沙冬青根瘤菌表型特征和16S rDNA PCR-RFLP 分析

应用表型数值分类和16S rDNA PCR-RFLP 分析方法,对分离自宁夏和内蒙古部分地区的沙冬青根瘤菌进行表型和遗传多样性研究.通过分离纯化获得44株供试根瘤菌,选取37株未知菌和11株参比菌株进行唯一碳氮源利用、抗生素和染料抗性、耐盐性、初始pH生长、生长温度范围和脲酶共94项生理生化性状测定,以及16S rDNA 基因扩增和扩增产物的限制性酶切分析.结果表明,沙冬青根瘤菌在碳源利用、抗生素敏感性和染料抗性方面存在差异;对15项所选氨基酸氮源均能利用,无明显差异;具有较强的耐盐碱和耐高温能力.经过数值分类和16S rDNA PCR-RFLP比较分析,测试菌株具有丰富的表型和遗传多样性.测试菌株和参比菌株在80%的相似水平上产生2个表观群,表观群I和表观群II在鉴别特征上存在差异.数值分类中聚群的根瘤菌菌株在16S rDNA PCR-RFLP分析中也聚群,2种分析方法有基本的一致性.     

沙冬青根瘤菌固氮酶基因nifH PCR-RFLP分析

利用固氮基因nifH PCR扩增,nifH PCR-RFLP及扩增产物序列分析方法对分离自宁夏和内蒙古部分地区的沙冬青根瘤菌代表菌株的nifH 进行了遗传多样性和系统发育分析.结果表明,在80%相似水平上42株根瘤菌nifH PCR-RFLP基因图谱中有5个基因型聚类群.对不同基因型代表菌株的nifH PCR产物进行序列测定和系统发育关系分析,测试菌株在系统发育地位上与中慢生根瘤菌和中华根瘤菌相近,测试菌株与温带中慢生根瘤菌(Mesorhizobium temperatum isolate HAMBI 2583)序列相似性范围为95.6%～96.9%,与草木樨中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti strain CCBAU10062)基因序列相似性范围为99.8%～100%,基因序列同源性较高.本研究中nifH基因所揭示的沙冬青根瘤菌遗传多样性和系统发育关系说明沙冬青根瘤菌受染色体基因背景、地理环境以及菌株个体的进化而存在一定的差异.     

沙冬青抗逆性研究进展与应用前景

豆科植物沙冬青是中国西北方荒漠地区特有的超旱生常绿阔叶灌木,所处生态环境十分恶劣, 抗逆性非常强,被列为珍稀濒危保护植物。对沙冬青的抗逆性作了综述,从抗旱、抗寒、耐盐和抗风沙等 4个方面,对其研究进展进行了总结和探讨,分析了沙冬青能在逆境中得以生存的原因及其适应恶劣环 境的机理,并对其开发应用前景作了进一步讨论分析。     

沙冬青植物群落特征及其根瘤多样性研究

沙冬青是西北荒漠地区珍稀常绿阔叶灌木.该文在其分布区内,综合土壤、水分条件,选定宁夏中卫县沙坡头、内蒙古阿拉善左旗、内蒙古磴口县、内蒙古乌拉特后旗4个地区作为调查样区,研究了沙冬青植物群落和沙冬青根瘤的特征.结果表明:沙冬青植物群落组成较为丰富;因水分、土壤类型及地形差异,不同样区内沙冬青群落成分、结构有一定变化,水分是沙冬青植物群落的决定性生态因子;沙冬青根瘤的最佳采集时间是在结果期之前,根瘤的外部形态呈现多样性,不同样区根瘤的着生部位有差异;水分是根瘤菌侵染沙冬青根系并形成根瘤的主要限制因子;沙冬青群落其他豆科植物的根瘤与沙冬青根瘤具有相似的外部形态.      

