PPARγ mRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立

过氧化物酶体增殖物活化受体PPARγ对多种炎症都进行着调节,而免疫应激与炎性疾病又具有极其相似的机制,推测PPARγ可能与畜禽免疫应激的调节有关。因此,对PPARγ mRNA准确定量意义重大。试验采用经典的脂多糖（LPS）免疫应激模型,建立了准确检测PPARγ mRNA相对表达量的方法,检测断奶仔猪免疫细胞中PPARγ mRNA的相对表达,从而判断免疫应激是否影响其表达,以进一步探讨PPARγ对仔猪免疫应激调控的影响。     

LPS诱导的仔猪胸腺、淋巴结和空肠中lncRNA-44651和lncRNA-45208 mRNA的表达

为了探究脂多糖(LPS)刺激仔猪发生炎症时炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)、lncRNA-44651和lncRNA-45208在仔猪胸腺、淋巴结和空肠的表达差异,试验选取8头杜×长×大健康断奶仔猪并按照是否注射LPS随机分为对照组和LPS组,各组仔猪在饲喂基础饲粮14 d后,分别按体重100μg/kg腹腔注射生理盐水和LPS,4 h后屠宰仔猪并取胸腺、淋巴结和空肠样品置液氮中保存,采用基因表达测定的方法研究仔猪胸腺、淋巴结和空肠样品相关基因的表达情况。结果表明:LPS刺激4 h后,LPS组仔猪胸腺、淋巴结和空肠中炎性因子TNF-α的mRNA相对表达量均无显著变化(P0.05),IL-1β的mRNA相对表达量均极显著上调(P0.01);LPS组仔猪胸腺中lncRNA-44651的mRNA相对表达量极显著上调(P0.01),lncRNA-45208的mRNA相对表达量显著上调(P0.05);LPS组仔猪淋巴结中lncRNA-44651和lncRNA-45208的mRNA相对表达量均极显著上调(P0.01);LPS组仔猪空肠中lncRNA-44651的mRNA相对表达量极显著上调(P0.01),lncRNA-45208的mRNA相对表达量显著下调(P0.05)。说明lncRNA-44651和lncRNA-45208可能参与了机体的炎症反应,可为后续仔猪机体功能研究提供候选lncRNA。     

复合植物精油对脂多糖诱导的断奶仔猪免疫应激的影响

试验旨在研究复合植物精油(OCT)对脂多糖(LPS)诱导的断奶仔猪的免疫应激的影响。试验选取28日龄左右的杜×长×大三元杂交仔猪,随机分成3个处理组:对照组(基础日粮,注射生理盐水),LPS组(基础日粮,注射LPS),OCT组(基础日粮+50mg/kg OCT,注射LPS)。每组8个重复,每个重复1头猪。于试验第21天注射LPS(100μg/kg体重)或等体积的生理盐水,注射3h后前腔静脉采血进行白细胞分类计数;6h后屠宰,取胸腺、脾脏,-80℃保存,用于测量胸腺、脾脏免疫相关基因白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、核因子(NF-κB)以及转录相关基因转录激活因子3(STAT3)的基因相对表达量。结果表明:(1)与对照组相比,LPS刺激降低了仔猪血液中白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及嗜酸性粒细胞数量(P0.05);与LPS组相比,日粮中添加OCT提高了白细胞的数量(P0.05);(2)与对照组相比,LPS刺激上调了脾脏、胸腺IL-6、STAT3mRNA水平(P0.05),下调了脾脏IL-4、TNF-α及胸腺IL-4、TNF-α、NF-κB mRNA水平(P0.05);与LPS组相比,添加OCT下调了脾脏、胸腺IL-6、STAT3mRNA水平(P0.05);上调了胸腺IL-4、IL-10、TNF-α、NF-κB的mRNA水平(P0.05)。综合上述结果,LPS诱导发生了仔猪免疫应激,OCT在一定程度具有缓解作用。     

