酒炙龙胆炮制工艺研究

目的研究酒炙龙胆的炮制工艺,为酒龙胆质量标准研究提供理论依据。方法以龙胆苦苷含量、浸出物量为指标,对加酒量进行单因素考察;以炒制温度、炒制时间、闷润时间为考察的因素,采用正交实验方法,优选出龙胆最佳酒炙工艺。结果优选出龙胆最佳酒炙的工艺为:龙胆100g,加15g黄酒,拌匀,闷润1小时,100℃下炒制25min。结论本实验可为酒炙龙胆炮制工艺的标准化提供参考依据。     

酒炙知母炮制工艺研究

目的研究酒炙知母的炮制工艺,为酒知母质量标准研究提供理论依据。方法以芒果苷含量、知母皂苷BⅡ含量为指标,以炒制时间、闷润时间、炒制温度为考察的因素,采用正交实验方法,优选出知母最佳酒炙工艺。结果优选出知母最佳酒炙的工艺为:称取知母100g,加18g黄酒,拌匀,闷润0.5小时,80℃下炒制20min,取出,晾干。结论本实验可为酒炙知母炮制工艺的进一步标准化研究提供参考。     

大豆C2H2型锌指蛋白转录因子家族全基因组鉴定及表达分析

为进一步寻找与大豆产量相关的潜在候选基因,利用生物信息学与转录组学技术,通过拟南芥(Arabidopsis thaliana L.)C₂H₂型锌指蛋白(C₂H₂ zinc finger protein)序列BLAST映射,将从大豆(Glycine max)的基因组数据库中筛选出的44个C₂H₂锌指蛋白家族成员分成11个亚家族,并对其进行系统进化、保守结构域、顺式作用元件、测序数据和转录组数据等相关分析。结果表明：C₂H₂锌指蛋白家族成员分布于17条大豆染色体中,且每个亚家族的基因结构域较为相近,呈高度保守性。成员启动子部分含有抗逆境胁迫以及激素相关的调控元件。RNA-seq结果显示,有8个基因在不同植物组织内表达差异显著。荧光定量PCR分析表明,3个基因的分析结果为SUPERMAN的转录调节因子,GmC1-1iZFP42为Ln位点的相应基因,参与大豆叶形和籽粒的调控,GmC1-1iZFP12、GmC1-1iZFP...     

茶树多酚氧化酶基因的生物信息学分析及原核表达

通过PCR方法扩增出迎霜品种茶多酚氧化酶（PPO）的编码区序列,并将其登录于GenBank,注册号为GQ214317。生物信息学分析表明,该基因编码区全长1800bp,编码599个氨基酸,分子式为C₃₀₀₈H₄₆₇₇N₈₁₃O₉₀₀S₁₈,存在两个铜离子结合域,没有跨膜区;进化树分析表明,茶与毛叶茶亲缘关系最近。成功构建了原核表达载体pET-ppo,并转化E. coli BL21（DE3）,实现了PPO的原核表达。SDS-PAGE电泳检测结果表明,在71KD处有一条特异蛋白条带,与预测大小相符。     

醋两头尖饮片质量标准研究

目的根据前期醋两头尖饮片最佳炮制工艺研究参数,建立醋两头尖饮片质量标准。方法对10批不同来源的醋两头尖饮片进行外观性状观察、显微鉴别、薄层色谱鉴别,测定醋两头尖饮片的水分、总灰分及酸不溶性灰分、醇溶性浸出物含量,采用高效液相色谱法对含量进行测定。结果依据10批不同来源的醋两头尖饮片测定结果,制定醋两头尖饮片质量标准。结论该方法稳定性强、专属性高、重现性好,可用于醋两头尖饮片的质量控制。     

海南黎药海巴戟药材质量标准研究

为建立黎药海巴戟药材质量标准,为其质量控制及资源开发利用提供科学依据。依据《中国药典》2015 年版中药质量标准研制的要求,对药材性状、鉴别、检查、浸出物、含量测定等进行研究。明确了海巴戟药材性状和显微结构特征,并建立了其专属性薄层色谱鉴别方法;规定海巴戟药材多糖含量不得少于 6.0%、东莨菪内酯含量不得低于 0.017%、水分不得超过 10.0%、总灰分不得超过 6.0%以及醇溶性浸出物不得少于 20.0%。本研究制定的黎药海巴戟药材质量标准,可为该药材的质量控制提供依据。     

