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福建黄兔线粒体DNA的限制性内切酶分析 总被引:2,自引:0,他引:2
本文用差速离心法分离福建黄兔线粒体,氯化铯超速离心法纯化线粒体DNA。对纯化的mtDNA用BagII,BamHI,ClaI,EcoRI,EcoRV,MluI,PstI,PvuI,SacI等9种限制性内切酶进行酶切分析。共识别了17个酶切位点。经测算福建黄兔mtDNA的分子量约为18.45Kb。 相似文献
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云南保种山羊线粒体DNA限制性酶切研究 总被引:18,自引:0,他引:18
采用碱变性法,提取来自云南省不同地区4个保种山羊的13个个体的线粒体DNA(mtDNA),并用ApaⅠ,AvaⅠ,BamHⅠ,BclⅠ,BcIⅠ,BglⅡ,ClaⅠ,DraⅠ,EcoRⅠ,EcoRⅤ,HaeⅠ,HindⅢ,KpnⅠ,PstⅠ,PvuⅡ,SacⅠ,SalⅠ,SmaⅠ,StuⅠ和XhoⅠ等20种限制性内切酶进行酶切分析。结果发现它们的线粒体DNA的分子量大小约为15.8Kb;不同限制性内切酶的酶切位点分别为:DraⅠ有7个酶切位点,AvaⅢ有6个酶切位点,EcoRⅤ和StuⅠ共有5个酶切位点,HindⅡ和HaeⅡ有4个酶切位点,BamHⅠ,BglⅡ,PstⅠ和PvuⅡ有3个酶切位点,ApaⅠ,ClaⅠ有两个酶切位点,其余有1个酶切位点。各保种山羊间未发现变异,说明云南的4个保种山羊极可能来自于共同的母性祖先。 相似文献
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实验兔线粒体DNA多态性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
用ECORI,ECORV,BamHI,HindⅢ,PtuI,SmaI,Xbol,ClaI,SacI,BglⅡ等11种酶,用mtDNA限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)技术,分析了国内几个省区的实验用兔mkDNA多态性。结果表明,在研究的64个个体中,共检出15种限制性态型,归结为4种不同的限制性类型,限制性类型的差异主要来源于少数几个限制 位点的偶然突变,提示这些免疫mtDNA变异度很低,遗传 相似文献
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藏绵羊线粒体DNA遗传多样性研究 总被引:25,自引:4,他引:21
本文用ApaI,AvaⅡ,BamHI,BclⅡ,ClaI,EcoRⅤ,HindⅢ,HpaI,KpnI,PstI,PvuⅡ,XbaI,XhoI等14种内切酶,分析了12头藏绵羊mtDNA的限制性片断长度多态性,共检测了35个酶切位点,发现AvaⅡ,ClaI,PvuⅡ三种酶切类型具有多态性,根据不同个体的mtDNA的酶切类型,发现藏绵羊存在三种mtDNA单倍型,计算mtDNA多态度π值为0.0012, 相似文献
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云南地方猪种在生境,形态外貌,细胞遗传,血液蛋白等均表现出较丰富的多样性,但mtDNA的是度很低。结果分析表明;mtDNA多态性的贫乏并不能代表云南猪种的群体结构单一,体现了猪种进化的不平行性,此现象很可能是长期以来人工强烈选择的结果。 相似文献
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采用RFLP技术 ,对四川白鹅和郎德鹅及其杂交后代进行了线粒体DNA多态分析。在所使用的19种限制性内切酶中 ,有4个酶检测出多态 ,共获得两种mtDNA单倍型 ,四川白鹅和以四川白鹅为母本杂交后代的mtDNA为Ⅰ型 ,郎德鹅的mtDNA为Ⅱ型。以上结果为中国鹅和欧洲鹅存在两种不同起源学说提供了分子遗传学的证据。EcoRV、HaeⅡ、HiucⅡ和KpnⅠ四种限制性内切酶的两种限制性态型可以作为鉴别两种不同起源家鹅的母系分子遗传标记。线粒体DNA在家鹅中也遵循严格的母系遗传。(摘自《畜牧兽医学报》1998,… 相似文献
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新城疫病毒F48E9株HN基因的克隆与酶切分析 总被引:9,自引:0,他引:9
