无籽沙糖桔高效离体再生体系的建立

以无籽沙糖桔异交种子(无籽沙糖桔×有籽沙糖桔)的实生苗上胚轴为材料,以MT为基本培养基,研究了不同种类的植物生长调节剂及其组合对无籽沙糖桔离体再生的影响,建立了高效的无籽沙糖桔离体再生体系。结果表明:ZT和TDZ不利于无籽沙糖桔不定芽的诱导;单一附加6-BA时,6-BA浓度为0.250mg/L的不定芽诱导率和平均每个外植体不定芽数最高,分别为88.5%和2.7个/外植体;同时附加6-BA与IBA时,以6-BA 0.250mg/L+IBA 0.25mg/L的效果最好,不定芽诱导率达95.2%,平均每个外植体萌芽数为3.6个。再生不定芽生根较难,在附加NAA的培养基中不能生根,在附加IBA的培养基中可生根,再生植株;在附加IBA 1.00mg/L的培养基上生根效果最好,生根率为10%。     

桃幼胚离体培养再生植株的研究

 以中晚熟桃品种‘京艳’、‘绿化9 号’、‘ 晚蜜’和‘大久保’为试材, 初步建立了桃体细胞胚发生和增殖的三阶段程序, 即胚性愈伤组织诱导、体细胞胚发生和发育、体胚萌发成株以及次级体细胞胚的增殖。各品种体细胞胚的萌发成株率分别为73. 5 %、38. 6 %、5. 4 %和58. 2 %。用苯脲类细胞分裂素TDZ有效诱导‘京艳’的幼胚子叶直接再生植株, 再生率70 % , 平均每外植体不定芽数13. 8 个, 再生不定芽生根后获得完整植株。     

番茄子叶和下胚轴离体再生体系的建立

以‘09-22’番茄无菌苗子叶和下胚轴为外植体,研究了其在MS附加不同浓度6-BA和NAA/IAA的培养基上的诱导分化及不定芽生根情况。结果表明:IAA比NAA更利于该品种子叶的再生;在不同激素组合下,番茄子叶和下胚轴愈伤组织诱导率均达100%,但子叶的愈伤组织生长状态好于下胚轴,不定芽分化率也略高于下胚轴,然而,下胚轴来源芽的生根较快,且生根效果好于子叶来源芽。该研究筛选出‘09-22’番茄子叶和下胚轴不定芽再生的最佳培养基配方为MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 0.5mg/L,最佳生根培养基配方为MS+IAA 0.1mg/L。     

两个花椰菜品种再生体系的研究

以2个花椰菜品种的子叶和上胚轴为外植体,以MS为基本培养基,设置不同激素浓度,建立再生体系。结果表明:子叶作为外植体时不定芽分化率低,子叶大部分发生黄化。上胚轴作为外植体不定芽分化率较高,在适合的培养基上均能达到100%,‘祁连白雪’上胚轴最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L,‘新东海明珠80天’的最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+IAA0.5 mg/L。分化后得到的不定芽在MS+6-BA 0.5 mg/L培养基上伸长后,在MS+IAA 0.5 mg/L的培养基上生根,生根率达100%,移植成活率95%。     

马齿苋高频再生体系的建立及对草丁膦敏感性测定

以马齿苋子叶和下胚轴为外植体,研究了外源激素对其不定芽的诱导及不同浓度6-BA、NAA、GA3对不定芽伸长的影响,并测定了马齿苋子叶和下胚轴对草丁膦的敏感性。结果表明:MS+2.0mg/L 6-BA+100mg/L水解酪蛋白为下胚轴不定芽再生最适培养基,不定芽再生率达96.65%;MS+3.0mg/L 6-BA+100mg/L水解酪蛋白为子叶不定芽再生最适培养基,不定芽再生率达100%;最佳的不定芽继代培养的培养基为MS+0.5mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA+0.2mg/L GA3;生根培养基为MS+2.0mg/L IBA,生根率达100%;以子叶和下胚轴为材料研究其对草丁膦的敏感性,发现子叶对草丁膦更敏感,0.050mg/L草丁膦对子叶的致死率达到89.0%;对下胚轴的致死率为71.5%。该研究建立了马齿苋植株高频再生体系,并确定了其对草丁膦的敏感性,可为该品种的基因工程研究提供必要的理论和实践基础。     

蓖麻胚轴外植体离体再生研究

以蓖麻胚轴为外植体,研究了不同种类和浓度的细胞分裂素对胚轴再生不定芽的影响以及不同浓度的生长素对外植体根分化的影响.结果表明:从成熟蓖麻种子中剥离的胚轴接种在MS基本培养基并添加0.5 mg/L 6-BA或10.0 mg/L ZT中诱导不定芽的再生频率最高,分别为86.7％和68.9％.健壮的不定芽在MS+0.2 mg/L NAA的培养基中根分化率达26.7％.     

