冠突散囊菌胞外多糖的分离纯化

冠突散囊菌液体深层发酵滤液经浓缩,醇析,透析冻干得多糖粗品.粗多糖经Sevag法脱蛋白,DEAE-52阴离子交换柱层析纯化得到4种多糖.将含量最高的多糖ECP-A经Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱层析得到纯化的冠突散囊菌胞外多糖(ECP-A1和ECP-A2),并测定其相对分子质量.用紫外光谱和红外光谱分析鉴定该多糖,紫外光谱分析未见蛋白质(280 nm)与核酸(260 nm)的特征吸收峰,红外光谱揭示ECP-A1具有典型的多糖特征吸收峰,表明ECP-A1和ECP-A2为单一均匀组分的多糖.     

胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)胞外多糖的分离纯化

以胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)(硅酸盐细菌)为材料,经液体发酵培养后,通过碱提醇沉法得到胞外多糖粗提物。紫外光谱分析表明,该粗提物不含有核酸和蛋白质,经DEAE-纤维素离子交换柱层析分离纯化得到多糖纯品。通过Sephadex G-100凝胶柱层析和醋酸纤维薄膜电泳鉴定,其为均一组分不含有其他多糖;化学法分析表明,多糖纯品含有氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸,不含有硫酸根。     

复方免疫增强剂中三种多糖的分离纯化初步研究

采用超声辅助提取法提取复方免疫增强剂中的多糖,以Sevag法除蛋白后分级醇沉得粗多糖PS1、PS2和PS3。粗多糖PS1、PS2和PS3上离子交换柱层析分离纯化,以0-2.0MnaC l溶液进行梯度洗脱得PS1A、PS2A和PS3A多糖组分,再经过Sephadex G-200凝胶柱层析分离得到三个主要多糖组分PS1A-Ⅰ、PS2A-Ⅱ和PS3A-Ⅲ。利用凝胶层析、纸层析及紫外分光光度法进行纯度鉴定,结果表明PS1A-Ⅰ、PS2A-Ⅱ和PS3A-Ⅲ为均一多糖。     

可德兰多糖的分离纯化和化学结构分析

用酸碱法从产碱杆菌突变株C125的发酵液中提取Curdlan粗多糖样品CD-1,经Sevage法脱蛋白、纤维素柱层析脱色后,用Sephadex G-100凝胶层析柱分离纯化得多糖CD-2.紫外分光法及Sephadex G-200凝胶柱层析法检测CD-2为均一多糖,Sephadex G-200柱层析测得CD-2的分子量为65300Da,完全酸水解后纸层析检测CD-2的单糖组成中仅有葡萄糖,分析CD-2的红外光谱、核磁共振谱得知CD-2多糖的化学结构是以β-(1,3)糖苷键连接而成的无分枝的葡聚糖.     

红稗多糖的分离纯化工艺

为研究红稗粗多糖不同的脱蛋白工艺,并确定DEAE-52纤维素交换层析柱纯化分离红稗多糖的最优条件。用Sephadex G-100柱层析分离纯化得到的红稗多糖并采用柱前衍生化高效液相色谱法对纯化后的红稗精多糖的单糖组成种类进行测定。结果表明:红稗粗多糖的最佳上样浓度为5 mg/mL,洗脱速度0.5mL/min,上样体积25mL;采用Sevage法除蛋白3次,得到的蛋白清除率以及多糖保存率均较高,通过DEAE-52纤维素的柱层析分离纯化后可得到大组份多糖;再由Sephadex G-100柱层析分离纯化得到的大组份红稗中性多糖;再利用柱前衍生化高效液相色谱法(HCLP)测定分离纯化后的红稗多糖主要由L-鼠李糖(rhamnose,Rham)、D-葡萄糖醛酸(glucuronic acid,Glu)和葡萄糖(glucose,Glc)3种单糖组成。     

