牙鲆淋巴囊肿病毒灭活疫苗制备及应用

淋巴囊肿病毒（Lymphocystis virus）属于虹彩病毒科（I ridoviridae）,病毒粒子含DNA正二十面体,直径一般200-250nm,该病毒的感染性在18～20℃水中能保持5d以上,是感染高峰期。淋巴囊肿病是一种慢性皮肤瘤。牙鲆淋巴囊肿主要症状表现在鱼类的皮肤上、鳍上和眼球等处出现小水泡状的肿状物,这些肿状物多呈白色、淡灰色、灰黄色、个别囊肿物因寄生部位充血而略显红色,囊肿大小1～10mm并紧密相连呈桑椹状。淋巴囊肿病全年可见,     

鲤鱼淋巴囊肿病

正病原或病因本病是由虹彩病毒科的淋巴囊肿病毒(Lymphocystis virus)引起的一种慢性皮肤瘤传染病。病毒粒子20面体,有囊膜。临床症状病情较轻时,发病鱼无明显症状,病情严重时食欲减退甚至不摄食,病鱼的皮肤、鳍条及体表各部位形成大小不一的囊肿物,颜色有白色、粉红色和黑色,较大的囊肿物上有肉眼可见的红色小血管。     

军曹鱼淋巴囊肿的病理学研究

应用病理组织学和电镜方法,对患疑似淋巴囊肿病的军曹鱼(Rachycentron canadum)的各器官进行观察.结果表明,患病军曹鱼的皮肤囊肿组织由一些淋巴囊肿细胞集合体组成,这些囊肿细胞排列紧密,直径为10～150 μm,细胞呈圆形、锥形不规则状;细胞外有一层厚的囊膜;细胞质内散布有大量的嗜碱性包涵体,且多数集中在细胞的边缘部分;电镜观察到囊肿细胞质中有大量二十面体的病毒粒子,病毒颗粒直径220 nm.据此确认该病为病毒性淋巴囊肿病.其他器官主要组织病理学变化有:在心脏、肝脏、脾脏和头肾中也存在囊肿细胞,心肌纤维水肿;肾间质淋巴细胞增生,巨噬中心出现,肾小管上皮细胞变性和坏死;脾淋巴细胞增生,脾髓质出血;肝脂肪变性;鳃上皮肿胀.根据观察结果可以认为,该病毒不仅损伤鱼的皮肤,致使病鱼外观异样而严重影响其商品价值,而且对鱼的内脏和免疫器官也造成严重的致命损伤.     

我国海水鱼常见病害的防治技术

目前 ,我国养殖的海水鱼类有 5 0多种 (含从国外引种移植种类 ) ,报道的病害有 1 0 0种左右 ,病原或病因包括 :病毒、细菌、原虫、蠕虫、寄生甲壳类及非生物性病害等六大类。现将危害较大的种类及防治技术介绍如下。1病毒性疾病1 .1淋巴囊肿病1 .1 .1病原　鱼淋巴囊肿病毒 (Lymphocysticvirusoffish) ,从不同患鱼获得的毒株可能有几个型。1 .1 .2临诊症状　病鱼吻端、眼眶周围、鳍、尾部及体表等处出现许多小泡状囊肿物 ,似乳头状肿瘤 ,有的紧密相连成桑椹状 ;病灶呈白色、淡灰色、灰黄色或微红色 ;严重患鱼可遍及全身 ,包括内脏组织器官。…     

欧洲鳗小瓜虫病的防治

在欧鳗养殖过程中,小瓜虫病是白仔养殖阶段发病率高、危害大的一种常见病,如防治不及进及方法不当,将会造成极大的损失。 　　病原：多子小瓜虫 　　病症：小瓜虫一般寄生在鱼皮肤和鳃上,在眼角膜和口腔等处也有寄生,侵袭部位肉眼可见由于细胞增生而形成的白色点状胞囊,因此又称之为“白点病”。病情严重时,由于虫体侵入鱼的皮肤和鳃的表皮组织,此起宿主的病灶部位组织增生,并分泌大量的粘液,形成一层白色薄膜覆盖于病灶表面,同时鳍条病灶部位遭受破坏,出现腐烂。病鱼呼吸困难,游泳迟钝,有时集群绕池并摩擦其他物体,造成鱼体…     

