不同精粗比底物对瘤胃细菌标记率的影响

以4头安装永久瘤胃瘘管的徐淮山羊为试验动物,运用15N稳定性同位素示踪技术,研究了1:9(A)、3:7(B)、5:5(C)、7:3(D)四种精粗比底物对瘤胃细菌15N标记率的影响。结果表明:(1)细菌产量D组显著高于A组,极显著高于B组,细菌含氮量以C组最高,为5.25%;(2)细菌15N富集量、瘤胃细菌对(NH4)2SO4的利用率以C组最高,分别为367.13μg/30ml、16.79%,而B组最小,分别为257.13μg/30ml、11.65%;(3)细菌15N标记率A、B组间差异不显著,A组显著高于C、D组,B组极显著高于C、D组,C、D组间差异不显著,且1.5h为最佳标记时间。     

不同氮利用率山羊瘤胃细菌结构与组成的差异

本试验旨在研究不同氮利用率山羊瘤胃细菌结构与组成的差异。以30只山羊作为试验动物,通过代谢试验,筛选出高氮利用率组(HNU组)和低氮利用率组(LNU组)的山羊个体。屠宰采集HNU组、LNU组每只山羊瘤胃内容物,用高通量测序技术分析比较组间瘤胃细菌结构与组成的差异性,并用实时荧光定量PCR技术对7种蛋白质分解菌进行定量分析和比较。结果表明:1)30只山羊对饲料氮利用率存在明显的个体差异,HNU组和LNU组的平均氮利用率分别为(56.68±5.54)%和(34.25±4.21)%,组间差异极显著(P<0.01)。2)HNU组和LNU组瘤胃微生物的结构在属水平上有明显差异,HNU组普雷沃氏菌属1(Prevotella 1)、解琥珀酸菌属(Succiniclasticum)、p-1088-a5gutgroup的相对丰度显著低于LNU组(P<0.05),毛螺菌科XPB1014肠道群(Lachnospiraceae XPB1014group)、瘤胃球菌属1(Ruminococcus 1)、瘤胃球菌科UCG004(RuminococcaceaeUCG004)、瘤胃杆菌属(Ruminobacter)、FamilyⅩⅢUCG002、厌氧支原体属(Anaeroplasma)的相对丰度显著高于LNU组(P<0.05)。3)相关分析显示宿主氮利用率与Ruminococcus 1、Ruminobacter、Anaeroplasma的相对丰度呈显著正相关(P<0.05)。4)HNU组中溶纤维丁酸弧菌(Butyrivibriofibrisolvens)、产琥珀酸丝状杆菌属(Fibrobacter succinogens)和瘤胃球菌属sp.HUN007(Ruminococcussp.HUN007)数量显著高于LNU组(P<0.05),而栖息瘤胃普雷沃氏菌(Prevotella ruminicola)、牛链球菌(Streptococcus bovis)、溶糊精琥珀酸弧菌(Succinivibrio dextrinisolvens)和黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)数量在2组间没有显著差异(P>0.05)。综上所述,不同氮利用率山羊瘤胃细菌的结构与组成存在显著差异。     

不同NDF/NFE比的日粮对山羊瘤胃发酵参数影响的研究

利用4只(35±2.5)kg装有瘤胃瘘管的徐淮白山羊,采用拉丁方试验设计,饲喂NDF/NFE分别为1.46(A组)、1.2(5 B组)、1.0(3 C组)、0.8(2 D组)的4种日粮,研究其对瘤胃内环境参数的昼夜动态变化规律的影响。结果表明:①瘤胃pH随NDF/NFE的降低而降低,由A组的6.37降至D组的5.86;②乙酸浓度以B组最高,极显著(P<0.01)高于A、C和D组,A、C、D 3组则依次降低(P>0.05);丙酸浓度以B、D两组较高,极显著(P<0.01)高于A和C组;丁酸浓度随NDF/NFE降低而升高,D组最高,极显著(P<0.01)高于C和B组;总VFA浓度B组最高,极显著(P<0.01)高于D组,显著(P<0.05)高于A、C组;乙酸/丙酸比随NDF/NFE比的降低而减小,A组极显著(P<0.01)大于B、C和D组;③瘤胃氨态氮平均浓度随日粮NDF/NFE比的降低而升高,由A组的8.37mg/dL升至D组的13.71mg/dL。     

