外源精胺对黑果枸杞不同性质愈伤组织诱导再生器官及玻璃化的影响

以黑果枸杞不同性质的愈伤组织为试材,将不同浓度的精胺(Spm)添加于MS培养基中,研究外源Spm对黑果枸杞不同性质愈伤组织诱导再生器官及玻璃化的影响,以期为黑果枸杞植株再生技术、遗传转化等提供参考依据.结果 表明:添加适宜浓度的Spm均能显著提高愈伤组织再生率、降低玻璃化率.4种不同性质愈伤组织的再生率、玻璃化率影响效果依次为芽愈伤组织(BEC)＞叶愈伤组织(LEC)＞茎愈伤组织(SEC)＞花药愈伤组织(AEC).青海诺木洪(QH-N)和宁夏中宁(NX-Z)的BEC添加Spm最佳浓度均为30 mg·L-1,再生率分别达到60.62％和63.89％,均无玻璃化苗发生;LEC添加Spm最佳浓度均为20 mg·L-1,再生率分别达到49.48％和52.48％,均无玻璃化苗发生;SEC添加Spm最佳浓度分别为10 mg·L-1和15 mg·L-1,再生率分别为33.60％和42.11％,玻璃化率分别降至1.14％和0％;AEC最佳浓度均为15 mg· L-1,再生率分别为19.89％和34.86％,玻璃化率分别降至12.19％和8.97％.外源精胺能有效促进愈伤组织再生率,并不同程度减轻或抑制玻璃化苗的发生.     

中国特有濒危植物八角莲胚状体的发生及其植株再生研究

以我国特有濒危药用植物八角莲(Dysosma versipellis (Hance) M.Cheng)为试材,采用DPS软件正交设计法和SPSS的Duncan's multiple range test,研究了不同植物激素对其愈伤组织形成、胚状体诱导及植株再生的影响,以期为离体培养条件下快速诱导八角莲愈伤组织、胚状体及其植株的再生,以及将来深入研究真菌诱导子诱导八角莲活性成分鬼臼毒素累积的作用机理、信号调控机制和人工种子制作等提供参考依据.结果 表明:八角莲叶和叶柄最适合作为诱导愈伤组织的材料;植物激素对愈伤组织形成的影响效果从大到小依次为2,4-D＞ TDZ＞KT＞NAA＞2-ip,愈伤组织形成的最佳培养基为MS+2,4-D 1 mg·L-1 +NAA 0.05 mg·L-1 +TDZ 0.5 mg·L-1 +2-ip 1 mg·L-1;诱导颗粒状愈伤组织胚状体形成的最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L-1 +NAA 0.1 mg·L-1,诱导率为71.33％;胚状体生根和植株再生培养基为MS+IBA 0.5 mg·L-1 +GA30.5 mg·L-1.     

植物生长调节剂和蔗糖浓度对狼爪瓦松愈伤组织生物量及有效物质积累的影响

以狼爪瓦松愈伤组织为试材,采用正交实验的方法,研究了MS基本培养基浓度及6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)2种植物生长调节剂对狼爪瓦松愈伤组织生物量和有效物质含量的影响;同时,对适宜的蔗糖浓度进行了筛选。结果表明:MS+3.5mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA组合,最有利于愈伤组织生长和多糖、总酚及黄酮的积累;MS+3.5mg·L~(-1)6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA培养基中加入30g·L~(-1)的蔗糖时,愈伤组织生长最佳,有效物质含量最高,在此蔗糖浓度下狼爪瓦松愈伤组织可生产711.2mg·L~(-1)多糖、165.1mg·L~(-1)总酚和154.5mg·L~(-1)黄酮。     

黄芩愈伤组织中黄芩苷与过氧化物酶活性相关性分析

以黄芩愈伤组织为试材,研究了其生长过程中过氧化物酶活性变化规律及其与黄芩苷次生合成之间的关系.结果表明:在黄芩愈伤组织生长周期(27 d)内,过氧化物酶的活性高低与黄芩苷的积累呈正相关性.在黄芩愈伤组织生长周期的前15 d,愈伤组织处于生长期,过氧化物酶活性低水平表达,黄芩苷合成缓慢;15～21 d,愈伤组织处于稳定期,过氧化物酶的活性高水平表达,并到达最大值,期间黄芩苷迅速合成,也达到最大值;21～27 d,愈伤组织进入衰老期,而此时的过氧化酶活性降低,黄芩苷合成几乎停止.采用L9 (34)正交表优化培养基中6-BA、碳源、氮源、pH的配比,筛选过氧化物酶活性表达最优的培养条件为:6-BA2 mg/L,碳源:20 g蔗糖+10 g葡萄糖,氮源(NH4+)30 mmol/L,pH 6.0.     

“嘎拉”苹果叶片愈伤组织的诱导

以"嘎拉"苹果单芽系组培苗叶片为外植体诱导愈伤组织,研究了愈伤组织诱导过程中植物生长调节剂种类及浓度配比、光照和黑暗条件以及继代天数对其形成及生长的影响。结果表明:各组合均能比较高效地诱导愈伤组织的形成,以MS+蔗糖30g·L~(-1)+2,4-D 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+BA 2.0mg·L~(-1)诱导效率最佳;愈伤组织的形成需要14~21d的暗培养,继代周期以15~30d为宜。     

正交试验优化银杏胚愈伤组织继代培养及黄酮积累

采用正交试验研究了基本培养基、NAA、6-BA、植酸(PA)4因素各3水平对银杏胚愈伤组织继代培养及黄酮积累的影响,并测定了愈伤组织生长曲线.结果表明:银杏胚愈伤组织继代培养的最佳组合是N6+NAA 3.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+0.1%PA,各因子影响程度为基本培养基＞NAA＞6-BA＞PA;愈伤组织黄酮积累量最佳组合是B5+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5mg/L+0.05%PA,各因子影响程度为NAA＞PA＞6-BA＞基本培养基.愈伤组织生长曲线基本呈"S"型,黄酮积累的适宜培养周期为40～50 d.     