脂多糖刺激对断奶仔猪下丘脑-垂体-肾上腺轴PPARγ表达的影响

研究脂多糖(LPS)对断奶仔猪下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)表达的影响。对照组注射生理盐水,试验组注射LPS。注射后1.5 h和3 h采血,3 h采血后屠宰。结果表明:LPS刺激后1.5 h,中性粒细胞含量及其比例显著下降(P<0.05);LPS刺激后3 h,白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞含量显著下降(P<0.05)。LPS刺激后1.5 h,血浆肿瘤坏死因子(TNF)-α、皮质醇和促肾上腺皮质激素释放素激素(CRH)含量显著上升(P<0.05);LPS刺激后3 h,血浆TNF-α、皮质醇和促肾上腺皮质激素(ACTH)含量显著上升(P<0.05);LPS刺激导致下丘脑、腺垂体、肾上腺皮质和髓质中PPARγ阳性细胞百分率显著升高(P<0.05)。这表明LPS导致免疫应激,激活HPA轴,诱导HPA轴PPARγ的表达。     

罗格列酮和双酚A型环氧树脂对脂多糖应激断奶仔猪白细胞分类计数和血液生化指标的影响

试验研究了过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的激动剂和抑制剂对脂多糖(LPS)应激断奶仔猪白细胞分类计数和血液生化指标的影响.选取24头健康断奶仔猪,分为4组,每组6个重复,每个重复1头猪.4个组分别为:对照组;LPS组;罗格列酮(ROS,PPARγ激动剂)+LPS组;双酚A型环氧树脂(BADGE,PPARγ抑制剂)+ROS+LPS组.注射LPS或生理盐水3 h后,前腔静脉采血待测.结果显示:1)ROS缓解了LPS导致的断奶仔猪血液白细胞总数和淋巴细胞数量的降低(P<0.05),BADGE阻断了ROS的缓解作用(P<0.05);2)ROS缓解了LPS导致的断奶仔猪血浆碱性磷酸酶活性的升高(P<0.05)及总蛋白、白蛋白和球蛋白含量的降低(P<0.10),BADGE阻断了ROS的缓解作用(P<0.10).结果表明,ROS在一定程度上缓解LPS应激导致的断奶仔猪白细胞总数和淋巴细胞数量的下降及部分血液生化指标的改变,而BADGE阻断了ROS的缓解作用.     

复合植物精油对脂多糖诱导的断奶仔猪免疫应激的影响

试验旨在研究复合植物精油（OCT）对脂多糖（LPS）诱导的断奶仔猪的免疫应激的影响。试验选取28日龄左右的杜×长×大三元杂交仔猪，随机分成3个处理组：对照组（基础日粮，注射生理盐水），LPS组（基础日粮，注射LPS），OCT组（基础日粮+50 mg/kg OCT，注射LPS）。每组8个重复，每个重复1头猪。于试验第21天注射LPS（100 μg/kg体重）或等体积的生理盐水，注射3 h后前腔静脉采血进行白细胞分类计数；6 h后屠宰，取胸腺、脾脏，-80℃保存，用于测量胸腺、脾脏免疫相关基因白介素-4（IL-4）、白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、核因子（NF-κB）以及转录相关基因转录激活因子3（STAT3）的基因相对表达量。结果表明：①与对照组相比，LPS刺激降低了仔猪血液中白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及嗜酸性粒细胞数量（P<0.05）；与LPS组相比，日粮中添加OCT提高了白细胞的数量（P<0.05）；②与对照组相比，LPS刺激上调了脾脏、胸腺IL-6、STAT3 mRNA水平（P<0.05），下调了脾脏IL-4、TNF-α及胸腺IL-4、TNF-α、NF-κB mRNA水平（P<0.05）；与LPS组相比，添加OCT下调了脾脏、胸腺IL-6、STAT3 mRNA水平（P<0.05）；上调了胸腺IL-4、IL-10、TNF-α、NF-κB的mRNA水平（P<0.05）。综合上述结果，LPS诱导发生了仔猪免疫应激，OCT在一定程度具有缓解作用。     