苜蓿皂苷对山羊瘤胃细菌发酵的影响

本试验旨在研究苜蓿皂苷对山羊瘤胃细菌发酵功能的影响。选择4只22月龄、体况良好、安装永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊,晨饲后3 h采集瘤胃液,分离出细菌后,采用批次培养法进行体外发酵。试验分0%(对照组)、1%、2%及3%4个组,每组3个发酵瓶,每个发酵瓶为1个重复,体外厌氧培养24 h后,分别测定各处理组pH值、氨态氮浓度、微生物蛋白浓度及总挥发性脂肪酸含量。结果表明:添加1%~3%的苜蓿皂苷可以降低瘤胃细菌发酵液的pH值,提高总挥发性脂肪酸和氨态氮的浓度,但未对微生物蛋白浓度产生显著影响。     

不同精粗比饲粮中添加酵母培养物对牦牛瘤胃体外发酵参数的影响

本试验旨在探讨不同精粗比饲粮中添加酵母培养物(YC)对牦牛瘤胃体外发酵参数的影响。采用3×6两因素交叉分组试验设计,在3个精粗比(40∶60、50∶50、60∶40)饲粮中分别添加6个水平(0、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%和2.5%)的YC,制备出18底物进行体外发酵。结果表明:1)饲粮精粗比对产气量、干物质降解率(DMD)、粗蛋白质降解率(CPD)、酸性洗涤纤维降解率(ADFD)、中性洗涤纤维降解率(NDFD)有显著影响(P0.05),50∶50组和60∶40组DMD、CPD、NDFD、ADFD显著高于40∶60组(P0.05)。饲粮YC添加水平对产气量、CPD、NDFD和ADFD有显著影响(P0.05),0.5%组产气量和CPD显著高于其他各组(P 0.05)。饲粮精粗比和YC添加水平对CPD有显著的互作效应(P0.05)。2)饲粮精粗比对pH及氨态氮(NH3-N)、微生物蛋白(MCP)含量有显著影响(P0.05)。40∶60组pH显著高于50∶50组和60∶40组(P0.05),60∶40组NH3-N含量显著低于40∶60组和50∶50组(P0.05),40∶60组M CP含量显著低于50∶50组和60∶40组(P0.05)。饲粮YC添加水平对NH3-N和M CP含量有显著影响(P 0.05),0.5%组NH3-N和M CP含量显著高于其他各组(P 0.05)。3)饲粮精粗比和YC添加水平对总挥发性脂肪酸(TVFA)含量和乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸比例及乙酸/丙酸均有显著影响和互作效应(P0.05)。60∶40组TVFA含量和丁酸比例显著高于40∶60组和50∶50组(P0.05),40∶60组乙酸、异戊酸比例以及乙酸/丙酸显著高于60∶40组和50∶50组(P 0.05),50∶50组异丁酸和戊酸比例显著高于40∶60组和60∶40组(P 0.05)。1.0%组异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸比例显著高于其他各组(P0.05),乙酸/丙酸显著低于其他各组(P0.05)。综上所述,在本试验条件下,饲粮精粗比和YC添加水平对牦牛体外瘤胃发酵产气量、养分降解率和发酵参数有一定影响。饲粮精粗比以50∶50和60∶40为宜,YC添加水平以0.5%和1.0%为宜。     

