体外试验中不同粗精比对山羊瘤胃细菌氨态氮利用效率的影响

利用体外发酵法研究了4种粗精比(10∶0、8∶2、6∶4和4∶6)底物对山羊瘤胃细菌产量、15NH3-N利用效率的影响。结果表明:混合培养液的pH值与氨态氮浓度在8h内急剧下降,而后至24h呈缓慢下降;经24h培养的细菌产量在8∶2、6∶4和4∶6组中差异不显著(P>0.05),但都极显著地高于10∶0组(P<0.01);细菌体15N丰度以8∶2及4∶6组较高,显著高于10∶0和6∶4组(P<0.05);细菌体15N富集量以8∶2组最高,底物547.43μg15N中有120.44μg被细菌体富集,显著高于10∶0组(P<0.05),但6∶4、4∶6组与10∶0组间差异均不显著(P>0.05)。细菌赖氨酸的相对百分组成随精饲料比例的增加而显著增加,胱氨酸在粗饲料组(10∶0)显著高于其它组,但各精饲料添加组间差异不显著,组氨酸以8∶2组为最高,显著高于10∶0组,但与其它精饲料添加组间差异不显著(P>0.05)。     

不同饲粮条件下湖北黑头羊瘤胃细菌多样性及群落结构分析

旨在研究不同饲粮条件下湖北黑头羊瘤胃细菌多样性及群落结构。选取15只健康的湖北黑头山羊公羊,随机分为5组,每组3只,分别饲喂花生藤(A组)、苜蓿(B组)、苜蓿+花生藤(C组)为粗饲料来源的颗粒型全混合日粮以及进口苜蓿草颗粒(D组)和新疆苜蓿草颗粒(E组),试验期共45 d,其中预试期15 d。在试验结束后第1天,经口腔抽取瘤胃液抽提基因组DNA,采用Illumina Miseq PE300平台对瘤胃细菌进行分析。结果表明:1)在97%相似性水平下,5组样品共产生851个操作分类单元(OTU),共享295个OTU,占瘤胃液细菌总OTU数目的34.67%,D组在各组中α多样性指数指标(Ace指数、Chao1指数和Shannnon指数)最高,而3组颗粒型全混合日粮中A、C组高于B组(P<0.05,P<0.01);2)瘤胃中拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)、无壁菌门(Tenericutes)为各组优势菌门,D组中的拟杆菌门显著高于B组(P<0.05),而厚壁菌门显著低于D组(P<0.05),而A、B、C组间拟杆菌门、厚壁菌门含量差异不显著(P>0.05);3)普雷沃氏菌属1(Prevotella_1)、1种未鉴定的属(Unidentified genus)、理研菌属RC9(Rikenellaceae_RC9_gut_group)为优势菌属,其中D组普雷沃氏菌属含量较高,A组与C组,D组与E组的遗传距离更接近。综合得出,苜蓿草颗粒品质和颗粒型全混合日粮中精料含量能影响湖北黑头羊瘤胃细菌的多样性;全苜蓿饲粮条件下湖北黑头羊瘤胃存在独特的细菌群落结构,细菌多样性最高。     

