建立高质量马铃薯细胞悬浮培养物的研究

以马铃薯四倍体栽培品种甘农薯２号、布尔班克（Ｒｕｓｓｅｔ Ｂｕｒｂａｎｋ）的块茎和茎段两种外植体为材料,进行了愈伤组织诱导和继代培养、细胞悬浮培养物的建立及其继代培养的研究。结果表明：选取良好的愈伤组织经１～３次继代培养后进行细胞悬浮培养,培养物每５ｄ继代一次,继代时新旧培养基体积按３：１配置,能获得较高质量的培养物。在悬浮培养及继代培养过程中,用高浓度蔗糖溶液或蒸馏水调节该培养液的渗透压,以及采用与愈伤组织固体培养基成分相同的细胞悬浮培养基和悬浮继代培养基,可有效地控制悬浮细胞的质壁分离和破碎现象,有助于建立高质量的细胞悬浮培养物。     

花生愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以中花2号无菌苗为材料,对愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的最佳条件进行探讨,并对悬浮细胞的生长特性进行检测,建立了花生悬浮细胞培养体系。结果表明,叶片是诱导愈伤组织和进行悬浮培养的理想外植体,愈伤组织最佳诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+2,4-D 2.0mg/L,悬浮培养适宜培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+2,4-D 2.0mg/L+KT 1.5mg/L。悬浮细胞生长呈"S"型曲线,培养12d达到最大生长量,最适继代周期为12d左右,在悬浮培养过程中,细胞数量呈现先上升后下降的趋势,培养液的pH和电导率变化则均为先下降再回升最后趋于稳定。     

胆木愈伤组织与悬浮细胞培养研究

通过组织培养技术,利用胆木(Nauclea officinalis)种子无菌实生苗的茎段、叶片、叶柄等进行愈伤组织的诱导及悬浮细胞的培养。结果如下：(1)以WPM为基本培养基,获得愈伤组织高诱导率的激素种类及浓度为①0.5 mg/L 2,4-D、②0.5～1.5 mg/L IBA＋(0.0,0.5 mg/L)6-BA,诱导率达到100%;(2)在外植体的差异上,茎段和叶片出现愈伤组织的时间较早、增殖系数最大,可达15倍;(3)在培养基1/2WPM＋0.5 mg/L 2,4-D＋30 g/L蔗糖中,继代周期为14～17 d,胆木细胞悬浮培养增殖率可达30.16%。     

显齿蛇葡萄细胞悬浮培养研究

研究了显齿蛇葡萄细胞悬浮培养的基本条件,同时测定了悬浮液中二氢杨梅素的含量。确定了细胞悬浮培养的基本条件是:取继代培养4代之后的愈伤组织接种,以12.5 g/L的接种量接种在附加6-BA(2.0 m g/L),2,4-D(1.0 m g/L),NAA(0.5 m g/L)的M S培养基上,添加100 m l/L的椰子汁,起始pH 5.8,110 r/m in,光照强度为250~350 Lx,光照培养12h/d,25±1℃下培养6 d。经过优化培养之后的悬浮液中二氢杨梅素含量为0.829 g/mL。     

甜菜基因型的筛选及胚性细胞系建立的研究

通过以甜菜未成熟胚为外植体诱导愈伤组织，再将产生的愈伤组织转移至分化培养基（ＭＳＢ培养基附加１．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ、３％蔗糖、８％琼脂）进行分化力测试实脸，筛选出两个再生能力强的基因型─８９３０、ＧＤ＿２．通过挑选淡黄色或灰白色、呈颗粒状的愈伤组织继代培养，经调节培养基的ＩＡＡ和ＮＡＡ的浓度，得到再生能力强的胚性愈伤组织，建立了胚性细胞无性系。     

