二指肠到回肠均逐渐增多,对照组小肠固有层浆细胞数量从十二指肠到空肠增加,空肠到回肠减少,感染组小肠固有层浆细胞数量从十二指肠到回肠均逐渐增多;对照组十二指肠、空肠、回肠的上皮内淋巴细胞、上皮内杯状细胞、浆细胞和嗜酸粒细胞均差异极显著（P〈0.01）;感染组十二指肠、空肠、回肠的上皮内杯状细胞、浆细胞和嗜酸粒细胞均差异极显著（P〈0.01）,感染组上皮内淋巴细胞空肠与回肠差异极显著（P〈0.01）,但十二指肠与空肠差异不显著（P〉0.05）。研究结果表明,贝氏莫尼茨绦虫感染成年绵羊后,成年绵羊通过特异性黏膜免疫细胞上皮内淋巴细胞增生加强细胞免疫水平,浆细胞增生加强体液免疫水平,同时还通过非特异性黏膜免疫细胞,嗜酸粒细胞和杯状细胞的增生进一步加强黏膜免疫水平以抵抗贝氏莫尼茨绦虫对绵羊的感染。可见绵羊可以通过黏膜免疫相关细胞增生加强局部免疫力以监视虫体免疫逃逸来抵抗寄生虫的感染。     

大蒜 小鼠 黏膜免疫 淋巴细胞 杯状细胞

试验利用组织化学法和图像分析法研究不同浓度的大蒜溶液对小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞、杯状细胞数量的影响。选用8周龄Balb／c小鼠（均为雄鼠）50只,随机分成5组,每组10只,分别饲喂5种不同浓度的大蒜溶液,80mL／d,试验期为10d。试验结果显示：各试验组小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐减少;杯状细胞的数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐增加。1％浓度的大蒜溶液对小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞、杯状细胞数量的影响明显高于对照组、2％组、5％组、10％组,且差异极显著（P〈0．01）。     

不同剂量乳猪壮对仔猪小肠黏膜上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量变化的试验

利用组织化学法和图像分析法研究庆大霉素和不同剂量的“乳猪壮”在防治仔猪大肠杆菌病时对仔猪小肠的上皮内淋巴细胞、杯状细胞的数量变化.试验选用60头刚出生的0日龄的杜×大×长三元杂交健康仔猪,随机分6个处理组,每个处理组设10只(雌雄均有),分别饲喂生理盐水、庆大霉素和4种不同剂量的“乳猪壮”,试验期为7d.结果显示,各试验组仔猪小肠黏膜上皮内淋巴细胞数量由十二指肠向空肠、同肠逐渐减少;杯状细胞的数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐增加.4mL乳猪壮组对仔猪小肠黏膜上皮内淋巴细胞、杯状细胞的数量明显高于其他组且差异极显著(P＜0.01).结果显示,4 mL乳猪壮组对改善仔猪小肠黏膜的防御功能,提高肠道的防御能力有一定作用,可以防治仔猪大肠杆菌病.     

