南方红豆衫细胞体系建立的优化（摘要）

[目的]优化南方红豆杉愈伤组织诱导及训化条件。[方法]以南方红豆杉幼芽、幼茎以及幼叶为外植体,比较不同外植体诱导愈伤组织的效率,并对愈伤组织的增殖条件及悬浮细胞培养条件进行了研究。[结果]以幼芽作为外植体的诱导效果最佳;南方红豆杉外植体消毒的最佳方法为链霉素浸泡2h＋洗洁精浸泡3h＋75%酒精消毒30s＋10%次氯酸钠浸泡25min＋1‰氯化汞10min;愈伤继代的最佳配方为B5＋4.0mg/LNAA＋0.5mg/L2.4-D＋0.2mg/LGA＋0.5mg/L6-BA＋2g/L活性碳。[结论]该研究建立了南方红豆杉的高效再生体系。     

南方红豆杉愈伤组织诱导和继代培养体系的建立

以南方红豆杉为材料,建立了其愈伤组织诱导与保持的技术体系,主要为:(1)南方红豆杉侧芽是诱导愈伤组织的最佳外植体;(2)南方红豆杉愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+2.0 mg.L-12,4-D+1.0 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-1IAA;(3)南方红豆杉愈伤组织增殖的培养基为:B5+4.0 mg.L-1NAA+0.5 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-1GA+500 mg.L-1AC+2000 mg.L-1LH.并在培养基中同时添加AC、LH和GA33种抗褐物质,取得较好的抗褐化效果.     

南方红豆杉组织培养体系优化

为建立南方红豆杉(Taxus chinensis)愈伤组织的高效诱导体系,提高红豆杉愈伤组织的诱导率和成活率,分别对南方红豆杉愈伤组织诱导的培养基、外植体接种方法、植物生长调节剂、pH进行优化试验,结果得出:最适宜的培养基为B5改良型、最佳接种方法为无叶茎段正插入培养基、添加2.0mg/L2,4-D或1.0mg/LNAA、pH控制在6左右,可以分别有效地提高红豆杉愈伤组织的诱导率和成活率。     

喜树细胞悬浮培养体系的建立

以喜树的幼嫩叶片为材料,探讨了MS、SH、B5基本培养基和不同激素(2,4-D、NAA、6-BA)配比对愈伤组织诱导及继代培养的影响,并筛选喜树细胞悬浮培养体系的最优培养基配方.结果表明,喜树幼嫩叶片外植体诱导愈伤培养以SH+2.0mg/LNAA+0.5mg/L6-BA为最优,愈伤组织诱导率为92%.继代培养以MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA为最适,在此条件下诱导的愈伤组织质地疏松,适于进行悬浮培养.     

曼地亚红豆杉细胞悬浮培养体系的建立

【目的】建立曼地亚红豆杉的愈伤组织细胞悬浮培养体系,为紫杉醇生产提供参考。【方法】以曼地亚红豆杉幼茎诱导的愈伤组织为材料,以B5培养基为基本培养基,利用单因素试验或正交试验,研究愈伤组织接种量、蔗糖质量浓度、激素类型及配比和防褐化试剂对曼地亚红豆杉细胞生长的影响。【结果】曼地亚红豆杉细胞悬浮培养的最佳培养基和培养条件为:B5+2,4-D 0.6mg/L+NAA 0.8mg/L+KT 1.0mg/L+柠檬酸220mg/L+PVP350mg/L+水解乳蛋白450mg/L+蔗糖30g/L(pH=5.8),接种量0.1g/mL,在培养箱中110r/min、25℃暗培养。【结论】曼地亚红豆杉愈伤组织细胞在所建立的培养体系中经过多次继代后,生长状况良好,表明该细胞悬浮体系比较稳定,可以用于大规模培养红豆杉细胞。     

南方红豆杉愈伤组织诱导的研究

以南方红豆杉的嫩茎和针叶为外植体诱导愈伤组织,比较了不同种类基本培养基及不同激素水平诱导愈伤组织的能力。结果表明,嫩茎作为外植体较针叶有利于南方红豆杉愈伤组织诱导;B5培养基较MS培养基有利于愈伤组织诱导。嫩茎诱导愈伤组织的最适培养基为B5+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。     