罗布麻胚性细胞悬浮系的建立

本实验以罗布麻（Apocynum venetttln Linn．）成熟种子为外植体。探寻获得罗布麻胚性愈伤组织的最佳培养基和条件。研究两种主要的生长素（2,4-D和NAA）和两种主要的细胞分裂素（6-BA和KT）对诱导罗布麻愈伤组织及2,4-D对诱导罗布麻胚性愈伤组织和胚性细胞悬浮系建立的影响。结果表明2,4-D对诱导形成胚性愈伤组织非常重要;不同激素配比对实验的结果影响较大,其中激素组合为2,4-D0．5mg／L＋6-BA0．05mg／L可产生大量的胚性愈伤组织;MB＋2,4-D2．0mg／L是建立罗布麻胚性细胞悬浮系的最适培养基。     

生物技术获取茶氨酸的研究现状与展望

茶氨酸（N－乙基－γ－L－谷氨酰胺）作为茶叶的特征性物质之一，由于在茶树的氮素代谢、茶汤滋味等方面有着特殊的作用，自１９５０年日本学者酒户弥二朗首次从绿茶中分离、命名以来，受到了国内外学者的关注。近年来，由于茶氨酸能对咖啡碱诱发的兴奋作用起抑制、拮抗作用犤１犦，茶氨酸对大鼠的降压效果和多巴胺能神经元的活化作用犤２犦以及茶氨酸对人α－脑波释放的影响犤３犦等药理功能研究的深入，促使国内外学者对通过利用生物技术获取茶氨酸研究的深入。现就该方面的研究进展概述如下：１茶氨酸的细胞培养１９９０年OriharaY．等…     

茶树黄观音幼籽愈伤组织诱导与分化初步研究

通过对茶树黄观音幼籽愈伤组织诱导和继代,获得了大量茶树愈伤组织,愈伤组织在17种分化培养基上分化生长,大多数分化培养基能使愈伤组织转绿并有大量绿色小突起同时能分化出根。     

籼稻绿芽悬浮细胞原生质体再生成株

采用籼稻Hu-18绿芽为外植体,在N6附加2 mg/L 2,4-D的培养基上诱导愈伤组织。加20 d后转人AA 培养基进行悬浮培养。继代培养45 d左右形成了分裂旺盛的胚性细胞悬浮系。即从绿芽诱导至胚性细胞悬浮系的建立仅用了65 d左右。继代后前6 d,细胞干重几乎每2 d增加1倍,而培养液的渗透压及pH 值迅速下降。取继代后4 d的悬浮细胞游离原生质体,产率为8.74X10⁶/g鲜重。纯化后的原生质体在KPR培养基中进行琼脂糖包埋培养,原生质体植扳率为12.0％ 。将20 d后的小愈伤组织(0.1 mm)转入 N6附加0.5 mg/L 2,4- D、1 mg/ L BA、1 mg/L KT、0.3 mg/L ZT的培养基上增殖,待长成直径2～3 mm 左右时,用N₆附加1 mg/L BA,1 mg/L KT,0.3 mg/L ZT的培养基进行分化培养, 5 d后同时出现芽根生长,最终再生成绿色植株,绿苗分化率为3.5株/10000个原生质体。     

罗勒研究进展及开发利用

总结维药罗勒在栽培采收、化学、药理和开发应用方面的研究进展。通过查阅国内外文献等对其进行归纳总结并展望了发展趋势。期望能为罗勒的进一步深入研究提供参考和依据。     

响应面优化诱导子促进印楝悬浮细胞培养产印楝素的研究

通过单因素实验法研究了水杨酸(SA)、萘乙酸(NAA)、壳聚糖(CTS)、吲哚丁酸(IBA)、茉莉酸(JA)、激动素(KT)和甲基茉莉酸(MJ) 等7种诱导剂对印楝悬浮细胞培养产印楝素的作用,筛选出SA、NAA、CTS、IBA等4种刺激效果明显的诱导剂,利用响应面法优化了该4种诱导剂的最佳组合为SA 92.00 mg/L、NAA 6.0 mg/L、CTS5 4.0 mg/L和IBA 3.0 mg/L,得到印楝素含量的实际值为8.61 mg/g,与理论预测值8.69的相对误差为0.92%。回归方程的预测值和实验值差异不显著,所得回归方程模型拟合情况良好,符合要求。     

Anticancer Activities of Plant Secondary Metabolites: Rice Callus Suspension Culture as a New Paradigm