L-精氨酸对脂多糖刺激断奶仔猪生产性能、血液生化指标和内脏器官重量的影响

试验研究L-精氨酸(Arg)对脂多糖(LPS)刺激断奶仔猪[(21±1)d,平均体重(5.78±0.26)kg]生产性能、血液生化指标和内脏器官重量的影响。试验采用单因子设计,分为以下4个处理组:(1)基础日粮(非应激对照组);(2)基础日粮 LPS(应激对照组);(3)基础日粮 LPS 0.5%Arg(0.5%Arg组);(4)基础日粮 LPS 1.0%Arg(1.0%Arg组)。在试验第16天,给处理2、处理3和处理4组仔猪按每千克体重注射100μgLPS,处理1组注射等量的生理盐水,3h后采血。试验第18天屠宰仔猪测定内脏器官的重量。结果表明:(1)LPS刺激导致断奶仔猪日增重和日采食量显著下降(P<0.001),而0.5%Arg可缓解LPS刺激所导致的日增重下降(P<0.001);(2)LPS刺激导致断奶仔猪血浆葡萄糖、总蛋白、白蛋白和球蛋白含量显著降低(P<0.05),而0.5%或1.0%Arg可在一定程度上缓解LPS刺激导致的血浆总蛋白、白蛋白和球蛋白含量降低;(3)LPS刺激导致胃绝对重量显著降低(P<0.05)和肝脏相对重量增加(P<0.05),0.5%或1.0%Arg可在一定程度上缓解LPS刺激导致的胃绝对重量的减轻和肝脏相对重量的增加。这表明Arg在一定程度上缓解了LPS刺激所导致生长抑制和应激反应。     

银杏叶复方对LPS应激断奶仔猪小肠黏膜形态及上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量的影响

为探讨银杏叶复方对免疫应激断奶仔猪小肠黏膜形态及其上皮内淋巴细胞和杯状细胞数目的影响,本试验将36头断奶仔猪随机分为对照组(灌服110 mL生理盐水)、大肠杆菌脂多糖(LPS)应激组(灌服110 mL生理盐水)、银杏叶复方组(灌服110 mL银杏叶复方制剂),每组4个重复,每个重复3头。预试期7 d,正试期27 d。试验第23天采用腹膜注射LPS刺激断奶仔猪建立免疫应激模型。结果表明:与对照组及LPS应激组相比,银杏叶复方显著提高了断奶仔猪十二指肠、空肠及回肠段的小肠绒毛高度/隐窝深度(P0.05);银杏叶复方组小肠各段上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量均显著高于LPS应激组(P0.05)。综上,银杏叶复方可维持和修复由免疫应激引起的断奶仔猪肠道损伤并能增强肠道黏膜的免疫功能。     

脂多糖刺激后不同时间断奶仔猪空肠上皮细胞铁死亡的变化规律

本试验旨在探究用脂多糖(LPS)刺激后不同时间断奶仔猪空肠上皮细胞发生铁死亡的变化规律。选取体重和遗传基础相近的21日龄杜×长×大断奶仔猪42头,饲喂基础饲粮14 d后,空腹注射LPS,按100μg/kg BW注射LPS后不同时间随机分为7个处理,分别于0、1、2、4、8、12、24 h屠宰取样,测定空肠上皮细胞铁死亡相关基因mRNA表达量以及抗氧化水平。结果表明:在LPS刺激后8 h,空肠上皮细胞铁死亡关键基因膜蛋白转铁蛋白受体1(TFR1)、热休克蛋白B1(HSPB1)、铁反应元件结合蛋白2(IREB2)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA表达量最高(P<0.05);在LPS刺激后2 h,胱氨酸/谷氨酸反向转运体亚基(SLC7A11)的mRNA表达量最高(P<0.05);在LPS刺激后8、12、24 h,空肠上皮细胞总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均显著降低(P<0.05);在LPS刺激后8 h,谷胱甘肽(GSH)含量最低(P<0.05)。由此可见,在LPS刺激后8 h,断奶仔猪空肠上皮细胞铁死亡发生程度最为严重。     

脂多糖刺激对断奶仔猪小肠结构的影响及机理

为了探讨脂多糖(LPS)对肠道结构的影响,试验选取12头(28±3)日龄断奶仔猪,随机分为对照组和LPS组,LPS组按体重注射100μg/kgLPS,对照组注射等量生理盐水。注射3小时时,屠宰仔猪后取小肠样品,观察肠道形态,测定小肠黏膜细胞增殖率以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARγ)的表达。结果表明:(1)LPS刺激加深了仔猪十二指肠、空肠的隐窝深度(P0.05),降低了十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度与隐窝深度比值(P0.05);(2)LPS组十二指肠、空肠和回肠小肠黏膜细胞增殖率显著降低(P0.05);(3)LPS刺激明显提高了仔猪十二指肠(P0.05)和回肠(P0.10)间质以及空肠绒毛(P0.05)iNOS的表达;(4)LPS刺激降低了十二指肠和回肠上皮、空肠和回肠间质PPARγ的表达(P0.05)。说明LPS刺激可导致仔猪肠道结构损伤,其机理可能是通过促进促炎基因(iNOS)和抑制抗炎基因(PPARγ)的表达所致。     