花椒愈伤组织诱导及细胞悬浮培养研究

以花椒试管苗叶片为试验材料,研究了不同激素浓度对花椒愈伤组织继代培养的影响,并以多次继代得到的疏松、活性高的愈伤组织建立花椒细胞悬浮系。结果表明:花椒愈伤组织最适继代培养基为MS+2,4-D 1.0mg·L~(-1)+6-BA 0.5mg·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂6g·L~(-1);花椒细胞悬浮培养的最佳培养基和培养条件为:MS+2,4-D 1.0mg·L~(-1)+6-BA 1.0mg·L~(-1)+葡萄糖30g·L~(-1),接种量0.05g·mL~(-1),摇床转速110r·min~(-1),25℃暗培养,该条件下悬浮细胞生长良好,最大生长量为4.52g;花椒悬浮细胞生长呈"S"型曲线,最适继代周期为16d。     

西洋参细胞悬浮培养体系的建立

目的:建立西洋参细胞悬浮培养体系。方法:通过不同激素和物理影响因素筛选出西洋参细胞培养的最佳条 件。结果:将西洋参愈伤组织接种于附加0.5mg·L-1 2,4-D + 0.1 mg·L-1 KT + 0.2 mg·L-1 NAA 的MS 培养基上最适合 西洋参愈伤组织的生长;用西洋参愈伤组织制作西洋参细胞,发现西洋参悬浮细胞生长曲线类似“S”型;通过改变西洋 参细胞悬浮培养的外界条件发现,西洋参悬浮细胞生长的最佳接种量为1.5 g/30mL,摇床转速和光照条件对西洋参细 胞生长影响没有显著差异。结论:建立了西洋参细胞悬浮培养体系,该技术为西洋参细胞的扩大培养和有效成分的提 取提供了物质基础。     

南方红豆杉愈伤组织培养研究

对南方红豆杉叶、茎的愈伤组织诱导条件及最适培养基组成成分进行了探讨.结果表明:2,4-D浓度2.0 mg/L比0.5 mg/L或1.0 mg/L处理的叶、茎愈伤组织诱导率高;嫩茎愈伤组织的诱导率因不同类型的激素组合以及激素不同质量浓度而不同,培养基MS 2,4-D 2.0mg/L,MS 2,4-D 2.0 mg/L 6-BA 1.0 mg/L,MS 6-BA 1.0 mg/L IAA 1.0 mg/L,1/2 MS NAA 2.0 mg/L IBA 1.0 mg/L,茎诱导率分别为100%,90%,75%,75%,相对其比较对象而言,这些培养基的诱导率最高.     

太行菊细胞悬浮培养体系的建立

以太行菊(Opisthopappus taihangensis)作为试材,进行了细胞悬浮培养的初步探讨.结果表明,试管苗茎段诱导愈伤组织最适培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+2,4-D 1.0 mg·L-1,诱导出的愈伤组织生长迅速,且排列紧密质地松软适合进行细胞悬浮培养....     

组织培养中不同抗生素对南方红豆杉内生菌抑制研究

抗生素能有效抑制组织材料中内生菌,但红豆杉在组织培养过程中易褐化,从而影响愈伤组织诱导。试验通过分析不同类型、不同浓度抗生素对南方红豆杉组织培养的内生菌的抑制作用,找出南方红豆杉内生菌抑制的最适抗生素及其最适浓度。试验结果表明:500 mg/L氟康唑抑制效果最好,且组织培养过程中红豆杉组织茎段不发生褐化。     

南方红豆杉群落物种的多样性

以植物群落调查样地资料为基础,对福建龙栖山和梅花山国家级自然保护区南方红豆杉群落物种多样性特征进行了研究,测定了群落植物生长型构成以及各层次植物物种的重要值,采用多种测度方法计算了群落各层次植物物种的丰富度指数、均匀度指数和多样性指数。结果表明:南方红豆杉群落总体上物种多样性高,种类组成复杂;龙栖山国家级自然保护区南方红豆杉—毛竹群落植物生长型在物种丰富度、多样性指数及均匀度等多样性指数上表现出灌木层>草本层>乔木层的规律;梅花山国家级自然保护区南方红豆杉群落物种多样性指数则表现出乔木层>灌木层>草本层的规律。     

