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为建立区分猪种布鲁菌S2疫苗株接种奶牛与布鲁菌自然感染奶牛,BLAST比对分析羊种、牛种、猪种、犬种、沙林鼠种和绵羊种6种布鲁菌基因序列,发现repA-related基因是猪种布鲁菌与牛种及羊种布鲁菌的差异基因。设计引物PCR扩增获得repA-related基因片段,克隆并原核表达得到了布鲁菌repA-related融合蛋白,以repA-related蛋白建立间接ELISA检测方法。用repA-related蛋白间接ELISA检测猪种S2疫苗株接种动物血清为阳性,检测牛种和羊种布鲁菌自然感染动物血清为阴性。repA-related蛋白间接ELISA能从试管凝聚实验(SAT)及常规ELISA检测阳性的奶牛血清样本中,区分出S2疫苗接种牛与牛种布鲁菌感染牛。 相似文献
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将3种检测口蹄疫非结构蛋白抗体的间接ELISA试验进行了比较。这3种间接ELISA试验检测田间血清样品的最低符合率为96%,最高符合率达98%:有2种间接ELISA试验可以检测到感染口蹄疫第10天后血清中的口蹄疫感染抗体.有1种间接ELISA试验可以检测到感染口蹄疫第14天后血清中的口蹄疫感染抗体;这3种间接ELISA试验检测12份已知口蹄疫阳性血清的试验结果吻合。研究表明.这3种间接ELISA试验方法对于检测口蹄疫感染抗体具有较好的特异性.其中猪口蹄疫3A蛋白间接ELISA诊断试剂盒在灵敏性、特异性和符合率方面更优于另外2种试剂盒。 相似文献
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口蹄疫属于我国一类动物疫病,防治该病的关键是做出及时、准确的诊断。本文介绍了ELISA方法在口蹄疫诊断中的应用研究进展,传统ELISA方法包括液相阻断ELISA、间接ELISA、固相竞争ELISA、间接夹心ELISA;新型ELISA方法包括单克隆抗体ELISA、PCR-ELISA、生物素-亲和素ELISA及Dot-ELISA。随着技术的进步及养殖领域的规模化,ELISA在临床诊断和流行病学调查中将会有更加广泛的应用。 相似文献
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酶联免疫吸附测定技术新进展 总被引:4,自引:0,他引:4
酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)技术是1971年由Engvall等建立的一种生物活性物质微量测定新技术,以其灵敏度高、特异性好等优点,在生命科学各领域得到广泛应用。在实际应用过程中,该技术得到不断改进,形成了多种分析方法,并且在检测的灵敏度、特异性、操作简单化以及实时、高效等方面都有很大提高,可以说ELISA是当前应用最广、发展最快的一项技术。本文仅就近几年ELISA的发展情况作一综述。 1 常规ELISA常规ELISA试验方法如间接法、双抗夹心法及竞争法或阻断法仍然被广泛用于诊断各种病毒、… 相似文献
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建立了检测血清中禽副粘病毒2型(PMV-2)抗体的间接免疫荧光试验(IFA)、间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)以及斑点酶联免疫吸附试验(Dot—ELISA)方法,并将三种方法同血凝抑制试验(HI)进行了比较。结果表明,建立的IFA、间接ELISA和Dot—ELISA等三种抗体检测方法其敏感性、特异性均很好,与HI方法相比,敏感性也大大增强。 相似文献
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韩和祥 《国外畜牧学(猪与禽)》2006,26(6):46-49
本文综述了血清中和试验、猪瘟间接血凝试验、正向间接血凝试验、荧光抗体技术、免疫酶测定技术、间接ELISA、夹心-ELISA、DOT-ELISA、PPA-ELISA、C-ELISA、抗原捕获ELISA等在猪瘟血清学检测上的应用情况,并对其优、缺点作了浅析. 相似文献
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兔瘟是一种急性、热性、败血性和毁灭性的传染病,发病率和死亡率极高,是目前危害我国养兔业最重要的疫病之一。间接ELISA抗体检测方法是兔瘟血清学抗体水平检测的主要方法,在兔瘟的诊断、流行状态的监测和流行病学调查等方面得到了广泛应用。为了评价兔瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒在兔瘟抗体检测中的应用效果,利用兔瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒对2012年采集于河南、河北、山东等地的818份免疫兔血清进行了检测,并进行了间接ELISA抗体检测试剂盒与间接血凝抑制试验(HI)的符合率研究。结果显示两者的符合率达94.0%,说明ELISA试剂盒具有良好的临床适用性和准确性,非常适用于兔场免疫后兔群的抗体水平监测。 相似文献
