金水乌鸡PRL基因多态性研究

[目的]研究金水乌鸡PRL基因多态性,为金水乌鸡的保种和持续选育与提高积累分子基础数据。[方法]采用PCR-RFLP方法研究金水乌鸡白羽丝毛系165只乌鸡PRL基因多态性,分别采用HaeⅢ和HhaⅠ2种内切酶对各DNA样品的PCR产物进行单酶切,分析基因型与产蛋数的相关。[结果]金水乌鸡PRL基因的PCR产物的HhaⅠ酶切片段未出现多态性。金水乌鸡PRL基因的PCR产物的HaeⅢ酶切片段呈现RFLP多态性,有AA、AB、BB3种基因型,A基因频率较高。相关分析结果表明,不同基因型的产蛋数差异不显著。[结论]A基因可能是影响产蛋数的优势基因。     

黑鲷催乳素基因PRL1和PRL2在急性盐胁迫环境下的表达分析

【目的】明确催乳素基因（PRL1和PRL2）在黑鲷不同组织及不同盐度胁迫下的表达模式,为黑鲷养殖过程中最适盐度范围的确定提供参考依据。【方法】通过RT-PCR扩增黑鲷PRL1和PRL2基因,以ExPASy、NetNGlyc及SWISS-MODEL等在线软件进行生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR检测PRL1和PRL2基因在黑鲷不同组织及不同盐度胁迫下的表达情况。【结果】黑鲷PRL1基因开放阅读框（ORF）全长639bp,共编码212个氨基酸残基,其编码蛋白分子量为23.32kD,理论等电点（pI）为6.70;黑鲷PRL2基因ORF全长750bp,共编码249个氨基酸残基,其编码蛋白分子量为28.31kD,pI为8.37。黑鲷PRL1和PRL2蛋白均由1个为信号肽结构域和1个为Hormone 1结构域组成;黑鲷PRL1蛋白二级结构中α-螺旋占69.34%、无规则卷曲占30.66%,包含1个糖基化位点及37个磷酸化位点;黑鲷PRL2蛋白二级结构中α-螺旋占67.07%、无规则卷曲占32.93%,包含1个糖基化位点及21个磷酸化位点。黑鲷PRL1和PRL2基因在12个待检测组织中均有表达,且均以脑组织中的相对表达量最高,显著高于其他组织中的相对表达量（P<0.05,下同）;在盐度5‰处理组中,黑鲷PRL1基因在胁迫4h开始显著上调,黑鲷PRL2基因在胁迫8h开始极显著上调（P<0.01）,二者均在胁迫24h时达峰值,随后开始缓慢下降,至胁迫72h时其相对表达量仍显著高于对照组;在盐度25‰和35‰处理组中,黑鲷PRL1和PRL2基因在胁迫72h时其相对表达量均显著低于对照组。【结论】低盐胁迫能促进黑鲷PRL1和PRL2基因的表达,高盐胁迫则抑制黑鲷PRL1和PRL2基因的表达,即黑鲷PRL1和PRL2基因在其适应淡水环境的过程中发挥重要调节作用。     

鸭催乳素基因内含子1 SNP分析

利用PCR-RFLP方法和DNA测序技术检测了江淮流域的高邮鸭、巢湖鸭、淮南麻鸭、荆江麻鸭和沔阳麻鸭5个鸭品种PRL基因第1内含子多态.结果表明:内含子1在1 326 bp处发生了T→C的碱基突变,产生了AA、AB和BB 3种基因型.A等位基因的频率分别为0.285 7、0.287 9、0.228 6、0.166 7、0.283 3;B等位基因在江淮流域的5个鸭品种当中具有绝对优势;5个家鸭品种的多态性良好且都处于Hardy-Weinberg平衡状态(P＞0.05).     

云南4个地方鸡种PRL外显子5基因多态性研究

[目的]研究云南4个地方鸡种PRL外显子5基因的多态性。[方法]对云南地方鸡种剥隘小种鸡（BA）、大围山微型鸡（DW）、武定鸡（WD）、盐津乌骨鸡（YJ）4个鸡种P地基因第5外显子PCR-SSCP进行检测分析,并采用Progene,Editplus等软件进行数据分析。[结果]PcR-SSCP检测分析发现,PRL外显子5有4个SNP位点,均有多种基因型。在PRL-exon5681、742和816bp处呈现基因多态性,剥隘小种鸡、武定鸡、盐津乌骨鸡有AA、BB和AB3种基因型,大围山微型鸡有AA和AB2种基因型。PRLR-exon5950bp处有1个SNP,4种鸡均有AA、BB和AB3种基因型。[结论]A基因可能是影响繁殖性状的优势基因。     

