应用弱毒疫苗防治番茄病毒

全国植保总站于1983年5月5日至7日,在北京市召开了“应用弱毒疫苗防治番茄病毒病现场会”。 中国科学院微生物所自1978年开始进行应用弱毒疫苗防治番茄病毒病研究工作。经多年试验示范,应用弱毒疫苗N14在以烟草花叶病毒病原为主的地区,防治番茄病毒病效果较好。病     

植物病毒弱毒系及其应用——1.烟花叶病毒番茄株弱毒系的诱变和性质的研究

我们用亚硝酸诱变方法,从烟花叶病毒番茄株获得两个突变株——N_(11)和N_(14)。它们在番茄、烟等植物上都不产生病状。在温室和田间,预先接种N_(11)或N_(14)可使番茄和烟干扰强株的侵染。对弱毒株和强毒株的生物学和理化性质的比较实验说明,弱毒株的增殖速度和病毒浓度都低于强株系。N_(11)外壳蛋白的氨基酸组成也与强株系不同。     

弱毒病毒的生产方法与应用

现在世界上已知的植物病毒（包括类病毒）有１目１０科４７属８５０余种。植物病毒病对农作物的危害,因病毒种类、感染时期、传病媒介（主要是昆虫）发生时期与发生量、农作物的种类、品种、栽培与环境条件等而异,正确的解析危害困难,加之蔬菜、花卉面积小、品种多,更...     

保护地番茄青枯病的防治技术

番茄青枯病是１种细菌性病害。土壤温度高、湿度大、气温急剧上升，最易诱发青枯病。此外，番茄连作、缺钾肥以及根部损伤均有利于发病。番茄青枯病，尤其在保护地中，应采取以加强栽培管理、选用抗病品种为主，药剂防治为辅的防治技术。１）加强栽培管理。①实行与十字花科或禾本科作物４a（年）以上轮作，避免与茄科作物轮作。②调节土壤酸度。青枯病病菌适宜在微酸性土壤中生长，可结合整地撒施适量的石灰，使土壤呈微碱性，以抑制病菌生长，减少发病。一般每６６７m２（亩）施石灰５０～１００kg（千克，下同）。③改进栽培技术。高畦种…     

保护地番茄叶霉病的防治

叶霉病是一种真菌性病害，仅为害番茄，是保护地番茄的一种重要病害，可造成２０％～３０％的减产，必须加以防治。一、发病症状：叶片、叶柄和果实均可受害，但以叶片为主。发病初期，多在叶片背面形成近圆形或不规则形白色霉斑，霉斑多时可相互融合，布满叶背面，颜色变成灰紫色或墨绿色。被害叶片正面随背面病斑的扩大，逐渐褪绿变黄，直到全叶枯黄，严重时叶片正面也长霉斑。果实发病多围绕果蒂形成圆形黑色硬质病斑，稍凹陷。二、发病条件：相对湿度在８０％以上，有助于病菌侵染和孢子的形成，在相对湿度９０％以上，温度为２０～２５…     

番木瓜环斑病毒西瓜株系弱毒突变体的筛选与应用

为防治番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)在我国葫芦科作物上引起的病毒病害,以PRSV西瓜株系山东分离物(PRSV-SD)侵染性cDNA克隆为基础,采用定点突变方法将辅助成分-蛋白酶保守氨基酸137位和346位的天冬酰胺(N)和417位的缬氨酸(V)突变为丙氨酸(A),应用农杆菌浸润法接种西葫芦叶片并分析突变对PRSV-SD致病力的影响,筛选弱毒突变体,进而评价其交叉保护效果。结果表明,与野生型PRSV-SD相比,获得的3个突变体N137A、N346A和V417A,接种后在西葫芦植株上的症状明显减轻,衣壳蛋白在叶片中的积累水平分别为野生型PRSV-SD的24.0%、13.0%和4.0%,均为弱毒突变体。当保护间隔期为10 d时,弱毒突变体N137A具有完全的交叉保护效果,N346A可延迟发病15 d,而V417A无交叉保护效果。当间隔保护期为15 d时,弱毒突变体N137A和N346A的保护效率分别为100.0%和26.7%,而V417A无交叉保护效果。     

浸根法对番茄接种弱毒株(N14)获得的效果

 应用弱毒株保护,对烟草花叶病毒强毒株(TMV-L)侵染番茄形成花叶病,而获得免疫性的研究。国内外试验都取得一定效果。     

番茄环斑病毒的提纯

通过对番茄环斑病毒繁殖寄主、抽提缓冲液、澄清剂、浓缩方法和悬浮缓冲液等比较试验,初步筛选出得率高,并能保持病毒完整的提纯程序,即:用番杏为繁殖寄主,用0.05M 磷酸钾缓冲液(pH 7.5,内含0.02M 巯基乙醇)抽提,加1%Tritonx-100澄清,经8%聚乙二醇沉淀,接着差速离心(28000转/分,4小时)浓缩病毒,最后用0.01 MPB(pH 7.5内含0.002MEDTA)悬浮,低速离心,上清液为部分提纯的病毒制剂。此提纯制剂具有侵染性;病毒粒体完整,为等轴对称,直径约28μm;且具有典型的核蛋白吸收曲线。     

保护地番茄晚疫病的发生与防治

番茄是深受人们喜爱的茄果类蔬菜,其适应性强,栽培面积广,产量高,营养丰富。保护地栽培的小气候环境,有利于番茄的生长发育,但同时也为病原物的繁衍创造了良好的条件。保护地番茄病害种类多,为害严重,晚疫病是番茄的重要病害之一,各地温室和棚栽番茄均有发生,常造成严重损失。     

