对虾输精管用于人工授精的研究

越冬后期雄虾输精管中的精子已达成熟程度,可以作为人工授精用精子来源。采取越冬后期雄虾的输精管用于人工授精,除一批卵子未受精外,其余两批的平均受精率为73.6%,孵化率为86.6%。保存72小时后的输精管用于人工授精,平均受精率为54.2%,孵化率为86.7%。类似于用精荚进行人工授精的实验结果。     

通过精液移植构建中国明对虾家系及微卫星分型鉴定父本

本研究首次采用精液移植法进行中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)的家系构建,利用10尾已交尾雌虾纳精囊内精液对17尾未交尾雌虾进行了移植,共建立11个中国明对虾家系,其中含有父系半同胞家系2个;精液移植的平均受精率为46.8%,最高受精率为78%,授精成功率为64.7%。为了揭示每个家系母本内精液的来源情况,选用6个中国明对虾微卫星标记对11个家系的母本、母本内精液及每个家系的6个个体进行分析,推算出每个家系各自的父本基因型,并与各自母本内精液基因型进行比较,成功地对11个家系进行了父本鉴定。实验结果表明,11个家系的父本基因型与各自母本内精液基因型相同,每个家系内个体属全同胞关系,即对于1尾自然交尾雌虾,其纳精囊内精液只来自于1尾雄虾。通过本实验,验证了精液移植在构建中国明对虾全同胞家系和半同胞家系中的可行性,阐明了精液移植家系内个体的亲缘关系,为中国明对虾选育工作提供了技术保证。     

对虾类人工授精的研究和实践

对虾人工授精有精荚移植和人工体外授精两种途径。本文主要介绍人工获取精荚、精荚移植以及人工体外授精方法、存在问题和国内外的研究现状。     

超低温冷冻保存中华鲟F_1精子授精方法研究

利用超低温冷冻保存中华鲟子一代(F_1)的精液,研究4种不同激活液、2种不同的授精方式及5种不同冻精授精量对授精效果的影响。结果表明,冷冻保存365d的中华鲟F_1冻精,用养殖水激活授精效果优于4种激活液,获得(15.04±0.58)%的受精率和(14.6±0.59)%的孵化率。相同条件下,试验1、试验2和试验3的湿法受精率和孵化率分别为(18.3±1.45)%、(13.57±0.76)%、(18.65±0.42)%和(16.82±2.01)%、(11.03±0.98)%、(15.87±1.25)%,湿法授精效果均优于干法授精。用10mL中华鲟卵与不同冻精授精量进行湿法授精,精子密度3.82×109个/mL,稀释比1∶2,冻精活力(35.45±5.26)%,冻精用量0.1~0.6mL,随着冻精用量的加大,受精率和孵化率呈现上升趋势,0.6mL时,受精率和孵化率达最高,分别为(16.43±1.57)%和(14.58±1.35)%,但随着冻精用量的继续加大,其受精率和孵化率随之下降。     

中国对虾雄性生殖系统感染WSSV在其垂直传播中的作用

通过人工感染实验,对中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)雄性亲虾进行投喂感染。在确定其携带WSSV粒子后,将被WSSV感染的精荚人工移植到健康的雌虾纳精囊内。在无其他病源的情况下,促其产卵繁殖,统计各组子代的受精率、孵化率及无节幼体至溞状幼体的变态率贸?式PCR技术对亲虾及子代进行WSSV检测。结果表明,受WSSV感染的精荚能够把病毒传播给健康雌虾,雌虾能产出携带WSSV的卵子,培育出带毒幼体。各组子代的受精率、孵化率及变态率的统计结果表明,感染组和对照组在受精率上没有明显区别,受WSSV感染的精卵细胞可以正常结合。对照组受精卵的孵化率明显高于感染组,差异显著(P=0.045<0.05)。对照组无节幼体的变态率也高于感染组。说明WSSV的入侵对受精卵及幼体的发育有影响,WSSV感染导致部分受精卵及幼体不能正常发育或死亡。     