欧洲鳗小瓜虫病的防治

在欧鳗养殖过程中，小瓜虫病是白仔养殖阶段发病率高、危害大的一种常见病，如防治不及时及方法不当，将会造成极大的损失。 病原：多子小瓜虫 病症：小瓜虫一般寄生在鱼皮肤和鳃，在眼角膜和口腔等处也有寄生，侵袭部位肉眼可见由于细胞增生而形成的白色点状胞囊，因此又称之为“白点病”。病情严重时，由于虫体侵入鱼的皮肤和鳃的表皮组织，引起宿主的病灶部位组织增生，并分泌大量的粘液，形成一层白色薄膜覆盖于病灶表面，同时鳍条病灶部位遭受破坏，出现腐烂。病鱼呼吸困难，游泳迟钝，有时集群绕池并摩擦其他物体，造成鱼体充血、损伤…     

应用免疫技术检测牙鲆组织内的淋巴囊肿病毒

应用免疫荧光抗体技术(IFAT)和标记链亲和素-生物素(LSAB)免疫组化法对患淋巴囊肿病牙鲆(Paralichthys olivaceus的肝、脾、肾、胃、幽门、肠、心脏、性腺、鳃、表皮10种组织进行了检测，结果发现体表有囊肿症状病鱼的胃、肠、鳃和表皮组织内有淋巴囊肿病毒存在；体表未见囊肿症状病鱼的胃、肠和表皮组织内也检测到了病毒，说明这两种免疫技术可以应用于牙鲆淋巴囊肿病的检测与诊断。同时本文还对淋巴囊肿病毒通过消化道感染的可能进行了探讨。     

牙鲆淋巴囊肿病药物防治试验

淋巴囊肿病（Lymphocyst ic disease简称LD）是由虹彩病毒科的淋巴囊肿病毒（L ymphocyst ic viru s简称LCV）引起的。牙鲆淋巴囊肿病发病率高,一年四季均可发病,目前尚无有效药物防治。牙鲆鱼淋巴囊肿病的特点是呈亚急性暴发,感染率高达809,6以上,病鱼死亡较多。但在同一养殖场的不同养殖车间,使用不同育苗场的牙鲆鱼苗种养殖的则未见发病,而使用同一厂家牙鲆鱼种苗所养殖的牙鲆鱼则普遍发病。     

井陉县成功治愈淡水白鲳小瓜虫病

<正> 井陉微水电厂于去年投资13万元新建一特种养殖场,今年1月份从福建厦门引进10万尾淡水白鲳夏花,半月后发现有很多鱼浮于表面,有的体色发黑、眼瞎,行动迟缓,并出现死鱼现象。县技术站人员及时赶往现场,捞出病鱼观察,鱼体表和鳃上有大量的粘液,皮肤和鳍上有许多分布较均匀的白色点状     

淋巴囊肿病毒结构蛋白及其抗原性分析

病鱼为威海水产养殖场感染淋巴囊肿病的牙鲆（Paralichthys olivaceus）,收集病鱼的囊肿组织,匀浆破碎,采用差速离心和蔗糖密度梯度离心方法,分离纯化淋巴囊肿病毒粒子.负染后,电镜观察证实获得的病毒纯度高,杂质极少,病毒粒子呈近似于圆形的多角形,结构完整.纯化的淋巴囊肿病毒粒子经SDS-PAGE,硝酸银染色后,电泳图谱清晰显示病毒结构蛋白带共有22条,且分子量主要集中在123～26 kD.应用Western blotting法分析病毒结构蛋白的抗原性,结果显示,分子量分别为123.55 kD、65.292 kD和54.438 kD的3条蛋白带发生了免疫反应,其中分子量为65.292 kD的蛋白带反应强度明显高于其他2条蛋白带.本研究旨为确定淋巴囊肿病毒主要衣壳蛋白提供基础依据.[中国水产科学,2006,13（3）：415-420]     

