HVT免疫鸡羽毛根中病毒抗原的检测

１日龄非免疫鸡,ＨＶＴ常规剂量免疫后,于第３周起,每周采集一次羽毛根,分别作常规ＭＤＶ琼扩抗原的检测,结果显示：在免疫后第３～８周检测,均未观察到特异性ＡＧＰ沉淀线;若取较多数量的富含羽髓的羽毛根,经２ｍｌ磷酸缓冲液（ＰＢＳ）浸提、浓缩胶浓缩约４０倍后,再作上述检测,则分别于免疫接种后的第３～５周都有特异性的ＡＧＰ沉淀线出现,且与感染细胞上清中浓缩的ＨＶＴ及ＭＤＶ琼扩抗原所形成的沉淀线基本吻合,而第６周检测时,仅与ＨＶＴ阳性血清呈微弱阳性,用同样方法对免疫后第６周后的检测结果均表明为阴性。由此推断,免疫鸡羽毛根中含有较低水平的、并与致病性ＭＤＶ抗原具有交叉反应性的ＨＶＴ琼扩抗原,但采用常规ＡＧＰ法不能直接检测到。     

HVT免疫鸡羽毛根中病毒抗原的检测

１日龄非免疫鸡,ＨＶＴ常规剂量免疫后,于第３周起,每周采集一次羽毛根,分别作常规ＭＤＶ琼扩抗原的检测。结果显示,在免疫事第３～８周检测,均未观察到特异性ＡＧＰ沉淀线,若取较多数量的富含羽髓的羽毛根,经２ｍｌ磷酸缓冲液（ＰＢＳ）浸提,浓缩胶浓缩约４０倍后,再作上述检测,则分别于免疫接种后的第３～５周都有特异性的,ＡＧＰ沉淀线出现,且与感染细胞上清中浓缩的ＨＶＴ及ＭＤＶ琼扩抗原所形成的沉淀线基本吻合,     

不同鸡MD疫苗免疫鸡及强毒攻击后羽囊排毒规律

分别以７种鸡ＭＤ疫苗免疫ＳＰＦ鸡和狼山鸡,用琼脂扩散试验（ＡＧＰ）检查鸡群ＭＤＶ强毒攻击后不同时期的羽囊抗原,结果表明,免疫组鸡羽囊排毒高峰推迟,排毒率下降,排毒高峰维持时间短,不同疫苗免疫不同品种鸡后排毒情况有差异,ＣＶＩ９８８和两种二价苗效果优于ＨＶＴ苗。     

MD疫苗免疫雏鸡vMDV攻击后体液免疫球蛋白含量的变化

本实验以马立克氏病（ＭＤ）三价苗（ＳＢ＿１＋８１４＋ＨＶＴ）和ＨＶＴ疫苗免疫１日龄肉用雏鸡，１５日龄时腹腔注射马立克氏病强毒（ｖＤＭＶ）进行攻击，在攻毒后５、２５、４５和７５天用间接ＥＬＩＳＡ法测定实验雏鸡血清、泪液、气管液、胆汁和肠液ＩｇＧ、ＩｇＭ和ｌｇＡ含量的动态变化，结果发现免疫雏鸡强毒攻击后，其血清、泪液和气管液的ＩｇＧ、ｌｇＭ和ＩｇＡ含量显著高于感染对照鸡，胆汁和肠液中ＩｇＡ以及ＩｇＧ、ＩｇＭ显著高于感染对照鸡，其中三价菌免疫鸡的３种免疫球蛋白含量明显高于ＨＶＴ免疫鸡；表明ＭＤ强毒攻击后，免疫雏鸡全身和消化道、呼吸道局部的体液免疫应答显著增强，三价苗免疫鸡的体液免疫反应明显高于ＨＶＴ免疫鸡，并与其较高的免疫保护率相关。     