不同氮硫比日粮对南江黄羊瘤胃体外发酵的影响

本试验旨在探讨不同氮硫比日粮对瘤胃发酵特性的影响。以4只装有永久性瘤胃瘘管的南江黄羊作为瘤胃液供体,采用单因素试验设计,通过体外培养试验研究不同氮硫比日粮(氮硫比分别为10.5∶1、9∶1、7.5∶1、6∶1)对瘤胃pH、干物质(DM)降解率、氨氮(NH3-N)浓度、挥发性脂肪酸(VFA)含量以及微生物蛋白产量(MCP)的影响。结果表明:不同氮硫比日粮对培养液pH无显著影响(P>0.05);氮硫比为7.5∶1组的DM降解率在第4、8、12 h时显著高于其他处理组(P<0.05);在培养前8 h内,氮硫比为7.5:1和9:1组的氨氮浓度均显著低于10.5∶1组(P<0.05);降低日粮中的氮硫比可显著降低乙酸丙酸比例(P<0.05);氮硫比为7.5∶1组其总的挥发性脂肪酸、原虫蛋白、细菌蛋白以及总的微生物蛋白含量显著高于其他处理组(P<0.05)。因此,瘤胃微生物的生长需要适宜的氮硫比,在本试验的条件下瘤胃发酵适宜的氮硫比为7.5∶1。     

尿素饲料添加脲酶抑制剂对山羊瘤胃内pH值及氨氮含量的影响

本试验四头装置永久性瘤胃瘘管的本地成年山羊，分基础以对照期，尿素对照期和脲酶抑制剂－尿素期，三期精料补充料的总能量，总氮量相同，尿素期和脲酶抑制剂－尿素期用尿素氮取代基础对照期精料补充料中总氮量的４７％，在相同的饲养管理条件下对瘤胃内ｐＨ值，ＮＨ３－Ｎ进行测定。结果表明，所选用的脲酶抑制剂在一定水平能达到抑制ＮＨ３－Ｎ释入速率的效果（占尿素量６％以上），其抑制作用在一定范围内随脲酶抑制剂用量的加大     

C3和C4植物粗料及底物精粗比对山羊瘤胃体外发酵特性的影响

本试验研究了C3和C4植物粗料及底物精粗比对山羊瘤胃体外发酵特性的影响。采用完全随机区组试验设计,选择不同来源的C3(水稻秸秆和苜蓿)和C4植物(玉米秸秆和宽叶雀稗)为粗料,并分别设计3种不同精粗比(40∶60、45∶55和50∶50)的底物,进行48 h的瘤胃体外发酵试验,测定体外产气参数、发酵特性参数、营养物质降解率。结果表明:1)底物粗料选用苜蓿时,理论最大产气量极显著高于其余3种粗料(P0.01),且以精粗比为45∶55和50∶50时较高;底物粗料选用水稻秸秆时,甲烷(CH4)产量分别比苜蓿、玉米秸秆和宽叶雀稗降低53.79%、24.30%和3.29%,且以精粗比为45∶55时最低。2)C3植物粗料的发酵液p H和氨态氮(NH3-N)浓度均极显著高于C4植物粗料(P0.01);精粗比对发酵液p H和NH3-N浓度均没有显著影响(P0.05)。3)底物粗料选用水稻秸秆时,发酵液乙酸、丙酸和总挥发性脂肪酸浓度均极显著高于玉米秸秆和宽叶雀稗(P0.01),而与苜蓿没有显著差异(P0.05);精粗比为50∶50时水稻秸秆和玉米秸秆发酵液乙酸/丙酸均显著高于精粗比为40∶60(P0.05),而与精粗比为45∶55时没有显著差异(P0.05)。4)各底物体外干物质和中性洗涤纤维降解率均以选用水稻秸秆为底物粗料时最低,分别比苜蓿、玉米秸秆、宽叶雀稗低18.84%、4.37%、3.84%和11.12%、17.78%、15.56%。结果提示,以苜蓿为粗料,精粗比为50∶50的底物瘤胃体外发酵降解率最高,CH4产量也最高;以水稻秸秆为粗料时,精粗比为45∶55的底物瘤胃体外发酵降解率最低,CH4产量也最低。     