Plant natural products including alkaloids,polyphenols,terpenoids and flavonoids have been reported to exert anticancer activity by targeting various metabolic pathways.The biological pathways regulated by plant products can serve as novel drug targets.Plant natural compounds or their derivatives used for cancer treatment and some novel plant-based compounds which are used in clinical trials were discussed.Callus suspension culture with secondary metabolites can provide a continuous source of plant pharmaceuticals without time and space limitations.Previous research has shown that rice callus suspension culture can kill>95%cancer cells with no significant effect on the growth of normal cells.The role of candidate genes and metabolites which are likely to be involved in the process and their potential to serve as anticancer and anti-inflammatory agents were discussed.Large scale production of plant callus suspension culture and its constituents can be achieved using elicitors which enhance specific secondary metabolites combined with bioprocess technology.     

相思树悬浮细胞培养及其细胞形态学观察

试验分析了基因型、愈伤组织类型、2,4-D 浓度、蔗糖浓度,起始接种量等各因素对相思树悬浮细胞培养的影响。结果表明：选择淡黄色,质地鲜嫩松脆的愈伤组织作为相思树悬浮培养的材料,能较快地建立起悬浮细胞系。黑木相思细胞小,胚性强,分散性好,最容易建立起悬浮细胞系。当蔗糖浓度为 30 g/L,2,4-D 浓度为 0.5 mg/L时,适宜于悬浮细胞的保持。起始接种量对相思悬浮细胞系生长也有很大影响,从保持悬浮细胞系的角度看,每瓶 25 mL 培养基中适宜的接种量为 0.5~1.0 g。台湾相思悬浮细胞培养周期以 7 d 继代 1 次,卷荚相思悬浮细胞培养周期以 8~10 d 为宜。同时,通过对悬浮细胞培养的显微观察可以看出不同基因型的相思树悬浮细胞,其细胞生长状态各不相同。     

香荚兰细胞培养及产香兰素研究初报

香荚兰的幼茎在MS＋BA1μg／mL＋NAA5μg／mL培养基上培养40d,其表面形成白色、块状的愈伤组织。愈伤组织在MS＋2,4－D1μg／mL＋BA1μg／mL＋NAA4μg／mL＋2．5％sucrose的半固体培养基上快速增殖培养,培养4周后培养物的重量增加7倍左右;在相同培养基的悬浮培养中,培养4周后培养物的重量增加6～8倍。从不同的培养物中分离出香兰素并测定其含量。     

柑桔细胞悬浮培养及再生植株的研究

取锦橙(Citrus sinensis Osbeck)试管实生苗下胚轴切段诱导愈伤组织,继代培养,再以该愈伤组织制备悬浮细胞系。在附加KT(0.75mg/L)和2,4—D(0.5mg/L)的MS液体培养基中悬浮单细胞能正常分裂和生长,形成多细胞团和愈伤组织,在MT添加BA(1.5mg/L)和IAA(0.5mg/L)的固体培养基上能进一步诱导小芽并形成完整小植株。文中还探讨了建立悬浮培养细胞系的最适蔗糖浓度以及单细胞悬浮培养过程的细胞密度和培养液的pH值变化情况。     

小麦花药液体漂浮离体培养体系的建立与应用

为了建立高效的小麦花药离体培养体系,对6个小麦品种（系）的5个花药离体培养性状进行了鉴定,并利用6种不同时间的低温预处理对两个小麦品种幼穗进行了处理效果的探讨。结果表明,6个品种（系）的出愈及绿苗分化能力均较强,愈伤组织诱导率、绿苗分化率和绿苗产率分别达到116.48%、5.79%和10.25%以上,初步建立了小麦花药液体漂浮离体培养体系,其培养效果好于固体培养方式。6种不同时间的低温预处理培养结果表明,幼穗经4 ℃低温预处理后,愈伤组织诱导率、绿苗分化率及绿苗产率与对照相比均表现下降的趋势,白苗分化率及白苗产率具有增加的趋势,说明未进行低温预处理的适期幼穗培养效果更好。