草虾人工受精技术简介

草虾的成本高,平均每尾亲虾都要100美金左右,且易脱壳。所以一旦没有交配,既使再度成熟,所产的卵亦不能受精,亲虾将成为无用。为了充分利用亲虾,采取人工受精,移植精荚、输精管的办法可提高产卵受精率,借以提高孵化率达到多次利用的目的。 一、雄性生殖器官: 由于要移植精荚、输精管,所以详细介绍一下雄性生殖器官的构造: 1.生殖巢:雄性草虾的生殖巢由精巢、输精管、射精管、贮精荚囊、生殖孔组成。精巢位于头胸甲胃域～心脏域正下方,肠将其分成左右两片,每片8叶,输精管与精巢相连,自左右第4叶精巢下方成急速弯曲,最粗部位直径达3.25毫米突出肝胰脏后方并与之成直角,输精管内充满粘着性分泌物将精子群包围,呈白浊部分为精子群,输精管末端急速呈细管     

台湾研制成草虾人工交配技术

台湾省水产试验所研究成功草虾养殖人工交配繁殖新技术，为海产虾类杂交及品种改良做出了贡献。该项技术一是以电击方式摘取精荚，产卵后平均有71，5％的受精率；二是将雄虾的整个精荚取出分段移植，降低了生产成本；三是将取下的精荚以特殊方法活化，提高了人工交配的成活率．     

长耳珠母贝人工育苗的研究

以解剖方法取得长耳珠母贝的成熟卵子和精子，在氨海水中诱导受精。在—定范围内，提高氨海水浓度可使受精率提高(达65％)，但正常发育率和孵化率有所下降；氨海水浓度以取0．14％为宜。用金藻或合浦珠母贝的精液(或两者混合)作为长耳珠母贝幼体前10天的饵料(10天后投喂扁藻)，能使育成率提高(达17．4％)，酵母不宜作为长耳珠母贝幼体的饵料。     

花鲢和草鱼杂交试验

1972年5月,利用人工催情取得草鱼(♀)卵95．6万粒,与花鲢(♂)的精液进行湿法授精,受精率为59．7％,孵化率为39．5％,得仔鱼苗约24．6万尾。     

紫海胆不同家系早期发育、变态、生长和肠道微生物的比较

为比较紫海胆不同家系间幼体生长发育的差异,实验构建了9个紫海胆全同胞家系,比较了其受精率、孵化率、幼体存活率、变态率、开口率、幼胆生长、性腺发育和消化道微生物组成。方差分析表明,各个家系的受精率均在95%以上,无显著性差异,而其他指标在不同家系间均存在显著性差异。孵化率、早期幼体存活率、晚期幼体存活率、变态率和开口率最高的家系分别为3号(58%)、1号(83%)、4号(90%)、2号(75%)和9号(100%),最低的家系分别为6号(0%)、3号(42%)、2号(76%)、9号(6%)和5号(24.5%)。幼胆生长速率最快是3号家系为146%;最慢的是5号家系为76%。3号家系在实验结束时性腺发育明显;而其他家系性腺未见发育。3号家系的消化道微生物中拟杆菌门丰度较高,变形菌门丰度低;生长速率较慢的5号家系则与之相反。研究结果表明,紫海胆不同家系间的生产性状存在差异,具有选育改良的潜力,实验为紫海胆良种培育积累了相关数据。     

低渗溶液浓度对黄颡鱼精子活力和受精率的影响

为提高黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)人工授精的稳定性,分别用卵子和精子同步激活法以及预激活精子法,在6个梯度浓度(0%～0.5%)范围的低渗溶液中进行人工授精试验,比较精子活力、受精率和孵化率。结果显示:低渗溶液浓度与精子活力、精子激活率和受精率密切相关,在相同浓度的低渗溶液组中采用预激活精子法的受精率显著高于卵子和精子同步激活法(P<0.05),受精率相对应提高了7.7%～14.5%;低渗溶液的浓度和人工授精方式对孵化率无显著影响。结果表明在浓度0.3%的低渗溶液中采用预激活精子法的效果最好。     