禽类PRL基因的cDNA克隆及生物信息学分析

[目的]通过对PRL基因(催乳素基因)的克隆及生物信息学分析,研究该基因编码的蛋白对禽类就巢性的作用。[方法]利用原鸡PRL基因mRNA序列(NM-205466)与蓝孔雀表达序列标签(EST)数据库进行Blast检索,以及序列拼接和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),获得了蓝孔雀PRL基因的部分cDNA序列,并对该序列进行了生物信息学分析。[结果]获得的cDNA序列片段长度为927bp,包括完整的开放阅读框690 bp,编码229个氨基酸。系统发育树的构建发现蓝孔雀与原鸡亲缘关系比较近,与鹑次之,与火鸡亲缘关系最远。[结论]该研究结果为研究PRL蛋白的生物学功能奠定了基础。     

荆江麻鸭PRL基因内含子1的SNPs检测及其与体尺性状的关联研究

[目的]研究荆江麻鸭PRL基因内含子1序列多态性及其对体尺性状的影响。[方法]以96只荆江麻鸭为材料,采用PCR-RFLP方法对PRL基因内含子1序列多态性进行检测,并分析基因多态性与其体尺性状间的关系。[结果]荆江麻鸭PRL基因内含子1具有序列多态性,DraⅠ酶切产生AB和BB 2种基因型,其中BB基因型为优势基因型（91.67%）;卡方检验结果表明,群体该位点处于遗传平衡状态（P〉0.05）;最小二乘分析结果表明,AB基因型个体骨盆宽极显著大于BB基因型个体（P〈0.01）,BB基因型个体胸围显著高于AB基因型个体（P〈0.05）。[结论]初步推断,PRL基因可作为影响荆江麻鸭部分体尺性状的候选基因（标记）,选择不同的等位基因可改善不同的体尺性状。     

天柱黑番鸭催乳素基因内含子1的PCR-RFLP分析

利用PCR-RFLP技术,对天柱黑番鸭和白羽番鸭的催乳素(Prolaction,PRL)基因内含子1进行了酶切和序列分析。结果表明:PRL基因内含子1存在两个DraI酶切位点,其中1个位点具有DraI多态性。该位点由于在1 326 bp位置发生了A→G的碱基突变,产生了AA、AB和BB3种基因型。其中,BB基因型频率在天柱黑番鸭和白番鸭中分别为0.714 3和0.705 9,B等位基因频率在两组番鸭中相应为0.821 4和0.794 1。χ2检验表明,基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡,因此,BB基因型为优势基因型,B基因为优势等位基因。     

秋稻品种Aus373广亲和基因的RFLP分析

Ａｕｓ３７３是典型的秋稻广亲和品种，曾有报道指出，Ａｕｓ３７３广亲和基因位于第七染色体上，与ＲＦＬＰ标记ＲＺ４８８，ＲＧ５１１连锁，该基因暂被命名为Ｓａ（ｔ）＾ｎ」３「）。在此基础上，该研究对Ａｕｓ３７３广亲和基因在ＲＦＬＰ图谱上的定位作了初步尝试。     

荆江麻鸭PRL基因内含子1的SNPs检测及其与体尺性状的关联研究（摘要）

[目的]研究荆江麻鸭PRL基因内含子1序列多态性及其对体尺性状的影响。[方法]以96只荆江麻鸭为材料,采用PCR-RFLP方法对PRL基因内含子1序列多态性进行检测,并分析基因多态性与其体尺性状间的关系。[结果]荆江麻鸭PRL基因内含子1具有序列多态性,DraⅠ酶切产生AB和BB2种基因型,其中BB基因型为优势基因型（91.67%）;卡方检验结果表明,群体该位点处于遗传平衡状态（P〉0.05）;最小二乘分析结果表明,AB基因型个体骨盆宽极显著大于BB基因型个体（P〈0.01）,BB基因型个体胸围显著高于AB基因型个体（P〈0.05）。[结论]初步推断,PRL基因可作为影响荆江麻鸭部分体尺性状的候选基因（标记）,选择不同的等位基因可改善不同的体尺性状。     

乌蒙乌骨鸡血液生化指标研究

为丰富乌蒙乌骨鸡血液生化指标数据,为其人工饲养、疾病预防、肉质研究和保种选育提供依据,试验以饲养的成年乌蒙乌骨鸡为研究对象,对其血液生化指标进行了测定并按性别分组统计进行差异显著性检验。结果表明,乌蒙乌骨鸡血液生化指标中球蛋白含量雌雄之间差异显著(P0.05),其余各项生化指标雌雄之间差异不显著(P0.05)。     

中国泰和乌骨鸡MHC与其繁殖性能相关的研究

实验采用四种限制性内切酶（ＨｈａＩ、ＥｃｏＲＶ、ＨａｅⅢ、Ｘｂａｉ）,运用ＰＣＲ－ＲＦＬＰＳ的方法,研究了泰和乌骨鸡ＭＨＣ分子遗传多态笥,探讨了各基因型与繁殖性能的相关关系,结果表明：四种酶切区别的Ｂ－ＬＩＩＢβ１外元的多态笥及ＭＨＣ基因组合型对蛋重及受精蛋孵化率影响差异均不显著。ＥｃｏＲＶ及ＸｂａＩ酶切多态性对产蛋数的多态性及ＭＨＣ基因组合型对蛋重及受精蛋孵化率影响差异均不显著。ＥｃｏＲＶ及Ｘｂ     