静电纺丝制备魔芋葡甘聚糖-纳米四氧化三铁纳米纤维膜结构及性能

将魔芋葡甘聚糖-纳米四氧化三铁共混,通过静电纺丝技术进一步制备纳米纤维膜,研究纳米四氧化三铁、KGM、甘油、Na₂CO₃含量对纳米纤维膜力学性能的影响。结果表明,纳米Fe₃O₄、KGM、甘油、Na₂CO₃含量对纳米纤维膜性能有较大影响,当纳米Fe₃O₄含量为1.0%,KGM含量为1.2%,甘油含量为0.1%,Na₂CO₃含量为0.1%时,制得的纳米纤维膜的拉伸强度为28.35 MPa,断裂伸长率为6.42%。X射线衍射（XRD）和扫描电镜（SEM）证明静电使KGM分子和Fe₃O₄粒子间存在着较强的相互作用,形成纤维表面的微孔结构薄膜。此外其静电纺丝增加了薄膜的性能,静电纺丝使膜的拉伸强度和断裂伸长率分别提高了72.4%和32.0%,水蒸汽透过系数和氧气透过率分别降低了35.2%和49.7%,且通过静电纺丝可使膜具有一定抗氧化性能。     

软枣猕猴桃UPLC指纹图谱研究

目的 建立软枣猕猴桃超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱分析方法,为满药软枣猕猴桃质量评价提供依据。方法 选用C₁₈柱SVEA A132V1 C₁₈(50mm×2.1mm,1.7μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.3ml/min,检测波长210nm,洗脱时间30min。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”,建立指纹图谱并进行相似度评价。结果 建立了软枣猕猴桃特征指纹图谱,标定共有峰9个,13批软枣猕猴桃其相似度均≥0.85,不同批次指纹图谱相似度较好。结论 该UPLC指纹图谱简便、稳定,具有可靠性,可为进一步研究制订软枣猕猴桃的质量标准提供依据。     

五味子不同炮制品中鞣质含量的测定

目的研究不同炮制方法对五味子中鞣质含量的影响。方法对五味子采用炒制、醋制,酒制等8种炮制方法,以没食子酸为对照品,运用分光光度计法,得到五味子不同炮制品中鞣质的含量。结果鞣质含量最高的为醋制五味子(28.79%),含量最低的是炒五味子(2.04%),其他几种炮制品分别是:酒蒸(13.39%)、清蒸(4.64%)、生品(4.31%)、盐蒸(3.66%),炒炭(2.61%)、炒焦(2.11%)。结论不同的炮制方法对五味子中鞣质含量有影响。     

海藻渣与镁配施对红壤理化性质和烟草生长的影响

针对部分红壤地区土壤酸性强、有效养分含量低及透气性差等特性,研究了硫酸镁和海藻渣配施对红壤理化性质及烟草生长的影响,为烟区红壤改良提供理论基础。采用盆栽试验,设置6个处理,CK：对照,不加镁和海藻渣;MS：单独施用硫酸镁,每千克土施用0.375 g;SF：单独施用海藻渣,每千克土施用50 g;C₁：每千克土施用MgSO₄ 0.375 g+海藻渣50 g;C₂：每千克土施用MgSO₄ 0.563 g+海藻渣75 g;C₃：每千克土施用MgSO₄ 0.75 g+海藻渣100 g。烟草收获时,测定并分析不同处理对土壤pH、有机碳、矿质养分含量、土壤容重、总孔隙度,以及烟草农艺性状、烟叶矿质养分含量等的影响。结果表明：单独施用硫酸镁或海藻渣以及硫酸镁与海藻渣配施后,烟草株高、茎粗和叶片数等农艺性状明显改善,生物量比对照显著提高;硫酸镁单施处理中烟叶的P和Mg含量比对照显著提高,海藻渣单施及硫酸镁与海藻渣配施的烟叶P、K和Mg含量比对照显著提高;C₃处理土壤pH比对照提高0.38个单位,碱解氮、有效磷、速效钾、交换性钙和交换性镁含量分别比对照提高了42.85%、60.01%、33.73%、253.02%和689.07%;C₁、C₂和C₃处理土壤有机碳含量分别比对照提高了212.9%、385.7%和540.7%;海藻渣单施及与镁配施对土壤有效磷、速效钾、交换性钙和交换性镁含量显著提高;海藻渣单施或与镁配施能显著降低土壤容重并提高土壤总孔隙度;C₃处理土壤容重比对照显著降低9.78%,总孔隙度比对照显著提高8.87%。因此,海藻渣和硫酸镁配施能促进红壤中烟草的生长,并有效改善红壤的理化性状。     

