小麦成熟胚愈伤组织诱导及再生影响因素初探

以2个小麦品种成熟胚为外植体进行离体培养,研究了不同取胚方式、诱导培养基中不同2,4-D浓度、分化培养基中不同2,4-D浓度与KT浓度组合对愈伤组织的诱导率、直接成苗/根率及再生成苗率的影响。结果表明:刮胚法的再生苗率最高、直接成苗/根率最低;在2个基因型条件下,2,4-D浓度在2 mg·L-1条件下,愈伤组织出愈率均最高;在分化培养基中,MS+2,4-D 2 mg·L-1+KT 2 mg·L-1其再生率最高。     

籼稻高效再生体系建立及其影响因子的研究

以籼稻成熟胚为材料,研究了不同因子对水稻愈伤组织诱导和分化的影响,建立了籼稻高效再生体系。结果表明,2,4-D可诱导愈伤组织产生,但博B在仅含2,4-D的诱导培养基中,愈伤组织诱导率极低;6-BA和2,4-D共同作用显著提高出愈率,在2mg.L-12,4-D+0.5mg.L-16-BA的条件下,253的出愈率最高可达到92.9%,博B出愈率可达到84.8%,2,4-D的最适浓度是1.0-2.0=mg.L-1,6-BA的最适浓度0.5-1.0mg.L-1。不同比例的KT、6-BA、NAA和IAA配合使用有利愈伤组织分化,分化率均达到100%,成苗率最高达63.3%。在诱导培养基中添加6-BA不仅对愈伤组织形成和质量有较好促进作用,而且有利于愈伤组织的分化。     

寒地粳稻再生体系的优化研究

以长白3号、东农427和龙稻9号成熟胚为试验材料,采用离体培养法研究培养基种类、激素种类和浓度以及Cu2+对水稻成熟胚再生体系的影响,对寒地粳稻再生体系进行优化。结果表明,长白3号和龙稻9号宜采用NMB+2,4-D 3 mg·L-1+6-BA 1.5 mg·L-1作为诱导培养基,而东农427宜采用NMB+2,4-D 3 mg·L-1+6-BA 1 mg·L-1作为诱导培养基,愈伤组织诱导率由优化前的49.00%、42.50%和68.01%分别提高到87.50%、91.30%和81.20%;东农427和龙稻9号宜采用NMB+0.02 mmol·L-1Cu2+培养基进行继代,长白3号宜采用NMB+0.01 mmol·L-1Cu2+培养基进行继代,愈伤组织褐化率分别由优化前的51.85%、29.41%和43.24%降低到23.61%、14.28%和21.60%;长白3号和龙稻9号宜采用N6+3 mg·L-16-BA+1 mg·L-1NAA+0.02 mmol·L-1Cu2+作为分化培养基,东农427宜采用N6+3 mg·L-16-BA+1 mg·L-1NAA+0.01 mmol·L-1Cu2+的N6培养基进行分化培养,愈伤组织分化率分别由优化前的12.90%、12.50%和2.38%提高到80.76%、46.15%和31.25%。     

2,4-D和6-BA对籼稻成熟胚愈伤组织诱导和植株再生的影响

[目的]探究2,4-D和6-BA对籼稻成熟胚愈伤组织培养的影响。[方法]在愈伤组织诱导和分化培养基中设置不同的2,4一D和6-BA浓度,研究2,4一D和6-BA对籼稻成熟胚愈伤组织诱导、成苗及再生幼苗生根的影响。[结果]在含0．5mg／L2,4-D的培养基中,嘉育948、盐恢559、扬籼6547、中二软占、明恢86、广恢998、遵籼3号等7个品种的愈伤组织诱导效果最佳;在含最适2,4一D浓度的诱导培养基中再添加0．2mg／L6-BA对愈伤组织诱导率作用不明显,但抑制愈伤组织分化成苗;在分化培养基中适当降低6-BA浓度,既能保证愈伤组织成苗率不下降甚至上升,又可以提高再生植株的质量。[结论]该研究结果为2,4一D和6-BA在籼稻愈伤组织培养中的合理使用提供借鉴。     