成年牦牛小肠结构及黏膜免疫相关细胞数量变化研究

为了揭示成年牦牛小肠结构和黏膜免疫相关细胞的分布与数量变化的规律,本研究采用组织化学法、图像分析法及透射电镜技术,对成年牦牛小肠形态结构及上皮内淋巴细胞、杯状细胞、浆细胞和肥大细胞数量的变化进行了研究.结果表明:牦牛小肠壁由黏膜层、黏膜下层、肌层和浆膜构成.小肠中十二指肠绒毛高度/隐窝深度的比值最高、肌层最厚;空肠绒毛最高、隐窝最深;3段小肠绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度/隐窝深度的比值和肌层厚度之间差异极显著(P＜0.01).牦牛小肠上皮内淋巴细胞数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐减少,且差异极显著(P＜0.01),杯状细胞和肥大细胞数量也逐渐减少,而浆细胞数量则由十二指肠到回肠逐渐递增,且差异极显著(P＜0.01).电镜观察表明,牦牛小肠绒毛上皮细胞连接为紧密连接、缝隙连接和半桥连接,细胞游离面微绒毛丰富;上皮内淋巴细胞核大、胞质较少;杯状细胞呈典型高脚杯状,细胞顶端含有大量的分泌颗粒而膨大;浆细胞呈圆形或椭圆形,染色质沿核膜排列,胞质中有丰富的内质网;肥大细胞呈椭圆形,胞质内充满电子密度极强的大小不等的膜包颗粒.成年牦牛小肠结构特点能大大地提高了对高寒草地牧草的消化和吸收效率;而小肠各段有规律的分布了丰富的黏膜免疫相关细胞,显示牦牛小肠黏膜具有很强的黏膜免疫屏障功能.     

丁酸钠对肉鸡小肠黏膜免疫相关细胞的影响

本试验通过日粮中添加丁酸钠研究其对肉鸡小肠黏膜免疫相关细胞的影响.将32只1日龄健康AA肉鸡随机分为4个处理组:A组(对照组:基础日粮)、B组(丁酸钠组:基础日粮 500mg/kg丁酸钠)、C组(丁酸钠 芽孢杆菌组:基础日粮 100 mg/kg丁酸钠 200 mg/kg芽孢杆菌)和D组(丁酸钠 酶制剂组:基础日粮 100 mg/kg丁酸钠 500 mg/kg酶制剂).试验7周后,采用组织学技术研究肉鸡小肠黏膜免疫相关细胞的分布变化.结果显示:(1)与对照组比较,小肠肥大细胞、上皮内淋巴细胞及杯状细胞的形态无明显变化,肥大细胞多存在于肠腺周围和肠绒毛固有层,(2)各试验组的小肠肥大细胞、上皮内淋巴细胞及杯状细胞数均显著高于对照组(P<0.05);(3)各试验组和对照组小肠肥大细胞和上皮内淋巴细胞数均从前向后逐渐减少,十二指肠的肥大细胞最多,空肠的次之,回肠的较少;杯状细胞数则与之相反.由此可知,3种添加剂可不同程度地改善肉鸡小肠黏膜结构,且将丁酸钠分别与芽孢杆菌和酶制剂混合饲喂,效果在一定程度上好于单独饲喂丁酸钠.     

不同浓度的大蒜溶液对小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量的影响

试验利用组织化学法和图像分析法研究不同浓度的大蒜溶液对小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞、杯状细胞数量的影响.选用8周龄Balb/c小鼠(均为雄鼠)50只,随机分成5组,每组10只,分别饲喂5种不同浓度的大蒜溶液,80 mL/d,试验期为10 d.试验结果显示:各试验组小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐减少;杯状细胞的数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐增加. 1%浓度的大蒜溶液对小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞、杯状细胞数量的影响明显高于对照组、2%组、5%组、10%组,且差异极显著(P<0.01).     

1日龄大通牦牛小肠黏膜结构及黏膜免疫相关细胞的形态学研究

为了研究新生牦牛小肠黏膜结构及黏膜免疫相关细胞的分布特点,试验采用常规H.E.染色、改良甲苯胺蓝(MTB)染色和糖原及多糖高碘酸-Schiff试剂染色技术对1日龄大通新生牦牛小肠黏膜结构进行了观察,并对免疫相关细胞的分布以及数量进行了检测。结果表明:1日龄犊牦牛空肠的小肠肠绒毛长度和隐窝深度最高,回肠和十二指肠依次降低;空肠的V/C值分别比十二指肠和回肠高72.75%和74.66%;空肠的黏膜厚度最厚,回肠和十二指肠依次降低,三者之间厚度差异均显著;十二指肠的肌层厚度最厚,回肠和空肠依次降低,三者之间厚度差异均显著。1日龄犊牦牛十二指肠到回肠上皮内淋巴细胞数量相对稳定(P0.05);十二指肠的杯状细胞数量最多,空肠和回肠差异不显著;从十二指肠到回肠,其肥大细胞的数量呈逐渐增多的趋势,各肠段之间差异均显著。说明1日龄犊牦牛空肠消化吸收能力较强,各肠段免疫能力差异较大。     