棉酚对瘤胃真菌和瘤胃细菌体外发酵稻草活力的影响

笔者研究了不同浓度（5mg／kg、10mg／kg、20mg／kg、40mg／kg）的棉酚对瘤胃真菌和瘤胃细菌体外发酵稻草活力的影响。瘤胃真菌发酵试验中,各处理组的底物消失率均显著低于对照组（0mg／kg）（P〈O．05）。产气量结果表明,20mg／kg和40mg／kg两试验组的发酵明显滞后于其他各组,且发酵24-h和48h的累计产气量显著低于对照组及5mg／kg和10mg／kg试验组（P〈0．05）,说明20mg／kg和40mg／kg的棉酚可显著抑制瘤胃真菌的发酵。在瘤胃细菌发酵试验中,5mg／kg和10mg／kg棉酚处理组的底物消失率与对照组（0mg／kg）无明显差异,而20mg／kg和40mg／kg棉酚处理组的底物消失率显著低于对照组（P〈o．05）。累计产气量结果表明,各浓度水平的棉酚对瘤胃细菌发酵无明显的滞后效应。因此,瘤胃真菌对棉酚较为敏感,而瘤胃细菌对棉酚有较强的耐受能力,但高浓度的棉酚对细菌发酵活力有一定的抑制作用。     

反刍动物瘤胃细菌定量培养方法的研究

以山羊为实验动物研究了反刍动物瘤胃中拟杆菌,牛链球菌,乳酸杆菌,韦荣氏球菌,消化链球菌定量培养方法,并对实验性过食玉米山羊瘤胃细菌进行测定。发现过食后其瘤胃中拟杆菌大量减少,牛链球菌,乳酸杆菌,韦荣氏球菌,消化链球菌均显著增加。     

不同氯化铈水平对南江黄羊瘤胃体外发酵的影响

本试验用体外培养法研究不同氯化铈添加水平对南江黄羊瘤胃发酵的影响,旨在筛选稀土元素铈作为南江黄羊添加剂的最适添加量。用4只装有永久瘤胃瘘管、体重约25 kg的阉割南江黄羊为瘤胃液供体动物,试验组分别添加0.003%DM、0.006%DM、0.012%DMCeCl3.7H2O和0.024%DM,同时设置一个对照组。结果表明:体外发酵24 h后,试验组pH均低于对照组(P<0.05);试验组的产气量均高于对照组,其中0.024%D M组显著提高(P<0.05);除0.006%D M组外,试验组NH3-N浓度均显著低于对照组(P<0.05);TVFA、乙酸、丙酸均高于对照组(P<0.05);除0.003%DM组外,试验组MCP浓度均高于对照组(P<0.05)。结果显示,氯化铈能够促进瘤胃内有机物的降解,促进瘤胃微生物蛋白合成,提高TVFA产量,氯化铈的最适添加量为0.012%DM。     

不同精粗比日粮中添加甘露寡糖对绵羊体外发酵的影响

试验旨在研究不同精粗比日粮中添加甘露寡糖(MOS)对绵羊体外发酵的影响。采用4×6二因子析因试验设计,在4种精粗比日粮(20:80、30:70、40:60及50:50)中分别添加6个水平的MOS(0、0.4%、0.8%、1.2%、1.6%及2.0%),以体外产气法对各底物培养3、6、9、12和24h的产气量、甲烷(CH₄)产量、体外干物质消失率(IVDMD)、体外粗蛋白质消失率(IVCPD)、体外有机物质消失率(IVOMD)进行测定。结果表明:日粮精粗比对体外总产气量(除12、24h)和甲烷(CH₄)产量(除9h)均没有显著影响(P>0.05),日粮精粗比对IVDMD、IVOMD和IVCPD均产生了显著的影响(P<0.05);MOS仅对24h IVCPD产生了显著的影响(P<0.05);日粮精粗比和MOS的交互作用对体外产气量、CH₄产量、IVDMD、IVOMD和IVCPD均没有产生显著的影响(P>0.05)。随日粮中精饲料比例的上升,IVCPD下降而IVDMD和IVOMD在升高;随日粮中MOS比例的升高,IVCPD升高。综上所述,在精粗比为30:70的日粮中添加1.2% MOS效果最好。     

