枇杷细胞悬浮培养生产熊果酸的调控

以枇杷悬浮培养细胞的生长量及熊果酸（UA）的含量为考察指标,从蔗糖浓度、装液量、pH值、接种量、温度、光照强度、摇床转速、激素等开展培养参数的筛选。结果表明：接种量8 g/100 mL,pH6.0,蔗糖30 g/L,25 ℃,白炽灯400 lx,转速130 r/min,装液量130 mL/250 mL,MS+NAA 0.5 mg/L,15 d收获,细胞鲜重是起始的3.577倍,UA含量为34.993 mg/g DW,是自然界枇杷叶的约3.5倍。     

建立高质量马铃薯细胞悬浮培养物的研究

以马铃薯四倍体栽培品种甘农薯２号、布尔班克（Ｒｕｓｓｅｔ Ｂｕｒｂａｎｋ）的块茎和茎段两种外植体为材料,进行了愈伤组织诱导和继代培养、细胞悬浮培养物的建立及其继代培养的研究。结果表明：选取良好的愈伤组织经１～３次继代培养后进行细胞悬浮培养,培养物每５ｄ继代一次,继代时新旧培养基体积按３：１配置,能获得较高质量的培养物。在悬浮培养及继代培养过程中,用高浓度蔗糖溶液或蒸馏水调节该培养液的渗透压,以及采用与愈伤组织固体培养基成分相同的细胞悬浮培养基和悬浮继代培养基,可有效地控制悬浮细胞的质壁分离和破碎现象,有助于建立高质量的细胞悬浮培养物。     

香蕉胚性细胞悬浮培养方法的改进

针对香蕉胚性悬浮细胞培养过程中存在的胚性愈伤组织的诱导率低、周期过长、胚性易丢失等问题, 以“苹果蕉”及“威廉斯”香蕉的未成熟雄花为试验材料, 对香蕉胚性愈伤组织的诱导、 悬浮培养的理化条件进行改进。 结果表明： （1）光照条件较暗培养更有利于诱导理想的香蕉胚性愈伤组织; （2）M1培养基中加入酪蛋白和脯氨酸有利于胚性愈伤组织的诱导; （3）用微孔板代替三角瓶悬浮培养, 有利于悬浮细胞分裂增殖, 而且可减少污染的可能。     

茶悬浮培养细胞玻璃化超低温保存研究

为保存具有稳定代谢能力的优良茶细胞系,本文对茶叶悬浮培养细胞玻璃化法超低温保存进行了初步研究。结果表明:预培养以4d最佳,60%PVS2冰浴装载以20min最好,100%PVS2冰浴脱水处理60min最优,40℃复温解冻细胞存活率最高,采用这些参数进行完整试验的细胞存活率达到76%,初步建立了茶悬浮培养细胞玻璃化超低温保存的冷冻程序。     

人参悬浮细胞原生质体培养的研究

以人参幼叶为外植体,在MS+2ppm2.4—D+0.5ppmKT+500ppmLH培养基上诱导产生愈伤组织.将生长旺盛的愈伤组织转移到MS+1ppm2.4—D+O.5ppmNAA+0.5ppmKT+500ppmLH液体培养基上建立细胞悬浮系.用含2.0%Onozuka R—10,0.5% Pectinase和11%甘露醇的混合酶液在PH5.8、25℃下分离原生质体.原生质体在培养后的第3天形成再生细胞并进行第一次分裂,第8天形成细胞团,40天形成愈伤组织.当再生的愈伤组织转移到MS+0.1ppmNAA+0.5ppmKT上时分化产生大量不定根.     

花生愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以中花2号无菌苗为材料,对愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的最佳条件进行探讨,并对悬浮细胞的生长特性进行检测,建立了花生悬浮细胞培养体系。结果表明,叶片是诱导愈伤组织和进行悬浮培养的理想外植体,愈伤组织最佳诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+2,4-D 2.0mg/L,悬浮培养适宜培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+2,4-D 2.0mg/L+KT 1.5mg/L。悬浮细胞生长呈"S"型曲线,培养12d达到最大生长量,最适继代周期为12d左右,在悬浮培养过程中,细胞数量呈现先上升后下降的趋势,培养液的pH和电导率变化则均为先下降再回升最后趋于稳定。     