L-精氨酸对脂多糖刺激的断奶仔猪肠道损伤的缓解作用

研究L-精氨酸(Arg)对脂多糖(LPS)刺激的断奶仔猪小肠黏膜蛋白质、DNA、RNA含量、二糖酶活性和血浆D-木糖含量的影响,旨在探讨L-Arg是否可以缓解LPS刺激所导致的肠道损伤.选取24头健康的(21±1)d断奶仔猪,分成4个处理,每个处理6个重复.采用单因子设计(1)基础日粮(非应激对照组);(2)基础日粮 LPS(应激对照组);(3)基础日粮 LPS 0.5%Arg(0.5%Arg组);(4)基础日粮 LPS 1.0%Arg(1.0%Arg组).在第16天,给应激对照组、0.5%和1.0%Arg组注射100 μg/kg BW的LPS,非应激对照组注射等量的生理盐水.注射LPS 2 h后,按1 mL/kg BW的剂量分别给仔猪灌服D-木糖溶液,注射LPS 3 h后,采血,分离血浆待测;注射LPS后48 h屠宰仔猪,刮取小肠黏膜待测.结果表明(1)和非应激对照组相比,应激对照组的十二指肠黏膜蛋白质含量,空肠、回肠黏膜DNA含量,空肠黏膜蔗糖酶活性,回肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶活性,血浆D-木糖含量均显著降低(P＜0.05),这表明LPS刺激导致断奶仔猪肠道损伤;(2)0.5%Arg组十二指肠黏膜蛋白质含量,空肠黏膜DNA含量,回肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶活性,血浆D-木糖含量以及1.0%Arg组空肠DNA含量,空肠黏膜蔗糖酶活性,回肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶活性,血浆D-木糖含量均高于应激对照组,且与非应激对照组无显著差异(P＞0.05).这表明L-Arg在一定程度上缓解了LPS刺激所造成的肠道损伤.     

脂多糖应激对断奶仔猪肠黏膜免疫屏障的影响

选用12头(21±1)d断奶仔猪,随机分为2个处理,研究脂多糖(LPS)刺激对肠黏膜免疫屏障功能的影响。禁食12h后,LPS组仔猪腹膜注射100μg/kgBW LPS,对照组注射等量的生理盐水。48h后,屠宰仔猪,打开腹腔,取小肠组织样品,测定小肠上皮间淋巴细胞、杯状细胞、肥大细胞数、肠集合淋巴结增殖、凋亡细胞数。结果表明:LPS刺激显著降低十二指肠、回肠上皮间淋巴细胞数(P<0.01),极显著增加小肠各段肥大细胞数(P<0.01);LPS刺激显著增加回肠集合淋巴结凋亡细胞数(P<0.05),但对增殖细胞数没有影响(P>0.05);LPS刺激可增加仔猪小肠杯状细胞数,但两处理组间差异不显著(P>0.05)。这些结果显示,LPS应激可导致肠黏膜免疫屏障功能改变,进而加重机体出现急性感染症状。     

日粮中添加姜黄素对免疫应激断奶仔猪肠道抗氧化能力及糖代谢的影响

旨在研究姜黄素对免疫应激断奶仔猪肠道抗氧化能力、二糖酶活性及葡萄糖转运载体的影响。选择28日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪24头,随机分为3个处理组,即对照组(基础日粮组),脂多糖(LPS)组(基础日粮+LPS)和姜黄素(Cur L)组(基础日粮+200 mg/kg姜黄素+LPS),每组8头。试验周期为28 d。于试验第18和28天,LPS组和Cur L组仔猪每千克体重腹腔注射100μg LPS,对照组仔猪注射相同体积的生理盐水。结果表明:添加200 mg/kg姜黄素可以显著降低空肠和回肠黏膜中丙二醛(MDA)含量(P0.05),增加回肠黏膜中麦芽糖酶活性(P0.05)以及上调空肠黏膜中钠/葡萄糖协同转运蛋白1(SGLT1)mRNA表达量和回肠黏膜中葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)mRNA表达量(P0.05)。因此,添加姜黄素可以通过降低过氧化产物的堆积缓解免疫应激对仔猪肠道的损伤,同时增加麦芽糖酶活性以及葡萄糖转运载体mRNA的表达而加强肠道对糖的消化吸收。     

