猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒混合感染的PCR检测

笔者实验分别建立了用于检测猪传染性胃肠炎病毒及猪轮状病毒的RT-PCR方法,通过该方法对52份疑似病料进行了检测,以调查猪群中猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒混合感染情况。实验结果表明,17份样品表现为猪传染性胃肠炎病毒与猪轮状病毒混合感染,占样品总数的28.8%。     

一例猪流行性腹泻病毒与猪传染性胃肠炎病毒混合感染的诊断与思考

2019年8月初,河南省遂平县某规模化猪场产房仔猪出现严重的腹泻、呕吐现象,最终因脱水而死亡。为探究猪群发病原因,对发病严重猪群进行临床解剖,结合分子生物学诊断技术,最终确诊为猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒混合感染所致。经过紧急疫苗接种、实施其他防控措施,2周后疫情得到有效控制,仔猪腹泻情况不再发生。     

猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒混合感染的调查

本试验通过RT-PCR方法对113份疑似病料进行了检测,用以调查猪群中猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病痛毒混合感染情况.实验结果表明:34份样品表现为猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒混合感染,占样品总数的29.2%.     

猪传染性胃肠炎的实验室诊断

仔猪腹泻病给养猪业生产带来了巨大经济损失,其中猪传染性胃肠炎是引起仔猪腹泻病的主要病毒性疾病之一,根据流行病学、临床症状和病理变化可做出初步诊断,确诊需要进一步做实验室诊断.本文主要介绍了猪传染性胃肠炎病毒的分离和鉴定、抗原检测、电镜检测、血清学检测和核酸检测等实验室诊断方法.     

猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒的RT-PCR鉴别诊断

猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）为套式病毒目冠状病毒科、冠状病毒属的病毒，引起猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea，PED）。该病是一种猪肠道传染病，以水泻、呕吐和脱水为特征，各种年龄的猪均易感染，哺乳仔猪、架子猪或育肥猪的发病率可达100％，尤其是哺乳仔猪受害最严重，该病主要发生于冬季，夏季也可发生。猪传染性胃肠炎病毒（porcine transmissible gastroenteritis virus，TGEV）为套式病毒目冠状病毒科、冠状病毒属的病毒，是猪传染性胃肠炎（porcine transmissible gastroenteritis，TGE）的主要病原。该病是一种急性、高度接触性传染病，以呕吐、严重腹泻、脱水为特征的传染病，对新生仔猪具有高度致死率。虽然不同年龄的猪对这种病毒均易感，但5周龄以上的猪死亡率较低，多成僵猪，使养猪饲料报酬降低。     

猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒RT-PCR鉴别诊断技术研究

分别设计了三对引物对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(RV)的RNA进行RT-PCR，结果其扩增产物的目的条带分别为：199bp、886bp、342bp，证明对引起猪病毒性腹泻的最主要的三种病毒用RT—PCR方法，可在3h作出内快速鉴别诊断。病毒间无交叉反应。     

猪传染性胃肠炎

猪传染性胃肠炎是猪传染性胃肠炎病毒引起的，临床以呕吐、暖泻为主要特征的高度传染性消化系统传染病。各种年龄猪都可发病，新生仔猪病死率最高。     

中西医结合治疗猪瘟与猪传染性胃肠炎混合感染

猪瘟是危害养猪业的主要传染病之一,是由猪瘟病毒引起的一种高度传染性和致死性的疫病。其特征为高热稽留和小血管变形引起的广泛出血、梗塞和坏死。感染猪瘟的猪,抗病力降低,极易并发其他病毒、细菌等病原微生物的感染,尤其是在寒冷、潮湿、冷热交替、天气剧变等,使猪体抵抗力降低,可引起传染性胃肠炎病毒大量繁殖,毒力增强而发病,如不及时控制,可造成猪只大批死亡,现就一起典型的病例介绍如下。     

仔猪人工感染猪传染性胃肠炎病毒的病理分析

[目的]研究猪传染性胃肠炎（TGE）在仔猪体内的发病规律,为猪传染性胃肠炎的防治提供理论依据。[方法]将猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）JL分离株口服接种1周龄仔猪,10TCID50/只。应用RT-PCR方法检测发病和死亡仔猪的粪便处理液;采取病猪心脏、肝脏、胃、肺脏、肠管,制成病理组织切片,观察病理组织学变化。[结果]接种动物48h后出现典型的传染性胃肠炎临床症状,表现为短时间呕吐,伴有黄色水样腹泻和脱水。剖检发现肠管扩张,充满液体,小肠壁变薄。PCR结果为TGEV阳性。十二指肠近端黏膜绒毛轻微萎缩变短,远端绒毛明显缩短;上皮细胞脱落,呈浆液性或卡他性炎症。空肠、回肠绒毛显著萎缩,肠黏膜皱褶减少,大肠出血,并见卡他性炎症。胃壁变薄,淤血,出血。肺脏表现为间质性肺炎病理变化。[结论]攻毒仔猪表现出典型的TGE病理组织学变化。     

猪传染性胃肠炎病毒纯化方法的选择与优化

利用超速离心、饱和硫酸铵、聚乙二醇-6000(PEG-6000)对猪传染性胃肠炎细胞毒进行纯化,收集纯化病毒测定蛋白含量,分别运用PCR方法和作为ELISA包被抗原方法对纯化的效果进行检测,并对最佳纯化方法进行优化。3种纯化方法获得的蛋白浓度分别为1.875、6.435、0.763 mg/mL。PCR检测结果显示PEG-6000纯化后在上清液中未检出病毒,其余2种上清中均检出病毒。3种纯化方法制备的包被抗原ELISA试验阴阳性比值(P/N)分别为2.21、1.27、2.25,最终选择PEG-6000作为纯化病毒的方法,其最佳优化参数为PEG-6000浓度8%、浓缩时间2 h、NaCl浓度1%。研究表明利用PEG-6000纯化TGEV是一种经济实用、操作简单、并有较高纯化效率的方法,纯化后的TGEV为后续建立特异、敏感、快速的ELISA检测方法奠定了良好基础。     