显齿蛇葡萄细胞悬浮培养研究

研究了显齿蛇葡萄细胞悬浮培养的基本条件,同时测定了悬浮液中二氢杨梅素的含量。确定了细胞悬浮培养的基本条件是:取继代培养4代之后的愈伤组织接种,以12.5 g/L的接种量接种在附加6-BA(2.0 m g/L),2,4-D(1.0 m g/L),NAA(0.5 m g/L)的M S培养基上,添加100 m l/L的椰子汁,起始pH 5.8,110 r/m in,光照强度为250~350 Lx,光照培养12h/d,25±1℃下培养6 d。经过优化培养之后的悬浮液中二氢杨梅素含量为0.829 g/mL。     

内生细菌及其组合对雷公藤悬浮细胞生长及生化特性的影响

本研究将雷公藤内生细菌菌株 Pseudomonas chlororaphis LG6、Pantoea ananatis LY3、Bacillus cereus group LJ3、Bacillus cereus group LJ12 及其组合分别以活菌、灭活菌体粗提物和菌液的形式添加到悬浮细胞培养体系中,通 过检测悬浮细胞的重量、细胞活力以及培养液的 pH、电导率、可溶性糖和 NO3 ? 含量,分析了内生细菌对雷公藤悬浮细 胞生长状况的影响。结果显示,内生细菌活菌对悬浮细胞生长的影响较大,菌株 LY3、LJ3、LJ12、LY3+LJ12 及 LG6+LY3+LJ3+LJ12 活菌对悬浮细胞的鲜重具有促进作用,菌株 LY3 和大部分混合菌株的活菌降低了培养液的 pH,多 数内生菌株活菌提高了培养液的电导率,内生菌株活菌的添加使培养液的可溶性糖含量发生了较大变化,并明显提高 了培养液中的 NO3 ? 含量。灭活菌体粗提物和菌液的添加对细胞鲜重的增加多表现为抑制作用。     

抗菌肽B、D双基因表达载体的构建及转化广藿香的研究

将人工合成的柞蚕抗菌肽D基因和天蚕抗菌肽B基因分别接上启动子和终止于，克隆到双元表达载体PBin19上，构建成双价抗菌肽基因表达载体pTBD。用三亲交配的方法将pTBD导入根癌农杆菌菌株LBA4404，再通过农杆菌将抗菌肽B、D基因导入广藿香，获27个转基因植株。Southern杂交结果表明，抗菌肽B、D基因已同时整合进3个株系染色体组中。与病原细菌Pseudomonassolanacearum试管共培养结果表明，转基因植株获得较强抗病性。盆栽接菌试验结果也表明．转基因植株具有较强抗病性。     

树盘处理对‘南丰蜜橘’完熟栽培果实浮皮的影响

本研究以大棚延后栽培的‘南丰蜜橘’作为研究材料,结合覆盖材料与保水剂做树盘试验处理,分析不同树盘处理对浮皮程度、果实品质和树盘土壤温湿度的影响。结果表明:在果实成熟的11月,树盘覆盖处理可提升果实可溶性固形物（TSS）、可滴定酸（TA）和维生素C含量,反光膜+保水剂处理提升果实TSS和TA效果显著,分别较对照（CK）高2.30%、0.27%。果实浮皮程度与TSS、TA和维生素C含量负相关;在12月,CK和稻草处理果实TSS、TA含量低,浮皮趋于严重,浮皮程度分别高达1.67级、1.07级,而其他处理果实出现轻度浮皮,均为0.73级。浮皮程度与单果重、果实TA和维生素C含量有很大关联性;在翌年1月,浮皮程度与土壤湿度呈极显著正相关（相关系数为0.879）,而TA与土壤湿度呈极显著负相关（相关系数为-0.911）。反光膜+保水剂处理土壤湿度一直处于最高,此时期TA迅速降低,浮皮程度呈加速趋势。因此,土壤湿度越高,浮皮程度越严重,果实的TSS、TA和维生素C含量越低。通过覆盖处理能降低土壤湿度,提升果实TSS、TA和维生素C含量等品质,推迟‘南丰蜜橘’果实浮皮的发生,减轻果实浮皮程度。其中,地布覆盖处理防治果实浮皮效果最佳,反光膜、地毯、地布+保水剂处理的效果次之。     