泰和乌鸡遗传多样性研究进展

从染色体、蛋白质和DNA水平,分析了泰和乌鸡遗传多样性的研究进展,总结了遗传多样性与泰和乌鸡生产性能的关系。     

泰和乌鸡线粒体DNA遗传变异分析

采用聚合链式反应(PCR)和直接测序的方法,测定泰和乌鸡线粒体DNA控制区高变I区和部分II区484bp的序列,研究其遗传变异及其性别间的差异,并与其它7种乌鸡的同源序列相比较,分析它们的系统进化关系。20个样本共发现17个变异位点,6种单倍型。所有变异位点全部为转换。6种单倍型中,Hap_1的比例最高,达到40%。公鸡的单倍型数量、单倍型多样性、核苷酸多样性、核苷酸平均差异数均高于母鸡。卡平方检验显示雌雄间遗传分化不显著。在系统发生树上,泰和乌鸡的单倍型比较分散,主要与余干乌鸡和雪峰乌鸡聚在一起。     

乌骨鸡黑色素皮质激素受体-1基因的克隆、序列分析与原核表达

【目的】克隆乌骨鸡黑色素皮质激素受体-1（melanocortin 1-receptor,MC1R）基因,并对其进行生物学分析和原核表达。【方法】采集乌骨鸡的肌肉组织,提取其总RNA,根据GenBank上公布的原鸡（Gallus gullus）MC1R基因序列设计引物,利用反转录RT-PCR克隆乌骨鸡MC1R基因,对其进行生物学分析,并构建原核表达载体pET32a-MC1R,在大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达。【结果】乌骨鸡MC1R序列由945个碱基组成,编码314个氨基酸。成功构建了重组质粒pET32a-MC1R的原核表达系统,并且体外诱导获得了MC1R蛋白。【结论】成功克隆了乌骨鸡MC1R基因并分析了其与乌骨鸡乌色性状的关系,其与原鸡的亲缘关系最近,达99.4%,经原核表达获得了乌骨鸡MC1R蛋白。     

利用多重PCR分析丝羽乌骨鸡遗传多样性

以丝羽乌骨鸡为材料,在家鸡1号染色体和Z染色体上分别选取15对和5对微卫星标记,应用多重PCR技术对140只试验个体的基因组DNA进行了扩增,结果表明,所选用的20对微卫星引物中,除MCW0101和MCW0181因扩增效果不理想而剔除外,其余18对标记均表现出丰富的多态性,所有结果都能重复.18对微卫星引物平均检测到6.83个等位基因(5～8个),平均杂合度和多态信息含量分别为0.833和0.805.其结果可作为进一步QTL定位和标记辅助选择研究的参考.     

乌骨鸡外周淋巴组织发生和结构

在光镜水平上,以部分组织器官为对象,对乌骨鸡外周淋巴组织的发生和结构进行了研究。哈德氏腺中的淋巴组织主要是浆细胞,出现于10日龄左右,在各级导管及腺泡之间呈弥散或密集团块状分布,但无生发中心形成。除甲状旁腺外,甲状腺(20日龄)及鳃后体(初孵出时)都有淋巴组织存在,且后者还于5日龄起形成生发中心。卵巢(髓质)内出现淋巴组织的时间较睾丸早,分别为10与20日龄,两者都集中于小血管周围。盲肠扁桃体与派伊尔氏斑的组织结构相似,都由密集的各种淋巴成分和较多的淋巴小结(生发中心)组成。但在淋巴细胞及生发中心出现时间上,盲肠扁桃体比派伊尔氏斑要早,前者分别为19胚龄和20日龄,而后者为5和40日龄。两者的生发中心都于70日龄显著增多,并可区分为两种不同的类型。     

不同蛋氨酸水平对泰和乌骨鸡氮存留率的影响研究

采用氮平衡试验研究了5个不同蛋氨酸水平对生长期泰和乌骨鸡(4、8、12周龄)氮存留率。结果表明：4周龄时,泰和乌骨鸡公、母鸡均以0．44％的蛋氨酸的氮存留率最佳;8周龄时,泰和乌骨鸡公鸡以0.35％,母鸡以0．31％的蛋氨酸的氮存留率最佳;12周龄时,泰和鸡公鸡以0．26％,母鸡以0．24％的蛋氨酸的氮存留率最佳。     

泰和乌鸡配套系商品肉鸡的肉质特性研究

研究了泰和乌鸡配套系商品肉鸡的肉质特性。结果表明:通过改良育种后,泰和乌鸡配套系商品肉鸡不仅早期生长速度得到了较大的提高,而且与原种泰和乌鸡的肉质特性基本一致。