非洲菊的AFLP指纹图谱构建

以非洲菊的嫩叶、老叶为材料,用改进后的CTAB—FREE洗涤法、CTAB法均获得HMW基因组DNA;CTAB—FREE洗涤法提取的DNA纯度较高,其操作简单,并能有效地将非洲菊老叶中富含的酚类、多糖类物质去除,使得提取出DNA纯度、浓度都合符AFLP分析要求,取材也最方便;本研究还获得了非洲菊的清晰AFLP指纹图谱,为非洲菊的相关研究提供参考。     

黑杨派无性系多性状相关分析

以9年生黑杨派无性系试验林为试材,分析了多个性状间的相关关系,结果表明,生长性状、干形性状、冠形性状及木材性状间均存在显著的相关关系。首次发现树高与边材宽度存在极显著的遗传正相关,这说明选育高生长快的无性系,其边材宽度将得到提高;生长性状与气干密度的相关性不显著,故对生长性状的改良并不影响木材性状的表现;气干密度与其它力学性状呈显著或极显著遗传正相关,与干缩率相关不显著,这表明选择气干密度大的无性系,其力学性状会得到显著提高,而对干缩率影响不显著。     

杨树部分种的AFLP遗传多样性分析

利用10对AFLP引物对杨属5个派20个种及杂种的44份杨树材料进行分析.结果表明:在这些材料中,不同引物组合的多态性均为100%,表明杨属种间及无性系间在DNA 水平上存在广泛变异.利用 UPGMA 法对 AFLP 数据进行聚类分析,相似系数在 0.765～0.971 之间,派间聚类与经典形态分类完全一致,派内种间及种内无性系间聚类与形态分类基本相同.构建了 44 份材料的指纹图谱,在该图谱中,每个材料都具有自身独特的条带.最后,探讨根据分子标记结果进行杂交亲本选配及杂种子代早期选择的可行性.     

黑杨派杨树新无性系苗期试验研究

１个黑杨派杨树新无性系的苗期试验结果表明：无性系间的生长量和育苗成活率存在显著差异,具有广泛的遗传变异。苗高、地径、胸径、成活率４个性状均受强遗传控制。３个生长性状间表现出极显著的遗传相关。通过聚类分析和综合评定,选出３１个生长量较大、育苗成活率较高的无性系,可参与区域化造林试验。     

建立黑杨派无性系引进种基因库的研究

森林基因资源的保存,不仅对育种学家具有特殊的重要性,更重要的是对长期开发利用的一种保险和投资。许多国家的专家对此都给予足够的重视。F、A、O,在《森林基因资源保存方法》的研究报告中,称基因资源的保存为“明智的利用”(Wise use)。国际资源和自然保护联合会(IU CN)提供的“世界自然资源保护大纲”中,将遗传多样性的保存列为是用来支持、改进生产、维持将来选择机会所必要的措施,是发挥生物的遗传潜能、不断改进产量、品质、持久力、抗性     

黑杨派杨树组培再生系统的研究

建立高效杨树组培再生系统，为杨树良种选育、遗传转化等研究，提供材料和基础手段。采用1／2MS基本培养基，通过不同外植体获得无菌苗，经培养基配方筛选，获得继代和生根苗，再选取组培苗的不同部位为材料，分别诱导形成再生植株，优化成高效的黑杨派杨树组培再生系统。     

黑杨派杨树杂交育种研究初报

利用Ｉ—７２／５８杨×（Ｉ—６９／５５×Ｉ—６３／５１）杨进行杂交育种，用常规方法，选出沂林杨９９、２２、１１、５８、１３、２６和９１号７个无性系，其３年生幼树树高、胸径生长量均大于Ｉ—７２／５８杨１５％以上，表现出明显的生长优势。     

黑杨派南方型杨树在浙江的引种开发展望

从树木引种学的基本原理出发,以黑杨派南方型杨树在浙江引种的初步成果为依据,分析了南方型杨树在浙江的引种开发前景。目前在浙江应重视两个基本问题:一是造林地的正确选择;另一是木材的利用出路。     

黑杨派优良无性系病虫危害情况的调查

从2009年开始,对引进的9个黑杨派优良无性系,以107杨作为对照进行抗病虫害对比筛选试验。通过试验调查并比较分析,无性系在抗溃疡病、白粉病和春尺蠖、美国白蛾等病虫害方面具有差异性,131杨(丹红杨)、276杨、239杨对病虫害抗性较强。在多年的调查中,均未发现桑天牛危害。     

