公猪精液长效稀释液配方研究

利用国内外猪精液常温保存的研究成果，设计了４个公猪精粹稀释液配方，以目前四川农村猪人工授精中常用的ＥＤＴＡ液配方为对照，在室温条件下通过逐日镜检的方法检查精子活力，每个配方５次重复，筛选出了保存期达５天、精子活力０．５级以上的配方２个；保存期达６天、精子活力０．５级以上的配方１个。使用Ｔ４配方保存６天的稀释液输精母猪６８头，经超声波妊娠诊断仪检测母猪受胎率达８６．８％。对４个精液稀释液配方在溶解后     

不同稀释液对猪精子活力与保存时间的影响

通过研究不同配方的稀释液在相同的稀释倍数及同一保存条件下,对猪精子活力的影响来选择合适的猪精稀释液。试验选用灌南县家畜改良站内的4头成年公猪的精液作为材料,采用4种稀释液配方,分别进行稀释,观察精子活力和保存时间。结果表明,用葡—柠—乙液稀释的精液,在32h内精子活力平均数显著高于葡萄糖液和葡—柠液,精子存活时间也长于其它稀释液。     

牛磺酸对猪精子负压17℃液态保存效果的影响

为研究猪精子在17℃负压液态保存时牛磺酸对精子质量的影响,通过在Modena基础稀释液中添加不同剂量的牛磺酸,17℃负压环境下进行猪精液的保存,并利用迈朗全自动精子质量检测仪等仪器检测猪精子质量、精液pH值及精液中H2O2浓度,研究不同浓度牛磺酸对猪精液质量的影响。实验共分5个处理组,即基础稀释液中添加0、2.5、5、7.5、10 mmol·L-1牛磺酸,实验重复4次。结果表明,7.5 mmol·L-1的牛磺酸在精子活力,路径速度上都明显优于其他组(P0.05);添加牛磺酸后精液的pH值下降缓慢,且精液中H2O2浓度较对照组有不同程度的下降。由以上实验结果可知,从综合指标上看7.5 mmol·L-1的牛磺酸对在17℃负压环境下进行猪精液的保存是有利的,为猪人工授精生产实践中猪精子的保存提供了实验依据。     

猪精液冷冻与常温保存技术的研究

为研究冷冻保存和常温((17±0.5)℃)保存后猪精子活率、活力和顶体完整率,比较了猪精液冷冻稀释液中2种甘油含量细管法的快速冷冻效果,以及不同解冻温度对冷冻精液的影响,采用细胞计数法、FDA-PI双重染色法与Giemsa染色方法检测精子的活率、活力和顶体完整率。结果显示:3%(体积分数,下同)甘油冷冻解冻后精液的活率、活力(38.54%、52.24%)显著(P<0.05)高于2%甘油组(15.63%、28.22%),但3%甘油组顶体完整率(11.55%)显著(P<0.05)低于2%甘油组(21.71%)。38℃水浴解冻后的精子在39℃培养箱中4 h内活率高于0.3,而50℃水浴解冻后1 h后的活率低于0.3。精液稀释液Anderohep和BTS在常温((17±0.5)℃)保存新鲜猪精子的活率与顶体完整率上效果相似,保存3 d内精子活率达0.6以上,保存6 d内精子活率为0.3以上。结果表明,使用3%甘油冷冻保存及2种常温保存稀释液均可以较好地保存精子。     

L-精氨酸对猪精液低温保存效果的影响

对L-精氨酸在猪精液低温保存中应用的效果进行评价,为猪精液低温保存稀释液配方的改良提供参考。采用手握法采集健康公猪精液,用含不同质量浓度L-精氨酸(0、0.50、1.00、1.50、2.00mg·mL-1)的低温保存稀释液稀释,于4℃下保存,对比7d内各组之间精子的活率、活力、畸形率、质膜和顶体完整性等参数。低温保存后,猪精液的总体质量浓度以1.00mg·mL-1组最好,其除了第1天精子活率与对照组差异不显著(P0.05)外,其他时间检测的5个指标均显著优于对照组(P0.05)。在本试验条件下,稀释液中添加1.00mg·mL-1 L-精氨酸可以明显改善4℃低温条件下猪精液的保存后质量。     