薄皮甜瓜离体再生体系的优化

通过器官发生途径诱导形成不定芽,建立薄皮甜瓜‘IVF05’植株再生体系,探讨不同外植体及不同的激素组合对不定芽再生的影响。结果表明,子叶近胚轴端外植体的不定芽再生率为90.00%,子叶节的再生率为85.00%,子叶远胚轴端外植体的再生率为31.43%,下胚轴的再生率为0,子叶近胚轴端是‘IVF05’不定芽分化的理想的外植体。不定芽诱导中最适宜的培养基为MS+ABA 0.5 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1,在此培养基上产生的愈伤较少,能正常分化的不定芽较多,不定芽的生长较快。在MS+6-BA 0.05 mg·L-1的不定芽伸长培养基上,分化的不定芽能够伸长长大。在MS+IAA 0.2 mg·L-1的生根培养基上无根苗容易生根。从外植体培养到获得完整再生植株需50⁶0 d。     

TDZ对甜椒不定芽分化的影响

为了建立甜椒高频、高效离体培养再生体系,以甜椒子叶、真叶、下胚轴为外植体,采用了不同浓度的TDZ与IAA、6-BA的配比,研究了TDZ对甜椒不定芽分化的影响。结果表明:仅含有TDZ的培养基中芽分化率几乎为0,仅含有IAA、6-BA的培养基中芽分化率最高达80%,加入TDZ后,在0.5mg/L IAA+10.0mg/L 6-BA+0.5mg/L TDZ的激素组合培养条件下,可获得96%的丛生芽诱导频率。表明在甜椒芽诱导过程中添加TDZ能够很好地提高分化效率。     

茄子组织培养高效再生植株体系的优化

以三月茄为试验材料,探讨了不同浓度6-BA、ZT与IAA对茄子外植体不定芽分化的影响,比较了下胚轴不同接种方式对不定芽分化的影响和不同生根培养基对茄子不定芽的生根效果。结果表明,MS+IAA(0.2 mg/L)+6-BA(2.0 mg/L)+ZT(1.0 mg/L)能加强外植体不定芽的分化能力,带柄子叶的不定芽分化率达到60.2%,下胚轴的不定芽分化率达到98.1%,类Flamingo-bill外植体的不定芽分化率更是达到了100%;与横向平接相比,下胚轴正向扦插能提高不定芽的分化率和不定芽分化系数,还能提前分化;茄子不定芽在MS固体培养基上生根效果最好,生根率达到100%。     

无籽西瓜“蜜童”子叶再生体系的建立

以无籽西瓜"蜜童"无菌苗子叶为外植体,建立了高效的组培再生体系。结果表明:不定芽诱导培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA,诱导率达88.33%,最佳伸长培养基为MS+0.2mg/L 6-BA,最佳生根培养基为1/2MS+0.5mg/L IBA,生根率达90%。     

Influence of cytokinins on in vitro morphogenesis in root cultures of Centaurium erythraea—Valuable medicinal plant

The purpose of this work was to acquire more information on the capacity of in vitro grown Centaurium erythraea Gillib. normal and hairy root cultures to simultaneously regenerate adventitious buds and to evaluate the variations induced on regeneration response by treatments with six cytokinins. Explants from normal and hairy root cultures were cultured on half-strength MS medium (1/2 MS) with kinetin (KIN), N⁶-benzylaminopurine (BA), 6-γ,γ-dimethylallylaminopurine (2IP), N-(2-chloro-4-pyridyl)-N′-phenylurea (CPPU), 1-Phenyl-3-(1,2,3-thiadiazol-5-yl)urea (TDZ) and 6-[4-Hydroxy-3-methyl-but-2-enylamino]purine (ZEA), used alone in six different concentrations. The average number of adventitious buds per explant was promoted by all of cytokinin treatments. Urea-type cytokinins, TDZ and CPPU were more effective for the induction the morphogenesis of adventitious buds than adenine-type cytokinins. We found that the 1.0 μM CPPU induced the largest number (25.6, 18.2, respectively) of adventitious buds in normal and hairy root culture. TDZ-supplemented media induced highest number of adventitious buds (24.2) from normal root explant, but from hairy root explant average number of buds is lower (20.5). Regenerated shoots were excised and placed on 1/2 MS medium without hormone. The rooted plantlets were successfully acclimatized in greenhouse conditions.     

抱子甘蓝组织培养及人工种子研究

以抱子甘蓝下胚轴为外植体诱导再生植株,并制作人工种子。结果表明:苗龄为8d的无菌苗,其下胚轴诱导不定芽频率最高,平均诱导不定芽数达11.3个。6-BA、ZT对下胚轴诱导不定芽均具有明显的促进作用,6-BA2mg·L-1作用最显著,繁殖系数达11.2。不定芽在不含激素的1/2MS培养基上诱导生根,驯化移栽后成活。将不定芽用海藻酸钠包埋成人工种子,生根率为24%,移栽成活并开花。     