L-精氨酸对脂多糖刺激仔鹅生长发育的影响

本试验旨在研究脂多糖(LPS)刺激所产生的免疫应激对仔鹅早期生长发育的影响及L-精氨酸对免疫应激的缓解作用.选取128只14日龄健康扬州鹅公鹅,随机分为A、B、C、D 4个组,每组4个重复,每个重复8只鹅.A组饲喂基础饲粮,并静脉注射生理盐水;B组饲喂基础饲粮,并注射细菌LPS;C组饲喂添加0.5%L-精氨酸的基础饲粮,并注射LPS;D组饲喂添加1.0%L-精氨酸的基础饲粮,并注射LPS.14日龄逐一称重,并分别于15、17、19日龄进行注射,21日龄时屠宰采样,称量试验鹅活重以及心脏、肝脏、肌胃、脾脏、胸腺、腔上囊的重量.结果表明:1)LPs刺激导致3周龄仔鹅体增重显著下降(P<0.05),而0.5%精氨酸可在一定程度上缓解LPS刺激导致的3周龄仔鹅体增重的下降(P>0.05);2)LPS刺激导致3周龄仔鹅腔上囊重量显著降低(P<0.05),而0.5%精氨酸可在一定程度上缓解LPS刺激导致的腔上囊重量的降低(P>0.05);LPS刺激导致3周龄仔鹅腔上囊指数显著降低(P<0.05);0.5%或1.0%精氨酸使LPS刺激3周龄仔鹅的脾脏指数显著增加(P<0.05);3)LPS刺激导致3周龄仔鹅肠道长度显著减小(P<0.05),而0.5%精氨酸町在一定程度上缓解LPS刺激导致的肠道长度的减小(P>0.05).本试验以仔鹅生长发育为衡量指标,表明适当的精氨酸添加量可以缓解鹅由LPS刺激所产生的免疫应激.     

α-酮戊二酸对脂多糖多次刺激后断奶仔猪生长性能、血液生化指标和内脏器官指数的影响

试验选取24头体质量为(6.79±0.32)kg的断奶仔猪(杜洛克×长白×大约克)随机分成4个处理组,每个处理设6个重复(猪),2×2因子设计。在试验的第10、13、15天对应激组的猪腹腔注射100μg/kg LPS,非应激组注射等量的生理盐水。结果显示:(1)日粮添加1%AKG对非应激期仔猪生长性能无显著性影响(P>0.05);(2)日粮添加1%AKG可以缓解LPS多次刺激引起断奶仔猪的平均日增重的下降(P<0.05);(3)LPS多次刺激下,日粮中添加1%AKG降低了猪血液中总蛋白(P<0.05)和球蛋白的含量(P<0.01),提高了白蛋白/球蛋白(P<0.01);(4)LPS多次刺激导致猪脾脏器官指数显著增加(P<0.05)。结果表明,1%AKG在一定程度上能缓解LPS多次刺激导致的生长抑制和应激反应。     

NODs/RIP2信号通路关键基因在断奶仔猪不同组织中的mRNA表达

本试验旨在研究核苷酸结合寡聚化结构域蛋白/受体相互作用蛋白2(NODs/RIP2)信号通路关键基因在断奶仔猪不同组织的分布情况。选择12头杜×长×大断奶仔猪,屠宰,取脾脏、胸腺、肠道淋巴结、下丘脑、垂体、肾上腺、肝脏、腓肠肌、皮下脂肪、空肠和回肠组织。应用实时荧光定量PCR技术测定NODs/RIP2信号通路关键基因,包括NOD1、NOD2和RIP2在各组织的mRNA表达水平。结果表明:NOD1、NOD2和RIP2在所检测的11个组织中均有表达。NOD1 mRNA在肠道淋巴结和下丘脑表达量较高;NOD2 mRNA在肠道淋巴结、脾脏、下丘脑和胸腺表达量较高;RIP2 mRNA在肠道淋巴结、胸腺和脾脏表达量较高。NODs/RIP2信号通路关键基因在不同组织中表达差异较大,可能与仔猪各组织对病原的识别和抵抗能力有关。     