鸡传染性支气管炎病毒S1基因免疫对鸡的保护作用

将鸡传染性支气管炎病毒肾型 Ｔ 株 Ｓ１ 基因ｃ Ｄ Ｎ Ａ 连接于ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ３ 的 Ｈｉｎｄ Ｉ Ｉ Ｉ与 Ｂａ ｍ Ｈ Ｉ位点之间构建含有 Ｃ Ｍ Ｖ 启动子及 Ｂ Ｇ Ｈｐｏｌｙ Ａ 信号序列的鸡传染性支气管炎病毒 Ｓ１ 蛋白真核表达质粒。实验证明, Ｓ Ｐ Ｆ 鸡肌注免疫后血清 Ｉｇ Ｇ 抗体逐渐升高,至第３５ 日龄左右达到高峰,攻毒后血清 Ｉｇ Ｇ 抗体先下降而后升高,血清 Ｉｇ Ｇ 抗体升高幅度不及 Ｉ Ｂ 油苗免疫组。质粒 Ｄ Ｎ Ａ 免疫鸡攻毒后有４０ ％ 的鸡可耐过强毒的攻击,说明 Ｓ１ 基因在体内获得了表达并使鸡产生了一定的免疫力。     

鸡马立克氏病活疫苗免疫效力比较试验

用ＨＶＴ冻干苗、ＨＶＴ细胞结合苗、ＣＶＩ９８８细胞结合苗、ＳＢ１＋ＦＣ１２６双价活疫苗、３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６双价活疫苗和Ｚ４＋ＦＣ１２６双价活疫苗等６种鸡马立克氏病（ＭＤ）疫苗免疫ＳＰＦ白来航鸡或普通伊莎鸡，用鸡马立克氏病病毒（ＭＤＶ）强毒ＧＡ株、京－１血毒以及鸡马立克氏病超强毒ｖｖＭＤＶ－Ｍｄ５毒株分别攻击进行免疫效力比较试验。试验表明，ＭＤ单价苗的免疫效力强弱顺序依次是ＣＶＩ９８８、ＨＶＴ细胞结合苗和ＨＶＴ冻干苗，这３种ＭＤ单价苗均能给免疫鸡群提供有效的免疫保护力。ＳＢ１＋ＦＣ１２６、Ｚ４＋ＦＣ１２６和３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６等３种ＭＤ双价苗免疫效力显著高于ＭＤ单价苗，均能给免疫鸡群提供较强的免疫保护力，并能有效地抵抗ｖｖＭＤＶ－Ｍｄ５毒株的致瘤作用。Ｚ４＋ＦＣ１２６和３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６ＭＤ双价苗免疫效力无显著差异     

用鸡胚检测鸡马立克氏病疫苗的免疫效果

将火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗接种于鸡胚卵黄囊、然后检查绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）上病毒痘斑（以下简称“痘斑”）生长情况,以此作为ＨＶＴ疫苗免疫前效力检测的手段,得到满意效果。１材料与方法１．１ＭＤ强毒（ｖＭＤＶ）分离自本公司某鸡场严重感染ＭＤ鸡的血液,经原北京农业大学鉴定为一株ｖＭＤＶ。历年采购的国产和进口ＨＶＴ疫苗３０批次,分甲、乙、丙３组进行观察。１．２经血清学检查（ＭＤ-ＡＧＰ）并证明无ＭＤ抗体的种鸡所产种蛋,按常规方法,孵育到４～５ｄ的鸡胚用于接种;卵黄囊接种已稀释好的ＨＶＴ疫苗,每份ＨＶＴ疫苗分１,２…     

马立克氏病疫苗免疫鸡群强毒攻击后羽囊排毒情况

分别以血清型Ⅱ型马立克氏病病毒（ＭＤＶ）疫苗株（Ｚ４、ＳＢ１）、血清Ⅲ型火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗株（ＦＣ１２６）及二价疫苗（Ｚ４＋ＦＣ１２６、ＳＢ１＋ＦＣ１２６）免疫鸡群，用琼脂扩散试验（ＡＧＰＴ）检查各鸡群ＭＤＶ强毒攻击后不同时期的羽囊抗原。结果，二价苗能使试验鸡羽毛囊强毒排出高峰推迟，排毒率显著下降。     