芒果AP2/ERF转录因子MiERF2基因的克隆及表达分析

芒果(Mangifera indica L.)是热带地区主要的经济作物之一,也是典型的呼吸跃变型水果,其成熟衰老与乙烯有关。AP2/ERF转录因子在植物中广泛存在,研究发现这类转录因子参与果实内源乙烯合成的信号转导,是乙烯信号通路中的关键基因,在植物生长发育、逆境胁迫响应及贮藏运输过程中发挥重要作用。为了探究AP2/ERF转录因子对采后芒果成熟衰老的影响,本研究以贵妃芒果品种为研究对象,通过PCR技术克隆得到了1个长度为915 bp,编码305个氨基酸的MiERF2基因。通过生物信息学分析得知：MiERF2蛋白分子式为C₁₄₄₉H₂₂₅₉N₄₃₃O₄₇₀S₁₁,分子量为33 618.16 Da,总原子数为4622,理论等电点为7.66,带30个正电残基,带29个负电残基,蛋白具有亲水性,结构不稳定;MiERF2蛋白不含信号肽和跨膜区域,磷酸化修饰以苏氨酸为主,包含1个AP2保守结构域;二级结构以66.12%的无规则卷曲为主,还含有24.67%的α-螺旋、1.32%的β-折叠、7...     

三七花质量标准研究

目的参考地方标准对三七花质量标准进行研究,以指导各药厂生产及为药典中相关标准的建立提供依据。方法参照《中国药典》2015年版四部通用检测方法分别对三七花的水分、总灰分、浸出物、主要有效成分含量进行了测定。结果依据中药质量标准制定指导原则及相关检测方法,根据实验数据,初步拟定三七花水分含量不超过15.0%,总灰分不得超过7.0%,水溶性浸出物不得少于49.0%,人参皂苷Rb2、Rb3含量分别不得少于1.0%和3.0%。结论根据实验结果,含量测定部分尚需进一步考察方法,除此之外,该实验所探讨的其他部分符合国家有关中药材质量标准制定要求,能够对三七花的质量标准的建立提供一定的借鉴作用。     

三七精华液的配方设计研究

中药化妆品作用温和、安全、刺激性小,目前市场上以三七为主具有抗炎祛痘功效的化妆品较少,为了填补这一市场空白,我们将对三七精华液进行研究与开发。以三七、黄芩和苦参为原料,采用正交试验法对药材配方工艺进行优化,以各样品的pH值和抑菌效果作为评价指标,找出一组最佳的药材配方。并对其样品进行脱色,之后采用紫外分光光度法对样品中三七皂苷、苦生碱和黄芩苷的含量进行测定。确定了药材的最佳配方为三七:黄芩:苦参=3:3:2,根据2015版《中国人民共和国药典》规定,三七皂苷的含量不得少于5.0%,黄芩苷的含量不得少于9.0%,苦参碱的含量不得少于1.2%。配方中三种药材的含量分别达到了7.7%、9.3%、1.3%,都高于《中华人民共和国药典》规定的含量。所以配方中三七皂苷、苦生碱和黄芩苷的含量达到了《中华人民共和国药典》的标准。本试验的配方表现出明显的抑菌效果,具有潜在的抗炎效果。     