饲粮中性洗涤纤维水平对山羊瘤胃细菌结构及组成的影响北大核心CSCD

本研究旨在利用高通量测序技术研究饲粮中性洗涤纤维(NDF)水平对山羊瘤胃细菌结构及组成的影响。选用6只山羊进行3×3拉丁方试验,依据饲粮NDF水平分为低(35.01%,LN组)、中(40.10%,MN组)和高NDF水平组(45.16%,HN组),每组2只。分3期进行饲养试验,每期试验20 d,其中预试期14 d,正试期6 d。正试期结束后采集山羊瘤胃内容物,提取细菌总DNA后,用细菌通用引物对16S rRNA的V4区进行PCR扩增,扩增产物用Illumina Hi Seq250PE测序平台进行高通量测序,测序结果用QIIME 1.8.0等生物信息学软件进行分析。结果表明:1)HN组的瘤胃液氨态氮(NH3-N)浓度极显著低于LN组和MN组(P<0.01);LN组瘤胃液乙酸/丙酸显著低于HN组(P<0.05),但MN组与其他2组无显著差异(P>0.05)。2)各组间Chao1指数和Shannon指数的差异均不显著(P>0.05);LN组observed species指数显著高于其他2组(P<0.05),其他2组间则无显著差异(P>0.05)。3)在门水平上,3组间所有细菌的相对丰度差异均不显著(P>0.05);在属水平上,HN组普雷沃氏菌科UCG-001(Prevotellaceae UCG-001)、普雷沃氏菌科UCG-003(Prevotellaceae UCG-003)和瘤胃球菌科UCG-014(Ruminococcaceae UCG-014)的相对丰度显著高于其他2组(P<0.05);HN组瘤胃球菌科NK4A214(Ruminococcaceae NK4A 214 group)、瘤胃球菌科UCG-005(Ruminococcaceae UCG-005)的相对丰度显著高于LN组(P<0.05);HN组SP3-e08和Lachnoclostridium 10的相对丰度显著低于其他2组(P<0.05);LN组解琥珀酸菌属(Succiniclasticum)相对丰度显著高于其他2组(P<0.05);MN组赖氨酸芽孢杆菌属(Lysinibacillus)、芽孢杆菌属(Bacillus)和叶杆菌属(Phyllobacterium)的相对丰度显著高于其他2组(P<0.05),食物谷菌属(Victivallis)的相对丰度极显著高于其他2组(P<0.01)。综合得出,饲粮NDF水平在35.01%~45.16%变化时,显著影响山羊瘤胃液NH3-N浓度和乙酸/丙酸,显著影响瘤胃Prevotellaceae UCG-001、Prevotellaceae UCG-003等多种菌属的相对丰度。     

高通量测序分析不同断奶时间对南方黄牛犊牛瘤胃细菌菌群的影响

本试验旨在研究不同断奶时间对南方黄牛犊牛瘤胃微生物多样性、物种丰度的影响。选用18头南方黄牛犊牛,依据出生体重相近原则随机分成对照组(NW,n=3)和早期断奶组(EW,n=15)。NW组不早期断奶;3个早期断奶组逐渐增加开食料、青饲料的饲喂量,当犊牛连续3 d每日进食固体饲料干物质分别达500 g(EW500,n=5)、750 g(EW750,n=5)和1 000 g(EW1000,n=5)时,停喂代乳粉。犊牛断奶后利用口腔取样装置获取瘤胃内容物样品,用Illumina-Mi Seq高通量测序技术分析瘤胃细菌结构和组成的变化。结果表明:NW组瘤胃细菌最多的是厚壁菌门(P0.05);EW组拟杆菌门相对较高,EW750和EW1000组较NW组差异显著(P0.05);瘤胃内细菌在属水平上普雷沃氏菌占比例较多,EW组的普雷沃氏菌较NW组有所增加(P0.05),丁酸弧菌属和琥珀酸菌属均显著增加(P0.05),但EW500、EW750和EW1000组间差异不显著(P0.05);EW组分支杆菌属和颤螺菌属较NW组显著降低(P0.05)。由此可见,早期断奶能显著影响犊牛瘤胃细菌多样性及物种丰度,但是不同早期断奶时间处理组之间差异不显著,从瘤胃微生物角度,推荐日采食固体饲料干物质达500 g时断奶。     

山羊瘤胃中固氮细菌的分离与初步鉴定

通过瘤胄瘘管采集山羊瘤胃液,分离瘤胃优势菌,并在不同气体环境（纯N2、纯CO2、氢气或空气）下应用无氮培养基培养,考察瘤胃优势菌对氮气的利用情况,并初步进行了微生物学鉴定。结果表明,纯N2条件下,菌株YUAN63和菌株YUAN100在无氮培养基上能生长,与空气条件下相当,但在CO2条件下未有可见菌落,在氢气条件下仅有少数小菌落。研究结果说明了瘤胃细菌中存在一类能利用氮气的细菌,但仍需进一步确定。     

山羊瘤胃中固氮细菌的分离与初步鉴定

通过瘤胃瘘管采集山羊瘤胃液,分离瘤胃优势菌,并在不同气体环境(纯N2、纯CO2、氩气或空气)下应用无氮培养基培养,考察瘤胃优势菌对氮气的利用情况,并初步进行了微生物学鉴定。结果表明,纯N2条件下,菌株YUAN63和菌株YUAN100在无氮培养基上能生长,与空气条件下相当,但在CO2条件下未有可见菌落,在氩气条件下仅有少数小菌落。研究结果说明了瘤胃细菌中存在一类能利用氮气的细菌,但仍需进一步确定。     