珍稀植物南方红豆杉群落物种-多度关系

采用Weibull分布模型、对数正态分布模型、对数级数模型、分割线段模型、几何级数分布模型来拟合珍稀植物南方红豆杉群落物种-多度分布格局,并用卡方临界值检验模型的拟合效果。结果表明:Weibull分布、对数正态分布、对数级数分布可用于描述南方红豆杉群落乔木层种-多度分布格局;而Weibull分布和对数正态分布适合于灌木层种-多度关系的描述。     

南方红豆杉种子生物学特性研究

[目的]研究南方红豆杉种子的形态特征和萌发特性。[方法]以当年采收的南方红豆杉种子为试材,通过测定其形态指标、生活力及发芽力分析了其形态特征和萌发特性。[结果]种子呈坚果状,紫褐色,先端有突起的短钝尖头,种脐呈椭圆形。种子长为3．78～5．84mm,直径为3．84～5.86min,平均含水量为8．5％,千粒重为65．048g。种子由种皮、种胚和胚乳构成,种皮重量占完整种子重量的51．83％。新鲜南方红豆杉种子的种胚长约1．3～1．9mm。有生活力种子的比例为77％,无生活力和空粒种子的比例分别为21％和2％。层积8个月后,200mg／L赤霉素溶液浸泡处理的种子发芽率最高,达71．8％;流水处理的种子发芽率次之,为61．5％;自然层积处理的种子发芽率最低。f结论]南方红豆彩种子具有一定的侏眠特性．赤垂素浸泡时箕萌发有明显的促进作用．     

不同激素处理对南方红豆杉扦插苗的影响

以清水处理为对照,使用不同激素(ABT1号生根粉、NAA、IBA)处理南方红豆杉插穗,从而研究不同激素处理对南方红豆杉扦插苗生根率、生物量及紫杉醇含量的影响。结果表明:ABT处理下,南方红豆杉扦插苗的生根率、生根数、新生枝叶数以及紫杉醇的含量均为最高。因此,用ABT处理南方红豆杉插穗优于其他激素处理。     

濒危植物南方红豆杉叶片形态结构及气孔参数

用光学显微镜观察了南方红豆杉叶片形态结构。结果表明:南方红豆杉叶片上、下表皮细胞近长方形或正方形,均覆盖一层角质层,角质化程度不同,角质层平均厚度分别约为14.78μm和12.53μm。在同一叶片的不同区域,叶表皮细胞形状及大小变化较大,叶中脉处的表皮细胞最大,为152.20μm×37.59μm,长/宽约为4.05;气孔区的表皮细胞形状不规则,细胞大小起伏较大,最大细胞为154.8μm×29.6μm,最小为43.1μm×47.1μm,平均大小为83.89μm×45.31μm,长/宽约为1.85;非气孔分布区的表皮细胞平均大小为99.13μm×40.17μm,长/宽约为2.47。气孔仅分布于下表皮中脉两侧,呈带状,每条气孔带含8~12列气孔,气孔密度为98~159个/mm2。雌雄植株不同高度叶片的气孔密度均从基部到株顶呈逐渐增加的趋势,但雌雄植株同一高度叶片的气孔密度变化差异不大。在同一高度的叶片中,阳面叶片的气孔密度普遍高于阴面叶片;在同一叶片中气孔密度最高的区域在叶片的中部,向两端逐渐减少,与叶片着生植株的雌雄、方位和高度无关。     

都匀市南方红豆杉资源调查

[目的]了解都匀市南方红豆杉资源。[方法]调查都匀市南方红豆杉资源的数量、分布特征、生长状况及生境因子。[结果]都匀市南方红豆杉古树共有56株,平均树高16.60 m,其中树高10.50~19.70 m的有40株,占71.4%;东西平均冠幅9.76 m,南北平均冠幅9.80 m;平均枝下高3.30 m。胸径在50 cm以内的最多,有29株,占51.8%;南方红豆杉的东西冠幅和南北冠幅的均值相近,29株在5.00~10.00 m,占51.8%,大于20.00 m的极少;海拔分布在725.00~1 232.00 m。[结论]调查结果为南方红豆杉资源的保护提供了理论依据。