Cloning and Homology Comparison of S Gene for Isolate TH-98 of Porcine Transmissible Gastroenteritis Virus

TH-98 isolate of transmissible gastroenteritis virus (TGEV) was propagated and harvested onswine testicle (ST) monolayer ceil. Two pairs of primers were designed to amplify S gene by RT-PCR accord-ing to the published sequence of TGEV'S gene cDNA with Oligo version 4.1 and DNasis software. The productsof PCR were named Sa and Sb, of 2.3 kb and 2.1 kb respectively. Sa was inserted in EcoR I and Kpn I sitesafter Sb was cloned in Kpn I and Pst I multiple cloning sites of the same pUC18 plasmid. The recombinantpUC-S plasmid was identified and analyzed by corresponding restriction endonuclease and nested PCR on thebasis of the genetic sites of S gene and pUC18 plasmid, which was identified as S gene of TGEV. RecombinantpUC-S was sequenced and analyzed in comparison with the other strains. Gene sequence comparison indicatedthat TH-98 shared 99, 97, 98, 97 and 94% identities with Purdue-115(US), Miller(US), TO14(Japan),FS772(British), 96-1933(British), respectively, their deduced amino acid homology was 99, 97, 97, 96 and93% correspondingly. In addition, the analysis report verified that pUC-S owned a complete open readingframe (ORF) including initiation codon, signal sequences, remaining sequences and termination codon aswell. Therefore, the results affirmed that S gene of TGEV TH-98 was extremely conservative.     

猪细环病毒和猪圆环病毒2型混合感染的检测

为诊断中牟某猪场送检病料的感染类型,调查了其流行病学、临床症状和病理剖检特征,并采用PCR检测技术对其进行检测。结果表明,该猪场存在猪细环病毒与猪圆环病毒2型的混合感染。     

猪传染性胃肠炎的诊治

介绍了猪传染性胃肠炎的流行情况、临床症状、剖解变化、诊断和防治措施等。     

猪传染性胃肠炎病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立及在疫苗评价中的应用(英文)

[目的]建立检测猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的TaqMan荧光定量PCR方法。[方法]根据TGEV基因组中保守的N基因序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有N基因的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应。[结果]该试验建立的荧光定量PCR方法在102~1010拷贝/μl之间具有良好的线性关系,相关系数达到0.99以上,扩增效率在90%~110%之间。该方法的检测灵敏度为10拷贝,敏感性较高,而且特异性较好,与猪的其他病毒核酸均无交叉反应;批内和批间的变异系数低于3%,表明该方法的重复性较好。应用该方法可以对疫苗的免疫效力进行定量检测和评价,也可以对临床病料进行检测。[结论]该研究建立的荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好,可为TGEV的流行病学调查、疫苗开发和发病机制等研究提供可靠的工具。     

乌梅散加减方治疗猪传染性胃肠炎效果研究

该文研究乌梅散加减方对猪传染性胃肠炎治疗效果。试验选用120头患有传染性胃肠炎的仔猪,随机分为治疗组和对照组,每组60头。治疗组病猪采用乌梅散加减方水煎液灌服,1剂/d,连用5d;对照组病猪肌肉注射氟苯尼考和硫酸庆大霉素,剂量分别为20mg/kg·体重和1~2mg/kg·体重,2次/d,连续5d。结果,乌梅散治疗组的治愈率、有效率以及总有效率都显著(P0.05)高于对照组,而无效率显著(P0.05)低于对照组。表明中药复方乌梅散加减方对猪传染性胃肠炎有较好的治疗效果,可以用于临床猪传染性胃肠炎疾病的治疗。     

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)对猪小肠黏膜上皮细胞活性的影响

观察猪传染性胃肠炎病毒对猪小肠黏膜上皮细胞Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,细胞增殖和凋亡的影响。将猪传染性胃肠炎病毒接种于体外培养猪小肠黏膜上皮细胞24、48和72 h后,检测细胞的ATP酶(Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶)活性,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪测定细胞周期,PI染色法检测细胞凋亡。与空白组相比较,试验组小肠黏膜上皮细胞的Na+-K+-ATP酶活性降低(P<0.05),Ca2+-Mg2+-ATP酶活性降低(P>0.05),细胞增殖能力降低,S期细胞比例降低,细胞凋亡明显。猪传染性胃肠炎病毒可以降低猪小肠黏膜上皮细胞的Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,减弱细胞的增殖能力并引起细胞凋亡。     

猪附红细胞体病并发弓形虫病的诊治

[目的]诊断吉林省延边州某养猪场发病原因。[方法]对病猪的临床症状和病理剖检变化进行了观察,采集血液样本进行病原学检测和抗体检测,提取病猪的组织与血液DNA进行PCR分子生物学检测。[结果]根据临床症状、病理剖检变化以及实验室检测结果,确诊为猪附红细胞体病与弓形虫病混合感染。采取血呼平和速复欣拌料给药,并结合附红血注射液肌注给药的中西医结合的方式进行治疗,取得了满意的效果。[结论]该研究可为猪场类似疾病的诊治提供依据。