紫萁孢子叶组织培养技术研究

【目的】建立紫萁(Osmunda japonica Thunb.)孢子叶组织培养快繁体系,筛选其适宜的组织培养条件。【方法】以紫萁孢子叶穗为外植体,研究乙醇和HgCl_2处理不同时间对外植体的消毒效果;在加入0.3 mg/L NAA的1/4MS培养基中,再分别加入0.5 mg/L的2,4-D、IBA和KT,比较各处理对原叶体的诱导效果;在1/2MS基础培养基上,采用L_9(3~4)正交试验设计,探讨不同质量浓度KT、GA_3、NAA和6-BA组合对原叶体增殖的影响;同时,研究光合酵素稀释300,500和700倍对紫萁孢子体诱导的影响,以及1/2MS培养基中加入0.1,0.5,1.0 mg/L IBA或NAA对紫萁组培苗生根的影响。【结果】使用1 g/L HgCl_2对紫萁孢子叶穗消毒8 min的效果较好,萌发率为61.11%;紫萁原叶体最适宜的诱导培养基为1/4MS+KT 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,诱导率为88.55%;紫萁原叶体最适宜的增殖培养基为1/2MS+KT 5 mg/L+GA_3 3 mg/L+NAA 1 mg/L,增殖系数为9.6;稀释500倍的光合酵素对紫萁孢子体苗的转化及生长有促进作用,孢子体转化率为57.23%,孢子体高度为2.33 cm;1/2MS培养基中加入0.5 mg/L IBA,紫萁组培苗生根率与长势俱佳,生根率可达93.33%。【结论】初步建立了紫萁孢子适宜的组织培养体系,在相应条件下组培苗长势良好。     

鱼尾星蕨组织培养与快速繁殖的研究

利用鱼尾星蕨的孢子为外植体,研究了不同培养基、不同激素以及浓度对其孢子萌发、原叶体增殖、孢子体诱导和增殖的影响。结果表明,鱼尾星蕨的成熟孢子在1/2MS培养基上萌发速度最快,萌发率最高;鱼尾星蕨的原叶体在1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上增殖速度较快,但增殖过程中不能形成孢子体;在1/2MS+AgNO31.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L培养基上成功诱导出孢子体;孢子体可再进行分株扩增,从而获得大量的孢子无菌苗。     

鸟巢蕨组培快繁技术研究

以鸟巢蕨(Neottopteris nidus)孢子为原材料进行组培快繁,考察了孢子处理方式、基本培养基、激素及孢子体诱导方式等条件对培养效果的影响.结果表明,把经过消毒灭菌的孢子囊从孢子叶上切下,破碎取出孢子后接种到1/2MS培养基上,孢子萌发较快,萌发率高.萌发后的原叶体接种到不添加激素的MS培养基上能得到较大的增殖系数.原叶体在试管内诱导孢子体难度较大,可采用1g/L的KH2PO4溶液作诱导剂在试管外诱导,有利于原叶体向孢子体的转化.     

芒萁组织培养和快繁技术研究

以孢子为外植体对芒萁进行组织培养。在基本培养基中添加不同生长调节物质对孢子萌发和孢子体进行诱导。结果表明,孢子体萌发阶段最适培养基组合是1/2MS培养基+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,pH值5.8~6.0;原叶体增殖阶段,最佳培养基组合为1/2MS+NAA 1.0 mg/L+6·BA 1.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7g/L;孢子体的诱导最适培养基组合是1/2MS培养基+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L。     

不同激素配比对铁线蕨组织培养的影响

以孢子叶为外植体进行组织培养,研究不同激素配比对铁线蕨原叶体增殖、孢子体分化的影响,以期获得提高繁殖效率的方法。结果表明:铁线蕨原叶体增殖最佳培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L,增殖系数为4.28±0.41;孢子体分化最佳培养基为1/2MS+KT 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L,分化率达91.11%±2.22%。     

铁线蕨的组织培养与快速繁殖

以铁线蕨孢子为外植体进行组织培养,研究不同消毒处理对外植体的影响,孢子体的初代培养及原叶体的增殖.结果表明,外植体最佳消毒方式为:用刀片把叶片背面的孢子刮下,用无菌滤纸包裹,先用70％乙醇溶液浸泡30s,再用0.1％ HgCl2消毒8min;铁线蕨孢子萌发的最适宜培养基为1/2 MS+活性炭2 g/L,孢子萌发率最高可达33.3％;原叶体增殖的适宜培养基是1/2 MS+1 mg/L6-BA+O.1 mg/L NAA+活件炭1g/L.增碚倍数可达3.8倍.     

