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甲病毒(Alphavirus)是披膜病毒科(Togavirus family)的成员,是单股、正链的RNA病毒,包括塞姆利基森林病毒(Semliki forest virus,SFV)、辛德毕斯病毒(Sindbis virus,SIN)和委内瑞拉马脑炎病毒(Venezuelan equineencephalitis virus,VEE)等30个成员.20世纪80年代末,随着这些病毒的cDNA感染性克隆的建立,相继开展了以甲病毒复制子为基础载体的研究,利用复制子特有的RNA复制酶提高翻译模板mRNA的量来实现高水平表达的目的,以改造出相应的甲病毒载体,已被广泛地应用于基因治疗和分子生物学的研究,并在疫苗领域中受到关注. 相似文献
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慢病毒可以感染分裂细胞和非分裂细胞,是较有前途的病毒载体,来源于HIV-1型载体,能阻止形成有复制能力的HIV-1病毒,构建一个更为安全的模式是慢病毒载体构建策略的焦点。该文介绍了慢病毒载体应用过程中的不同载体系统及构建策略,对载体的生物安全性进行了分析,展望了慢病毒在基因治疗、RNA干扰及转基因领域的应用前景。 相似文献
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正链RNA病毒是家族非常庞大,可以感染多种动、植物及人的一类病毒。研究这类病毒的复制机理和调控方式对于阐明病毒的致病机制,以及研制新型抗病毒药物和疫苗等具有重要意义。RNA依赖性RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)是正链RNA病毒进行复制的关键蛋白酶,研究其结构与功能是了解病毒复制机理的前提和基础。本文即对近年来关于正链RNA病毒RdRp的结构与功能研究进展情况进行综述。 相似文献
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RNA重组是RNA病毒普遍存在的变异方式之一,但仍有很多关键性问题尚未阐释清楚。目前认为重组机制主要有两种,复制型重组机制即模板转换(template-switch),又称为copy-choice机制;另一种为非复制型重组机制,即断裂连接机制(breakage-religation)和类似于剪接的反酯作用(splicing-like transesterification)机制。由于重组在病毒进化变异过程中发挥着不同的作用,阐明重组机制有助于研究病毒进化变异和复制转录等生命周期过程。本文拟就RNA重组类型、重组机制、对RNA病毒重组的研究、重组的生物学意义及应用4个方面,综述RNA病毒重组机制及其研究进展。 相似文献
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对应用于兽用疫苗研发的病毒载体,包括痘病毒载体、疱疹病毒载体、腺病毒载体、杆状病毒载体、副粘病毒载体、弹状病毒载体、甲病毒载体、冠状病毒载体、反转录病毒载体、黄病毒载体等DNA和RNA病毒载体的研究进展进行了综述,以期为我国基因工程活载体疫苗研发工作提供参考. 相似文献
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RNA干扰(RNAi)是指短的双链RNA能降解与其互补mRNA,特异性诱发转录后基因沉默的现象,近年来成为抗病毒研究的新途径。为了探索siRNA对单链DNA病毒复制的影响,根据犬细小病毒(CPV)基因组序列选择4段21nt的保守序列设计4对SiRNA寡聚核苷酸,插入psiSTRIKE系列的U6发卡结构载体,构建了小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的psiSTRIKE表达载体,转染FK81细胞,筛选稳定的转染细胞,通过病毒感染检测、细胞活度测定和TCID50测定,研究质粒介导的siRNA对CPV复制的影响。结果表明,构建的4个psiSTRIKE表达载体转染细胞后,能够不同程度地抑制病毒在宿主细胞内的复制。因此质粒介导的shRNA能抑制CPV在细胞内的复制和感染,具有抗病毒作用,从而为进一步通过siRNA途径控制病毒奠定基础。 相似文献
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家蚕细胞质型多角体病毒的核酸结合蛋白 总被引:2,自引:0,他引:2
采用Northwestern分子杂交方法 ,研究了家蚕细胞质型多角体病毒 (BmCPV)结构蛋白质的功能 ,结果证明VP1、VP3和VP4具有与核酸结合的能力 ,暗示了VP1可能是依赖于RNA的RNA聚合酶 ,在病毒核酸复制中起作用 ;VP4可能是核酸结合蛋白 ,在病毒粒子的复制包装过程中有结合核酸、促成完整病毒粒子形成的作用 ,可能是BmCPV病毒复制包装中的关键蛋白 相似文献
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小RNA病毒属于单股正链RNA病毒,包括肠道病毒属、鼻病毒属、心脏病毒属、口疮病毒属和肝病毒属等几个主要的属.口蹄疫病毒(FMDV)、脊髓灰质炎病毒(PV)、丙型肝炎病毒(HCV)、脑心肌炎病毒(EMCV)是该科病毒的典型代表.小RNA基因组的末端具有非编码区(UTR),是病毒基因组复制的主要调控位点,3'非编码(3'UTR)区是复制酶的第一结合位点,其二级结构在病毒的翻译与复制过程中具有重要作用,该区是病毒复制酶识别并结合的位点,主要起始负链RNA的合成,3'UTR在病毒的翻译过程及感染性病毒粒子的形成过程中起着十分重要的作用.因此,研究小RNA基因组的3'端结构和功能可为确定复制与表达位点在非编码区的具体位置和主要特征,以及其他正链小RNA病毒基因组复制的研究奠定了理论基础. 相似文献
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动物腺病毒载体的研究进展 总被引:4,自引:2,他引:2
腺病毒载体已成为近年来在基因治疗和重组疫苗研究方面的热点 ,文章较详细地叙述了腺病毒载体的构建基础、腺病毒载体的构建方法和各类动物腺病毒载体的研究现状以及腺病毒载体在应用时遇到的免疫学问题。并依据现有的腺病毒活载体的研究现状 ,讨论了动物腺病毒载体的发展趋势 ,提出在人类腺病毒载体应用遇到的免疫学问题上 ,某些动物腺病毒载体将具有独特的潜力 相似文献