不同稀释液2—5℃保存鸡精液的研究

试验使用不同稀释液在2—5℃稀释保存鸡精液,测定了体外保存的精子活力和pH值变化。随保存时间的延长,不同稀释精液的精子活力和pH值下降幅度有差异。精子活力与pH值密切相关。精液稀释保存24小时的受精率以BPSE液最高(86.37％),与新鲜未稀释精液的受精率无显著差异;不同稀释液的受精蛋孵化率均无显著差异。用BPSE液加氧和减压保存的效果均无改进。Lake液以1:1(精液:稀释液,v/v)的倍数稀释,保存24小时后精子活力和pH值明显低于较高稀释倍数(1:2或1:3);保存24小时的受精率显著低于输精前加入BPSE液调整Lake液后的受精率。     

BTS精液稀释液及保存时间对猪人工授精效果的影响

研究了BTS(Beltsville thawingsolution)精液稀释液及保存时间对猪人工授精效果的影响,结果表明:用BTS稀释液常温保存猪精子,精子生存指数明显高于葡-柠液组(P<0.05),精子有效保存时间可延长60h;以纯精液输精,随着保存时间延长,母猪产仔数下降(P<0.05),而以混合精液输精时,各试验组母猪产仔数并无明显差异(P>0.05);BTS液不同保存时间对人工授精效果影响程度与配种公母猪的品种差异有关。     

不同稀释液对猪精液常温保存效果的影响

为研究适宜于大白猪精液常温保存的稀释液配方,以精子活率、质膜完整率、顶体完整率和呼吸强度为测定指标,分析4种不同配方的稀释液常温下保存大白猪精液的效果。结果表明,经48h保存后,稀释液Ⅰ和Ⅱ保存的精子活率、质膜完整性和顶体完整率分别达到54%、58%和88%,显著优于其他组(P<0.05)。经稀释液Ⅰ和Ⅱ保存的精子的呼吸强度分别为7.25min和8.25min,显著优于稀释液Ⅲ、Ⅳ和对照组(P<0.05),但稀释液Ⅰ和Ⅱ差异不显著(P>0.05)。因此,稀释液Ⅰ和Ⅱ是大白猪精液常温保存的适宜稀释液。     

四种稀释液对精液保存的比较研究

对四种液态精液的稀释液于5℃(冰箱) 保存4天的效果进行了比较研究。按活力、畸形精子数及死亡精子数等项指标评定其品质。由鲜精稀释至96小时期间,每隔24小时观测一次。乳糖稀释液在5℃下保存72小时后精子活力下降。为了便于对活力,畸形和死亡精子的百分率进行方差分析,将资料换算为反正弦值。据推测,如果用乳糖和三羟甲基氨基甲烷稀释液,在超低温(液氮)情况下保存精液会比在冰箱(5℃)常温保存(液态精液)4天效果更佳。鉴于三羟甲基氨基甲烷稀释液要用甘油平衡,故计算保存时间时,应另加5个小时。     

黑山羊精液冷冻稀释液配方的筛选

为筛选出提高黑山羊冷冻精液质量的最佳冷冻稀释液配方,试验分别用4个不同的稀释液配方,对15只湘东黑山羊进行精液的冷冻处理,通过观测平衡后精子活率、解冻后精子活力、顶体完整率、精子畸形率等几个特征性指标,可以看出稀释液配方Ⅳ效果最好,是用于黑山羊精液冷冻的最佳稀释液配方。其配方Ⅳ冷冻保存精液解冻后活力平均为0.3627、冻后顶体完整率为42.93%、精子畸形率为12.93%。