小麦新品种鄂恩4号种子愈伤组织的诱导

选取小麦新品种鄂恩4号成熟胚和带胚半粒种子为外植体,采用MS基本培养基,以6种浓度的植物生长素2,4-D和2种浓度的细胞分裂素6-BA配伍,组成12种不同浓度组合的培养基,研究了3种预处理种子、激素浓度及外植体对愈伤组织诱导的影响。结果表明,MS 2,4-D2～8mg·L-1均能有效地诱导愈伤组织,2,4-D浓度达到10mg·L-1时,对愈伤组织的形成起一定的抑制作用;带胚的半粒种子出愈率低于成熟胚;常温处理的种子其愈伤组织的诱导率比低温、CaCl2处理的种子出愈率高。     

结缕草成熟胚愈伤组织的诱导及再生体系的研究

以结缕草的成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织诱导进行植株再生。结果表明在MS+2,4-D(2.0mg/L)+VB1(4mg/L)的培养基中,成熟胚可较高频率的诱导产生愈伤组织,诱导率为43.20%,但愈伤组织质量较差。将其在降低2,4-D浓度和添加6-BA,ABA的继代培养基中继代培养,可明显改善愈伤组织质量,增加胚性愈伤。筛选继代的胚性愈伤组织置于分化培养基MS+6-BA(1.0mg/L)+KT(2.0mg/L)+NAA(0.1mg/L)中,分化率45.6%。本研究建立了一套有效的以成熟胚为外植体结缕草组织培养再生体系。     

不同外源激素对胀果甘草愈伤组织诱导及褐化的影响

以胀果甘草下胚轴、子叶为外植体,以MS为基本培养基,研究了不同激素浓度配比对胀果甘草愈伤组织诱导率和褐化率的影响.结果表明:不同浓度的6-BA、2,4-D以及6-BA、NAA组合下的子叶、下胚轴愈伤组织诱导率及褐化率均具有极显著差异;NAA对子叶愈伤组织的诱导效果好于2,4-D,较高浓度的6-BA、NAA及较低浓度的6-BA、2,4-D更易导致下胚轴、子叶愈伤组织的褐化;供试范围内胀果甘草下胚轴和子叶愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.5mg·L-1NAA+0.5mg·L-16-BA和MS+2.5mg·L-1NAA+0.5mg·L-16-BA.     

特色马铃薯品种红宝石再生系统的筛选

采用3因素3水平L9(34)正交试验设计,以特色马铃薯品种红宝石试管苗茎段为试材,分别选用3种植物激素(诱导愈伤用NAA,2,4-D,6-BA;诱导分化用NAA,GA3,6-BA)的3个水平对其茎段的离体再生进行研究,筛选适合红宝石的愈伤和芽分化诱导培养基。结果表明,不同培养基表现出不同的诱导效果,愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+NAA 0.5 mg·L-1+2,4-D 1.0mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1,愈伤率达100%;植株再生最佳培养基是MS+NAA 0.5 mg·L-1+GA31.0 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1,再生率为80.3%,分化后再生苗健壮。     

抗松材线虫病黑松胚性愈伤组织诱导

以抗松材线虫病黑松(Pinus thunbergii)(以下简称抗性黑松)未成熟合子胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织。对影响胚性愈伤组织诱导的因素进行研究发现,在南京地区,6月下旬至7月上旬是采集抗性黑松未成熟球果诱导胚性愈伤组织的最佳时期;抗性黑松未成熟球果在冰箱4℃冷藏7~14 d,能有效地提高胚性愈伤组织的诱导率;麦芽糖更适合抗性黑松胚性愈伤组织诱导;KT质量浓度变化对抗性黑松胚性愈伤组织诱导影响比6-BA显著,诱导抗性黑松胚性愈伤组织最佳激素组合为2,4-D 4 mg·L-1+6-BA 2 mg·L-1或2,4-D 4 mg·L-1+KT 1 mg·L-1。     

毛稔叶片离体培养及植株再生研究

以毛稔叶片作为外植体, MS为基本培养基,研究不同种类激素的浓度配比对毛稔叶片离体再生的影响。结果表明,黑暗条件与光照12 h·d-1有利于毛稔愈伤组织形成,毛稔叶片愈伤组织最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+2.0 mg·L-12,4-D+0.1 mg·L-1 NAA,光照12 h·d-1诱导40 d,愈伤诱导率为96%;叶片形成的愈伤组织分化率极低,分化率随6-BA浓度升高而升高,愈伤组织分化最适培养基为MS+0.1 mg·L-1 NAA+2.0 mg·L-16-BA,分化率为10%;最适生根培养基为1/2 MS+0.1 mg·L-1 NAA,生根率为88.89%。     

