网翅蝗科3种蝗虫精子发生时c-kit蛋白特异性表达和比较

以吉林省四平地区网翅蝗科(直翅目：蝗总科)3种优势蝗虫为实验材料，探讨在蝗虫精子发生过程中c-kit蛋白表达和调控机制，应用免疫组织化学和统计分析等方法对精子发生过程中四个代表性阶段c-kit蛋白特异性表达动态进行研究，3种蝗虫分别为：绿牧草蝗Omocestus viridulus (Linnaeus) ，素色异爪蝗Euchorthippus unicolor (Ikonn.)和条纹异爪蝗Euchorthippus vittatus Zheng。结果表明，（1）精原细胞时期阳性表达强度较弱，阳性颗粒细小；（2）初级精母细胞时期阳性表达强度显著增强，阳性颗粒粗大；（3）次级精母细胞时期阳性表达强度继续增强，阳性颗粒细小；（4）成熟精子时期阳性表达强度较强，阳性颗粒细小，并分布于精子头部和尾丝等处；（5）在精巢小管末端发现大量c-kit蛋白成团存在；（6）c-kit蛋白表达存在的种间差异。以上结果提示c-kit蛋白在生精细胞中阶段性的特异表达说明它直接参与和调控精子增殖与分化进程，同时参与成熟精子生理活性维系和受精等功能，甚至还参与调控不同种蝗虫精子发生的进程和种间生殖隔离的维系。     

长翅素木蝗卵子发生过程中c-kit蛋白特异性表达动态

应用免疫组织化学和生物统计分析相结合的方法,对吉林省四平地区长翅素木蝗卵子发生过程中c-kit蛋白特异表达特点和动态进行研究。结果表明:卵子发生过程中,第1～6阶段卵母细胞中有不同程度的c-kit蛋白特异性表达,但随着卵黄发生的开始逐渐消失;滤泡细胞、输卵管和受精囊的腺细胞中有c-kit蛋白颗粒存在;c-kit蛋白表达季节动态显示,刚羽化的蝗虫卵巢管内有较强的表达,老熟成虫卵巢管内表达维持在较弱的水平。     

短星翅蝗卵子发生过程中原癌基因c-kit特异性表达

将免疫组织化学和生物统计分析方法相结合,对吉林省四平地区的短星翅蝗(Calliptamus abbreviatusIkonn.)卵子发生过程中c-kit特异表达特点和动态进行了研究。结果表明:卵子发生过程中,第1~6阶段卵母细胞中有不同程度的c-kit蛋白特异性表达,但随着卵黄发生该蛋白表达开始逐渐减弱,最后消失;滤泡细胞、输卵管和受精囊的腺细胞中有c-kit蛋白颗粒的存在。     

魁蚶精子发生的超微结构

利用透射电镜(TEM)技术观察了魁蚶精子发生过程的超微结构变化。结果表明:魁蚶精子发生经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子形成等过程,在精子形成中的主要细胞学事件包括顶体的发育、核形态变化及尾部的形成等。此过程中,前顶体颗粒聚集、融合,形成顶体囊,然后发育为圆锥形顶体;核的形态由圆形或卵圆形变为鼓形,核内染色质由团块状到颗粒状,再到高电子密度均质;线粒体聚集、融合、体积变大,迁移至核的后端,参与精子中段的形成。成熟精子由头部、中段及尾部组成,头部由顶体及核构成,中段由5个线粒体围绕远端中心粒组成,尾部为细长的鞭毛。研究亮点:魁蚶为我国重要的海产经济贝类之一,目前对其精子发生过程的超微结构未见研究报道。利用透射电镜技术观察了魁蚶精子发生过程中精子顶体的形成、核的形态建成等主要细胞学事件,探明了魁蚶精子属原生型,顶体物质的合成始于初级精母细胞时期,细胞核在精子发生过程中形态变化不大等问题,为蚶科精子发生机制的深入研究提供了参考。     

拟黑多刺蚁精子发生观察

首次对拟黑多刺(Polyrhachis vicina Roger)精子的发生动态过程进行了连续观察和描述,由精母细胞形态和细胞核形态变化特征性指标显示,拟黑多刺蚁精子发生过程总体可分为5个阶段,分别是精原细胞时期、初级精母细胞时期、次级精母细胞时期、精子细胞时期和精子形成时期,最终成熟的精子通过交配活动排出体外.     