新疆沙冬青AM真菌物种多样性空间异质性研究

2012年6月选取新疆乌恰县康苏、膘尔托阔依（阴阳面）和上阿图什4个样地,分别采集新疆沙冬青（Arnmopiptanthus nanus）根嗣0～50cm土层土壤样品,研究了新疆沙冬青AM真菌物种多样性空间变化规律。共分离鉴定AM真菌4属44种,其中球囊霉属（Glomus）28种,无梗囊霉属（Acaulospora）11种,盾巨孢囊霉属（Scutellospora）4种,巨孢囊霉属（Gigaspora）1种,优势菌种为网状球囊霉（G．reticulatum）。AM真菌孢子密度低、体积小、孢壁厚、整体形态不饱满,表现出明显的旱生特征。膘尔托阔依（阴）样地的孢子密度最大,显著高于上阿图什样地（Pd0．05）,极显著高于与膘尔托阔依（阳）和康苏样地（_Pd0．01）;康苏、膘尔托阔依和上阿图什样地的种丰度依次升高且差异显著;康苏、膘尔托阔依（阳）和上阿图什样地的Simpson多样性指数无显著差异（P〉0．05）,却显著高于膘尔托阔依（阴）样地;膘尔托阔依（阴）和上阿图什样地的Shannon-wiener多样性指数显著高于其他样地（Pd0．05）;膘尔托阔依（阳）、膘尔托阔依（阴）和康苏、上阿图什样地的均匀度指数依次显著升高（P〈0．05）。土壤因子中速效磷与种丰度有极显著负相关,pH值与种丰度、Shannonwiener多样性指数和均匀度指数极显著正相关,水溶性全盐与Shannon-wiener多样性指数和均匀度极显著负相关,全氮与种丰度极显著负相关。结果表明,新疆沙冬青AM真菌物种多样性具有明显的空间异质性,与其土壤环境密切相关,pH值是影响新疆沙冬青AM真菌多样性的最主要土壤因子。     

濒危植物矮沙冬青研究进展

矮沙冬青(Ammopiptanthus nanusCheng f.)是国家Ⅱ级濒危保护植物,也是古老的第三纪孑遗种,本文就其生物学特性、分布区系及生境、生理生态特性、细胞学、胚胎学、濒危原因及保护措施等方面的研究成果进行了系统地评述,并提出了一些研究建议与今后的研究方向。     

沙冬青生根组织培养的研究

以沙冬青无菌苗的茎尖为材料，采用Ｍｓ及改良的Ｍｓ培养基，对不同激素进行试验。结果表明：ＩＢＡ在沙冬青的生根组织培养中是必须的，且以０．２ｍｇ／ＬＩＢＡ为最佳浓度；活性炭对沙冬青生根有抑制作用；改良后的１／３Ｍｓ培养基优于１／４Ｍｓ培养基。     

冬青属植物系统学及遗传多样性研究进展

本文概述了近10年来冬青属植物系统学与遗传多样性研究的新进展,包括植物形态、化学分类学、分子系统发生、遗传多样性及分子生物学具体应用等领域.     

沙冬青沙地育苗造林技术

简述了沙冬青的特征特性,并从育苗和造林两方面总结了沙地沙冬青育苗造林技术,为沙地水土保持提供一定指导。     

沙冬青生境调查及人工栽培技术

调查了野生沙冬青的生长环境,并通过试种研究了人工栽培技术。结果表明:沙冬青具有强的抗高温和低温能力,易繁育,可作为绿化资源在北方平原地区种植。     

蒙古沙冬青AM真菌分子特征研究

为了揭示蒙古沙冬青根围土壤AM真菌遗传多样性以及环境对AM真菌遗传特征的影响,为AM真菌形态学分类提供依据,选取内蒙古地区乌海、阿拉善、磴口、乌拉特后旗等4个样地,结合孢子形态鉴定和分子克隆方法研究了样地间AM真菌分子特征及其差异性,并比较了荒漠、农田、人工繁育和森林等4种不同生态系统中摩西管柄囊霉(Funneliformis mosseae)的遗传距离差异。结果表明:不同样地条件下,蒙古沙冬青根围土壤同种AM真菌种内遗传变异小,4个样地共有的AM真菌遗传相似度较高。内蒙古荒漠系统F.mosseae遗传距离显著小于其他生态环境F.mosseae的遗传距离,环境差异能够影响AM真菌遗传多样性。系统发育分析显示,F.mosseae与管柄囊霉属更为近缘,同意将其归入管柄囊霉属(Funneliformis)。     