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间接ELISA检测鸡传染性鼻炎抗体的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
用副鸡嗜血杆菌Hpg-8菌株制备ELISA抗原,与抗鸡Ig单抗1B7酶结合物建立了检测鸡血清抗体水平的间接ELISA方法.交叉试验、阻断试验、重复性试验等表明该方法重复性好、特异性强、灵敏度高.确立了检测FLISA效价(ET)的回归方程y=1.421+0.299x)(P>0.05),可用于定量测定.间接凝集试验与间接ELISA方法的比较试验表明,ELJSA法比间接凝集试验敏感性高3倍以上. 相似文献
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奶牛新孢子虫重组蛋白NcSRS2t间接ELISA方法的建立及初步应用 总被引:2,自引:0,他引:2
以纯化的犬新孢子虫(Neospora caninum)重组蛋白 NcSRS2t为抗原包被酶标板,通过对间接ELISA 各反应条件的优化,确定了最佳反应条件.采用已建立的间接ELISA反应条件,对218份阴性血清的检测结果进行统计学分析,确定了间接ELISA的判定标准,即OD450nm值大于等于O.32为阳性,小于O.32为阴性.应用建立的间接ELISA方法对128份阴性血清和50份阳性血清(经IDEXX公司新孢子虫抗体检测试剂盒证实)进行检测,结果表明,闻接ELISA方法的特异性为93.0%,敏感性为90.0%.采用本试验建立的新孢子虫间接ELISA 诊断方法对黑龙江省克山、海林、双城、甘南、克东、富裕、牡丹江、大庆等8个县(市)奶牛场的540份奶牛血清进行了检测.结果表明,被检的540份奶牛血清样本中奶牛新孢子虫的抗体阳性率为13.33%.该间接ELISA 诊断方法的建立及初步应用为新孢子虫病诊断试剂盒的研制和新孢子虫病的预防研究奠定了基础. 相似文献
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《中国畜牧兽医文摘》2015,(1)
本文采用猪瘟抗体间接ELISA和阻断ELISA检测试剂盒对320份血清样本进行猪瘟抗体检测,符合率达80.63%,对检测结果不一致的样品,利用抗体中和试验(FVNT)做定性检测,结果表明,间接ELISA试剂盒的敏感性和特异性均高于阻断ELISA试剂盒,猪瘟间接ELISA试剂盒更适用于我国猪瘟抗体检测。 相似文献
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用蔗糖密度梯度离心和凝胶层析纯化伪狂犬病病毒(PRV)作抗原,建立了检测PRV抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)。所建立的间接ELISA抗原包被浓度为3.2 mg/L,血清最佳稀释度为1∶80。试验结果表明,间接ELISA检测PRV抗体具有快速、敏感、特异等特点,适合于大量样品的检测,对畜群免疫效果的检测和免疫程序的制定有重要意义。 相似文献
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为探究口蹄疫疫苗的最佳免疫日龄,明确猪口蹄疫母源抗体在体内的消长规律,良圻原种猪场在A猪场随机选取30头53日龄的保育猪,应用间接ELISA、液相阻断ELISA及间接血凝3种不同方法对其进行母源抗体的跟踪监测。结果显示,在53、63、83、93日龄,间接ELISA的阳性率都远高于其它两种监测方法,但3种监测方法的抗体水平都呈下降趋势,并在83日龄时抗体阳性率均下降至较低水平。通过试验初步确定首次免疫猪O型口蹄疫的最佳日龄为70日龄,且间接ELISA方法敏感性高于液相阻断ELISA及间接血凝。 相似文献
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分别采用商品化的酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测试剂盒和血凝抑制(HI)试验方法对153份血清样本进行禽流感病毒(AIV)的H5抗体检测,比较间接ELISA和HI两种方法检测结果的相关性。研究结果表明,间接ELISA和HI两种方法呈较好的相关性,二者间的相关系数为0.765。间接ELISA和HI两种方法检测AIV抗体的阳性符合率为95.8%,阴性符合率为87.2%,总体符合率为96.7%。间接ELISA方法是一种敏感、特异和快速的血清学诊断方法,可以用于临床样本的大规模检测。 相似文献
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间接ELISA检测禽霍乱抗体方法的建立 总被引:9,自引:0,他引:9
用多杀性巴氏杆菌 TJ8菌株制备ELISA抗原 ,与抗鸡 Ig单抗 1 B7酶结合物建立了检测鸡血清抗体水平的间接 ELISA方法。交叉试验、阻断试验、重复性试验等表明该方法重复性好、特异性强 ,灵敏度高。确立了将鸡血清 1 0 0倍稀释监测 ELISA效价(ET)的回归方程 y=1 .4981 + 0 .391 9x(P>0 .0 5 ) ,可用于定量测定。间接凝集试验与ELISA方法的比较试验表明 ,EL ISA法比间接血凝试验敏感性高 4倍以上 相似文献