为深入探讨新城疫病毒(NDV)的结构与功能的关系,扩增和克隆了F48E9株NDV的HN基因。首先以提取的F48E9株NDV基因组RNA为模板逆转录合成第一链cDNA,然后用HN基因特异性引物作PCR扩增HNcDNA,结果得到1条分子量约1.8kb的DNA带,与NDVHN基因的大小一致。Southernblot杂交进一步证实其为HN特异性cDNA。随后采用平端连接法将其克隆到pSV·Sportl质粒中,应用限制性内切酶EcoRI、ScaⅠ、MluⅠ、ApaⅠ、PstⅠ、和SmaⅠ对NDVF48E9株HNcDNA重组质粒作单酶或双酶切,结果表明,NDVF48E9株HN基因较HitchnerB1株的HN基因缺少1个MluⅠ位点(705bp左右),多1个PstⅠ位点(802bp左右)。 相似文献
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四川白鹅朗德鹅及杂交后代线粒体DNA多态研究 总被引:7,自引:1,他引:6
采用RFLP技术,对四川白鹅和朗德鹅及其杂交后代进行了线粒体DNA(mtDNA)多态分析,在所使用的19种限制性内切酶中,有4个酶(EcoRV,HaeⅡ,HincⅡ和KpnI)检测出多态,共获得两种mtDNA单倍型,四川白鹅和以四川白鹅为母本杂交后代mtDNA为I型,朗德鹅的mtDNA为Ⅱ型,以上结果为中国鹅和欧洲鹅存在两种不同起源学说提供了分子遗传学的证据,EcoRV,HaeⅡ,HincⅡ和Kp 相似文献
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对猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N)作为ELISA抗原进行了研究,将编码PRRSVN蛋白的基因0RF7cDNA插入杆状病毒表达载体pBlueBacHis2A,通过同源重组获得了重组杆状病毒ORF7-AcMNPV,感染昆虫细胞SF9表达了N蛋白,占细胞总蛋白的7.07%,纯化后作为抗原建立了间接ELISA,与IDEXX公司的ELISA诊断试剂盒有96%的符合率,与IFA有100%的符合率。试验证实:PRRSVN蛋白在昆虫细胞中得到高效表达且是检测PRRSV抗体的良好抗原。 相似文献
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马立克氏病病毒(MDV)糖蛋白D基因的分离克隆,定序及其在大肠杆… 总被引:1,自引:0,他引:1
用聚合酶链式反应(PCR)技术,从马立克氏病病毒(MDV)GA株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)基因组DNA中扩增出MDV糖蛋白(gD)抗原基因1209bp编码序列。将该PCR扩增产物于EcoRI和KpnⅠ位点克隆进行pUC18质粒载体中。将gD重组pUC18质粒DNA用Digoxigenin(Dig)标记后,在Southern blot中,该探针能识别MDV基因组DNA的Bam HI-A克隆中的A 相似文献
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猪FSHβ亚基基因RFLPs研究初报 总被引:22,自引:0,他引:22
本文用猪FSHβ基因cDNA作为探针,对二花脸猪、梅山猪、长白猪、大约克猪、香猪基因组DNA进行EcoRI、BamHi和HindⅢ三种性内切酶的Southern印迹分析,发现猪品种之间在该位点变异较大,而且发现FSHβ/RamHIRFLPs中,太湖猪表现出品种内一致性。本研究为进一步分析FSH是否对太湖猪高的排卵率有影响了一定基础。 相似文献
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大肠杆菌不耐热性肠毒素LT_B基因的克隆及其核苷酸序列分析 总被引:12,自引:0,他引:12