紫萁孢子的无菌培养

以紫萁孢子为外植体,研究不同培养基对紫萁离体培养各阶段的影响.结果表明:以孢子囊为外植体接种比直接接种孢子效果更理想;孢子萌发最佳培养基是1/2MS+0.3%活性炭;对原叶体增殖效果最好的是1/2 MS培养基;对孢子体诱导最佳方案是以灭菌河沙为基质的不完全培养基;激素处理对孢子体诱导有促进作用.     

刺齿贯众的组织培养*

 对刺齿贯众孢子萌发、原叶体增殖、孢子体的诱导进行了试验、观察和分析，研究了培养基和植物激素对其生长的影响。结果显示：成熟孢子在1/2 MS蔗糖浓度为1%培养基上59d萌发90%以上，且有利于原叶体的形成。原叶体在1/2 MS+Kt 0.5 mg/L培养基上60d增殖速率可达1∶11。试管苗在1/2 MS+IBA 2.0mg/L的培养基上长势较好，根系粗壮且发达。该物种组培和快繁的成功，为它离体保存和持续利用提供了技术支撑。     

鹿角蕨孢子萌发与快速繁殖技术研究

[目的]建立鹿角蕨孢子萌发与快速繁殖技术体系,为鹿角蕨规模化育苗提供技术支撑.[方法]以鹿角蕨孢子为外植体,采用3种不同消毒方法进行孢子灭菌与萌发;利用正交设计法,探讨基本培养基(MS、改良1号和改良2号)及植物生长调节剂(6-BA、KT、NAA和IBA)等对绿色球状体(GGB)增殖、丛生芽增殖及生根培养等关键环节的影响,筛选出适宜的孢子消毒方法及GGB增殖、丛生芽增殖和生根培养基配方.[结果]适宜孢子消毒的方法为超声波清洗器振荡清洗40 min,污染率低,仅为6.7%,孢子萌发率高达100.0%;各试验因素对GGB增殖影响的主次关系为基本培养基>6-BA>CH>NAA,以改良1号为基本培养基较好,6-BA适宜浓度为0.5 mg/L,NAA适宜浓度为0.1 mg/L,CH适宜浓度为0.2 g/L,42 d平均增殖系数达5.5;各试验因素对丛生芽增殖影响的主次关系为IBA>6-BA>NAA>KT,IBA适宜浓度为0.5 mg/L,6-BA适宜浓度为0.3 mg/L,KT适宜浓度为0.1 mg/L,NAA适宜浓度为0.3 mg/L,60 d平均增殖系数达5.3;添加NAA 0.3 mg/L为最适浓度,生根率为100.0%;试管苗移栽60 d成活率达98.5%.[结论]超声波清洗器振荡清洗40 min能有效降低鹿角蕨孢子污染率,提高孢子萌发率.鹿角蕨GGB增殖培养基以改良1号+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+CH 0.2 g/L较适宜,丛生芽增殖培养基以改良2号+6-BA 0.3 mg/L+KT 0.1 mg/L+NAA 0.3 mg/L+IBA 0.5 mg/L较适宜,生根培养基以改良1号+NAA 0.3 mg/L较适宜.     