亚麻籽油对脂多糖刺激断奶仔猪肠黏膜结构和免疫细胞的影响

本试验旨在研究亚麻籽油对脂多糖(LPS)刺激断奶仔猪肠黏膜结构和免疫细胞的影响。选择24头(9.15±0.90)kg杜×长×大断奶仔猪,随机分为4组,每组6个重复,每个重复1头猪。试验采用2×2双因子设计,主因子包括:1)饲粮处理(5%玉米油或5%亚麻籽油);2)免疫应激(注射生理盐水或LPS)。饲粮中添加5%玉米油或5%亚麻籽油饲喂21 d,在试验第21天,每组1/2的猪腹膜注射100μg/kg BW的LPS,另外1/2的猪腹膜注射等量生理盐水。注射LPS或生理盐水4 h后,将仔猪麻醉屠宰,取肠道样品待测。结果表明:1)LPS刺激显著降低了空肠、回肠绒毛高度和空肠隐窝深度(P0.05),显著提高空肠固有层细胞密度和嗜中性粒细胞数目(P0.05),有降低空肠上皮间淋巴细胞数目(P=0.080)和回肠杯状细胞数目(P=0.059)的趋势;2)LPS刺激对亚麻籽油组仔猪空肠、回肠绒毛高度无显著影响(P0.05);饲粮添加5%亚麻籽油有提高回肠派氏结细胞密度的趋势(P=0.064),且在LPS刺激下,显著降低空肠固有层细胞密度(P0.05),并有增加空肠上皮间淋巴细胞数目的趋势(P=0.069)。结果提示,5%亚麻籽油在一定程度上可维护LPS刺激断奶仔猪的小肠黏膜结构和免疫功能。     

谷氨酸对脂多糖刺激断奶仔猪肠道能量代谢的影响

本试验旨在研究谷氨酸(Glu)对脂多糖(LPS)刺激断奶仔猪肠道能量代谢的影响。选择24头断奶仔猪分为4个组,分别为对照组、LPS组、LPS+1.0%Glu组和LPS+2.0%Glu组,每组6个重复,每个重复1头猪。于试验第28天,试验组猪注射100μg/kg BW LPS,对照组注射等量的生理盐水,4 h后屠宰,取肠道样品待测。结果表明:1)与对照组相比,LPS刺激导致断奶仔猪空肠三磷酸腺苷(ATP)、腺苷酸池(TAN)含量和能荷(EC)显著降低(P0.05),一磷酸腺苷(AMP)/ATP值显著升高(P0.05);与LPS组相比,LPS+2.0%Glu组显著提高了空肠ATP、二磷酸腺苷(ADP)和TAN含量(P0.05)。2)与对照组相比,LPS刺激导致断奶仔猪回肠柠檬酸合成酶和α-酮戊二酸脱氢酶系活性极显著降低(P0.01),空肠α-酮戊二酸脱氢酶系活性有降低趋势(P=0.092);与LPS组相比,除LPS+1.0%Glu组回肠柠檬酸合成酶活性显著降低(P0.05)外,Glu对空肠和回肠三羧酸循环关键酶活性无显著影响(P0.05)。3)与对照组相比,LPS刺激导致空肠过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC1α)及回肠沉默信号调控因子1(Sirt1)和PGC1α的mRNA表达量极显著降低(P0.01);与LPS组相比,LPS+2.0%Glu组有提高空肠PGC1α(P=0.067)和回肠Sirt1(P=0.053)mRNA表达量的趋势,LPS+1.0%Glu组有提高回肠Sirt1 mRNA表达量的趋势(P=0.070)。由此可见,Glu可以改善LPS刺激导致的肠道能量损耗状态。     