氮添加对不同坡度退化高寒草甸土壤细菌多样性的影响

选取三江源区果洛州不同坡度退化程度相近的高寒草甸,进行氮添加试验,运用Miseq PE250测序技术对土壤细菌16s rDNA进行序列测定和分析,探讨3个氮添加水平低等量氮添加（LN, 2 g N·m^-2）、中等量氮添加（MN, 5 g N·m^-2）、高等量氮添加（HN, 10 g N·m^-2）对不同坡度退化草地土壤细菌多样性的影响。结果表明：放线菌门（Actinobacteria）、变形菌门（Proteobacteria）是研究区草地土壤中最主要的两大类群。缓坡地与陡坡地土壤细菌个别丰度极低的门以及61.4%以上（包括未鉴定的细菌属）细菌属存在显著差异（P<0.05）。不同施氮水平对退化高寒草地各细菌门以及大部分细菌属影响不显著,对一些丰度较低的属的影响显著（P<0.05）,且在不同坡度所响应的细菌属不同。无论是缓坡地还是陡坡地,氮添加对退化高寒草甸土壤细菌群落结构存在显著差异（P<0.05）,土壤微生物丰富度和多样性整体上呈现出随着施氮量增加先减少后增加的趋势,中等量氮添加显著降低了土壤细菌丰富度和多样性,高水平氮添加显著抑制了土壤细菌的丰富度和多样性的下降（P<0.05）,说明氮添加对细菌多样性的影响具有阈值限制性。     

不同中性洗涤纤维与非纤维性碳水化合物比例日粮对山羊瘤胃和血液氮素利用的影响

试验以4只装有瘤胃瘘管和颈静脉血管留置针的徐淮白山羊(20±2)kg为试验动物,按4×4拉丁方试验设计方案,饲喂由玉米、豆粕、苜蓿干草、羊草等原料组成的中性洗涤纤维(NDF)与非纤维性碳水化合物(NFC)比例(NDF/NFC)分别为2.75(A)、1.71(B)、1.12(C)和0.74(D)组的4种日粮,研究其对山羊瘤胃和血液氮素利用的影响。结果表明:①瘤胃氨态氮浓度随日粮NDF/NFC降低而显著升高,采食1-2 h最高,然后下降。②血浆尿素氮浓度以B组最高为1 2.64 mg/dL,极显著(P<0.01)高于D组,在采食后2 h内升高而后降低,日内波动幅度以D组最大,达到4.36 mg/dL。③瘤胃液部分游离氨基酸如天门冬氨酸和谷氨酸变化显著,其浓度随NDF/NFC降低而逐渐升高。瘤胃总游离氨基酸以D组最高,极显著(P<0.01)高于A组,显著(P<0.05)高于B组。④日粮对血浆游离氨基酸浓度没有显著影响。     

不同外源寡糖对崂山奶山羊瘤胃微生物区系的影响

本试验旨在研究不同外源寡糖对奶山羊瘤胃微生物区系的影响。试验选用 ６只平均体重为（３２．８０±２．４５）ｋｇ、装有永久性瘤胃瘘管的崂山奶山羊,采用分期分组试验设计。各组羊饲喂基础饲粮（对照组）以及分别在基础饲粮中添加 １％甘露寡糖（ＭＯＳ组）、半乳甘露寡糖（ＧＭＯＳ组）、寡木糖（ＸＯＳ组）、低聚异麦芽糖（ＩＭＯ组）、果寡糖（ＦＯＳ组）的试验饲粮。共进行４期试验,每期 ２３ｄ,其中预试期 １４ｄ,正试期 ９ｄ。于晨饲前（０ｈ）,晨饲后 ２、４、６、８ｈ以及晚饲前（晨饲后 １０ｈ）采集瘤胃液,测定瘤胃液中细菌总数以及纤维素分解菌、原虫和真菌数量。结果表明：与对照组相比,试验组瘤胃液细菌总数趋于增加,仅晨饲前 ＭＯＳ组显著提高（Ｐ＜０．０５）;试验组瘤胃液纤维素分解菌数量有所提高,其中 ＭＯＳ组（０ｈ）、ＧＭＯＳ组（０、２、４ｈ）、ＦＯＳ组（０、２、４ｈ）显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）;试验组瘤胃液原虫数量有所提高,其中 ＭＯＳ组（２和 ４ｈ）、ＸＯＳ组（４ｈ）显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）;试验组瘤胃液真菌数量有所提高,其中ＧＭＯＳ组和 ＦＯＳ组（０ｈ）极显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）,ＭＯＳ组（２ｈ）、ＩＭＯ组（２ｈ）、ＦＯＳ组（２ｈ）、ＭＯＳ组（４ｈ）、ＦＯＳ组（６ｈ）显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。细菌总数、纤维素分解菌和原虫数量呈先下降后上升趋势,真菌数量呈先上升后下降趋势。本试验条件下,添加不同外源寡糖对瘤胃微生物影响有所差异,其中甘露寡糖、半乳甘露寡糖和果寡糖对瘤胃液纤维素分解菌、原虫和真菌的增殖作用较明显。     