保护地番茄溃疡病的发生与防治

 1987年我所塑料小棚番茄品种对比试验田发生一种新病毒,病株初期似缺水状,叶色灰绿,叶尖焦枯,发病不到一月即萎凋枯死,维管束褐色。当时我们误认为番茄枯萎病。     

应用dsRNA技术检测番茄环斑病毒简报

番茄环斑病毒Tomato ring Spot virus-Tomato是一种危险性的外检病毒,寄主植物受其侵染后会产生一类过渡形式的病理性双链RNA(dsRNA),对其进行检测具有快速、准确、经济、简便又不需专门设施的优点。检测过程如下;取感病叶片和健康寄主叶片各5g,分别加入一定量液氮,在冰冻状态下快速碾磨成细粉末。经STE/苯酚抽提全     

应用IC-RT-PCR方法检测番茄环斑病毒

以番茄环斑病毒阳性样品为研究材料,根据GeneBank(核酸序列数据库)中的序列设计特异性引物进行IC-RTP-CR(免疫反转录聚合酶链式反应,下同)扩增,获得产物克隆到pMD18-T载体中,经测序后与目标序列(ToRSVL19655)比较,核苷酸同源性为87.3%。通过实验建立了检测该病毒的IC-RT-PCR方法。该方法对其他样品核酸提取困难而抗体较容易制备的病毒检测同样具有借鉴意义。     

番茄环斑病毒的灭活处理

番茄环斑病毒(TmRSV)的病汁液和 PEG 粗提纯液,用温度、甲醛和戍二醛以及超声波进行灭活处理。PEG 粗提纯液经温度(水浴)60℃处理10分钟或使甲醛浓度达0. 3%二种方法后,均丧失侵染性而有抗原性。将其在4℃冰箱中存放,前者抗原性能保持8个月以上,后者只能保持5个月。病汁液不经处理,在4℃冰箱中存放1个月能丧失侵染性,而抗原性也可保持8个月以上。所以阳性对照的灭活处理以病汁液在4℃下存放1个月和 PEG 粗提纯液60℃处理10分钟为最佳方案。     

番茄环斑病毒的检测技术

番茄环斑病毒的检测方法一般有下列几种: 一、生物学检测 生物学方法是植物病毒检测的最常用方法之一,将植物病毒接种到指示植物(Indicator plant)上,通过指示植物的特殊症状,来判定是哪一种病毒。将TomRSV的PSP分离物(桃茎纹孔病分离物)摩擦接种于以下9种诊断寄主上,2—3周后出现以下症状: 苋色黎(Chenopodium amaranticolor):小的局     

国内外番茄花叶病毒的三个弱株系防病增产效果的比较

Mckinney 1929年发现植物病毒株系间干扰现象,萨拉曼1933年报道了PVX的弱毒系(G型)感染的烟草,能对接种坏疽系产生免疫后。大岛1965年起用高温诱变法获得了番茄上TMV—L的弱病毒L_(11)、L_(11A)、L_(11A237),R_(ast)1972年后,用亚硝酸处理普通系     

保护地番茄生理性落花落果的原因及预防措施

保护地栽培番茄如果不能满足番茄所需的水、肥、光、热、气等生长发育条件,落花落果就会比较普遍,特别是缺乏栽培经验的菜农的棚室表现更为严重,有的棚室第一穗花果出现全部脱落,第二穗花果大部脱落,造成严重的经济损失。笔者根据调查中发现的落花落果原因,提出有关预防措施。1低温障碍落花1.1病因番茄开花期对温度反应敏感,尤其开花前5～7d和开花后3～5d,要求白天气温20～30℃,夜间14～16℃,低于10℃,氮、硼、锌等决定花粉管伸长的元素就供应不足,致使花粉管变粗变短,不能伸出花药囊,影响授粉受精而落花。1.2预防措施①选择耐低温、弱光的…     

保护地番茄灰叶斑病的发生与综合防治

番茄灰叶斑病是鱼台县保护地番茄近年发生为害较严重的病害,全县种植的近3万个温室大棚中,2002年病棚率为43%,2003年达90%。防治不及时的,番茄减产20%左右,有的甚至减产80%,同时造成番茄果实质量下降。为此,笔者近2a对该病进行了细致的观察和初步的试验。1病原及症状经山东农业     

烟草环斑病毒和番茄环斑病毒的半巢式RT-PCR检测

烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)和番茄环斑病毒(Tomato ringspot virus,ToRSV)是我国禁止入境的检疫性有害生物。采用半巢式RT-PCR方法对这两种病毒进行了检测,用Trizol快速提取病毒总RNA,并根据TRSV和ToRSV的外壳蛋白基因设计特异性引物,经过第一轮RT- PCR和第二轮半巢式PCR扩增,TRSV样本分别得到359 bp和206 bp特异性片段,ToRSV样本分别得到340 bp和219 bp特异性片段。半巢式RT-PCR扩增产物的测序表明,TRSV产物序列与GenBank中登录的外壳蛋白基因存在88%～97%的同源性,ToRSV产物序列与GenBank中登录的外壳蛋白基因存在96%～100%的同源性。研究显示,DAS-ELISA与RT-PCR的检测灵敏度相近,而半巢式RT-PCR的检测灵敏度比这两种方法高出10~3倍以上。     

植物病毒弱株系及其应用 Ⅱ.烟花叶病毒番茄株弱株系N_(11)对番茄的保护作用

用亚硝酸诱变获得的烟花叶病毒弱株系 N_(11),在实验温室中对番茄和烟感染强株系具有保护作用。在杭州市的田间实验中,接种 N_(11)弱株系的番茄比未接种的对照增产11.39%。在兰州市的田间和生产性温室实验中,分别增产10.9～12.7%和27.5～32.2%