MD疫苗免疫雏鸡vMDV攻击后免疫器官组织抗体生成细胞的变化

本实验用马立克氏病（ＭＤ）三价疫苗（ＳＢ－１＋８１４＋ＨＶＴ）和火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗分别肌肉注射免疫１日龄ＡＡ肉鸡,１５日龄腹腔注射ＭＤ强毒（ｖＭＤＶ）,攻毒后５,２５,４５和７５ｄ,以彩色免疫金银染色法检测实验雏鸡法氏囊,脾脏,盲肠扁桃体和哈德尔腺的ＩｇＧ,ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体生成细胞的动态变化,结果发现;ＭＤ强毒攻击后,免疫雏鸡法氏囊和脾脏中ＩｇＧ,ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体生成细胞较对照攻毒雏鸡     

肉鸡神经内分泌免疫网络抗传染性法氏囊病病毒感染的机制

以Ａｖｉａｎ鸡为实验对象，研究了神经内分泌免疫网络在传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）弱毒免疫和强毒感染时发生的调节机制。结果表明，ＩＢＤＶ弱毒免疫能获得高滴度的血清ＩＢ－ＤＶ抗体。未免疫肉鸡感染ＩＢＤＶ强毒后会引起免疫功能抑制。ＩＢＤＶ攻毒后，肉鸡血浆皮质酮、ｃＧＭＰ升高，Ｔ淋巴细胞转化率、白介素－２活性明显降低。ＩＢＤＶ弱毒免疫肉鸡遭受ＩＢＤＶ强毒感染后，血浆ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ同时升高并呈现高阈平衡。ＩＢＤＶ攻毒前后，肉鸡血浆ＡＣＴＨ、皮质酮和免疫功能指标间有显著的相关性，提示外来病原入侵后，肉鸡垂体－肾上腺轴可调节免疫功能，主要是抑制非特异性免疫反应而增强特异性免疫反应     

Identification and characterization of Marek's disease virus serotype 1 (MDV1) ICP22 gene product: MDV1 ICP22 transactivates the MDV1 ICP27 promoter synergistically with MDV1 ICP4

A previous report [Virus Genes 6 (1992) 365-378] has shown that the US1 gene of Marek's disease virus serotype 1 (MDV1) encodes a homologue of herpes simplex virus type 1 infected cell protein No. 22 (ICP22). In the present study, we expressed and identified a product of the MDV1 US1 gene in chicken embryo fibroblasts (CEFs) with the aid of a recombinant baculovirus expressing a Flag epitope-tagged MDV1 US1 gene, under control of the SRalpha promoter (composed of the enhancer region of the simian virus 40 early promoter and the R region of the human T-cell leukaemia virus type 1 long terminal repeat). In CEF infected with the recombinant baculovirus, MDV1 ICP22 was specifically and efficiently expressed in the presence of n-butyric acid. The apparent M(r) of the expressed protein was 30,000. Reporter gene assays revealed that MDV1 ICP22 by itself transactivated an MDV1 ICP27 promoter/reporter construct weakly but specifically, and furthermore, worked synergistically with MDV1 ICP4 to efficiently up-regulate the MDV1 ICP27 promoter. MDV1 ICP22 may be a regulatory protein that stimulates viral promoters in co-operation with other viral regulatory proteins such as MDV1 ICP4.     