谷子种子愈伤组织的诱导与植株再生

[目的]研究不同激素种类和浓度配比对晋谷21号谷子种子愈伤组织诱导及植株再生的影响,旨在筛选最佳的愈伤组织诱导和分化的激素配比,建立稳定高效的谷子种子再生体系。[方法]以晋谷21号谷子的成熟种子为外植体,研究不同激素种类和浓度配比对晋谷21号谷子愈伤组织诱导及植株再生的影响。[结果]愈伤组织的诱导以MS培养基中附加2,4-D的效果要优于NAA,同时加入适合浓度的6-BA与之配比可以提高愈伤组织的质量,以MS培养基中附加2,4-D 2.0 mg·L~(-1)、6-BA 0.2 mg·L~(-1)时,愈伤组织诱导率最高,达92.86%; 6-BA诱导愈伤组织分化的效果优于ZT,培养基中附加6-BA 1.0 mg·L~(-1)时,愈伤分化率最高,为13.33%;将谷子分化苗转接于MS培养基上可诱导生根。[结论]诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2.0 mg·L~(-1)2,4-D+0.2 mg·L~(-1)6-BA,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA。     

橄榄下胚轴的愈伤组织诱导

采用离体的橄榄成熟胚在无菌条件下培养成橄榄胚苗,分别以上、下胚轴及胚根为材料,探讨橄榄愈伤组织的诱导方法.结果表明,筛选出的MS+KT 0.5 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1+2,4-D 0.5 mg·L-1培养基组合为诱导愈伤组织的有效培养基.这为橄榄的细胞培养及胚状体诱导奠定了基础.     

不同基因型小麦成熟胚愈伤组织的诱导与分化

以小麦成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织诱导,建立一套有效的小麦诱导再生体系.以抗冻早-30、百麦4411和"06-4046"3个小麦基因型为材料,对影响小麦愈伤组织诱导和分化的因素进行了研究.结果表明,2,4-D浓度为2mg·L-1时更有利于诱导胚性愈伤组织;在抗冻早-30和百麦4411分化中加入KT 2 mg·L-1有助于提高分化率和再生率,在"06--4046"分化中加入KT 0.5 mg·L-1对小麦成熟胚的分化和再生苗生长是有利的:不同小麦品种加入400 mg·L-1水解酪蛋白更有利于诱导愈伤组织.因此,在MS基本培养基中附加2 mg·L-1 2,4-D、400 mg·L-1水解酪蛋白及一定量的KT,可促进小麦成熟胚愈伤组织的诱导和分化再生苗.     

高留胚率水稻辽粳294成熟胚组织培养条件的优化

以高留胚率水稻辽粳294成熟胚为外植体,对影响高留胚率水稻愈伤组织诱导、分化的接种方式、培养基中激素水平进行研究。结果表明,用解剖刀在胚上纵切1刀后再将种子接在培养基上,种子灭菌彻底,愈伤组织诱导率高且质量较好。诱导培养基中激素6-BA和KT的浓度对愈伤组织的诱导率有极显著的影响,诱导培养基为N6+2 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT时,诱导率较高,可达90.0%;分化培养基为MS+0.8 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA时,绿苗分化效果好,分化率为73.0%。     

高秆野生稻愈伤组织诱导分化研究

获得品质优良的愈伤组织是野生稻资源离体保存和遗传转化的基础。以高秆野生稻为材料,通过采用N6D与NB为基础培养基,研究不同浓度激素组合对高秆野生稻愈伤诱导的影响,并分析比较优质胚性愈伤组织分化成苗的情况。结果表明,以N6D为基础培养基,2,4-D浓度为2.0 mg·L-1的培养基诱导高秆野生稻的出愈率最高,达到50.00%。以NB为基本培养基,最优激素组合为2.0 mg·L-12,4-D+3.0 mg·L-1NAA+3.0 mg·L-1IAA+1.5 mg·L-1KT,出愈率为35.0%,愈伤直径为0.43 cm,愈伤色泽淡黄,质地紧密。说明适宜的激素组合能够诱导高质量的高秆野生稻胚性愈伤,良好的胚性愈伤在MS分化培养基上的分化率为60.0%。通过培养基改良的方式可建立高秆野生稻脱分化与分化的离体研究体系。     

