利用扦插和组织培养技术繁殖特异种质资源滇桑(Morus yunnanensis Koidz.)

滇桑(Morus yunnanensis Koidz.)属于桑树特异种质资源,是研究桑属植物进化的重要桑种。解决滇桑嫁接不亲和性而不易繁殖的技术难题,对促进滇桑的科学研究和开发利用有重要意义。以云南省屏边大围山国家自然保护区采集的滇桑冬芽及枝条为材料,利用扦插和植物组织培养技术进行无性繁殖试验,结果表明:滇桑的冬芽能够在添加3.0 mg/L 6-BA和0.5 mg/L GA3的MS培养基中萌发,其萌发的小芽在添加1.0 mg/L 6-BA和0.2 mg/L GA3的MS培养基中能正常生长并木质化,继续在添加0.5 mg/L IBA的1/2 MS培养基中培养生根后能够移栽成活,其萌发率、生根率和移栽成活率分别达到95%、55%、90%;扦插能够诱导含冬芽的滇桑枝条生根获得完整植株并移栽成活,但其扦插生根率较低,仅30%左右。试验结果提示,进一步优化组织培养和扦插条件,有望建立滇桑的无性繁殖技术体系。     

‘白雪公主’草莓茎尖组培快繁体系研究

以草莓品种‘白雪公主’茎尖为外植体,以MS为基础培养基,对培养前暗处理、不定芽诱导、增殖培养、生根培养等组培快繁环节进行研究,并建立了其组织培养快速繁殖体系。结果表明：暗处理3 d能够促进茎尖萌发,提高萌发速度;MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖25 g/L为适宜的诱导培养基,诱导率达82 %以上;MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖25 g/L为适宜的增殖培养基,增殖系数为8.00;1/2 MS+蔗糖20 g/L作为生根培养基为适宜的生根培养基,培养5 d后生根率达100 %,平均生根数为10条,平均根长为5.00 cm。     

两性株番木瓜愈伤组织分化初探

以番木瓜两性株的愈伤组织为材料,以MS 为基本培养基,研究了不同人工激素种类、不同组合对愈伤组织诱导不定芽和无菌芽诱导生根的影响,初步建立了两性株番木瓜愈伤组织诱导分化体系。结果表明,6-BA和TDZ对番木瓜愈伤组织分化都有一定的诱导作用,而6-BA的作用更优于TDZ,最适浓度为 0.05 mg/L。GA3具有促进6-BA诱导愈伤组织分化的作用,诱导番木瓜愈伤组织分化出芽的最佳培养基为MS + 6-BA 0.5 mg/L + GA31.0 mg/L。相对NAA而言,IBA更适于诱导不定芽生根,生根培养基以MS + IBA0.3 mg/L为好。     

维多利亚菠萝组培快繁技术研究

以“维多利亚”菠萝品种的冠芽为外植体,采用6－BA、NAA、IBA等激素配比对芽诱导、愈伤诱导、继代增殖和生根培养。结果表明, 愈伤组织诱导率最高的为MS BA2.0 mg/L NAA0.2 mg/L。愈伤诱导不定芽最理想配比为MS 6-BA3 mg/L NAA0.1 mg/L。芽的继代增殖系数较高和芽较粗壮的培养基配比为MS 6-BA2.0 mg/L NAA0.1 mg/ L,适宜生根培养基为MS＋IBA0.5 mg/L＋NAA 1 mg/L。生根率达100%。     

扁穗牛鞭草组织培养体系建立

以扁穗牛鞭草茎段为外植体，进行组织培养体系研究，结果表明：初代培养最佳配方为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L，芽诱导率可达100％；继代增殖最佳增殖配方为MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．2mg／L，增殖系数为5．4；生根阶段以1／2MS＋IBA0．2mg／L为最佳的生根培养基配方，生根效果最好，生根率最高；初代培养生根苗与增殖后生根培养苗移栽成活率都在97％以上。     