海带岩藻聚糖硫酸酯酶解工艺及分离和纯化研究

岩藻聚糖硫酸酯是一种具有多种生物活性的多糖,对用纤维素酶、果胶酶酶解制备海带岩藻聚糖硫酸酯的工艺进行了研究,正交试验结果表明:纤维素酶、果胶酶优化的酶解工艺参数为:纤维素酶0.221%、果胶酶0.074%,温度50℃,pH值4.5,时间50min。经DEAE-52纤维素离子交换柱层析分离得到3个岩藻聚糖硫酸酯组分,3个组分经Sephadex G-200凝胶柱层析进一步纯化得5个分子量很大(大于2MDa)的组分,可能为岩藻聚糖硫酸酯的凝聚体,另5个组分的分子量为57.8KDa、115KDa、125KDa、154KDa、206KDa。     

灰树花多糖的分离、纯化与理化性质

灰树花子实体用热水提取，乙醇沉淀，透析冻干得灰树花多糖粗品，再经Sevag法脱蛋白，DEAE－Sephadex A-25柱层析纯化得到4种多糖分别为PGF－1，PGF－2，PGF－3和PGF－4。4种多糖经纸层析，Sephadex G-200柱层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果表明都为单一均匀组分：PGF－1经纸层及气相色谱分析证实它是一种葡萄糖；凝胶渗透色谱测定其分子量为11万。红外光谱揭示PGF－1含β－型糖苷键。     

牛血清乙酰胆碱脂酶的分离纯化

以牛血清为原材料，采用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G—100凝胶柱和DEAE-纤维素DE23柱层析对牛血清中的乙酰胆碱酯酶进行分离纯化。结果表明，经以上三步分离纯化后，可获得电泳纯的乙酰胆碱酯酶，最终收集的酶液经聚丙烯酰胺pAGE凝胶电泳鉴定后，仅出现一条谱带；对Sephadex G-100凝胶和Sephadex G-75凝胶分离纯化乙酰胆碱脂酶的效果进行了比较．发现两者对乙酰胆碱酯酶的分离效果相差不大。     

桐城小花茶多糖的提取工艺和分离纯化

采用正交试验优化桐城小花茶多糖的提取工艺[三氯乙酸(TCA)脱蛋白,DEAE C-52纤维素柱层析、Sepha-dex G-100凝胶柱层析纯化茶多糖,紫外全波段扫描和红外光谱分析纯度和性质].结果表明:料液比1:20,浸提温度60℃,浸提3 h,浸提2次,为茶多糖提取最优条件;三氯乙酸浓度在3.5%时,除蛋白效果最好;凝胶柱层析纯化后的茶多糖不含核酸或蛋白质等其他组分;红外图谱显示,在500-4000 cm-1区具有多糖类物质的一般特征吸收峰.     

米糠抗氧化肽的分离纯化研究

以DEAE-52离子交换柱层析和SephadexG-25凝胶过滤柱层析纯化米糠抗氧化肽,以硅胶G薄层层析测定其纯度,氨基酸自动分析仪测定其氨基酸组成。实验结果表明：米糠抗氧化肽经DEAE-52柱层析和Sephadex G-25柱层析后基本上得到了纯化;氨基酸组成分析表明,米糠抗氧化肽由14种氨基酸组成,富含两种酸性氨基酸：Asp、Glu,并含有6种人体必需氨基酸（Val、Met、lie、Leu、Phe、Lys）,占米糠抗氢化肽童基酸羔会号的31．89％．且有搪高的营兼价槽知僳馇功能．     