睾酮在北方山溪鲵精巢发育周期中的分布

用免疫组织化学方法检测了睾酮(testosterone,T)在北方山溪鲵(Batrachuperustibetanus)精巢发育周期中的变化。结果表明,在北方山溪鲵的精巢中,4月份T定位在次级精原细胞的胞质中;5月份T定位在次级精原细胞的胞核中;6~7月,精母细胞和精子细胞核中呈T阳性反应;8月份,精巢的非成熟区和成熟区散在地出现T的弱阳性位点;9~10月,精巢非成熟区的精原细胞胞质及成熟区精子中有较强的T阳性反应;11月,精原细胞的胞质及精子中的阳性反应减弱。在山溪鲵的生殖周期中,4~11月精巢中始终呈现T阳性反应,而且T的分布呈现出一定的规律性。在4~5月和9~10月,精巢间质细胞和支持细胞中也有T阳性反应。上述结果说明,在山溪鲵精巢中,T对生殖细胞增殖及精子形成起调控作用。     

绿牧草蝗精子发生观察

首次对绿牧草蝗[Omocestus viridulus（Linnaeus）]精子的发生动态过程进行了连续观察和描述。精母细胞形态和细胞核形态变化等特征性指标显示：该种蝗虫精子发生过程总体可分为5个阶段：精原细胞时期、初级精母细胞时期、次级精母细胞时期、精子细胞时期和精子形成时期,最终成熟的精子通过交配活动排出体外。     

塔形马蹄螺精子发生的超微结构研究

应用透射电镜显微镜技术观察塔形马蹄螺(Trochus pyramis Born)精子的发生过程。结果表明:塔形马蹄螺精子的发生历经精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞和成熟精子5个阶段。精原细胞呈近椭圆形,染色质分布较均匀,线粒体较少;初级精母细胞较大,染色质凝聚成小块状,线粒体增多;次级精母细胞较初级精母细胞小,线粒体较多,部分线粒体发生融合,呈扁囊状。精细胞的分化可分为5期,主要特点为:Ⅰ期,一些高电子致密颗粒参与顶体的形成;Ⅱ期,核形态由椭圆形到近圆形,再逐渐拉长为长圆柱状;Ⅲ期,核染色质以颗粒状形式凝集成较大的团块;Ⅳ期,线粒体逐步融合、体积增大和嵴发达;Ⅴ期,中心体移动及鞭毛形成,核内染色质凝聚成高电子密度均质化,胞质逐渐减少。成熟精子为原生型,由头部、中段和尾部(鞭毛)3部分组成。     

北方山溪鲵精巢中性类固醇激素的免疫细胞化学研究

探讨3种性类固醇激素在北方山溪鲵精子发育过程中的调控作用.用免疫细胞化学方法对3种激素在山溪鲵精子发生周期不同时期在精巢中的细胞定位进行检测.结果表明雄激素分布在精原细胞的胞质中,尔后转移到精母细胞及精子细胞的核中;雌激素一直存在于生精细胞的胞质及核膜周围;孕激素分布在精原细胞及精母细胞的胞质中,随后在精子细胞的核质中有表达.雄激素在早期的精子发生和转型中起作用,而雌激素主要以非基因组效应参与生精细胞的增殖,孕激素在精子发育后期精子细胞的变态中起作用.3种激素以不同的方式调控精子的发生.     

四平地区6种蝗虫精巢和卵巢发育动态

研究比较了吉林省四平地区6种蝗虫精巢和卵巢发育及其配子发生动态.结果显示:刚羽化的成虫精巢发育程度高于卵巢,蝗虫精巢发育模式呈先增长后降低趋势,卵巢发育模式呈幂指数增长并始终维持在较高的发育水平.从蝗虫精子形成动态来看,精巢管内各时期均有精原细胞、各级精母细胞和成熟精子,但在刚羽化成虫精巢管内精原细胞和初级精母细胞占优势,而老熟成虫精巢管内成熟精子占优势;从蝗虫卵子发生动态来看,成虫早期没有成熟卵子出现,而以1～4阶段卵母细胞占优势,老熟蝗虫以6～8阶段卵母细胞占优势.研究结果证明,蝗虫精巢和卵巢发育出现不同步现象.     

