产β-甘露聚糖酶环状芽孢杆菌发酵条件研究

本文以环状芽孢杆菌WXY-100为研究对象,研究了该菌在50L全自动发酵罐中更换C源、诱导剂量、补料、下罐时间等条件对发酵过程的影响。结果表明,在发酵罐放大工艺中,发酵培养基的C源改为甘油较优;在对数生长期末加入诱导剂的剂量为0.5%时,酶活相对最高;并在诱导后4~5h为最佳下罐时间点;而补料的效果不明显。     

芽孢杆菌所产β-甘露聚糖酶性质研究

本文通过硫酸铵沉淀、透析带以及聚乙二醇6000对粗酶液进行浓缩分离．获得较为纯净的β-甘露聚糖酶,然后通过常规方法对其进行性质研究。结果发现,该酶在pH4-8和60℃以下稳定．作用最适条件是pH5．0和60℃：另外对金属离子以及EDTA对该酶活力的影响也进行了研究．发现Cu^2＋和Co^2＋对酶有比较显著的激活作用．Ba^2＋只有微弱的激活作用,Hg^2＋对酶有强烈的抑制作用,Al^3＋、Mn^2＋、Fe^2＋、Zn^2＋、Ag^＋、Fe^3＋对酶有一定的抑制作用,EDTA、Ca^2＋、Mg^2＋、K^＋、Na^＋对酶活性影响不大。     

枯草芽孢杆菌Pab02产纤维素酶活性的研究

试验主要对目前饲料领域应用广泛的枯草芽孢杆菌进行产纤维素酶能力筛选及发酵优化条件的研究，为枯草芽孢杆菌Pab02开发成微生态制剂及生产纤维素酶提供理论依据。通过羧甲基纤维素钠培养基筛选分离到具有产纤维素酶能力的枯草芽孢杆菌Pab02。通过分析初始pH、发酵温度和发酵时间对枯草芽孢杆菌Pab02产纤维素酶活性的影响，得出最佳初始pH为8．0、发酵温度为37℃、发酵时间为48h。在该条件下发酵液酶活达到358．751u／mL酶液，比优化前提高了2．1倍。     

芽孢杆菌木聚糖酶固体发酵工艺研究

利用固体发酵对实验室筛选的芽孢杆菌021产木聚糖酶的培养基和发酵工艺进行研究。结果表明,以麸皮和黄豆饼粉(9:1)为主要基质,4%麦芽糖、4%硝酸铵有助于产酶。最佳发酵条件为:含水量65%、起始pH值8.0、发酵温度为37℃、接种量8%、250ml三角瓶装料20g、培养36h。在最佳发酵条件下,木聚糖酶酶活可达3.25U/g。     

益生菌发酵工艺中蜡样芽孢杆菌的分离鉴定

在益生菌生产发酵工艺中常出现耐热杂菌污染的现象,导致产品质量下降,甚至生产失败,从而造成经济损失。本试验为确定发酵工艺中被污染的耐热性杂菌,采集污染发酵液为检样,分离及纯化一株菌株(命名为YBNR),通过形态学、生化试验及16sRNA测序等方法进行菌株鉴定。结果显示:污染发酵工艺的耐热菌为蜡样芽孢杆菌。     

一株枯草芽孢杆菌产抗菌肽培养基筛选及发酵工艺优化的研究

试验旨在对一株产抗菌肽枯草芽孢杆菌BL0006的发酵培养基和发酵条件进行优化,以提高发酵液中抗菌肽的效价。首先通过单因子试验筛选出培养基的最适碳源、氮源与无机盐分别为葡萄糖、蛋白胨和K_2HPO_4;在此基础上采用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,再利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法得到培养基最佳配方:通过摇瓶单因素试验对发酵条件、温度、接种量、转速进行了优化,优化后的发酵培养基为葡萄糖47.7 g/L、蛋白胨29.0 g/L、K_2HPO_4 3.3 g/L,摇瓶发酵工艺为接种量30 mL/L、初始pH 7.5、摇床转速220 r/min、培养温度37℃。优化后抗菌肽的效价提高到了4.25×10~4 U/mL,是优化前的3.51倍。综合试验结果,本研究筛选的培养基和优化后的发酵工艺可达到高产、降低成本、缩短发酵时间的效果。     

产β-甘露聚糖酶菌株筛选及制备甘露寡糖产物分析

从河南省济源市猪场仔猪粪便中筛选得到1株产β-甘露聚糖酶的菌株,通过外观形态学分析、生理生化结果分析、16S rDNA序列分析及构建系统发育树结果,鉴定该菌株为沙福芽孢杆菌（Bacillus safensis）,命名为WBT0011。通过β-甘露聚糖酶和魔芋胶、瓜尔豆胶制备甘露寡糖,发现魔芋胶和瓜尔豆胶降解为多种甘露寡糖产物,说明二者水解较为完全,本研究旨在为β-甘露聚糖酶的应用及进一步工业化生产甘露寡糖的工艺优化提供帮助。[关键词] β-甘露聚糖酶|筛选|沙福芽孢杆菌|甘露寡糖     