苹果酸对山羊瘤胃发酵的影响

以4头装有永久性瘤胃瘘管的本地山羊为试验动物,采用4×4拉丁方设计,研究苹果酸(0、5、10和15g/d)对山羊瘤胃发酵的影响。结果表明,日粮中添加苹果酸显著提高了瘤胃pH和丙酸比例(P<0.05),并显著降低了NH3-N、乳酸浓度和乙丙比(A/P)(P<0.05)。添加苹果酸后8 h时,5 g/d和10 g/d处理组的乳酸浓度分别比对照组降低了31%(P<0.05)和29%(P<0.05);添加苹果酸后2 h时,10 g/d和15 g/d处理组的NH3-N浓度均比对照组降低了30%(P<0.05)。10 g/d和15 g/d处理组乙丙比日平均值分别比对照组降低了12%(P<0.05)和22%(P<0.01);但各处理组总挥发性脂肪酸浓度(TVFA)未见明显变化。结果提示,日粮添加苹果酸可以改变瘤胃发酵类型,明显提高丙酸比例,促进乳酸和NH3-N的利用。     

添喂葵花籽油对山羊瘤胃消化代谢与瘤胃液脂肪酸组成的影响

为研究亚油酸底物葵花籽油对山羊瘤胃消化代谢和瘤胃液脂肪酸组成的影响,以5只装有永久性瘤胃瘘管的雌性成年徐淮白山羊为试验动物,采用自身对照设计,对照期和试验期（添喂葵花籽油7 mL/d）各15 d,低精料日粮常规饲养。每期结束后采集瘤胃液进行分析。结果表明,添喂葵花籽油后,瘤胃液pH无显著变化;而氨氮（NH3-N）水平和TVFA显著升高（P〈0.05）;乙、丙酸含量显著增加（P〈0.05）,而乙、丙、丁酸比例（C2＋C4）/C3比值和微生物粗蛋白（MCP）均无明显变化;（C18∶1）和c9,t11-CLA（P〈0.05）浓度均明显升高。表明在山羊日粮中添加一定量的葵花籽油,可在不改变瘤胃发酵类型和不影响瘤胃微生物本身的情况下促进瘤胃消化代谢,调节瘤胃液脂肪酸组成。     

瘤胃保护性氨基酸对内蒙古白绒山羊氮消化代谢的影响

选用9只安装永久性瘤胃瘘管，十二指肠近端瘘管和回肠末端瘘管的内蒙古白绒山羊半同胞羯羊，随机分为3组，即保护性氨基酸组（A组）、常规氨基酸组（B组）和对照组（C组），每组3只进行动物试验。采用体内法研究在相同蛋白质水平（CP 9．93％）日粮条件下，日粮中添加瘤胃保护性蛋氨酸（RPMet）和瘤胃保护性赖氨酸（RPLys）对内蒙古白绒山羊氮消化代谢的影响。结果表明：在内蒙古白绒山羊基础日粮中添加RPMet和RPLys显著地增加了绒山羊的干物质采食量DMI（P〈0．05），提高了机体氮的沉积（P〉0．05），并有降低尿中尿素氮（UUN）排出量的趋势（P〉0．05）。     