野雉尾金粉蕨微繁殖技术

以野雉尾金粉蕨的孢子为外植体,建立快繁体系。结果表明,野雉尾金粉蕨孢子HgCl_2最佳处理时间为3 min,孢子最适萌发培养基为1/2MS+2%蔗糖。增殖期间,降低糖浓度更有利于配子体的快速增殖,最适增殖培养基为1/2MS+1%蔗糖。1/2MS+2%蔗糖为最适孢子体诱导培养基,待幼孢子体长至3~5 cm时,即可出瓶炼苗,炼苗最优基质为草炭+蛭石(1∶1)。     

铁线蕨组培快繁技术研究

以孢子作为外植体进行铁线蕨组培技术研究,结果表明：把经过消毒灭菌的孢子囊从孢子叶上切下,进行破碎取出孢子后接种到1／2MS培养基上,孢子萌发较快,萌发后的叶原体接种到MS培养基上能得到较大的扩繁速率,叶原体诱导孢子体在试管内诱导难度较大,可采用0．1％KH2P04诱导剂在试管外诱导,更适合叶原体向孢予体的转化。     

凤尾蕨科植物蜈蚣草的组织培养(英文)

[目的]对凤尾蕨科植物蜈蚣草的组织培养方法进行研究。[方法]以野外采集的叶芽为外植体,以1/2MS+3%蔗糖+0.7%琼脂为基本培养基,通过激素配比试验,筛选蜈蚣草愈伤组织诱导和继代培养的培养基配方。[结果]从外植体诱导出愈伤组织最佳培养基配方为1/2MS+3%蔗糖+0.7%琼脂+0.5g/LPVP+0.1mg/LKT+0.5mg/L2,4-D;从愈伤组织诱导出GGB和从GGB诱导出幼苗最佳培养基配方为1/2MS+3%蔗糖+0.7%琼脂+0.5g/LPVP+1.0mg/LKT+0.01mg/L2,4-D;另外,使用1/2MS+3%蔗糖+0.7%琼脂+0.5g/LPVP+0.5mg/L2,4-D做继代培养可以使愈伤组织持续增殖。[结论]研究直接使用野外材料组织培养,简化了试验步骤,是一种方便快速的蜈蚣草组培方法。     

生石花种子萌发及幼苗生长最优条件的筛选

[目的]优化生石花种子萌及幼苗生长的条件,以提高其种子萌发率。[方法]采用MS、1/2MS、3/4MS等培养基为生石花生长基质,比较不同培养基中种子萌发率和幼苗生长情况,在此基础上进行光照时间、激素配比和浸泡时间的筛选。[结果]1/2MS培养基最适合生石花种子萌发及幼苗生长。16 h为最优光照时间;不同因素影响由大到小依次为浸泡时间、GA浓度、IAA浓度、NAA浓度及6-BA浓度。其中,GA浓度与浸泡时间对种子萌发有显著影响,且0.1 mg/m L的GA浓度以及4 h的浸泡时间为最优组合。[结论]该研究为生石花组织培养快繁技术研究奠定基础。     

铁皮石斛种子液体悬浮培养的研究

[目的]研究铁皮石斛种子的液体悬浮培养方法。[方法]以MS为基础培养基,设计了不同浓度的基础培养基、激素、天然附加物、pH、蔗糖等5个影响因子的15种培养液配方,筛选出铁皮石斛最适的液体培养条件。[结果]适中的无机盐浓度,NAA、较低的pH值、较高的蔗糖浓度以及适量的土豆汁都有利于铁皮石斛种子的萌发;试验优选出的相对适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/LNAA+80 g/L土豆汁+45 g/L蔗糖。[结论]筛选出了相对较合适的培养基配方,为铁皮石斛栽培种植提供了理论依据。     

影响烟草种子萌发的理化因素研究

[目的]研究理化因素对烟草种子萌发的影响,提高烟草种子萌发率。[方法]采用摇床振荡水培养、MS培养基培养、赤霉素(GA3)浸种后MS培养基培养几种方法,分别处理烟草种子和浸种回干烟草种子,研究水分、温度、光照及激素等因素对烟草种子萌发的影响。[结果]摇床振荡水培养能促进种子萌发,MS培养基培养比较利于烟草幼苗的生长;浓度0.1~0.9 mg/L的GA3浸种10 min能打破种子休眠,而附加浓度1~7 mg/L GA3培养基培养能促进烟草植株茎的生长,其中浓度为0.7 mg/L GA3浸种和培养基附加7 mg/L GA3培养的效果最好。经过浸种回干的种子在每个对比试验中均比未处理的种子提早萌发。[结论]浸种回干和适当浓度的激素处理能有效打破烟草种子的休眠,提高萌发率。     