脂多糖刺激对仔猪下丘脑-垂体-肾上腺轴Toll样受体4信号通路关键基因表达的影响

本试验旨在研究脂多糖(LPS)刺激对仔猪下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴Toll样受体4(TLR4)信号通路关键基因表达的影响。选取12头断奶仔猪,分成2个组,每个组6个重复。试验组注射100μg/kg体重的LPS,对照组注射等量的生理盐水。注射LPS或生理盐水4 h后采血,测定血浆中与应激相关激素的含量;采血后屠宰仔猪,取下丘脑、垂体、肾上腺,测定TLR4信号通路关键基因的mRNA表达水平,包括TLR4、髓样分化因子88(My D88)、白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和核转录因子-κB(NF-κB)mRNA表达水平。结果表明:与对照组相比,1)LPS刺激导致血浆肿瘤坏死因子-α、皮质醇和促肾上腺皮质激素含量显著上升(P<0.05)。2)LPS刺激导致TLR4信号通路关键基因TLR4在下丘脑、垂体、肾上腺中mRNA表达水平显著升高(P<0.05);My D88在垂体、肾上腺中mRNA表达水平显著升高(P<0.05),在下丘脑中mRNA表达水平有升高的趋势(P<0.10);IRAK1在垂体、肾上腺中mRNA表达水平有升高的趋势(P<0.10);TRAF6在下丘脑、垂体、肾上腺中mRNA表达水平显著升高(P<0.05);NF-κB在垂体中mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。试验结果表明LPS刺激激活了HPA轴,诱导了HPA轴的TLR4信号通路关键基因的表达。     

刺五加多糖对脂多糖免疫应激断奶仔猪生长性能和血液生理生化指标的影响

本试验旨在探讨饲粮中添加刺五加多糖(Acanthopanax senticosus polysaccharide,ASPS)对脂多糖(LPS)免疫应激断奶仔猪生长性能和血液生理生化指标的影响。试验采用2×2两因素设计,即饲粮处理(添加0或800 mg/kg ASPS)和免疫应激处理(注射LPS或生理盐水)。将64头(28±3)日龄、平均体重为(7.22±0.46)kg的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪随机分为4个处理,其中处理1和2饲喂基础饲粮(添加0 mg/kg ASPS),处理3和4饲喂试验饲粮(添加800 mg/kg ASPS),试验第14和21天,处理2和4仔猪腹腔注射100μg/kg BWLPS,处理1和3仔猪腹腔注射等量生理盐水。注射后3 h采血,测定血液生理生化指标。试验期21 d。结果表明:试验1～14 d,饲喂ASPS对未注射LPS的仔猪生长性能无显著影响(P>0.05);试验15～21 d,饲喂ASPS显著增加仔猪的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)(P<0.05),且饲喂ASPS使注射LPS的仔猪ADG和ADFI显著增加(P<0.05),但对注射生理盐水的仔猪无显著影响(P>0.05)。饲喂ASPS对仔猪ADG的影响与LPS刺激存在显著互作关系(P<0.05)。试验第14天,饲喂ASPS显著提高了仔猪外周血淋巴细胞数量(P<0.05),对外周血淋巴细胞数量的影响与LPS刺激存在显著的互作关系(P<0.05),且饲喂ASPS能显著增加注射LPS的仔猪外周血淋巴细胞数量(P<0.05),但对注射生理盐水的仔猪无显著影响(P>0.05)。试验第14和21天,饲喂ASPS显著降低了仔猪血浆α-酸性糖蛋白(α-AGP)、葡萄糖、前列腺素E2(PGE2)含量(P<0.05),显著提高了血浆白细胞介素-2(IL-2)含量(P<0.05),且其对α-AGP、IL-2、PGE2含量的影响与LPS刺激存在显著的互作关系(P<0.05),饲喂ASPS能显著降低注射LPS的仔猪血浆α-AGP、PGE2含量(P<0.05),但对注射生理盐水的仔猪无显著影响(P>0.05)。由此可见,饲喂ASPS对非免疫应激断奶仔猪的生长性能无影响,但可以缓解免疫应激断奶仔猪的生长抑制,ASPS缓解免疫应激断奶仔猪生长抑制与降低其血浆α-AGP和PGE2含量,提高外周血淋巴细胞数量和血浆IL-2含量有关。