辽西地区黑杨派纸浆材无性系生长与材性综合评价

以辽宁西部的7个黑杨派优良无性系为试材,以13年生的生长量(胸径、树高、)和材性性状(基本密度、纤维长度、壁腔比和1 % NaOH抽提物)为指标进行方差分析和遗传参数估算,6个性状在7个无性系间存在极显著或显著差异,胸径和树高的重复力较高.利用灰色关联度分析与DTOPSIS法对7个无性系进行生长与材性综合评价,47号杨的综合表现最好,这两种方法的分析结果在无性系优劣排序上基本吻合,但无性系间的Ci值差异十分明显,而灰色关联度差异不大.此外,还对分析中各性状权重的确定进行了探讨.     

木瓜属优良品种亲缘关系的AFLP分析

用AFLP技术对29个木瓜属品种的亲缘关系进行分析.用8对引物(EcoRⅠ+3/Mse Ⅰ+3)对基因组DNA进行选择性扩增,共获得1095条扩增带,其中1035条具有多态性,多态带百分率达94.52%,揭示木瓜品种具有丰富的遗传多样性.采用NTSYS-PC软件的DICE法计算样本间的相似系数,UPGMA法进行聚类分析.结果表明:品种间的相似系数在0.4650～0.8339之间,具有相似形态特征的品种优先相聚,29个品种可以划分为4类,且基本对应着贴梗海棠、日本木瓜、木瓜海棠和傲大贴梗海棠,但品种'猩红与金黄'宜归人贴梗海棠内,而'碧雪'的分类地位值得进一步探讨.说明AFLP标记技术能较好地揭示木瓜属种质资源的亲缘关系及演化规律.     

苹果属种、杂交种及品种之间关系的AFLP分析

用AFLP技术,对72个苹果属植物样本(34个种、变种、杂交种及38个品种)进行遗传多样性分析.在64对AFLP引物中选出6对引物进行扩增,得到有效谱带1692条,其中多态谱带1547条,多态谱带比率为91.4%.对72个样品的试验数据进行聚类分析,它们的相似系数为0.54～0.82.在相似系数0.60处参试材料被分为4大类,即佛罗伦萨苹果(Malus florentina)为一类;绿苹果组(Sect.Choromeles)和多胜苹果组(Sect.Docyniopsis)分别各聚一类;花楸组(Sect.Sorbomalus)、脱萼组(Sect.Gymnomeles)和苹果组(Sect.Malus)聚为一类,所有苹果品种和观赏海棠品种全聚在原产亚洲的花楸组、脱萼组及苹果组中.亚洲原产的苹果属植物对于苹果及观赏海棠品种的发展起重要作用.根据试验结果及文献资料,支持将佛罗伦萨苹果组(Sect.Florentinae Cheng M.H.)成立单种组;建议将原属花楸组植物除佛罗伦萨苹果外,全部并入苹果组;取消脱萼组,将其组内的植物全部并入苹果组.     

引进葡萄柚品种基因资源的AFLP分析

采用AFLP分子标记技术,对引进的9个葡萄柚品种基因资源进行分析,评价引进资源的遗传多样性,揭示遗传结构和品种间亲缘关系,为引进葡萄柚品种的进一步开发利用和遗传改良提供基础信息。结果表明,筛选出的7对引物共扩增出263条带,多态带比率为7.22%。多态性标记百分率、观测等位基因数、有效等位基因数、Nei’s基因多样性指数和Shannon信息指数在物种水平分别为7.22%、0.023 4、0.008 0、0.6592和0.258 5,而在品种水平它们分别为2.41%、1.024 1、1.013 2、0.008 0和0.012 2。基因分化系数Gst为0.659,表明葡萄柚的遗传差异主要来自于品种之间。9个品种间的遗传距离变幅在0.000 5~0.037 1之间,平均为0.025 8。基于UPGMA的聚类结果将9个品种分为2组,火焰、矮化、亨路比、哈路比、帕利斯和瑞路比聚为一组,里德马叙、里约红和星路比构成另一组。     