Effects of Adding Mannan Oligosaccharides to Diets with Different Concentrate to Forage Ratios on Ruminal Fermentation of Sheep in vitro

The test was aimed at determining the effects of adding MOS to diets with different concentrate to forage ratios on ruminal fermentation of sheep in vitro.The 4×6 two-factor experimental design was chosen.There were 4 diets with different concentrate to forage ratios(20:80, 30:70, 40:60 and 50:50) and added to 6 dosages MOS(0, 0.4%, 0.8%, 1.2%, 1.6% and 2.0%), respectively.The method of gas production in vitro was used to measure the total gas and CH₄ production, IVDMD, IVCPD and IVOMD after cultured for 3, 6, 9, 12 and 24 h.The results showed that the gas(except 12 and 24 h) and CH₄ production(except 9 h) were not impacted by the two factors(P>0.05).The IVDMD, IVCPD and IVOMD were significantly affected by concentrate to forage ratios(P<0.05), while the IVCPD at 24 h was significantly affected by MOS(P<0.05).Meanwhile, all the indexes were not influenced by the interaction of two factors(P>0.05).The IVDMD and IVOMD increased with the rising of concentrate approximately, while the IVCPD decreased with the rising of MOS roughly.The biggest associative effect was gained in 30:70 concentrate to forage diet when adding 1.2% MOS.     

不同长链脂肪酸组合对体外瘤胃细菌发酵和群体结构的影响

本试验旨在研究不同长链脂肪酸组合对体外培养瘤胃细菌发酵和群体结构的影响。以3头瘤胃瘘管奶牛提供瘤胃液,对照(A)组底物含5%脂肪酸钙,试验组培养底物中硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸的含量分别为1.5%、1.0%、0.5%和1.5%(B组),1.5%、1.0%、1.5%和1.0%(C组),1.0%、1.5%、1.5%和0.5%(D组)以及1.5%、0.5%、0.5%和1.0%(E组)。在培养后0、3、6、12、18、24 h采集培养液,测定p H、氨氮浓度和瘤胃细菌含量。结果表明:1)培养液p H在组间的差异不显著(P0.05);C组的培养液氨氮浓度显著高于B、D组(P0.05)。2)除白色瘤胃球菌,其他菌属含量在组间存在显著差异(P0.05)。其中琥珀酸拟杆菌、生黄瘤胃球菌、蛋白溶解梭菌和嗜淀粉瘤胃杆菌含量在B组较高;C组溶纤维丁酸弧菌、埃氏巨球菌、降解淀粉瘤胃球菌以及瘤胃总细菌含量显著高于其他各组(P0.05)。培养液埃氏巨球菌含量最高,为优势菌。综合得出,脂肪酸组合对瘤胃总细菌和大部分细菌种属含量有显著影响,这与发酵模式有关。     

蛋白质来源对瘤胃细菌和原虫群体结构的影响

以4只瘘管山羊为试验动物,采用4×4拉丁方设计,使用克隆测序、遗传指纹以及细胞显微计数等技术,研究以羽毛粉(A)、玉米蛋白粉(B)、豆粕(C)和鱼粉(D)4种蛋白补充料分别配合的混合日粮对瘤胃细菌和原虫群体结构的影响。结果表明:细菌的R.flavefaciens、R.bromii、R-7、Roseburia faecalis、Uncultured T33H60F48、Uncultured GRANT42及1个尚不能定性的类群在组间存在显著差异(P<0.05);原虫的内毛虫、前毛虫、头毛虫、等毛虫4个类群在处理间差异显著(P<0.05)。综上可见,蛋白质源对瘤胃细菌和原虫类群结构有显著影响。     