瘤胃添加DL-蛋氨酸对槐山羊瘤胃消化代谢的影响研究

为研究DL-蛋氨酸对瘤胃消化代谢的影响，本试验选取4只体重约30 kg，装置永久性瘤胃瘘管的槐山羊，采用4×4拉丁方设计，在4期试验中分别经瘤胃投饲0（对照组）、4、6、8 g/d·只 DL 蛋氨酸。结果表明:①与对照组相比，给槐山羊投饲6～8 g/d·只DL-蛋氨酸，显著降低瘤胃液pH，但不影响瘤胃液氨态氮浓度。②〖JP3〗各处理组分别提高乙、丙、丁酸平均浓度7.2%～30.1%、43.6%～102.3%、15%～35.4%，总VFA平均浓度提高幅度为13.3%～38.3%，基本上各处理组在添加6～8 g/d·只达到显著水平。③添加8 g/d·只 DL-蛋氨酸可以显著提高前胃干物质、半纤维素的消失量，分别为85和45 g/d，消失率分别提高6.6%、12.2%。以及提高钙到达十二指肠的量和率。前胃纤维素的消失量和消失率均有随添加量增加而增加的趋势。以上结果提示：供给槐山羊6～8 g/d·只 DL-蛋氨酸是可以改善瘤胃对干物质和粗纤维的消化和瘤胃代谢状况的。     

不同比例白酒糟对育肥山羊生产性能、血清指标及瘤胃发酵的影响

本试验采用不同添加比例的白酒糟等量替换豆秸,以确定山羊育肥期饲粮中白酒糟的适宜添加比例。选用年龄(4月龄)、体重[(21.56±1.21)kg]相近的公山羊32只,随机分为4组,每组8只,用白酒糟分别替代全混合日粮中0(对照)、8%、15%、25%的豆秸。育肥90 d后屠宰,测定山羊生产性能、血清指标、屠宰性能、胴体品质及瘤胃发酵的影响。结果表明:15%组山羊的平均净增重、平均日增重最高,料重比最低,经济效益最佳,并且与对照组差异显著(P0.05)。8%、15%组的血清胆固醇含量均显著高于对照组和25%组(P0.05)。15%组的血清生长激素、胰岛素样生长因子Ⅰ、胰岛素、甲状腺素含量均显著高于对照组和25%组(P0.05)。15%组的胴体重、睾丸重、肺脏重、肝脏重、瓣胃重、皱胃重显著高于对照组和25%组(P0.05)。各组间肌肉p H、p H_24 h、失水率、熟肉率、瘤胃重和瘤胃液p H均无显著差异(P0.05)。15%、25%组的瘤胃液氨态氮浓度无显著差异(P0.05),但均显著高于对照组(P0.05)。由此得出,山羊育肥期饲粮白酒糟的最适添加比例为15%。     

苹果酸对山羊瘤胃挥发性脂肪酸浓度动态变化影响的研究

选用4头装有永久性瘤胃瘘管的土地山羊为试验动物,按4×4拉丁方试验设计,进行了苹果酸(5 g、10 g、15 g)对山羊瘤胃内挥发性脂肪酸浓度动态变化影响的研究。结果表明,在0~12 h内,10 g和15 g添加组的pH值始终高于6.0,分别比对照组提高了0.16~0.27和0.19~0.41。10 g和15 g处理组的丙酸浓度几乎在12 h内均高于对照组。4 h时,10 g和15 g处理组的丙酸浓度分别比对照组提高了22%(P<0.05)和23%(P<0.05)。10 g和15 g处理组的丙酸比例在0~12 h内分别比对照组提高了21%~56%和22%~61%,10 g和15 g处理组的乙丙比在0~12 h内分别比对照组降低了21%~41%和21%~43%。结果表明,苹果酸降低了瘤胃液乙丙比,改变了瘤胃发酵类型。     

丙酮酸钙对山羊瘤胃挥发性脂肪酸浓度动态变化的影响

以8只装有永久性瘤胃瘘管的成年徐淮山羊为试验动物,采用自身对照设计,研究丙酮酸钙对山羊瘤胃内挥发性脂肪酸浓度动态变化的影响。结果表明:与对照组相比,添喂丙酮酸钙后,在0~8h内,对pH值无显著影响。4h时,总挥发性脂肪酸(TVFA)浓度升高25%(P<0.01);丙酸浓度升高60%(P<0.01)。0~8h内,丙酸比例均高于对照组(17%~30%);乙丙比均低于对照组(20%~29%)。说明在山羊日粮中添加一定量丙酮酸钙,可在不影响pH值的情况下,提高丙酸比例,降低乙丙比,改变瘤胃发酵类型。     

提高反刍动物氮利用率的研究进展

提高反刍动物氮利用率是应对全球饲料资源短缺、环境污染和畜牧业可持续发展的有效措施。论文从当前对反刍动物氮代谢规律的最新认识、日粮和瘤胃因素对反刍动物氮利用率的影响以及经济与环境友好型集成技术等方面,综合阐述了国内外在提高反刍动物氮利用率方面的研究进展。