沙冬青cDNA-AFLP体系的建立及引物筛选

[目的]建立适合于沙冬青cDNA—AFLP的反应体系。[方法]以对照、3种逆境处理的沙冬青为材料,采用Trizol法和改良CTAB法提取总RNA。[结果]改良的CTAB法可抽提到较高质量的总RNA,适于沙冬青总RNA的提取。采用EcoRI/MseI酶切体系,64对选择性扩增引物中有35对适合沙冬青cDNA-AFLP分析。[结论]该研究为利用cDNA-AFLP标记对沙冬青抗逆基因进行深入研究奠定基础。     

瞬时渗透胁迫对沙冬青细胞离子流的影响

采用非损伤微测技术,研究了沙冬青悬浮细胞经不同浓度的氯化钠、甘露醇处理后,细胞Ca2+、K+、H+3种离子流速、流向及流量的变化。结果表明:氯化钠与甘露醇处理均诱导Ca2+外流,氯化钠诱导的Ca2+外流与氯化钠浓度有关;氯化钠诱导K+外流,而甘露醇诱导K+内流;氯化钠诱导的H+流具有先内流后外流的两个阶段的特点。H+-ATP酶在氯化钠诱导的H+外流中具有重要作用。     

Functional analysis of cold-inducible cDNA clones in the legume Ammopiptanthus mongolicus

Functional analysis of cold-inducible cDNA clones in the legume Ammopiptanthus mongolicus     

气候变化下沙冬青适宜分布区预测

通过135个地理分布数据,利用MaxEnt生态位模型,选择19项环境因子预测沙冬青未来的分布格局及面积。结果表明:1)模型模拟的训练集和测试集的AUC值分别为0.990和0.988,模型的预测结果可靠;2)沙冬青主要分布于内蒙古西部地区、宁夏北部、甘肃东部地区以及蒙古国南部;3)模型模拟当前沙冬青的分布面积为6.3×10⁵ km²,模拟2050年沙冬青的分布面积为9.1×10⁵ km²,沙冬青分布范围和种群面积将呈增加趋势;4)影响沙冬青分布的主要因子为最冷季降水量、最冷月最低气温、最热季降水量、年平均气温、最湿月降水量和年降水。研究结果不仅提供了沙冬青适生分布的划分,也为沙冬青调查与监测提供了重要的科学基础。     

沙冬青种子总黄酮对小鼠急性毒性作用研究

研究沙冬青种子总黄酮对小鼠的急性毒性作用,并测定沙冬青种子总黄酮单次给药的半数致死剂量(LD50)或最大耐受剂量(MTD).将70只体质量为(20±2)g的SPF级KM小鼠随机分成7组,雌雄各半,每组每只小鼠分别灌胃0.4mL的无菌生理盐水(对照组)及相同体积、不同浓度沙冬青种子总黄酮溶液,灌胃后7d内仔细观察小鼠的反应,观察并记录小鼠中毒症状和死亡数,利用改良寇氏法测定该总黄酮的LD50.试验结束后记录各组小鼠的体质量变化,进行病理剖检,同时每组随机取2只小鼠(雌雄各1只),分别采取心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏等进行病理组织学检查.结果表明:沙冬青种子总黄酮对小鼠的半数致死量LD50为2 004.47mg/kg,LD50的95%可信限为1 693.78～2 372.47mg/kg.死亡小鼠急性毒性主要表现为安静少动,即而出现走路不稳、腹卧昏睡、呼吸急促、连续性抽搐而死亡.说明小鼠在沙冬青种子总黄酮中毒后,心脏、肝脏、脾脏和肾脏等主要器官都受到一定程度的损害,但对小鼠的持续影响较小;沙冬青种子总黄酮毒性较低,符合低毒化合物标准(500～5 000mg/kg为低毒化合物).     

沙冬青容器育苗关键技术研究

本试验以沙冬青作为试验材料,研究不同基质对沙冬青实生育苗出苗率、生长量和根系生长的影响规律,为沙冬青人工繁殖提供理论依据.试验结果表明:不同基质对沙冬青播种后出苗动态、出苗率有重要影响,其中沙土和上沙下土基质出苗快、出苗率高.不同基质对沙冬青幼苗生长有明显的影响,在壤土和上沙下土基质中沙冬青幼苗植株最高、叶数最多、叶片最大,沙土中各项指标最低,混合基质介于二者之间.10叶期和15叶期断根处理的幼苗平均侧报数较多,幼苗成活率和移栽成活率均较高.