张掖湿地蝗虫多样性调查研究

在张掖湿地采用随机抽样调查,对蝗虫群落组成以及发生规律进行研究。根据张掖湿地植被生态情况,将调查区域植被划分为芦苇湿地、碱荒地、人工绿化地3种生境。结果表明:张掖湿地蝗虫种类有3个总科,8科,18种。其中优势种有4种,即中华稻蝗、无齿稻蝗、东亚飞蝗、日本蚱,其捕获量占总捕获量的百分比依次为31.14%、17.04%、16.13%、10.73%。不同生境蝗虫群落的丰富度指数、多样性指数、均匀度3项特征指数,由大到小依次为碱荒地> 人工绿化地> 芦苇湿地,优势度指数由高到低依次为芦苇湿地>人工绿化地>碱荒地。张掖湿地蝗虫群落的发生规律为:5月中下旬蝗蝻出现,主要活动期出现在7月至10月,8月下旬种类和种群数量均达到高峰期,11月上旬蝗虫完全消失,不再活动。     

三倍体雄性虹鳟(Oncorhynchus mykiss)生殖发育研究

以8~35月龄的三倍体雄性虹鳟为试材,同期二倍体为对照,研究了性腺发育和精子发生过程中组织结构、超微结构以及几种生殖激素含量的变化,以了解染色体多倍化对三倍体虹鳟精巢发育和精子发生的影响,探讨多倍体虹鳟的生殖机制。结果表明,三倍体虹鳟精巢能够发育成熟,但较二倍体发育迟缓,成熟精子量少,精子结构正常、大小不一;精子发生经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子5个阶段,各级生精细胞结构与二倍体相同,但体积较大,发生过程中有大量坏死细胞存在,精子变态期尤为明显;败育的生殖细胞被支持细胞所吞噬;生殖激素仅呈现一个生殖周期变化,与二倍体变化趋势相同但滞后。三倍体雄性虹鳟的生精细胞能够完成减数分裂,滞育于精子细胞阶段,由于非同源染色体不规则的联会,产生的精子绝大多数因含有多余的染色体片段成为非整倍体而败育,只有少数生精细胞能够正常发育成精子。     

刺槐、红花刺槐、四倍体刺槐花粉体外萌发对比

以刺槐(Robinia pseudoacacia L.)、红花刺槐(R.pseudoacacia var.decaisneana Carr.)、四倍体刺槐(Tetraploid R.pseudoacacia L.)的花粉为材料,研究了蔗糖、硼酸和硝酸钙对3种刺槐花粉萌发率及花粉管伸长生长的影响。结果表明:蔗糖、硼酸和硝酸钙对3种刺槐的花粉萌发和花粉管的伸长有明显促进作用,且影响程度因种而异。刺槐和红花刺槐的平均花粉萌发率明显高于四倍体刺槐。不同种刺槐的花粉萌发最适培养基不同;同种刺槐,不同花粉采集期的最适萌发培养基也不尽相同,并得出了每种花粉各自的最适萌发培养基。     

Effects of Paranosema locustae(Microsporidia) on the development and morphological phase transformation of Locusta migratoria(Orthoptera: Acrididae) through modulation of the neurotransmitter taurine

Neurotransmitters are important in the maintenance of phase transformation of Locusta migratoria(Arthropoda: Orthoptera). Here, the effects of the entomopathogen Paranosema locustae on the neurotransmitter taurine in migratory locusts were studied using biochemical methods. After inoculation with P. locustae, the taurine content of infected locusts significantly declined, but F/C values(ratio between the length of hind femur and the width of the head of locust) increased significantly, compared to healthy locusts. Meanwhile, F/C values of infected locusts that were injected with 2 μg of taurine showed no significant differences from those of healthy locusts, demonstrating that supplemental taurine inhibited the changes in morphological phase caused by P. locustae. Paranosema locustae infection also caused longer developmental durations and lower body weights of locusts, but these changes were unaffected after injection with taurine. These results provided new insights into the mechanisms by which microsporidian parasites affected their locust hosts.     