发酵苹果渣多糖分离纯化、结构及其与加工特性的关系

【目的】在研究发酵苹果渣多糖分离纯化动态趋势的基础上,对其结构特性进行深入研究,进一步探究发酵苹果渣多糖分离纯化、活性及加工特性。【方法】以苹果原渣多糖(apple pomace polysaccharides,AP)、苹果酒渣多糖(wine fermented apple pomace polysaccharides,WFP)、苹果醋渣多糖(vinegar fermented apple pomace polysaccharides,VFP)为原料,对其含量进行分析,利用发酵苹果渣多糖不同组分间极性差异,采用DEAE-52纤维素,以Na Cl溶液进行梯度洗脱,部分收集器进行逐管收集,苯酚硫酸法测定吸光值,制作洗脱曲线;同时,对DEAE-52纤维素层析所得组分利用去离子水经Sephadex G-200凝胶柱,根据一定分子量截留的特点进行进一步分离纯化,测定所得组分纯度后,对不同组分进行结构表征,主要包括X衍射仪(XRD)观察晶体结构、热重分析仪进行热重分析(TG)、激光粒度仪对溶液粒度进行分析(LPSA)、同时通过刚果红试验探究其是否具有三螺旋结构,运用台式扫面电镜进行微观结构分析。【结果】粗多糖含量达到70%左右,同时不含蛋白质、核酸,提取效率较高;AP在0.1和0.2 mol·L-1 Na Cl洗脱液浓度下经DEAE-52纤维素层析、Sephadex G-200凝胶层析可得NAP0.1、NAP0.2;WFP在0.0、0.1和0.2 mol·L-1 Na Cl浓度洗脱下可得NWFP0、NWFP0.1、NWFP0.2,VFP可得NVFP0、NVFP0.1、NVFP0.2,以上所得成分含量均达到92%以上,分离纯化效果良好;3种多糖分离纯化前后皆为非晶态物质,呈无定型结构;多糖溶液浓缩过程温度应低于65℃,在加工中应注意控制温度在150℃以内;分离纯化前,3种多糖都存在三螺旋结构,分离纯化后,组分NWFP0、NVFP0、NVFP0.1出现了三螺旋结构,AP经分离纯化无三螺旋结构成分出现;苹果渣多糖在分离纯化后更加稳定,粒径差异更小,主要表现在经分离纯化后多糖的粒径分散系数更小;分离纯化导致片状结构变小,交联作用减弱,能更好发挥其生物活性。【结论】发酵苹果渣多糖含量达70%,经分离纯化后的含量与AP均可达92%;由XRD、TG、LPSA、刚果红、微观结构等方面得出其在溶解度、黏度、物理性质等方面的改变有利于更好发挥生物活性,同时获得更好的加工特性。     

红松松子壳多糖分离纯化及对小鼠抗氧化活性的影响

采用DEAE-52离子交换层析和Sephadex G-150凝胶柱层析对红松松子壳多糖(PPSP)进行分离纯化。以不同浓度PPSP的生理盐水溶液给予小鼠连续灌胃,21 d后检测小鼠肝脏和血清中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力及丙二醛(MDA)含量4个抗氧化指标。结果显示:PPSP高剂量组与对照组相比,能够极显著提高抗氧化酶活力(P0.001)并降低丙二醛含量。表明PPSP能够增强小鼠的抗氧化能力,具有延缓衰老的作用。     

大球盖菇多糖的分子质量分布及其单糖的组成

 【目的】从大球盖菇(Stropharia rugoso-annulata)中提取多糖,并对其分子质量及组成糖进行研究。【方法】采用水提法提取大球盖菇多糖,利用高效液相色谱法研究大球盖菇多糖分子质量分布及提取过程中多糖分子质量的变化,并采用红外光谱、核磁共振法对其组成糖进行研究。【结果】大球盖菇多糖水溶性多糖类物质的分子质量分布于22 kD附近;大球盖菇多糖同时存在α和β糖苷键,以吡喃糖为主,由5种单糖构成,其中有D-果糖、D-葡萄糖和D-木糖。【结论】以稀盐溶液为流动相的检测手段更能真实地反映大球盖菇多糖的分子质量分布情况,大球盖菇多糖是由5种单糖组成的杂多糖。     