天蚕素和合生素对AA肉鸡小肠黏膜形态和小肠免疫细胞的影响

为研究日粮中添加天蚕素、合生素对AA肉鸡小肠黏膜形态及免疫细胞的影响,试验选用480只1日龄健康AA肉鸡,随机分为4组,每组4个重复,每个重复30只鸡。对照组（Ⅰ组）饲喂基础日粮,试验组（Ⅱ~Ⅳ组）分别在基础日粮中添加0.5%天蚕素、0.3%合生素、0.5%天蚕素+0.3%合生素。试验期42 d。结果显示,与Ⅰ组相比,Ⅳ组十二指肠、回肠绒毛高度极显著升高（P<0.01）;Ⅱ组空肠和回肠、Ⅲ组小肠各段隐窝深度显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）;Ⅱ、Ⅲ组小肠各段和Ⅳ组十二指肠、回肠绒毛高度/隐窝深度显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）;Ⅱ组空肠绒毛宽度显著降低（P<0.05）,Ⅲ组十二指肠和空肠、Ⅳ组空肠和回肠绒毛宽度均极显著降低（P<0.01）;Ⅱ、Ⅲ组空肠黏膜厚度显著升高（P<0.05）,Ⅳ组小肠各段黏膜厚度均极显著升高（P<0.01）。Ⅱ组回肠上皮内淋巴细胞数量显著升高（P<0.05）,Ⅲ组十二指肠、Ⅳ组小肠各段上皮内淋巴细胞数量极显著升高（P<0.01）;Ⅲ组十二指肠、Ⅳ组十二指肠和回肠杯状细胞数量极显著升高（P<0.01）;Ⅳ组空肠肥大细胞数量显著升高（P<0.05）。综上所述,天蚕素、合生素单独或联合添加均能改善AA肉鸡小肠黏膜结构,促进小肠黏膜免疫细胞增殖,联合添加效果最佳。     

Effects of Cecropin and Synbiotics on the Intestinal Mucosal Morphology and Intestinal Mucosal Immune Cells of AA Broilers

In order to investigate the effects of cecropin and synbiotics on the intestinal mucosal morphology and intestinal mucosal immune cells of AA broilers. 480 of 1-day-old healthy AA broilers were chosen and randomly divided into 4 groups with 4 replicates per group and 30 broilers per replicate. The broilers in group Ⅰ(control group) were fed basal diet,while that in groups Ⅱ to Ⅳ were fed the basal diet supplemented with 0.5% cecropin,0.3% synbiotics,0.5% cecropin+0.3% synbiotics,respectively. The trial lasted for 42 days. The result showed that compared with group Ⅰ,the villus height of duodenum and ileum in group Ⅳ were extremely significantly increased (P<0.01).The crypt depth of jejunum and ileum in group Ⅱ,and that of small intestine in group Ⅲ were significantly or extremely significantly decreased (P<0.05;P<0.01).The villus height/crypt depth of small intestine in groups Ⅱ and Ⅲ,and that of duodenum and ileum in group Ⅳ were significantly or extremely significantly increased (P<0.05;P<0.01).The villus width of jejunum in group Ⅱ was significantly decreased (P<0.05),while the villus width of duodenum and jejunum in group Ⅲ,that of jejunum and ileum in group Ⅳ were extremely significantly decreased (P<0.01).The mucous thickness of jejunum in groups Ⅱ and Ⅲ were significantly increased (P<0.05),while that of small intestine in group Ⅳ was extremely significantly increased (P<0.01).The number of the intraepithelial lymphocyte of ileum in group Ⅱ was significantly increased (P<0.05),and that of duodenum in group Ⅲ and small intestine in group Ⅳ were extremely significantly increased (P<0.01).The number of the goblet cell of duodenum in group Ⅲ,duodenum and ileum in group Ⅳ were extremely significantly increased (P<0.01).The mast cell of jejunum in group Ⅳ was significantly increased (P<0.05).In conclusion,both the cecropin and synbiotics could improve the small intestine mucosal structure and promote the small intestine mucosal immunocompetent cells proliferation in AA broiler, and the effect of combined utilization would be better.     