双瓣茉莉5个花期挥发性成分GC-MS分析

采用气质联用仪(GC-MS)对福州双瓣茉莉花小花蕾期、大花蕾期、花开12 h开花期、花开24 h开花期和花败期5个时期挥发性成分进行鉴定,并用峰面积归一化法分析各组分含量。结果表明,开花期是挥发性物质集中释放期,花败期含量急剧下降,小花蕾和大花蕾时期仅少量释放,这符合茉莉花为气质花的特性。萜类和酯类挥发性物质是双瓣茉莉花香主要成分,萜类挥发性物质在盛开时大量释放,酯类挥发性物质通常在花开12 h开花期释放量最高。5个不同时期共鉴定出43种挥发性成分,挥发性物质种类和绝大部分挥发性物质含量均是在开花期最高,其中含量较高的乙酸芳樟酯、α-金合欢烯、乙酸苯甲酯、苯甲醇、γ-依兰油烯、乙酸甲酯、反式-法呢醇和β-罗勒烯等是双瓣茉莉挥发性物质的主要成分。结果将为茉莉花精油的提取及茉莉花制茶的采摘时期提供依据,为开展双瓣茉莉花挥发性物质代谢途径的分子调控机理研究奠定基础。     

基于因子分析和聚类分析的30份山黄皮种质资源评价

选取单果重、果实纵径、果实横径、果形指数、单种重、种子纵径、种子横径、可食率、可溶性固形物含量9个性状指标对30份山黄皮种质资源进行评价。结果表明,山黄皮果实的单果重变异幅度最大,果形指数的变异幅度最小;除可溶性固形物含量与其他8个性状相关性不显著外,其余各指标之间大都存在显著或极显著的相关性;采用因子分析和聚类分析将30份山黄皮种质聚为3大类,山黄皮种质资源的果实性状与地理起源有一定的相关性。其中,来自广西龙州县和宁明县的13份山黄皮种质的果实性状表现最好。     

比久、多效唑、根太阳对金叶假连翘株型的控制效应

为减少金叶假连翘绿篱株型控制的修剪成本,特以6年生金叶假连翘为试材,采用L9(34)正交表设计,研究不同药剂种类、浓度水平、施药频率对其嫩枝长度、嫩枝数目以及叶绿素含量的影响。结果表明,3种药剂的作用效果为B9GTYPP333;随着浓度的增大药效增强;施药频率以2、3次为佳。综合3个指标,以喷施3500mg/LB92次的处理效果最佳。这为用植物生长延缓剂控制金叶假连翘的株型提供了科学依据。     

AOC-ipt转录融合基因转化热研5号柱花草

以无菌热研5号柱花草子叶为材料,采用农杆菌介导把AOC-ipt基因转录融合转化热研5号柱花草,通过10 mg/L的潮霉素筛选,获得约500余株抗性苗,通过PCR检测获得23株阳性苗,对这23株阳性苗进行RT-PCR检测,其中14株为阳性.对这14株转基因苗进行了抗盐性初步观察,转基因苗并没有明显地提高热研5号柱花草的抗盐能力.     

相思树悬浮细胞培养及其细胞形态学观察

试验分析了基因型、愈伤组织类型、2,4-D 浓度、蔗糖浓度,起始接种量等各因素对相思树悬浮细胞培养的影响。结果表明：选择淡黄色,质地鲜嫩松脆的愈伤组织作为相思树悬浮培养的材料,能较快地建立起悬浮细胞系。黑木相思细胞小,胚性强,分散性好,最容易建立起悬浮细胞系。当蔗糖浓度为 30 g/L,2,4-D 浓度为 0.5 mg/L时,适宜于悬浮细胞的保持。起始接种量对相思悬浮细胞系生长也有很大影响,从保持悬浮细胞系的角度看,每瓶 25 mL 培养基中适宜的接种量为 0.5~1.0 g。台湾相思悬浮细胞培养周期以 7 d 继代 1 次,卷荚相思悬浮细胞培养周期以 8~10 d 为宜。同时,通过对悬浮细胞培养的显微观察可以看出不同基因型的相思树悬浮细胞,其细胞生长状态各不相同。     

小麦花药液体漂浮离体培养体系的建立与应用

为了建立高效的小麦花药离体培养体系,对6个小麦品种（系）的5个花药离体培养性状进行了鉴定,并利用6种不同时间的低温预处理对两个小麦品种幼穗进行了处理效果的探讨。结果表明,6个品种（系）的出愈及绿苗分化能力均较强,愈伤组织诱导率、绿苗分化率和绿苗产率分别达到116.48%、5.79%和10.25%以上,初步建立了小麦花药液体漂浮离体培养体系,其培养效果好于固体培养方式。6种不同时间的低温预处理培养结果表明,幼穗经4 ℃低温预处理后,愈伤组织诱导率、绿苗分化率及绿苗产率与对照相比均表现下降的趋势,白苗分化率及白苗产率具有增加的趋势,说明未进行低温预处理的适期幼穗培养效果更好。