叉尾斗鱼肉瘤病的病理学检测和病原鉴定

为确诊叉尾斗鱼肉瘤病,采集自然患病鱼进行病理学观察,基于淋巴囊肿病毒主要衣壳蛋白基因采用PCR方法对肉瘤状增生物进行检测和进化树分析。结果显示,患病叉尾斗鱼肉瘤状增生物是由大量囊肿细胞聚集在皮肤和鳍条上形成,鳃、肝、肾、脾、肠等内脏组织器官均未观察到囊肿细胞。囊肿细胞大小为正常细胞大小的57.9~1823.8倍,细胞核不规则,细胞质内可见嗜碱性包涵体;透射电镜观察可见囊肿细胞胞质内存在大量直径约171.5nm的病毒粒子。病理观察结果符合鱼类淋巴囊肿病毒感染的临床特征,PCR方法检测到1272bp的目的片段,测序结果显示,该基因与GenBank中的淋巴囊肿病毒KJ408271.1序列相似性达99%。试验结果表明,叉尾斗鱼肉瘤病为淋巴囊肿病毒感染所致,皮肤和鳍是病毒感染的靶器官。本研究为叉尾斗鱼肉瘤病临床诊断和预防提供了试验参考。     

病毒铺膜印迹技术分离牙鲆鳃细胞上的淋巴囊肿病毒结合蛋白

利用非变性电泳与病毒铺膜印迹技术(VOPBA)分离了牙鲆(Paralichthys olivaceus)鳃细胞(FG)上淋巴囊肿病毒结合蛋白,结果显示在FG细胞膜上有分子量为135 kD的蛋白与淋巴囊肿病毒特异结合;对该蛋白切胶回收后进行SDS-PAGE与双向电泳,发现135 kD蛋白由3个蛋白组成,分子量分别为58.3 kD、44.6 kD及37.6 kD;135 kD蛋白SDS-PAGE的VOPBA显示,仅出现37.6 kD的蛋白带,而58.3 kD、44.6 kD蛋白皆不与淋巴囊肿病毒结合。结果表明牙鲆FG细胞上135 kD蛋白是淋巴囊肿病毒的结合蛋白,其37.6 kD蛋白具有病毒结合活性。     

一例鲤浮肿病的诊断

正2019年7月,四川省内江某养殖场的鲤出现大量死亡,患病鱼体表现为眼球凹陷、皮肤肿胀、鳃丝溃烂。为确诊引起该病的病原,给预防和治疗该病提供参考,笔者对自然发病的病鱼进行了细菌分离、病毒PCR检测、寄生虫检测。现将有关工作总结如下。一、发病情况养殖场的鲤鱼发病,同池饲养的鲫鱼未出现发病症状。     

牙鲆淋巴囊肿病的病理和病原分离

应用常规显微和亚显微技术观察和分析患淋巴囊肿病养殖牙鲆(Paralichthys olioaceus)的病理学变化，利用差速离心和蔗糖密度梯度离心技术分离其病原——淋巴囊肿病毒，并利用牙鲆细组织细胞系FG—9307为感染基质，观察淋巴囊肿病毒引起的细胞病理变化。结果表明，患病牙鲆的囊肿组织是一些淋巴囊肿细胞的集合体，这些囊肿细胞排列紧密，直径为10—100μm，细胞近圆形，细胞质内散布有大量的嗜碱性包涵体，且多数集中在细胞的边缘部分；囊肿细胞内含有大量病毒粒子，其衣壳外形呈六角或五角形，直径为150—230nm，大多数病毒粒子中央有一致密的核，核外周包围着一双层核衣壳，核衣壳的表面可见一圈把手样亚单位。以患病牙鲆囊肿物制备的上清液接种细胞，7d内未见细胞异常，经盲传2—3代后，细胞出现较明显的细胞病变效应。     

牙鲆淋巴囊肿病毒纯化及不同来源病毒免疫特性比较

比较了3种不同的牙鲆淋巴囊肿病毒纯化方法,优化后的方法如下：剥离囊肿表面薄膜,收集内容物,匀浆后再用超声波细胞破碎仪破碎,反复冻融,650×g、1800×g差速离心,30%（W/W）蔗糖垫底超速离心（78500×g）浓缩病毒,最后蔗糖密度梯度超速离心（78500×g）纯化病毒。电镜观察发现,出现在47%～52%蔗糖密度区域的病毒带含有多量、纯净和结构一致的病毒粒子。此外,利用制备的兔抗血清对不同地区的病毒进行了免疫特性分析,Western blotting检测显示来自威海、青岛及秦皇岛3个地区的淋巴囊肿病毒反应结果是一致的,均有3条蛋白带发生反应,其分子量分别为125、66和55kDa。     