墨西哥湾扇贝生殖细胞发生和性腺发育研究

[目的]研究墨西哥湾扇贝的生殖细胞和性腺发育,为该种的健康养殖提供参考依据。[方法]从湛江乌石墨西哥湾扇贝养殖群体取样,对其性腺进行制片和观察。[结果]墨西哥湾扇贝卵子的发生可分为卵原细胞期、生长初期、生长中期、生长后期和成熟期;精子的发生可分为精原细胞期、初级精母细胞期、次级精母细胞期、精细胞期和精子期。根据滤泡中生殖细胞的形态和所占比例,可将墨西哥湾扇贝生殖腺的发生过程分为增殖期、生长期、成熟期、生殖期和休止期。墨西哥湾扇贝性腺的成熟期和生殖期不同步。[结论]墨西哥湾扇贝雌雄同体,性腺发育不同步。     

慢病毒载体介导成纤维细胞高效稳定表达绿色荧光蛋白

 试验尝试建立稳定表达外源基因的人成纤维细胞系。取成年男性包皮皮肤的皮下组织,分离培养人皮肤成纤维细胞,分别采用脂质体和慢病毒载体介导转染人皮肤成纤维细胞表达绿色荧光蛋白。结果显示,来自成年人包皮皮下组织的成纤维细胞呈梭形,具有快速的增殖和稳定的生长性能。脂质体介导转染的人皮肤成纤维细胞绿色荧光蛋白表达不稳定,阳性细胞表达率低,转染后的人成纤维细胞变得更为细长,细胞生长速度降低。慢病毒载体介导人皮肤成纤维细胞高效稳定表达绿色荧光蛋白,转染后细胞生长性能和形态没有变化,经过多次传代和冻存复苏对人皮肤成纤维细胞绿色荧光蛋白的表达没有影响,通过流式细胞仪对慢病毒介导表达绿色荧光蛋白的人皮肤成纤维细胞检测显示,绿色荧光蛋白表达阳性率为99.85%,并且表达绿色荧光蛋白的人皮肤成纤维细胞细胞均一程度为76.05%。试验证实了慢病毒载体能够高效稳定介导人皮肤成纤维细胞表达绿色荧光蛋白。     

我国古代蝗灾社会反应机制定型期研究

概述了南宋以前各代应对蝗灾的措施,从积极和消极2方面探讨了南宋蝗灾的社会反映机制,指出了蝗灾反应机制在南宋最终定型,并成为南宋以后各代的基本模式。     

大庆地区蝗虫物种多样性初步研究

选择大庆地区有代表性的5个样点,采用野外采集与室内研究相结合的方法对大庆地区蝗虫的物种多样性进行初步研究.结果表明,以蝗虫的外形特征为依据,初步鉴别出该地区蝗虫共6科13属14种,其中古北种8种,为优势种,占总种类数的57.1％,广布种6种,占总种类数的42.9％,无东洋种分布.     

版纳微型猪近交系RNF4基因克隆、多组织qPCR表达及功能生物信息学分析

目的以版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line, BMI)为材料,初步研究STRA8基因的功能,为该基因在猪精子形成过程的作用研究奠定基础。方法以GenBank下载的猪STRA8基因序列JQ965783及多条猪EST序列为参考序列,设计特异性引物扩增版纳微型猪近交系(BMI) STRA8基因。对STRA8蛋白质进行理化特性和功能生物信息学分析,包括二级结构、蛋白功能域、疏水性、跨膜结构、信号肽、亚细胞定位、磷酸化位点以及蛋白质功能分析;搜索并下载其他物种的STRA8蛋白质序列构建多物种系统进化树。应用实时荧光定量PCR技术检测BMI STRA8在版纳微型猪近交系15个组织中的mRNA转录表达水平。结果获得了包含编码序列1 101 bp的全长序列1 316 bp,编码366个氨基酸,序列已提交GenBank,基因登录号KU705622,蛋白质分子量(Mw) 41.06 ku,等电点(pI) 4.52。STRA8二级结构中α螺旋含量最高,占52.19%;含有1个蛋白功能域;在氨基端有1个HLH结构域和1个卷曲螺旋区域,在羧基端有2个低复杂度区域;疏水性结果表明STRA8基因N末端、C末端均亲水;无跨膜结构,无信号肽序列;该蛋白质位于细胞核中的概率是56.5%;STRA8蛋白共有34个磷酸化位点;系统进化结果表明：BMI与羊、水牛的相似度最高。STRA8基因mRNA在检测的BMI 15个组织中呈现差异表达现象,睾丸中表达量最高。结论结果将为进一步研究STRA8基因在猪精子发生方面的作用及功能提供参考。