春秋姜黄组培快繁技术研究

以春秋姜黄根茎腋芽为外植体,采用添加6-BA、NAA、TDZ不同浓度和不同组合的MS基本培养基,进行不定芽诱导、丛生芽继代增殖和生根、壮苗培养等研究,探索其组织培养和离体快繁技术的适宜条件。结果表明:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L的培养基腋芽诱导率高达86.7%,且生长速度快;MS+6-BA 2.0mg/L+TDZ 0.1mg/L最有利于芽增殖,继代3次后,增殖系数达14.1;MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L培养基的壮苗生根效果最好。试管苗长至6cm时移栽,成活率可达90%以上。     

蔓性蝴蝶草叶片的组织培养及植株再生

以蔓性蝴蝶草全展叶片为外植体,以MS为基本培养基,分别添加0.01、0.05、0.1 mg/L浓度的TDZ及CPPU,研究TDZ及CPPU对分化芽的影响,并进行了最佳生根培养基的筛选.结果表明:不同浓度的TDZ和CPPU对蔓性蝴蝶草的芽分化影响不同,MS+ TDZ0.1 mg/L和MS+CPPU 0.05 mg/L对外植体芽的分化的诱导效果最佳,达到100％;在1/3 MS培养基上的生根效果最佳;移栽成活率在90％以上.     

不同细胞分裂素对2001富士苹果离体叶片再生的影响

以综合经济性状优良的2001富士苹果为试材,研究了不同浓度的细胞分裂素对其离体叶片再生效率的影响。结果表明:2001富士离体叶片分化不定芽适宜的BA、CPPU和TDZ的最佳再生浓度范围分别为8.0mg/L、6.0~8.0mg/L和1.0~2.0mg/L,再生频率分别达到67.9%、78.6%~89.3%和100.0%,ZT和KT不适宜诱导2001富士叶片分化不定芽。     

美人指葡萄不定芽离体诱导再生植株的研究

6-BA、TDZ与IBA不同浓度组合对美人指葡萄叶片、叶柄和茎段不定芽离体器官发生途径诱导再生植株有不同的影响。以茎段为外植体在MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.01mg/L培养基上分化效果最好,再生率75.00%;叶片、叶柄分别在MS+6-BA3.0mg/L+IBA0.10mg/L和MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.05mg/L培养基上分化效果较好。TDZ和IBA研究的几种组合都能诱导不定芽再生,但再生率不高。     

地被月季‘Royal Bassino’高频再生体系的建立

 以地被月季‘RoyalBassino’为试材, 进行了组培快繁和外植体再生条件的研究。结果表明,以带有腋芽的茎段为外植体, MS中添加6-BA 1.5 mg/L和IBA 0.1 mg/L 为最适诱导培养基, 诱导出芽率100%; MS中添加6-BA 0.5 mg/L和IBA 0.05 mg/L可以获得最高增殖倍数(6.3) ; 而添加IBA 0.01 mg/L的1/2MS为最佳生根培养基, 生根率92%。试管苗经7 d驯化后, 移栽成活率在99%以上。分别以叶柄、叶盘和茎段为外植体进行再生培养, 以MS为基本培养基, 叶柄在添加噻苯隆(TDZ) 7μmol /L的诱导培养基中暗培养10 d后, 转接到添加6-BA 0.5 mg/L的再生培养基中光照培养约20 d, 可以获得57.1%的芽再生率。     

杏胚珠培养及幼胚子叶不定芽诱导研究

以盛花后25、35、50、55、60d的凯特杏胚珠为外植体,研究胚珠培养的适宜条件;选择发育一致的幼胚子叶,研究不定芽的发生条件。结果表明,SH培养基是凯特杏胚珠培养的适宜培养基;盛花后25d的凯特杏胚珠(PF=0),仅采用生长培养不足以发育成可见胚,试验采用诱导方式获得了可见胚,诱导出胚率为80%;以MS为基本培养基,BA与NAA结合诱导能力强;但这种胚小且瘦弱,继续生长培养,利用幼胚子叶诱导不定芽。在幼胚子叶诱导不定芽方面,盛花后25、35d取样的凯特杏胚珠,培养后获得幼胚子叶,诱导不定芽的适宜TDZ质量浓度为1.25mg/L,诱导出芽率分别为85.00%、80.00%;盛花后50、55d取样的材料,适宜TDZ质量浓度为2.50mg/L,出芽率分别为65.00%、60.00%,而盛花后60d取样的材料,适宜TDZ质量浓度为5.0mg/L,出芽率为61.11%,不定芽主要发生在子叶的近轴面、胚轴连接处及子叶近轴端两侧;在相同培养基中,25℃进行21d暗培养,盛花后35、50、55、60d材料出芽率分别为72.22%、65.00%、60.00%、55.56%;4℃下28d暗培养,35、50、55、60d依次为59.09%,71.42%、77.78%、86.36%;对不定芽进行伸长、生根与快繁培养,获得了健康正常的植株。通过以上研究,建立了凯特杏幼胚4级培养体系,即(1)胚珠培养,获得可见胚(1级培养);(2)幼胚生长培养(胚培养),获得了健壮幼胚(2级培养);(3)幼胚子叶再生,获得不定芽(3级培养);(4)不定芽组培苗快繁(4级培养)。