东北玉簪多糖提取分离及组成研究

[目的]研究玉簪多糖的提取分离及其组成。[方法]利用水提醇沉法得粗多糖,并依次用30%、50%、80%乙醇分部沉淀得多糖CP1、CP2、CP3;经Superdex-100凝胶柱色谱分离得CP4、CP5。采用光谱法和色谱法对其总糖含量、单糖组成等进行了分析。[结果]东北玉簪5个多糖样品酸性糖含量为20.36%~52.76%、中性糖含量为34.07%~55.62%。[结论]东北玉簪多糖CP1~CP5均为中性糖和酸性糖的混合物。     

黑果枸杞多糖的纯化工艺研究

研究黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr)水溶性多糖的纯化工艺。结果表明,三氯乙酸法为最佳脱蛋白方法,过氧化氢法为最佳脱色方法,脱色条件为温度45℃,时间30min,pH 8～9,用量为每100mL粗糖液5mL H2O2。黑果枸杞经超声加热提取、醇沉、脱蛋白、脱色后得黑果枸杞粗多糖(crude Lycium rutheni-cum polysaccharides,CLRP)。CLRP经DEAE-Cellulose柱层析,用蒸馏水以及0.05、0.1、0.25、0.5mol/LNaHCO3洗脱液进行分段洗脱,分离得到LRP1、LRP2、LRP3、LRP4、LRP5五个多糖组分,多糖含量最高的LRP5经Sephadex G-100柱层析后得到LRGP5。经高效凝胶渗透色谱法分析,LRGP5为均一多糖,测得相对分子质量约为1.37×105。     

大白菜Ogura雄性不育系及保持系生理生化分析

[目的]研究大白菜Ogara雄性不育系及保持系生理生化特性.[方法]对2个大白菜Ogura雄性不育系(IOJC',`OQS')及保持系('JC','QS')的可溶性蛋白质、可溶性糖、游离脯氨酸含量以及过抗氧化酶(过氧化氢酶CAT、过氧化物酶POD,超氧化物歧化酶SOD)活性的变化进行了分析.[结果]2个不育系小蕾时可溶性糖,可溶性蛋白质含量低于保持系;中蕾时可溶性蛋白质、可溶性糖、游离脯氨酸含量以及 CAT,POD,SOD活性均低于保持系;大蕾时可溶性蛋白质,脯氨酸含量以及CAT,SOD活性均低于保持系.[结论]可溶性蛋白质、可溶性糖、游离脯氨酸含量和酶活性的变化与大白菜Ogura细胞质雄性不育有关.     

不同类型灵武长枣果实多糖的单糖成分差异

为分析大果型、枣刺退化型、早熟型和普通型4种不同类型灵武长枣完熟期果实多糖中单糖成分的差异,经水提醇沉法提取、采用DEAE-cellulose52和HW-55S分离纯化,利用GC-MS等分别对果实进行多糖的单糖成分分析研究。结果表明:1)不同类型果实粗多糖得率分别为:普通型1.795%,大果型1.504%,早熟型0.999%,枣刺退化型0.956%,粗多糖含量从高到低依次为:普通型早熟型大果型枣刺退化型。2)不同类型果实粗多糖经DEAE-52柱层析,均得到1个中性级分(Ju-0)和3个酸性级分(Ju-1、Ju-2、Ju-3),其中Ju-2含量均为最高,表明果实多糖的主要形式为酸性多糖,但4个多糖级分的质量和得率差异显著。3)不同类型果实精制多糖含量因级分不同而差异较大,Ju-0和Ju-3级分均为普通型中最高,Ju-1级分在大果型中最高,Ju-2级分在早熟型中最高。4)不同类型果实精制多糖均以阿拉伯糖、半乳糖和鼠李糖含量较高,葡萄糖含量次之,甘露糖和木糖含量较低,均不含有果糖;NIST谱库显示,果实精制多糖中还含有核糖、岩藻糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。因此,不同类型灵武长枣果实多糖中单糖成分相似,但其成分和含量因级分不同而差异较大。