4种海水鱼淋巴囊肿组织的病理特征比较

取山东、河北、浙江等地感染淋巴囊肿病的牙鲆(Paralichthys olivaceus)、许氏平鮋(Sebastes schlegeli)、鲈鱼(Lateo-labrax japonicus)及纹腹叉鼻(Arothron hispidus),利用光镜和电镜技术及组织化学方法,对患病鱼淋巴囊肿组织的病理特征进行观察比较。结果发现,来自不同地区同一种鱼的淋巴囊肿组织的病理特征无明显差异,不同种鱼的淋巴囊肿细胞具有共同的特征:细胞膨大,细胞核不规则,细胞质内有嗜碱性的、呈Feulgen和Mann氏反应阳性的包涵体,囊肿细胞的细胞膜外有呈PAS反应阳性的均质囊壁,细胞质内病毒颗粒的大小200～220 nm,核周池内有高电子密度物质等。不同种鱼囊肿组织细胞的大小、细胞核的不规则程度、细胞质内包涵体的形态、细胞质内病毒粒子的分布状态,以及囊肿物的外观等有差异。虽然不同种鱼之间存在差异,囊肿组织共同的病理学特征仍可作为疾病诊断的可靠依据。     

夏秋季主要鱼病与防治

病原为粘球菌属一新种，与鱼害粘球菌的形态相似，草、青、鲢、鳙等鱼苗和夏花均能发生，对夏花草鱼危害最大。病鱼自吻端至眼球的皮肤变成乳白色，唇似肿胀，张闭失灵，呼吸困难，口周围皮肤糜烂，有絮状物粘附其上，在池边水中观察可见病鱼呈“白头白嘴”状。     

金鱼小瓜虫病的诊断与防治

1　诊断1 .1　目检　病鱼体表、鳍条、鳃上均发现有 0 .5～ 1mm的白色小点状突起 ,个别重度病鱼全身皮肤和鳍条布满白点 ,全身体表如同覆盖着一层白色薄膜 ,粘液增多 ,体色暗淡无光。病鱼消瘦 ,多漂浮于水面不游动或缓慢游动。因鳃组织被破坏 ,病鱼经常呈浮头状漂浮于水面。1 .     

三文鱼—主要疾病防治

一、三文鱼发病前一般有如下征兆1.离群鱼或游于水面、排水部的鱼或在池壁、池底缓游的鱼增多。2.游泳方式异常，出现突进式、旋回式、竖直上下式、曲体或侧体游动或擦磨活动。3.活泼度、集群性下降，摄饵反应迟钝，摄饵量减少。4.体色发暗、变黑或呈灰黄色。5.体表局部浮肿或充血，出现白点或白色粘液。6.鱼鳍缺损，基部充血或颜色变白。二、常见疾病及其防治(一)传染性胰脏坏死症症状：鳃色淡、贫血，前腹部膨胀，消化道无饵，含透明白色粘液，肝脏白色或充血，幽门垂出现凝血块。主要危害开食2～4周稚鱼。防治：因病毒深入卵内部，尚无有…     

鲤鱼痘疮病

<正>病原或病因病原为鲤疱疹病毒(Herpes-virus cyprini),为有囊膜的DNA病毒,病毒最适传播温度为为15℃~20℃。临床症状早期病鱼体表出现乳白色斑点,后变厚、增大,逐渐在鱼体形成一层白色粘液层。随着病情发展,粘液由乳白色逐渐转变为石蜡状,长到一定程度后可自行脱落,但又会重新长出。如石蜡样物质蔓延到鱼体的大部分时,会严重影响鱼的正常生长,使鱼消瘦,并可影响亲鱼的性腺发育。流行病学流行于秋末至春初温度较低的高密度养殖池塘,当水温升高到15℃以上后,病鱼可自愈,一般不会