枯草芽孢杆菌YT168-6产抗菌肽sublancin的发酵工艺优化及培养基筛选的研究

研究旨在探索枯草芽孢杆菌YT168-6产抗菌肽sublancin的最适发酵条件和最适培养基组成,以期提高发酵液中sublancin含量。试验先通过单因素试验筛选出最适发酵条件,确定发酵培养基需要的无机盐、碳源、氮源,再通过正交试验、最陡爬坡试验、Box-Behnken设计的响应面分析方法确定最适发酵培养基组成。结果表明：枯草芽孢杆菌YT168-6产抗菌肽sublancin的最适发酵条件为菌种接种量1.0%、发酵温度37℃、发酵液初始pH 7.0;最适发酵培养基为K₂HPO₄ 5 g/L、KH₂PO₄ 5 g/L、MgSO₄ 10 g/L、可溶性淀粉30.2 g/L、蛋白胨23.6 g/L、玉米浆18.2 g/L;优化后sublancin产量由756 μg/mL提到1 581 μg/mL,是优化前的2.09倍。综上所述,本研究所筛选的最适发酵条件和最适培养基可为枯草芽孢杆菌YT168-6菌株工业化生产sublancin提供技术参考。     

发酵床中耐高温地衣芽孢的分离鉴定及产酶分析

 从健康猪生长的发酵床垫料中筛选到1株耐高温的高效降解菌Y34,把其接种到猪粪水中反应25 d后,对COD与NH3 N降解率分别为84.7%,83.5%。生长特性表明其最适生长温度为50 ℃。通过形态观察、生理生化鉴定及16S rDNA序列比对,鉴定菌株Y34为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）,其与Bacillus licheniformis相似性为99.0%。对此菌发酵过程中产酶情况作了研究,结果表明,在50℃培养条件下,菌株Y34能够分泌过氧化氢酶、蛋白酶、脲酶,具有用于研制发酵床微生物制剂的潜力。     

黄芪提取液发酵枯草芽孢杆菌工艺优化研究

为研究黄芪提取液发酵枯草芽孢杆菌的工艺流程,将活化后的枯草芽孢杆菌菌液以1%的比例分别接入含黄芪提取液浓度为100%、90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%的液体培养基中,置于37℃温箱中进行培养,分别取24h、48h、72h的培养物检测菌液数量、芽孢形成率和OD值。对初筛的培养基配方选取接种量、pH、温度和摇床转速4个条件进行正交试验观察影响发酵的主要因素并进行发酵罐大量培养。结果表明:含60%黄芪提取液芽孢数量最高可达1.70×109,芽孢形成率99%,OD值为2.961。正交试验结果优化条件为接种量10%,pH9.0,温度37℃,转速250r/min,发酵罐培养结果48h即可发酵结束,芽孢数量比摇瓶培养高5倍左右。     

地衣芽孢杆菌产芽孢培养基和培养条件的优化

本研究以地衣芽孢杆菌CICC 20514为对象,芽孢数和芽孢率为目标参数,采用单因素、正交试验方法对培养基配方进行筛选,并在此配方基础上对培养条件进一步优化。结果表明：最终产芽孢发酵培养基的最佳组合为20 g/L果糖、20 g/L豆粕、5 g/L K₂HPO₄、7 g/L NaCl、0.8 g/L CaCO₃和0.8 g/L MgSO₄;产芽孢最佳培养条件为37℃,220 r/min,接种量5%,装样量20%,初始pH 6.5～7.5,发酵培养时间48 h。优化后的地衣芽孢杆菌CICC 20514培养基芽孢数及芽孢率均具有良好的稳定性,发酵液芽孢数达5.8×10⁹CFU/mL,比优化前提高了58倍。     

枯草芽孢杆菌固态发酵仔猪配合饲料的工艺研究

为研究枯草芽孢杆菌固态发酵仔猪配合饲料(551H与552H)的工艺(简称SF-551H和SF-552H),以蛋白含量及其增加率为主要指标,分别对各工艺参数进行多水平7×2(发酵时间t)、4×2(固态培养基组成R)、5×2(发酵温度T)及5×2(接种量I)试验设计及响应面优化试验。结果表明,工艺参数对产品的蛋白含量及其增加率影响显著(P<0.05);确定参数的水平:SF-551H,12≤t≤32 h、1≤R≤4、25≤T≤30℃、3%≤I≤10%;SF-552H,12≤t≤32 h、1≤R≤4、25≤T≤35℃、3%≤I≤10%。二次响应面回归模型预测最佳工艺参数为:SF-551H,t=32 h,R=1,T=30℃,I=4.75%;SF-552H,t=32 h,R=4,T=35℃,I=4.75%,且验证可行(P>0.05)。因此,该研究结果将为工业化枯草芽孢杆菌固态发酵仔猪配合饲料的工艺提供试验与理论支撑。     