猪十二指肠中生长抑素阳性细胞和免疫细胞发育的研究

应用免疫组织化学技术分别研究猪十二指肠生长发育过程中生长抑素(SS)阳性细胞、IgA阳性细胞和酸性非特异性脂酶(ANAE)阳性细胞数量的变化。结果表明,SS阳性细胞的发育模式与IgA阳性细胞和AENE阳性细胞的呈相反趋势。SS阳性细胞数量于3日龄开始增加,20日龄达到第一个高峰,然后于45日龄呈极显著降低(P<0 01),90日龄又呈显著上升趋势(P<0 05),至120日龄时又达到第二个高峰;从出生至3日龄猪十二指肠无IgA阳性细胞的分布,20日龄时IgA阳性细胞开始出现,45日龄IgA阳性细胞数量显著增加(P<0 05)并达最高峰,90日龄时又呈下降趋势;猪十二指肠AENE阳性细胞数量在3日龄及20日龄均极显著增加(P<0 01)。然后于45日龄开始显著减少(P<0 05)。结果表明猪十二指肠中SS阳性细胞的发育对免疫细胞的发育可能具有重要的调节作用。     

益生菌制剂对早期断奶仔猪肠道pH、黏膜形态结构和挥发性脂肪酸含量的影响

本试验旨在研究益生菌制剂对早期断奶仔猪肠道pH、黏膜形态结构和挥发性脂肪酸含量的影响.选用48头平均体重为(6.39±0.42)kg的(21±2)日龄“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪,按性别、体重和窝源基本一致原则随机分为2个组,每个组4个重复,每个重复6头猪.试验1组为对照组,采用基础饲粮;试验2组为益生菌组,每千克基础饲粮中添加1×109 CFU活菌.试验期为21d.结果表明:1)28日龄时,益生菌组回肠内容物pH显著低于对照组(P＜0.05).2)和对照组相比,添加益生菌制剂,28日龄时,显著增加空肠、回肠绒毛高度和上皮内淋巴细胞数量(P＜0.05),显著提高回肠杯状细胞数量(P＜0.05),显著降低回肠隐窝深度(P＜0.05);35日龄时,显著增加空肠、回肠绒毛高度(P＜0.05),显著提高空肠上皮内淋巴细胞数量(P＜0.05),显著降低空肠、回肠隐窝深度(P＜0.05);42日龄时,显著增加空肠、回肠绒毛高度,显著提高空肠上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量(P＜0.05),显著降低空肠隐窝深度(P＜0.05).3)28日龄时,益生菌组盲肠内容物中丁酸和乳酸含量显著高于对照组(P＜0.05);35日龄和42日龄时,益生菌组盲肠内容物中乙酸、丙酸、丁酸和乳酸含量显著高于对照组(P＜0.05).由结果可知,添加益生菌制剂能改善断奶应激对绒毛高度和隐窝深度的影响,提高肠道淋巴细胞数量和挥发性脂肪酸含量,降低肠道pH,从而缓解断奶应激对肠道环境的影响.     