西番莲水通道蛋白PePIP2基因克隆及表达分析

西番莲作为新兴的热带果树，在热带农业中具有非常重要的作用，然而干旱、高温等非生物胁迫严重影响其正常生长发育。相关研究表明水通道蛋白(AQP)能够提高植物的抗逆性，本研究以西番莲‘台农’(Passiflora edulia Sims)为实验材料，利用西番莲的基因组数据，通过同源克隆法从西番莲中克隆得到了一个水通道蛋白基因PePIP2，其开放阅读框(open reading frame,ORF)为861 bp，编码286个氨基酸。对其进行生物信息学分析，其分子式为C₁₄₁₇H₂₁₅₆N₃₆₀O₃₇₃S₈，预测分子量为30 459.37 Da，等电点为8.84，亚细胞定位于细胞膜上。启动子区域分析显示其含有参与胁迫应答的顺式作用元件。对其进行干旱、高盐、低温、高温胁迫下的表达分析，结果表明：PePIP2能够受到干旱、高温和低温胁迫的诱导表达，其中在土壤含水量为50%，在45℃高温处理4 h和0℃低温处理48 h，其表达量最高。在烟草中进行瞬时表达，在不同时间的干旱胁迫处理下，PePI...     

太空诱变百子莲SP1代植株的性状鉴定及观赏性评价

太空搭载诱变是选育新品种的有效方法。本研究以太空搭载种子诱变的百子莲SP₁代实生苗为材料，以国际百子莲新品种测试标准为指导，对29株8~10年生苗的形态指标进行测量。采用主成分分析法从15个形态指标中提取出6个主成分，利用模糊综合评价法对受试植株进行整体观赏性评价；以多样性较高的观赏部位——花（花序）为对象，采用层次－关联分析法对百子莲花部的观赏性进行评价。结果表明，受试植株在15个形态指标上的差异显著，各指标之间存在极显著或显著的相关性，相关性系数集中在0.2~0.6之间。综合主成分分析和主因子分析表明，在百子莲诱变群体中，与株高、花序型相关的因子对观赏性影响较大，这些也是易产生变异的性状。建立综合评价函数对29个受试植株的观赏性进行评价，筛选出总体观赏性较高的植株，如植株506、445、319的花量、花序高度等指标均较高，适合进一步无性繁殖保持其优良性状。对花部的15个指标进行加权灰度关联系数计算，排序前6的指标为花量C₁、花期C₁₃、花色C₇、花序直径C₂、初花度C₁₄和小花苞色C₈，每个指标权重均大于6%，权重总和大于70%。结合连续2 a的调查发现，花色、花梗色、花量、初花度等指标相对稳定，不易受环境影响，由此筛选出花色具有渐变特征的植株445，适合作为杂交育种的材料，通过杂交选育获得更具观赏性的后代。通过单一指标和整体评价相结合的方式进行单一指标的变异株选择，利用热图法评价太空诱变的百子莲成年植株在生长过程中的性状变化。本研究初步建立了百子莲植株和花部的观赏性评价体系，对百子莲新品种的选育具有较好的借鉴意义。     

异常威克汉姆酵母纯种发酵淡豆豉的炮制工艺研究

淡豆豉是一种以黑豆为主要发酵原料的传统药食同源中药，但其炮制周期长且质量不稳定。本研究以从淡豆豉自然混菌发酵中筛选出的1株具有β-D-葡萄糖苷酶活性的异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)C5菌株作为发酵菌种，进行纯种酵母炮制型淡豆豉的研制。选取葡萄糖添加量、料液比以及酵母菌接种量3个因素进行单因素试验。利用响应面法分析3个因素对大豆苷元产量的影响，并对淡豆豉的炮制工艺进行优化。结果表明：料液比和葡萄糖添加量对大豆苷元产量的影响极显著，而接种量的影响不显著。最终确定炮制工艺为：葡萄糖添加量8.5%、料液比1∶2.4、接种量10%,炮制周期为6 d。炮制过程中糖苷含量逐渐降低，苷元含量显著升高。大豆苷元和染料木素的产量分别达到964.51和1 123.28μg·g^-1。本研究为酵母炮制型淡豆豉的进一步开发提供科学依据。     