超级稻沈农9741的组织培养体系的构建

以超级稻沈农9741的成熟胚为外植体,通过筛选基本培养基、优化激素组合和调节培养基渗透压,构建了适合水稻特定品种的高效再生体系.试验结果表明:愈伤组织诱导培养采用13(NBB 2.0mg·L-12,4-D)培养基可获得95%的愈伤诱导率;愈伤组织继代培养采用S3(NBB 1.5 mg·L-12,4-D 0.2 mg·L-16-BA 500 mg·L-1脯氨酸)的培养基能使愈伤快速增殖,并且保持良好的胚性;愈伤组织分化培养采用D2(NBB 3.0 mg·L-16-BA 0.5 mg·L-1NAA 500 mg·L-1脯氨酸)的培养基可获得85%的幼苗分化率.该体系可用于超级稻沈农9741的遗传转化和基因工程育种研究中.     

长俊木瓜体细胞胚胎诱导的初步研究

以长俊木瓜为材料,研究了其体细胞胚胎诱导过程中各个环节的影响因素.结果表明:愈伤组织诱导的适宜外植体是叶片,培养基为MS 6-BA1.0 mg-1 2,4-D0.2 mg·L-1,黑暗培养;非胚性愈伤组织向胚性愈伤组织转化的适宜培养基是MS 6-BA1.0 mg·L-1 NAA1.0 mg·L-1;胚性愈伤组织的保持与增殖应在黑暗条件下进行,培养基为MS 6-BA1.0 mg·L-1 2,4-D0.2 mg·L-1;长俊木瓜叶片体胚的发生以加入ABA2.0 mg·L-1的MS培养基最为有利.     

牡丹幼嫩花瓣愈伤组织诱导及芽的分化

以牡丹"凤丹"的花瓣为外植体,在优化植物生长调节剂的基础上,成功诱导出愈伤组织并实现植株再生,对愈伤组织诱导和分化的培养基类型、植物生长调节剂种类和浓度进行筛选,结果表明:不同的生长调节剂对愈伤组织诱导和分化的影响不同,愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg.L-1+6-BA 1.5mg.L-1+NAA 0.3mg.L-1,愈伤组织分化的最佳培养基为:MS+ZT 0.5mg.L-1+6-BA 2.0mg.L-1,分化率达到59.0%。     

小麦成熟胚愈伤组织的诱导及植株再生体系的研究

以小麦的成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织诱导进行植株再生.研究结果表明,在MS+2,4-D(3.0 mg/L)+VB1(1.0 mg/L)的培养基中,成熟胚可较高频率的诱导产生愈伤组织,诱导率为72.3%,但愈伤组织质量较差;在低浓度2,4-D和添加了ABA的继代培养基中,愈伤组织质量明显改善,胚性愈伤组织增加.筛选继代的胚性愈伤组织置于分化培养基MS+6-BA(1.0mg/L)+KT(4.0 mg/L)+NAA(0.3 mg/L)中,分化率达73.18%.该研究建立了一套有效的以成熟胚为外植体的小麦组织培养再生体系.     

苦瓜愈伤组织的诱导及悬浮培养体系的建立

以苦瓜子叶、上、下胚轴为外植体,在添加不同浓度激素组合的培养基上诱导和继代愈伤组织,比较愈伤组织的状态与生长情况,并对悬浮细胞培养条件进行了优化。结果表明,上下胚轴在添加2,4-D2.0mg·L-1+6-BA4.0mg·L-1或NAA1.0mg·L-1+6-BA4.0mg·L-1的MS培养基上均可诱导出状态良好的愈伤组织,愈伤组织在添加2,4-D0.5mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1的继代培养基上能长势最好,添加30g·L-1蔗糖和3.0g·L-1活性炭的B5培养基有利于苦瓜悬浮细胞的快速增殖。