杨属部分种及杂种的AFLP分析

利用13对AFLP引物对杨属4个派19个种及杂种的47个无性系进行分析,共检测到858个标记,其中多态性标记为771个,多态性位点的百分率为89.9%,每对引物产生的多态性位点的百分率在80.7%～98.1%之间,表明杨属种间及无性系间在DNA水平上存在广泛变异.根据AFLP标记结果计算杨属派间、派内种间、种内无性系间分子遗传距离,对它们的亲缘关系进行定量描述.聚类分析结果表明,派间聚类与经典形态分类完全一致,派内种间及种内无性系间聚类与形态分类基本相同.最后,探讨根据分子标记结果进行杂交亲本选配及杂种子代早期选择的可行性.     

木麻黄AFLP分析体系的建立及引物筛选

采用CTAB法改良技术提取木麻黄基因组DNA,在提取液中加入2%β-巯基乙醇防氧化和2%的PVP去除酚类等物质,获得高质量的基因组DNA,以满足AFLP对模板DNA高质量的要求;采用分步酶切和连接后,进行预扩和选扩,摸索建立和优化了木麻黄AFLP分析体系,探讨了木麻黄AFLP分析的影响因素;从64对AFLP核心引物组中筛选出了8对适合木麻黄分析的引物组合.同时探讨了AFLP技术在木麻黄研究领域的应用前景.     

闽楠、红楠AFLP反应体系建立

以闽楠、红楠总基因组DNA为模板,对AFLP分析各环节的条件进行了优化和筛选,建立了适合于闽楠、红楠AFLP分析的最佳反应体系.其中:酶切反应条件为在20μL反应体系中,加入模板DNA 150 ng,Buffer22μL,BSA 0.2μL,EcoRI 3U,Msel 2U,37℃酶切4 h,65℃变性10 min,4℃保存;连接反应条件为将酶切产物中加入5μL连接体系(包括T4 Buffer 2.5μL,EcoRI接头5 pmol,MseI接头50 pmol,T4连接酶1U),16℃连接过夜.预扩增反应条件为在20μL体系中,加入稀释25倍的连接产物5μL,Mg2+(25 mM/L)1.6μL,dNTP(2 mM/L)2 μL,预扩增引物E00、M00各30 ng,Taq酶1U.选择性扩增反应条件为:在20μL体系中,加入稀释100倍的预扩增产物5μL,Mg2+ 1.2μL,dNTP 2μL,选择性扩增引物(E+3/M+3)60 ng,Taq酶1U.本实验结果为闽楠、红楠AFLP分析打下了良好的实验基础.     

海南岛青梅AFLP标记的遗传多样性

采用AFLP标记检测海南岛青梅7个主要自然居群192株个体的遗传多样性及遗传结构.应用筛选出的6对引物共扩增出频率大于5.00%的位点777个,其中多态位点比例为99.61%(774).在种级水平上,Nei's基因多样性指数(H)为0.266 1,Shannon多态性信息指数(I)为0.420 4;总基因多样度(H,1)为0.268 4.居群水平的平均多态性位点数和多态性比例为617个和79.45%;H和I平均值分别为0.215 3和0.335 2.遗传分化指数(Fst)和基因流(N,m)分别为0.198 0和1.012 7.UPGMA聚类和遗传距离与空间距离相关性分析结果表明,居群间遗传亲缘关系与其地理位置关系不明显(P=0.230 0,r'2=0.232 5.综合研究结果表明,青梅具有较高的遗传多样性,居群间有一定的遗传分化.建议采取人工促进天然林下层苗木生长和人工造林等措施,促进现有青梅居群遗传多样性保育和发展.     

刺五加AFLP分子标记技术体系的建立

用改良的的试剂盒法提取刺五加叶片的基因组DNA,可以获得高质量的刺五加基因组DNA,DNA降解较少、污染低、电泳条带清晰,可以用于PCR扩增反应,可以被内切酶EcoRⅠ和MseI彻底消化。通过优化酶切反应、引物连接、预扩增、选择扩增,建立了优化的刺五加AFLP分析技术体系,从64对引物中筛选到5对高效扩增引物,并利用这5对引物在6个刺五加种源中获得了89个多态性AFLP分子标记。建立了利用红外荧光检测技术和Li-Cor4300DNA分析系统,进行刺五加AFLP分析的分子标记技术。