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E F Dieleman 《The Veterinary quarterly》1986,8(3):250-256
This review describes research conducted from 1900-1983 on trypanosomiasis due to Trypanosoma evansi in Indonesia. Clinical signs and post-mortem findings in horses, cattle, buffaloes, pigs and dogs, experimental transmission tests to establish possible surra vectors in Indonesia, and research on chemotherapy and chemoprophylaxis are discussed. 相似文献
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为获得高产量纯品植物乳杆菌素PlnE和PlnF,研究其开发生物兽药的可能,试验通过人工合成植物乳杆菌素基因PlnE和PlnF,构建表达载体pGEX-4T-E和pGEX-4T-F,经IPTG诱导表达条件优化后,进行亲和层析纯化融合表达蛋白,并使用SDS-PAGE进行鉴定。试验结果表明,pGEX-4T-E和pGEX-4T-F构建成功,纯化后获得2种产量高达30%的纯品融合蛋白,SDS-PAGE鉴定两融合蛋白表达正确。说明PlnE和PlnF基因片段编码的多肽能在原核细胞中正确表达,为进一步研究该细菌素的生物活性奠定了基础。 相似文献
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为降低RNAi技术的毒副作用,筛选高效抑制猪瘟病毒复制的shRNA序列,根据有关报道构建了荧光报告系统shRNA筛选平台。该平台以9种抑制效率分别为强、中、弱的shRNA筛选载体作为参照,结合荧光报告系统进一步量化shRNA的抑制效率。根据2种已知体外有效抑制猪瘟病毒复制的siRNA-N2、siRNA-NSSB,分别设计得到shRNA-N2、shRNA-NS5B表达栽体,继而采用高效、高灵敏度的shRNA筛选平台对这2种shRNA进行了检测,结果显示单拷贝情况下,shRNA-N2抑制靶序列效率较强,shRNA-NSSB抑制效率弱。本试验通过新策略大大提高了shRNA干扰效率检测的灵敏度,为采用shRNA转基因克隆动物进行抗病育种的研究提供了保障。 相似文献
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Andrea Maria Blanc Mabel Beatriz Berois Lorena Magal�� Tom�� Alberto L. Epstein Juan Ram��n Arbiza 《Journal of veterinary science (Suw?n-si, Korea)》2012,13(1):59-65
Herpes simplex virus type-1 (HSV-1) amplicon vectors are versatile and useful tools for transferring genes into cells that are capable of stimulating a specific immune response to their expressed antigens. In this work, two HSV-1-derived amplicon vectors were generated. One of these expressed the full-length glycoprotein D (gD) of bovine herpesvirus 1 while the second expressed the truncated form of gD (gDtr) which lacked the trans-membrane region. After evaluating gD expression in the infected cells, the ability of both vectors to induce a specific gD immune response was tested in BALB/c mice that were intramuscularly immunized. Specific serum antibody responses were detected in mice inoculated with both vectors, and the response against truncated gD was higher than the response against full-length gD. These results reinforce previous findings that HSV-1 amplicon vectors can potentially deliver antigens to animals and highlight the prospective use of these vectors for treating infectious bovine rhinotracheitis disease. 相似文献
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本研究利用RNAi介导的病毒抗性的原理,以柑橘上发生频繁、危害严重的柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)为研究对象,以期得到对CYVCV具有抗性的转基因植株。根据CYVCV的CP基因和RP基因序列设计含有不同酶切位点的特异性扩增引物,获得RNA干扰片段,分别构建RNA干扰载体ihpCP-pGN、ihpRP-pGN和ihpCPRP-pGN,将干扰载体转入农杆菌EHA105后,采用农杆菌介导法进行柑橘的遗传转化,获得两株转基因阳性植株,为培育抗CYVCV病毒柑橘品种提供技术参考和理论基础。 相似文献