茶黄素激活Nrf2/HO-1通路保护血管内皮细胞氧化应激损伤

为探讨茶黄素（Theaflavin,TF）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的血管内皮细胞氧化应激损伤的保护效应及作用机制,将人脐静脉血管内皮细胞HUVEC分为对照组、损伤组（0.2 mmol·L^-1 H₂O₂处理）和TF预处理组（2.0、5.0、10.0 μmol·L^-1 TF和0.2 mmol·L^-1 H₂O₂处理）。损伤组和TF组均以H₂O₂处理24 h,其中TF组先以不同浓度TF预处理2 h,对照组均以定量溶剂处理。以MTT法测定细胞活力,DCFH-DA探针测定活性氧（ROS）水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot测定蛋白表达水平,相应试剂盒测定乳酸脱氢酶（LDH）、一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化氢酶（GSH-Px）活性。结果显示,与对照组相比,损伤组细胞活力显著降低,LDH释放量增加,NO水平降低,胞内ROS水平升高,MDA增加,抗氧化酶活力降低,细胞凋亡升高;TF预处理能够显著提高细胞活力,降低LDH水平,维持NO水平,降低胞内ROS水平及MDA的产生,提高抗氧化酶活力,并抑制细胞凋亡;进一步研究显示,TF能够激活Nrf2/HO-1通路,且Nrf2抑制剂会显著降低TF的内皮细胞保护效应。可见,TF能够有效抑制H₂O₂诱导的血管内皮细胞氧化应激损伤,其机制至少部分是通过激活Nrf2/HO-1通路实现的。     

弱干旱下H2O2稳态调控大豆抗旱性的信号作用研究

研究弱干旱胁迫下H₂O₂稳态调控大豆抗旱性的信号作用,为大豆抗旱栽培提供理论依据。以大豆科丰1号为材料,用0.5%和5%的PEG-6000模拟不同程度的干旱,测定干旱胁迫下大豆叶片中相对含水量、膜脂过氧化程度、活性氧水平、抗氧化酶活性以及抗坏血酸-谷胱甘肽（AsA-GSH）循环中抗氧化剂含量及相关酶活性。结果表明：干旱胁迫增加了大豆叶片中活性氧的含量,促进了叶片膜脂过氧化,降低了叶片相对含水量;弱干旱胁迫下叶片H₂O₂积累并在抗氧化酶和抗氧化剂的共同作用下形成持续的稳态,产生信号作用,诱导植株在更强干旱胁迫下抗氧化酶活性以及AsA含量的进一步提高,显著降低了丙二醛和H₂O₂含量,提高了抗旱性,维持了叶片相对含水量的稳定。该信号作用同时具备时效性,会随着弱胁迫时间的延长而减弱。     

传统SMB、Varicol和Partial-discard工艺分离纯化ECG和EGCG的比较研究

使用B型三带模拟移动床技术,以C₁₈键合硅胶为固定相,乙醇与水（20︰80,V/V）为流动相,分别采取传统SMB工艺、Varicol工艺和Partial-discard工艺分离98%的茶多酚（TP98）。以得到高纯度和高回收率的ECG和EGCG为目标,分别优化柱配置、切换时间、进样流速、冲洗流速。结果表明,采用Varicol工艺能得到纯度为91.33%的ECG,回收率为91.41%;采用Partial-discard工艺能得到纯度为90.12%的EGCG,回收率为97.83%。相对于传统模拟移动床,Varicol工艺具有提高产品纯度和回收率的优点,Partial-discard工艺具有提高收集液浓度和产品纯度的优点。     

正交设计优化甘草苷提取工艺的研究

研究了以0.1%NaHCO350%EtOH作为溶剂,采用超声波辅助提取,以甘草苷的提取率为评价指标,利用正交实验,筛选最佳工艺条件。结果表明,最佳甘草苷提取条件为：料液比为1：10,超声温度为90℃,超声时间90min。通过此工艺,甘草苷纯品提取率可达1.16%。