茄子花药低温胁迫培养及耐冷性诱导

以 6个茄子品种为试材 ,在低温胁迫条件下进行花药培养。结果表明 5～ 6℃低温胁迫处理可诱导花药形成耐冷性愈伤组织 ,在MS +NAA(0 .0 2mg·L-1) +ZT(1.0mg·L-1)培养基上耐冷性愈伤组织的分化率达到31.6 % ,由耐冷性愈伤组织再生植株的低温伤害率明显低于原品种     

翠菊‘花束绯红’叶片的植株再生体系建立

以翠菊‘花束绯红’无菌苗为材料,研究了植物生长调节剂浓度及组合、光照条件、不同附加物对叶片及其愈伤组织再生植株的影响。结果表明:(1)在光照培养条件下,诱导翠菊叶片不定芽形成的最适培养基为MS+6-BA3.0mg·L-1+IBA1.0mg·L-1,诱导率为56.7%,平均不定芽数为3.3;(2)黑暗培养不利于叶片不定芽的分化,但促进叶片愈伤组织的形成;(3)培养基中分别添加脯氨酸、水解酪蛋白和NH4NO3等均能明显促进愈伤组织不定芽的诱导,最适培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+脯氨酸300mg·L-1,诱导率为82.8%,平均不定芽数为4.5;(4)不定芽移到幼苗生根培养基(1/2MS+IBA0.1mg·L-1)上,生根率为89.1%,移栽后成活率达89.3%。     

外源多胺对荔枝愈伤组织增殖及体胚发生的作用

[目的]研究多胺[腐胺(Put)、亚精胺(Spd)、精胺(Spm)]对愈伤组织增殖及体胚诱导的作用,为揭示多胺在荔枝离体再生中的功能提供依据.[方法]采用单因素试验设计,分别在愈伤组织增殖及体胚诱导过程中添加多胺及其合成抑制剂[D-精氨酸(D-Arg)、环己胺(Cha)],比较不同处理下妃子笑荔枝愈伤组织增殖及体胚诱导差异.[结果]低浓度多胺或高浓度多胺合成抑制剂促进愈伤组织增殖,愈伤组织增殖量达显著水平,胚性愈伤组织(EC)与非胚性愈伤组织(NEC)颜色状态界限更加明显.与对照相比,经过多胺处理增殖的愈伤组织乳白胚诱导数及萌发率均降低,而多胺合成抑制剂处理增殖的愈伤组织乳白胚诱导数及萌发率随着多胺合成抑制剂浓度升高而升高,当Cha质量浓度为200 mg·L-1时,乳白胚数量最多,达960个·g-1,萌发率29.41％;当D-Arg质量浓度为700 mg·L-1时,乳白胚萌发率最高,为32.35％,胚数量为450个·g-1.体胚诱导培养基上添加多胺及其合成抑制剂对体胚诱导作用差异较大,Spd促进体胚发生作用较明显,当Spd质量浓度为20mg·L-1时,乳白胚数量为590个·g-1,萌发率为30.30％.体胚发生培养基上添加Cha或高浓度D-Arg抑制体胚发生,而添加低浓度D-Arg则促进体胚发生.[结论]在愈伤组织增殖培养基上添加3种多胺可促进愈伤组织增殖并保持胚性,且抑制原胚发生,而Cha及高浓度D-Arg促进原胚发生.体胚诱导培养基中添加低浓度Spd促进体胚分化.     

转色初期喷施BTH对‘红地球’葡萄着色和果实品质的影响

【目的】研究植物诱抗剂BTH对葡萄果实花色素苷生物合成、着色和品质的影响。【方法】以‘红地球’葡萄植株为试材,在葡萄果实转色初期对果穗喷施30~120 mg·L-1的BTH溶液,定期采样测定葡萄果实的形态、色度、花色素苷和糖酸累积等品质特征的变化。【结果】BTH处理‘红地球’葡萄果实的颜色指数CIRG和总花色素苷含量均得到显著提高,处理效果依次为60 mg·L-1120 mg·L-130 mg·L-1;参与花色素苷生物合成的PAL、CHS1、CHS2、CHI1、CHI2、F3’H、F3H1、F3H2、DFR、LDOX、UFGT-2和Vvmyby A1等基因和转录因子的相对表达量显著提高,表明BTH诱导葡萄花色素苷含量的增加与花色素苷生物合成途径相关基因的上调表达有关;F3’5’H基因显著下调表达,且花色素苷单体主要以F3’H支路产物矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(Cy)和芍药素-3-O-葡萄糖苷(Pn)为主,F3’5’H支路产物锦葵素-3-O-葡萄糖苷(Mv)、矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷(Pt)和飞燕草素-3-O-葡萄糖苷(Dp)含量极少,据此推测BTH处理‘红地球’葡萄可能主要通过F3’H支路合成花色素苷。BTH处理使葡萄果实中可溶性固形物含量显著提高,可滴定酸含量显著下降,固酸比(SSC/TA)显著提高;60 mg·L-1BTH处理还对提高葡萄果实的可溶性总糖含量有显著效果;除120mg·L-1BTH处理导致葡萄果实横径变小外,其他浓度处理对葡萄果实形态均无显著影响。【结论】‘红地球’葡萄转色初期喷施一定浓度的BTH溶液可显著促进避雨栽培条件下葡萄的着色和转熟,并提高果实品质,且以60 mg·L-1BTH处理效果最好。