脂多糖应激对断奶仔猪肠黏膜免疫屏障的影响

选用12头(21±1)d断奶仔猪,随机分为2个处理,研究脂多糖(LPS)刺激对肠黏膜免疫屏障功能的影响。禁食12h后,LPS组仔猪腹膜注射100μg/kgBW LPS,对照组注射等量的生理盐水。48h后,屠宰仔猪,打开腹腔,取小肠组织样品,测定小肠上皮间淋巴细胞、杯状细胞、肥大细胞数、肠集合淋巴结增殖、凋亡细胞数。结果表明:LPS刺激显著降低十二指肠、回肠上皮间淋巴细胞数(P<0.01),极显著增加小肠各段肥大细胞数(P<0.01);LPS刺激显著增加回肠集合淋巴结凋亡细胞数(P<0.05),但对增殖细胞数没有影响(P>0.05);LPS刺激可增加仔猪小肠杯状细胞数,但两处理组间差异不显著(P>0.05)。这些结果显示,LPS应激可导致肠黏膜免疫屏障功能改变,进而加重机体出现急性感染症状。     

寡果糖对人源菌群仔猪肠道中IgA和IgG分泌细胞的影响

本文主要研究寡果糖对人源菌群仔猪肠道中IgA和IgG分泌细胞的影响。通过无菌剖腹产获取15头无特定病原菌(specific pathogen free,SPF)仔猪,随机分为三组。第一组为SPF组,经口灌服磷酸钠缓冲液(内含10%甘油)以示对照;第二组为人源菌群(human flora-associated,HFA)组,经口服途径接种人源菌群;第三组为寡果糖(fructo-oligosaccharides,FOS)组,口服途径接种人源菌群且灌喂寡果糖。仔猪饲养于屏障系统内,无菌条件下人工哺育45天。应用免疫组织化学方法进行研究。结果表明:(1)所有仔猪小肠和结肠的固有层中均分布有IgA和IgG分泌细胞。(2)IgA和IgG分泌细胞在十二指肠中分布最多,随着肠段的向后推移IgA和IgG分泌细胞数量有逐渐下降趋势。(3)HFA组和FOS组IgA分泌细胞数量在回肠显著高于SPF组(P<0.01);十二指肠中HFA组IgG分泌细胞数量显著高于SPF组(P<0.01)。(4)FOS组IgA分泌细胞数量在空肠显著高于HFA组外(P<0.05),其他肠段总体上低于HFA组,但差异不显著。本结果提示给新生仔猪接种人源菌群能促进仔猪肠道中IgA和IgG分泌细胞的发育,而寡果糖使肠道IgA和IgG分泌细胞数量呈现下降的趋势。     

肉鸡肠道NHE2 mRNA表达的组织特异性与发育性变化

选用遗传背景相同的1日龄父母代雄性Arbor Acre（AA）肉雏鸡120羽,随机分为4个重复,采用相对定量RT-PCR方法,以30日龄AA肉鸡肠道RNA为模板,研究肉鸡肠道钠/氢交换载体2（Sodium hydrogen exchanger 2,NHE2）mRNA表达的组织特异性;以AA肉鸡十二指肠和空肠RNA为模板,研究肉鸡肠道NHE2mRNA表达的发育性变化。结果显示：①AA肉鸡十二指肠和空肠NHE2 mRNA的表达丰度显著高于回肠和结直肠（P〈0.05）,而十二指肠和空肠之间、回肠和结直肠之间无显著差异（P〉0.05）;②AA肉鸡NHE2 mRNA在十二指肠及空肠中的表达具有相同的发育模式,2～16日龄升高,30～44日龄下降,55日龄略微回升;在16和30日龄时的表达丰度显著高于2、44和58日龄（P〈0.05）。以上结果说明：AA肉鸡肠道近端NHE2 mRNA的表达丰度显著高于远端（P〈0.05）。AA肉鸡十二指肠及空肠NHE2 mRNA的表达具有相同的发育模式,表明NHE2mRNA表达受到发育阶段的调控,且在十二指肠和空肠间具有稳定性。