‘紫金四季’草莓组培快繁技术研究

以‘紫金四季’的叶片为外植体,对愈伤组织诱导、不定芽诱导、增殖培养、生根培养等组培快繁关键环节进行了研究,建立了‘紫金四季’草莓组织培养快繁技术。结果表明：‘紫金四季’幼叶较叶柄更适宜作为组培外植体,培养时叶片正面朝上放置更有利于愈伤的产生;诱导不定芽培养基以 MS 2.0mg/L TDZ 0.1mg /L NAA为佳,诱导率为50%;继代增殖培养基为 MS 1.0mg /L 6-BA 0.2 mg /L NAA,其增殖系数为6.17;生根培养基为 1 /4MS,生根率达 100% ,平均生根数达 6.6条。     

紫椴组织培养研究

以紫椴一年生枝条萌芽为繁殖材料,研究紫板组织培养的适宜条件.实验结果表明,紫椴组织培养中最适分化培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+IBA0.2mg/L,增殖倍数达到3.6以上;最适生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L,生根率可达到93%.     

药桑用离体冬芽组织培养和用枝条扦插繁殖的试验

来自新疆地区的天然多倍体药桑属于黑桑(Morus nigra)种质资源,具有较高的药用价值,故应用组织培养和扦插的方法解决药桑嫁接繁殖困难的问题,以满足药用开发所需。运用Box-Behnken模型分析培养基中不同诱导物质含量对药桑冬芽愈伤组织诱导率的影响程度为6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)浓度赤霉素(GA3)浓度聚乙烯吡咯烷酮(PVP)浓度,3种诱导物质的最佳用量为2.21 mg/L 6-BA、0.39 mg/L GA3、0.79 g/L PVP,在此条件下药桑冬芽愈伤组织诱导率预测可达79.32%,验证试验的愈伤组织诱导率为78.57%,但通过愈伤组织培养再生植株较困难。在低浓度激素下冬芽萌发的小芽能够在1.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L萘乙酸(NAA)的MS培养基中生长,继续在添加0.5 mg/L吲哚丁酸(IBA)的1/2 MS培养基中可诱导出有根系的再生植株且移栽后能成活,由愈伤组织形成丛生芽的再生率达到57.69%。用含冬芽的药桑枝条进行扦插试验,其扦插生根率较低,仅15%左右。上述试验结果表明,虽然然用组织培养方法和扦插方法均能获得药桑的再生植株,但需要进一步优化组织培养和扦插条件提升药桑的无性繁殖效率。     

荔枝和龙眼茎段诱导成苗技术的初步研究

本文选用荔枝和龙眼实生苗带腋芽茎段为外植体,经常规消毒后,接种于附加不同浓度的激素6-BA、IAA和2,4-D的MS、B5、1/2MS等基本培养基上,诱导茎段萌芽。结果表明,MS培养基适合荔枝和龙眼茎段芽的诱导,荔枝茎段萌芽最佳的培养基为MS 0.6 mg/L 6-BA 0.2 mg/L IAA 0.5 mg/L 2,4-D 3g/L活性炭,萌芽率为71.7%,正常芽率为90.9%;龙眼茎段萌芽最佳培养基为MS 0.6 mg/L 6-BA 0.4 mg/L IAA 0.5 mg/L 2,4-D 3g/L活性炭,萌芽率为75.6%,正常芽率为83.8%。诱导荔枝芽苗生根的最佳培养基为MS 0.05 mg/L 6-BA 1.0 mg/L IBA,生根率为2.9%;诱导龙眼芽苗生根的最佳培养基为MS 0.1 mg/L 6-BA 1.0 mg/L IBA,生根率为5.0%。     

利用桑树特异种质资源的冬芽组织培养再生植株的试验

以不同类型的桑树特异种质资源的冬芽为材料,分别在含有不同种类生长调节剂及添加量的培养基中培养诱导桑树再生植株,考察桑树特异种质资源利用冬芽培养再生植株的可行性,筛选适宜的生长调节剂及其用量。结果表明:供试桑树种质资源的冬芽在不添加生长调节剂的培养基中外植体停止生长,添加生长激素TDZ能较好地诱导和促进愈伤组织的形成与生长,但会抑制生长芽的再生长,而添加细胞分裂素6-BA能促进冬芽的再生,且添加3.0 mg/L 6-BA的培养基中冬芽再生率显著高于添加1.0 mg/L 6-BA的培养基;8份桑树种质资源的冬芽在含3.0 mg/L 6-BA的改良培养基中培养,新疆药桑和小花叶皮桑的丛生芽诱导率最高,其冬芽的再生率均为66.7%,滇桑次之,再生率为55.5%,天目山桑和斯里兰卡的再生率分别为40.0%和25.0%;5份桑树种质资源的冬芽再生组培苗转移至生根培养基中培养1个月后,只有滇桑和新疆药桑分别诱导出再生根系(诱导率为分别为20.0%、14.3%)后移栽成活。研究结果初步显示,离体组织再生培养是保存和利用天然22倍体新疆药桑、渐危种滇桑等珍稀桑树种质资源的有效途径之一。     