用内切酶SacⅠ和HindⅢ双酶切大肠杆菌质粒pEWD299,回收505bp的LTB基因片段,再将载体pUC18用SacⅠ和HindⅢ双酶切,最后将pUC18DNA与505bp的LTBDNA进行连接,转化至受体菌DH5α中,经SacⅠ/HindⅢ、EcoRⅠ/HindⅢ酶切反应鉴定重组子,得到了理想重组子质粒pXLT1。再将pXLT1进行EcoRⅠ酶切、大肠杆菌聚合酶ⅠKlenow大片段补平、HindⅢ酶切处理,然后与用HicⅡ和HindⅢ酶切的pUC18连接,转化至受体菌DH5α中,经XbaⅠ/HindⅢ酶切反应鉴定重组子,得到了理想重组子质粒pXLT1-1。将质粒pXLT1-1进行核苷酸序列分析,确定了插入的LTB基因与载体的连接向位及其全部核苷酸序列 相似文献
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产蛋下降综合征(EDS-76)病毒DNA酶切图谱分析 总被引:4,自引:0,他引:4
选用EcoRI、PstⅠ、PvuⅡ、HindⅢ、BglⅠ和BglⅡ6种限制性内切酶,对国内4株EDS-76病毒鸡源分离株和国外标准株AV-127及1株鹅源腺病毒的DNA进行酶切图谱的比较,结果发现4种鸡源分离株与AV-127株用上述6种酶切的片段数分别为4、8、10、10、6和7条。各酶切图形、片段大小亦十分相似,表明均为EDS-76病毒。EcoRI-HindⅢ和PstI-EcoRI的双酶切也得到同样结果。鹅源分离株的酶切片段数分别为6、7、9、7、4和10条,酶切图形和片段大小均与AV-127有很大不同,表明该分离株可能为1株血清型相同而基因组不同的EDS-76鹅腺病毒。 相似文献
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产蛋下降综合征(EDS—76)病毒DNA酶切图谱分析 总被引:13,自引:3,他引:10
选Eco,Ri,Pst,I,Pvu III,HindIII,Bg1It和Bg1III6种限制性内切酶,对国内4株EDS-76病毒鸡源分离株和国外标准株AV-127及1株鹅源腺病毒的DNA进行酶切图谱的比较,结果发现4种鸡源分离株子AV-127株用上述6种酶切的片段数分别为4,8,10,10,6和7条。各酶切图形,片段大小亦十分相似,表明均为EDS-76病毒。EcoRI-HindⅢ和Pst-I-Ec 相似文献
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狂犬病病毒糖蛋白转基因小鼠的构建研究 总被引:1,自引:1,他引:0
将狂犬病病毒糖蛋白cDNA BglⅡ(1.67kb)片段正向插入pMT010/A^+BamHⅠ切点,构建重组质粒pMT010/A^+-Rgp,用EcoRⅠ+SalⅠ对pMT010/A^+-Rgp进行双酶切后,回收含有狂犬病病毒糖蛋白cDNA和绵羊MT启动子的2.76kb片段,通过显微注射技术将该片段注入小鼠单细胞受精卵雄前核内,在进行胚胎移植后,获得44只小鼠,经PCR、Southern杂交及原位 相似文献
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从2型犬腺病毒的MDCK细胞培养物中提取线状双链病毒基因组DNA,利用限制性内切酶PstI、BglⅠ和HindⅢ分别进行酶切,在1%琼脂糖凝胶上电泳,随后Southern印迹到尼龙膜上,利用Digoxin标记的2型犬腺病毒E3区PCR产物与膜上DNA杂交,结果发现,E3区探针分别与病毒DNA的PstIB片段、BglIAl片段和HindⅢA2、B2片段呈现阳性杂交反应,该结果为E3区的克隆及犬腺病毒 相似文献
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用猪细小病毒免疫BALB/C小鼠,融合其脾细胞和SP2/O骨髓瘤细胞,筛选出5株分泌抗猪细小病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞系,用交叉HI法对2株McAb作特异性分析,该McAb只特异地与PPV发生反应,而不与日本乙型脑炎,犬细病毒发生反应,用以建立检测猪小病毒本的ELZSA,与HI比较,其敏感性及特异性无很高。 相似文献
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天蚕、柞蚕线粒体DNA(mtDNA)的限制性酶切电泳图谱 总被引:2,自引:0,他引:2
采用差速离心和碱变性法,以9种限制性内切核酸酶对天蚕和柞蚕mtDNA进行了单酶切分析,发现这两种蚕的mtDNA在分子长度和酶切类型上存在明显差异。还对天蚕、柞蚕、蓖麻蚕和家蚕的mtD-NA限制性酶切电泳图谱进行了比较研究。 相似文献