1株凝结芽孢杆菌的生物学特性和产芽孢发酵条件研究

试验探索1株凝结芽孢杆菌N1的耐温性能、耐模拟胃液性能、耐胆盐性能、抗生素敏感性、溶血活性等特性,通过单因素试验和正交试验,探索该菌株最优的产芽孢发酵时间、初始pH值、接种量和温度。结果显示,该菌株具有较好的耐温性能、耐模拟胃液性能、耐胆盐性能,对庆大霉素、氯霉素、环丙沙星、红霉素、丁胺卡那、头孢唑林、氨苄西林和青霉素敏感,对复方新诺明、诺氟沙星具有耐受性,无溶血活性。在发酵24 h、初始pH值6.5、接种量5%、温度40℃的条件下,芽孢数为5.13×10^(8)CFU/mL。试验为凝结芽孢杆菌N1的生产、应用提供参考依据。     

一株枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化

本文从生产实际出发，针对生产用菌种，通过对培养基碳源、氮源等的选择及配比的正交实验，得出最适培养基。     

解淀粉芽孢杆菌液体发酵动态变化规律的研究

研究采用自行分离纯化的M-01解淀粉芽孢杆菌菌株,利用自行研制的液体发酵器进行培养,在温度(35±0.2)℃自动控制条件下,研究其发酵液p H、活菌数、芽孢率、还原糖、氨基氮及微生物总蛋白的动态变化规律,并同时对发酵液温敏脱水后的干燥物进行相关指标的质控检测。结果表明,菌株液体培养24 h,活菌数(146.68±4.05)亿CFU/m L,芽孢率(91.76±1.50)%;干燥物芽孢数(141.05±1.70)亿CFU/g、含水率(5.70±0.04)%及杂菌率(0.585±0.004)%。     

固态发酵生产芽孢杆菌活菌计数方法的改进

固体发酵生产芽孢杆菌常出现计数困难、波动性大等现象。作者从事微生物检验工作多年,针对检验过程中取样、样品处理等环节长期进行比较跟踪,提出了改进方法,减少活菌计数操作误差,方法便捷简单。     

纳豆芽孢杆菌的液体发酵条件研究

试验采用PB液体培养基测定纳豆芽孢杆菌生长曲线,确定了最佳接种时间为14h。对碳源和氮源分别采用单因子试验,对无机盐和培养条件分别采用L9(34)正交试验,筛出最佳液体发酵培养基配方为:葡萄糖2g/L、豆饼粉20g/L、氯化猛0.1g/L、磷酸氢二钾2g/L、磷酸二氢钾1g/L、硫酸镁1g/L;发酵温度33℃,初始pH值8.0,接种量为7%,250mL三角瓶的装量为40mL,芽孢数量为19.5亿/mL。     

饲用产甘露聚糖酶芽孢杆菌的筛选、鉴定及其对肉鹅生长性能影响的研究

为了筛选一株产甘露聚糖酶的芽孢杆菌,并考察其对肉鹅生长性能的影响,本试验采用刚果红平板变色圈法进行产甘露聚糖酶芽孢杆菌的初筛,通过液体发酵测定酶活力的方法展开复筛,并进行动物安全性和胃肠道耐受性试验。通过形态特征观察、生理生化试验和16S rDNA全序列分析与发育树构建将其鉴定到种。制备该菌菌剂,并将其按0.10%、0.25%、0.50%、0.75%和1.00%添加于肉鹅日粮中,考察其对肉鹅日增重和料重比的影响。结果表明：筛选到产甘露聚糖酶的菌株枯草芽孢杆菌（Bacillus subtils） Y-3-2,其产酶活力为45.939 U/mL,耐受pH 2.0,在0.1%的胆酸盐溶液和人工肠液中可正常生长。将其制成菌剂,在肉鹅日粮中按0.25%添加,可使试验组肉鹅日增重较对照组提高8.78%（P<0.01）,料重比降低6.69%（P<0.01）。以上结果说明在肉鹅日粮中添加本试验筛选出的产甘露聚糖酶芽孢杆菌可提高肉鹅的饲料利用率,对肉鹅的生长有显著促进作用。