马立克氏病病毒编码的类白细胞介素8研究进展

马立克氏病(Marek's disease,MD)是由马立克氏病病毒(MDV)引起的一种淋巴细胞增生性肿瘤疾病，病毒的许多成分参与了致肿瘤过程。最近的研究结果发现，MDV编码一种类似于白细胞介素-8的产物，称之为病毒性白介素-8（VIL-8)。这种vIL8与人类IL-8在结构上十分相似，但它对异嗜细胞的趋化作用微弱，而对外周血单核细胞有很好的趋化性，且在MDV溶细胞感染中起重要作用。vIL-8是否能象人类IL-8具有激活单核细胞、增强其吞噬作用、增进毛细血管增生和肿瘤生成等功能尚有待探索，本文就有关vIL-8的作用及作用机制进行了讨论。     

锗—132对健康及人工感染MDV雏鸡肝脏自由基代谢的影响

本文采用电子自旋共振（ＥＳＲ）自旋捕集技术研究了锗－１３２对人工感染马立克氏病毒（ＭＤＶ）雏鸡肝脏自由基代谢的影响。结果显示：健康对照组和健康加锗组雏鸡１０～６０日龄肝脏自由基和锗含量分别为０．４２４±０．０２３３、０．４２７９±０．０２７８×１０１０ｓｐｉｎｓ／ｇ．ｗ．ｗ．和０．０７９８±０．０１３４ｍｇ／ｋｇ、１１．２０１５±０．６９９８ｍｇ／ｋｇ，给雏鸡口服锗－１３２可明显提高肝脏锗含量（Ｐ＜０．０１），但对健康雏鸡肝脏自由基代谢没有影响。攻毒加锗组与攻毒对照组对比结果证实：Ｇｅ—１３２可明显降低人工感染ＭＤＶ雏鸡肝脏自由基产生和脂质过氧化物生成。实验结果从Ｇｅ—１３２抗自由基的角度，为Ｇｅ—１３２抗肿瘤病提供理论依据。     

MSB-1培养物上清液对MDV的作用

研究了马立克氏病肿瘤细胞系（ＭＳＢ－１）培养物上清液对马立克氏病病毒（ＭＤＶ）体外增殖及体内致瘤作用的影响。结果表明，该上清液对体外ＭＤＶ的增殖有明显的特异性的抑制作用，并且这种抑制活性保持至少２３ｄ不降低，而对体内ＭＤＶ的致瘤作用有明显的促进作用，但其本身在鸡体内并无明显的快速致瘤作用。     

MDV Meq基因簇miRNAs基因缺失株的致病性

为了探讨Meq基因簇microRNAs(Meq-clustered miRNAs)对马立克氏病病毒(Mareks disease virus,MDV)致病性的影响,本研究将MDV Meq-clustered miRNAs基因缺失株GX0101ΔMeq-miRNAs感染1日龄SPF鸡,并于感染后90d内进行毒株致死率、致肿瘤率、鸡体质量、免疫器官指数和鸡血液中病毒含量等方面的检测。结果显示:1日龄SPF鸡在接种GX0101ΔMeq-miRNAs后90d内累计死亡率和眼观肿瘤发生率分别为4%和8%,与亲本株GX0101BAC相比分别下降了23.5倍和2.5倍;与鸡胚成纤维细胞(chicken fibroblast cells,CEF)阴性对照相比,GX0101△Meq-miRNAs感染鸡在整个试验期间体质量差异均不显著(P0.05);在感染后14~21d,GX0101△Meq-miRNAs组的法氏囊指数和胸腺指数均显著降低(P0.05);与亲本株相比,GX0101△Meq-miRNAs在血液中的含量及导致的显微肿瘤发生率均下降。结果表明:MDV Meq-clustered miRNAs基因的缺失降低了MDV的致病性,Meq-clustered miRNAs具有调控MDV致病性的功能。     

Coinfection of specific-pathogen-free chickens with Marek's disease virus (MDV) and chicken infectious anemia virus: effect of MDV pathotype