不同精粗比条件下添加支链氨基酸对绵羊瘤胃微生物体外发酵的影响

本试验旨在利用体外发酵培养技术和正交试验设计研究在不同精粗比（20：80、40：60和60：40）条件下添加支链氨基酸（缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸）不同组合对瘤胃微生物体外发酵的影响,并对支链氨基酸间的组合效应进行分析以筛选在不同精粗比底物条件下支链氨基酸的最佳组合。结果表明,无论发酵底物精粗比如何,添加支链氨基酸对体外发酵pH、NDF降解率（NDFD）和乙酸/丙酸均无显著影响（P>0.05）,而DM降解率（DMD）在各组合间存在差异。当发酵底物精粗比为20：80时,3种氨基酸对氨态氮（NH₃-N）、挥发性脂肪酸（VFA）、总挥发性脂肪酸（TVFA）的影响均具有组合效应（P<0.05）;其中异丁酸和戊酸水平随缬氨酸添加水平的增加而升高（P<0.01）;异戊酸水平则受亮氨酸和异亮氨酸添加水平的影响（P<0.05）。当发酵底物精粗比为40：60时,异丁酸水平随着缬氨酸添加水平增加而升高（P<0.01）;异戊酸浓度受3种支链氨基酸的影响（P<0.05）。当精粗比为60：40时,添加支链氨基酸主要影响异丁酸、异戊酸和戊酸的水平;其中异丁酸主要受缬氨酸的影响（P<0.01）,异戊酸受亮氨酸和异亮氨酸的影响（P<0.01）,戊酸受缬氨酸和异亮氨酸的影响（P<0.05）。从异丁酸、戊酸和异戊酸来看,添加3种氨基酸均表现出明显的组合效应（P<0.05）。综上所述,以DMD为指标,当发酵底物精粗比为20：80时,缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸的最佳添加水平为0.67、2.00、1.33 mmol/L;当底物精粗比为40：60和60：40时,无需额外添加3种支链氨基酸。     

不同精粗比饲粮中添加异位酸对体外瘤胃发酵的影响

本文旨在探讨不同精粗比饲粮中添加异位酸对体外瘤胃发酵的影响.选用4只体况良好、平均体重(25.48±1.51)kg、装有永久性瘤胃瘘管的阉割南江黄羊作为瘤胃液供体动物.用体外发酵法考察在3个精粗比(30∶70、50∶50和70∶30)饲粮中添加异位酸(1％)后的体外发酵参数变化.结果表明:经过24 h体外培养,不添加异位酸时,随精粗比由30∶70升高到70∶30,培养液pH、氨态氮(NH3-N)浓度、乙酸/丙酸和乙酸占总挥发性脂肪酸(TVFA)的比例均显著下降(P＜0.05);产气量及乙酸、丙酸和TVFA浓度和丙酸占TVFA的比例均显著提高(P＜0.05).当精粗比为30∶70时,添加异位酸pH无明显变化,NH3-N浓度下降,产气量及微生物蛋白质(MCP)和丁酸浓度上升,但各项指标差异均不显著(P＞0.05),而乙酸、丙酸和TVFA浓度均显著提高(P＜0.05).当精粗比为50∶50时,添加异位酸可显著降低NH3-N浓度(P＜0.05),提高产气量及MCP、乙酸、丙酸和TVFA浓度(P＜0.05),而对pH、丁酸浓度和乙酸/丙酸无显著影响(P＞0.05).当精粗比为70∶30时,添加异位酸NH3-N浓度显著下降(P＜0.05),产气量及MCP、乙酸、丙酸和TVFA浓度显著上升(P＜0.05),而对pH和乙酸/丙酸均无显著影响(P＞0.05).饲粮中添加异位酸有利于提高有机物的消化率和NH3-N的利用,增加MCP、乙酸、丙酸和TVFA的合成.在本试验中,对于MCP和TVFA的合成而言,精料比例越高,添加异位酸的效果越好.