药用植物紫花地丁组织培养与快速繁殖技术研究

以药用植物紫花地丁叶片和叶柄为外植体,经过不同灭菌处理等,进行紫花地丁组织培养与快繁技术的研究。结果表明,紫花地丁叶片用70%乙醇处理20 s、0.1%Hg Cl2处理6 min灭菌效果最佳,而叶柄的最佳灭菌条件为70%乙醇40 s+0.2%HgCl_24 min;叶片最适愈伤组织诱导培养基为2/3MS+2,4-D 0.2 mg/L+6-BA 0.8 mg/L,叶柄在MS+2,4-D 0.2 mg/L+6-BA 0.6 mg/L培养基上的诱导分化效果最好;MS+2,4-D 0.6 mg/L+6-BA 0.8 mg/L和MS+2,4-D 0.4 mg/L+6-BA 0.6 mg/L分别为叶片、叶柄诱导丛生芽和继代增殖的最佳培养基;最适生根培养基是1/2MS+2,4-D 0.4 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L,生根率89%,移栽后,成活率高达95%。本研究成功建立了紫花地丁组织培养快繁体系,为其药用价值的进一步开发利用奠定了基础。     

‘玛瑙红’樱桃茎尖培养脱植原体快繁体系建立及优化

为了解决玛瑙红樱桃植原体病害问题,以玛瑙红樱桃休眠芽为外植体,优化了玛瑙红茎尖快繁体系并对该体系进行ISSR检测,同时采用茎尖培养法、热处理结合茎尖二次培养法对玛瑙红樱桃植原体进行脱除。结果如下：茎尖萌发培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+TDZ 0.3 mg/L,萌发率为80.67 %;增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+GA3 1.5 mg/L,平均增殖系数为5.07;生根培养基为MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,生根率为79.17 %;ISSR检测未发生变异,表明该快繁体系稳定;最佳茎尖培养脱除方法为：取休眠芽茎尖0.3~0.6 mm进行培养,脱除率为66.67 %,成活率为52.22 %,最佳热处理结合茎尖培养脱除方法为：组培苗经38 ℃处理21天后剥取0.3~0.6 mm茎尖培养,脱除率为86.67 %,成活率为42.22 %。     

核桃组培快繁体系的建立

为建立‘南核1号’核桃组培快繁体系,以带芽茎段为外植体,开展外植体采集时间、初代诱导、继代增殖和生根培养各阶段试验。结果表明,全年中4-5月为最佳外植体采集时间;最佳诱导培养基为DKW+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L,诱导率为66.7%;最佳增殖培养基为DKW+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.01mg/L,增殖率为63.3%,增殖系数为3.83;生根采用二步诱导生根法,先在附加IBA 6.0mg/L的1/2DKW中暗培养,再转移到1/4DKW中光培养,生根率为46.6%。     

外源激素对掌叶大黄愈伤组织诱导及种苗生根的影响

以掌叶大黄无菌苗为材料,研究不同外源激素浓度及配比对试管苗生根、愈伤组织诱导及增殖的影响。结果表明:掌叶大黄的根、茎、叶均可作为诱导愈伤组织的材料。2,4-D诱导愈伤组织的能力明显高于NAA,以2～3mg/L 2,4-D的诱导频率较高为87.93%～93.11%,诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+2mg/L NAA+2mg/L 2,4-D+2mg/L 6-BA;6-BA对愈伤组织诱导频率无直接影响,但明显影响愈伤组织的增长量及生长状态。愈伤组织继代增殖以MS+0.5mg/L 2,4-D+1mg/L NAA+1mg/L 6-BA最好;MS+0.5mg/L IBA适宜于试管苗生根。     