人工移植精荚技术在斑节对虾育苗中的应用

采用单人操作法,对斑节对虾实施人工移植精荚技术,观察对虾人工移植精荚技术在斑节对虾育苗生产中的应用情况。结果表明:采用人工移植精荚技术可使雌虾多次产卵受精,使有限亲虾得到充分利用,从而降低育苗成本,达到增产目的;实施人工移植精荚手术的最适宜时机为斑节对虾脱壳后12～24h,成功率高达97.3%;精荚获取以夹取法最佳,该法操作方便、效果较好,夹取后精荚可以再生、成熟,而挤压和虹吸两种方式对亲虾影响较大,成功率不高;术后亲虾经4～5 d精养,卵巢可发育成熟再次产卵,并且幼体孵化、生长等方面与非手术亲虾所繁育幼体生长无明显差异,可以达到类似自然交配的效果。     

江黄颡鱼人工繁育的初步研究

对江黄颡鱼人工繁殖和育苗进行了试验。以PG(鲤鱼脑垂体激素)、HCG(绒毛膜促性腺激素)等催产药物进行混合催产,水温24～26℃,效应时间为20～24h,产卵率为90%以上。采用等渗液稀释磨碎的精巢进行人工授精,用塑料网片着卵板粘卵,在孵化池内孵化,平均孵化率为87%。研究结果表明:江黄颡鱼在广西的适宜催产季节为4月中旬至6月底,工厂化育苗的饵料可用丰年虫和适口虾料来解决。     

江鳕胚胎发育的观察

研究了人工繁殖时江鳕（Lota lota）的胚胎发育。江鳕的胚胎发育分为胚盘期、卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、器官形成期6个阶段,20个发育时期,详细描述了各个发育时期的特征。在0~3℃下,胚胎历时998h孵出仔鱼,从受精卵至孵出的积温为887~1023h.℃。本研究还比较了江鳕自产与人工授精时卵的受精率的差异。结果显示,人工授精卵的受精率（约30%）比自产（19.4%）高10%。江鳕胚胎发育的不同时期对外界环境的敏感性不同,主要经历了3个死亡高峰,包括胚盘期至二细胞期、桑椹胚期至原肠早期、出膜期。     

羊驼人工采精及授精技术的研究和应用

羊驼常用的人工采精方法主要是假阴道法采精和电刺激法采精。其精液特性不同于其他家畜及野生动物,主要表现为精液量少、精子密度低及精液呈高粘性,这些因素阻碍了羊驼人工采精及授精技术的发展。采精的精液用于授精时要考虑诱导排卵的方法和时间、精液质量及输精时间等因素。重点讨论了羊驼人工采精和授精技术的研究进展及其应用。     

Spermatophore cryopreservation and artificial insemination of black tiger shrimp, Penaeus monodon (Fabricius)

To develop an appropriate cryopreservation protocol for spermatophores of black tiger shrimp, Penaeus monodon, three cryoprotectants (dimethyl sulphoxide (DMSO), methanol (MeOH) and ethylene glycol (EG)) at two concentrations (5% and 10%) were examined. Artificial implantation of spermatophores was also carried out to assess the fertilizing ability of fresh and post‐thaw spermatophores. Spermatophores were collected during consecutive regenerations (15‐day intervals) and assessed for qualitative and quantitative changes and also for fertilizing ability by implantation. The mean fertilization rate for artificial insemination using post‐thaw spermatophore was 79.9±3.7%, lower than the fertilization rates observed for artificial implantation using fresh spermatophore and natural mating. Mean hatch rates for fresh spermatophore, frozen‐thawed spermatophore and natural mating were 88.8±0.6%, 87.8±0.4% and 88.3±0.5%, respectively; and there was no difference among the three groups. The mean fertilization rate of spermatophores collected during the first stripping was higher (90.6±0.6) than during the second stripping (85.7±2.6), but the mean hatch rate was not different between the two strippings. The highest mean sperm viability (79.7±0.4%) was obtained from DMSO (5%), with no survival observed in the 10% MeOH treatment. Spermatophore weight, total sperm count and percentage of abnormal sperm were not different between spermatophores collected at the first and second stripping. This is the first study to report high fertilization and hatch rates from cryopreserved spermatophore using artificial implantation of spermatophore before spawning.     