金银忍冬腋芽离体培养技术研究

为了提高金银忍冬苗木的繁殖速度,采用了不同培养基的配方,对其腋芽进行离体培养技术研究,尝试寻求一种最佳的离体培养方式.结果表明把消毒后的金银忍冬腋芽在超净台下切割成0.2～0.3 mm大小后转入MS＋KT 0.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋GA3 1.0mg/L诱导培养基中培养,萌发率可达到92％;萌发后转入MS＋KT 0.5 mg/L＋NAA 0.04 mg/L增殖培养基上培养,会具有较高的增殖系数;生根培养基采用1/2 MS＋IBA 0.8 mg/L＋活性炭3 g/L配方,生根效果最好,生根率可达到100％.     

生姜芽的组培快繁

[目的]寻找生姜芽组培快繁的最佳方案。[方法]以MS为基础培养基,设计生姜芽组培快繁的两条途径,选择生姜芽组培快繁的最佳培养基配方。[结果]结果表明,茎尖→芽最适培养基为:改良MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;茎尖→愈伤组织→芽,茎尖诱导愈伤组织的最适培养基为:改良MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L,愈伤组织诱导芽分化的最适培养基为:改良MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。采用超净工作台上用75.0%酒精30 s+10.0%NaClO 15 min+0.1%HgCl210 min+50 ug/L青霉素与台外消毒相结合对外植体进行表面消毒,去污效果最佳。[结论]对愈伤组织进行切割并继代培养后再诱导芽分化,可获得较大的增殖倍数。     

蕨菜组织培养技术的研究

[目的]以蕨菜叶柄为外植体研究蕨菜的组织培养技术。[方法]在1/2 MS培养基中设置不同的6-BA和IBA浓度,研究6-BA和IBA对蕨菜叶柄组织培养的影响。[结果]1/2 MS+0.2 mg/L 6-BA+0.4 mg/L IBA为愈伤组织的最佳诱导培养基,诱导率为82%;1/2MS+0.2 mg/L IBA+0.2 mg/L 6-BA为愈伤组织的最佳增殖培养基,增殖倍数为8.07;1/2 MS+0.4 mg/L IBA为最佳生根培养基,生根率达100%,根数多、根长且健壮。[结论]结果为蕨菜植物的组培繁殖提供参考。     

七叶一枝花种子萌发和组织培养研究

[目的]研究七叶一枝花种子萌发的最适赤霉素（GA3）浓度和组织培养的最适培养基。[方法]采用不同浓度GA3处理种子,研究促进种子快速萌发且萌发率高的GA3浓度,再将胚根3～4 cm长的种子播于土壤中,分别在光照培养箱和自然条件下生长并观察第一片叶的长势。采用不同浓度的6－BA诱导愈伤组织,研究愈伤组织诱导的适宜6－BA浓度。[结果]150 mg／L GA3处理种子的萌发率最高,种子外植体最合适的愈伤组织诱导培养基为添加0．1 mgL／6－BA和0．5 mg／L NAA的1／2MS基本培养基。[结论]七叶一枝花种子的快速萌发方法是可行的。     

无患子优选树茎段离体培养体系的建立

【目的】筛选无患子茎段离体快繁最佳培养基,建立无患子优良种苗快速繁育体系。【方法】以野外选优获得的无患子树带腋芽茎段为外植体,采用L9(33)正交试验对影响外植体灭菌的HgCl2浓度、HgCl2与酒精的作用时间,不定芽诱导萌发中的6-BA、NAA及蔗糖用量,继代增殖中6-BA与KT用量和芽苗生根中的MS培养基无机盐水平、6-BA和2,4-D用量进行优化。【结果】75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2处理7 min是无患子茎段灭菌的最佳方法,其外植体成活率高达83.33%;MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖是无患子茎段腋芽萌发的适宜培养基,诱导率高达96.67%;MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT是无患子茎段腋芽增殖的适宜培养基,30 d可增殖4.13倍;1/3 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D是诱导芽苗生根的适宜培养基,平均生根率为41.50%。【结论】建立的无患子离体培养体系为:外植体茎段用75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2灭菌7 min,在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖培养基中诱导腋芽萌发,在MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT培养基中进行增殖培养,在1/3MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D培养基中进行生根培养。