Both Marek's disease virus (MDV) and chicken infectious anemia virus (CIAV) infections are prevalent in chickens throughout the world. In the past decade, MDV strains with increased virulence (very virulent plus MDV pathotype [vv+MDV]) have been isolated. The purpose of this experiment was to determine the effects of coinfection of chickens with CIAV and a vv+MDV isolate. Specific-pathogen-free chickens were inoculated at 1 day posthatch with RB1B (very virulent MDV pathotype [vvMDV]) only, 584A (vv+MDV) only, CIAV only, RB1B + CIAV, 584A + CIAV, or nothing. Samples of spleen, thymus, and bursa of Fabricius were collected at 4, 7, 10, and 13 days postinoculation (DPI). Thymic and bursal atrophy at 13 DPI and final mortality at 30 DPI were significantly greater in chickens inoculated with 584A with or without added CIAV, or with RB1B plus CIAV, compared with birds inoculated with RB1B alone. Both amounts of virus reisolated and levels of virus detected by quantitative-competitive polymerase chain reaction were greater at 4 DPI in 584A inoculates compared with RB1B inoculates. To monitor the early cytolytic infection, northern analysis was done with a probe for the MDV immediate early gene ICP4 (infected cell protein 4). In the absence of CIAV, ICP4 expression was more apparent in chickens inoculated with 584A than in those inoculated with RB1B. CIAV coinfection increased ICP4 expression in the spleens of chickens infected with RB1B. These results indicated that inoculation of chickens with the 584A isolate caused a more robust early cytolytic infection compared with inoculation with RB1B alone and support the classification of 584A as a vv+MDV strain. Coinfection with CIAV exacerbated vvMDV strain RB1B infection. The extent of this exacerbation was less evident when birds were coinfected with 584A and CIAV.     

MDV一种疱疹病毒诱导宿主细胞转化的模型

<正>马立克病病毒(Marek's disease virus,MDV )是引起鸡T淋巴细胞致瘤的α疱疹病毒,该病毒导致一种致瘤性和免疫抑制性禽病,称为马立克病(MD)。已发现的MDV有3种血清型,Ⅰ型为致瘤性的MDV强毒株,Ⅱ型为无致瘤性的MDV毒株,Ⅲ型为火鸡疱疹病毒(简称HVT)。HVT与MDV有明显区别,对鸡无致病性,广泛用于预防MD的活疫苗。近年来,MDV的致瘤基因在疫苗的防御机制下逐渐出现多态性变化和点突变变化~([1]),从而     

提高火鸡疱病毒(HVT)疫苗免疫效果的试验研究

应用ＨＶＴ冻干苗常规免疫雏鸡、二倍剂量免疫雏鸡、常规免疫后又分别于１０日、２１日龄二次免疫雏鸡和未接种任何ＭＤ疫苗的雏鸡，在饲养期间和经鸡马立克氏病强毒（ｖＭＤＶ）攻击后，常规免疫组的ＭＤ发病减少率为６１．９％，二倍剂量组的ＭＤ发病减少率为７１．４％，１０日龄二次免疫组的ＭＤ发病减少率为７６．２％，２１日龄二次免疫组的ＭＤ发病减少率为８１％；与常规免疫鸡比较，二倍剂量免疫和１０日、２１日龄二次免疫鸡的ＭＤ发病减少率可分别提高９．５％、１４．３％和１９．１％。试验结果表明，采用上述三种方法进行免疫接种，可减少母源抗体对ＨＶＴ苗的免疫干扰，明显提高ＨＶＴ苗的免疫效果，其中以２１日龄时二次免疫效果更为明显。     

三种中药复方制剂对鸡MD的影响及其机制的研究

文章应用筛选的三种中药复方制剂,通过拌料给药,采集MDV感染鸡不同时期的血液及组织样本,进行了血液生化指标、免疫指标、机体抗氧化能力等检测分析。结果表明:三种复方制剂能通过在一定程度上提高机体的抗氧化能力、提高机体免疫力和降低端粒酶活性,抗MDV感染的作用效果,其中复方制剂1作用效果更为显著,本研究结果为开发在畜牧生产中具有应用前景的无药物残留的中药抗病毒制剂,提供参考依据。