草地早熟禾高效丛生芽体系的建立

本试验以草地早熟禾无菌种子苗茎尖为外植体,建立了高效的草地早熟禾丛生芽离体培养体系.结果表明:茎尖在附加0.5 mg/L 2,4-D和3.0 mg/L 6-BA的MS培养基上可诱导茎尖部位基部膨大,且诱导率最高.膨大的基部在2.0mg/L6-BA的丛生芽诱导培养基上,其诱导频率最大,然后将丛生芽转入附加3.0mg/L6-BA和0.07mg/L2,4-D的培养基上可进行继代培养,丛生芽在1/2MS培养基上生根率达100%.     

草地早熟禾高效丛生芽体系的建立

本试验以草地早熟禾无菌种子苗茎尖为外植体,建立了高效的草地早熟禾丛生芽离体培养体系。结果表明:茎尖在附加0.5mg/L2,4-D和3.0mg/L6-BA的MS培养基上可诱导茎尖部位基部膨大,且诱导率最高。膨大的基部在2.0mg/L6-BA的丛生芽诱导培养基上,其诱导频率最大,然后将丛生芽转入附加3.0mg/L6-BA和0.07mg/L2,4-D的培养基上可进行继代培养,丛生芽在1/2MS培养基上生根率达100%。     

旱柳Q106组织培养及快繁体系的建立

以旱柳(Salixmatsudana)Q106春季萌生嫩枝为外植体,建立了“以芽繁芽”的组织培养快繁体系。丛生芽培养基为MS+BA0.4mg/L+NAA0.2mg/L。继代培养基为MS+BA0.4mg/L+NAA0.2mg/L和BA0.4mg/L+NAA0.4mg/L;MS+BA0.4mg/L+NAA0.2mg/L和BA0.4mg/L+IBA0.2mg/L交替使用。最佳生根培养基为MS+GA30.2mg/L+NAA0.5mg/L。     

红皮红肉火龙果组培快繁技术的研究

为建立火龙果的组培快繁体系,以红皮红肉火龙果(Hylocereu polyrhizus) 的幼嫩茎段为外植体进行组培快繁研究,结果表明,最适的外植体消毒的方法为75% 酒精消毒20 s,2%次氯酸钠5min, 0.1% 升汞10 min,污染率为11.11% ,成活率达73.33%。MS+6-BA 3.0 mg/L + NAA 0.2mg/L为诱导不定芽效果最好的培养基,诱导率83.33%。添加6-BA6.0 mg/L 和NAA0.1 mg/L有利于芽的增殖和分化,增殖系数可达5.9。研究发现最佳的壮苗培养基为MS+6-BA2.0 mg/L +NAA0.1 mg/,虽然繁殖系数不高,但其不定芽生长粗壮。最适宜的生根培养基为：MS+IBA 0.6 mg/L+NAA0.2 mg/L。,生根率达到 100% ,平均生根数6.83条每株。     

兰州百合鳞片组织培养研究

以兰州百合的内层鳞片为外殖体,以MS为基本培养基并添加不同配比生长调节剂,进行组织培养研究。结果表明,以MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基对初代培养形成不定芽最佳,低温有助于外殖体分化;不定芽增殖最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;1/2 MS+0.2 mg/L NAA+蔗糖60 g/L适宜苗的生根培养,生根率达100%,且结鳞茎率达73.4%。     

复序橐吾组培再生体系研究

用复序橐吾(Ligularia jaluensis Kom.)种子获得无菌苗,取其叶片为外植体,以MS培养基为基础,通过添加不同浓度和种类的细胞分裂素及生长素,目的是筛选出叶片组织培养的最适培养基。结果表明:种子较好的灭菌时间为75%酒精30 s+1‰升汞4min;初代培养基为MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L,由此获得的愈伤组织致密、颜色绿,具有很好的诱导效果,其诱导率达到90%;继代增殖的最适培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,其增殖倍数高达3.9,并且苗生长状况良好;生根最适培养基为:1/2MS+NAA 0.5mg/L,生根率达100%。