刺参(Apostichopus japonicus) 9月龄主要经济性状遗传力的估计

本研究基于全同胞组内相关法对9月龄刺参(Apostichopus japonicus)苗种体长、体重、肉刺总数3个性状的遗传力进行了评估.以前期收集、保存的刺参群体为亲本,选取了健康刺参29头,采用不平衡巢式设计方法及人工刺激采卵授精方法,按照1雌配2-5雄的原则,构建了6个母系半同胞家系及23个父系全同胞家系,至9月龄时,分别抽取每个家系30-50个后代测定相应个体的体长、体重及肉刺总数,应用数量遗传学分析和全同胞组内相关法估计刺参9月龄体长、体重和肉刺总数共3个生长性状的遗传力.结果显示,9月龄刺参体长雌性组分遗传力的估计值为0.87,雄性组分遗传力估计值为0.85,全同胞组分遗传力估计值为0.86;刺参体重雌性组分遗传力估计值为0.20,雄性组分遗传力估计值为0.73,全同胞组分遗传力估计值为0.46;肉刺总数雌性组分遗传力估计值为0.43,雄性组分遗传力估计值为0.32,全同胞组分遗传力估计值为0.37.t检验表明,体长、体重的雄性组分遗传力达到显著水平(P＜0.05),全同胞组分遗传力均达到极显著水平(P＜0.01),肉刺总数的遗传力均未达到显著水平.     

银白鱼人工繁殖受精卵附着介质筛选

为探索有利于银白鱼人工繁殖中的附着介质,提高孵化效率,选取4种受精卵附着介质(纱窗网、棕片、砾石、瓦片),开展了银白鱼人工繁殖试验,对不同产卵介质条件下银白鱼受精卵的孵化率、孵化时长进行了分析比较.结果表明,银白鱼人工繁殖受精率约为90％,采用4种介质的孵化率由高到低依次为:棕片(80％)、纱窗网(70％)、砾石(45...     

Sperm Quality of Pond-Reared and Wild-Caught Penaeus monodon in Thailand1

Sperm quality, as determined by visual examination and by reaction with “egg-water” was not significantly different (P > 0.05) for sperm obtained by electro-ejaculation from ablated or non-ablated pond-reared Penaeus monodon. Nor was sperm quality different between pond-reared and wild-caught prawns. Normal sperm, determined by appearance, ranged from 17.1 to 21.0%, while reactive sperm ranged from 1.5 to 3.0%. There were, however, significant correlations (P < 0.01) between spermatophore weight and prawn weight (r= 0.73, N= 434). Male prawns weighing 4150 g produced on average spermatophores weighing 22.7 mg and containing 0.8 million sperm, while prawns weighing 61-90 g produced on average spermatophores weighing 56.6 mg with 2.5 million sperm. Ablation did not increase spermatophore size or sperm quality, although it significantly increased mortality of ablated males. Male prawns could be re-ejaculated at about weekly intervals with no change in sperm quality. Wild-caught female prawns artificially inseminated with spermatophores from electro-ejaculated males produced normal spawns with 51% average egg fertilization, and 41% nauplii hatch success. Nauplii hatch success following spawning increased from >60% for newly inseminated females to near zero after 30 days post-insemination, indicating spermatophore depletion and/or deteriorated sperm quality during spermatophore storage in the thelycum. The findings of the present study indicate that electro-ejaculation and artificial insemination are relatively simple and practical methods for improving captive reproduction performance of closed-thelycum prawns such as P. monodon, and that pond-reared and wild-caught males produced sperm of similar quality.