一株致病纤维素降解菌的鉴定

为了筛选出高效的纤维素降解菌,实现纤维类饲料的资源化利用,试验采用形态学观察、生化试验、16S rDNA鉴定对奶牛粪便纤维素降解菌进行了研究,同时还测定了该菌株的最优酶活性。结果表明:形态学观察该菌株为革兰氏阴性直杆菌;生化试验初步鉴定其为志贺氏菌属;16S rDNA试验最终确定该菌为革兰氏阴性兼性厌氧志贺氏菌,将其命名为NC007384;在pH值为7、温度为35℃、装液量为40%、接种量为2.5%、摇床转速为180 r/min的条件下培养42 h,志贺氏菌CMCase活性最大,达到21.842 U。     

降解纤维素菌株筛选及其鉴定

筛选高效降解纤维素菌株,为秸秆饲料的生产工艺优化奠定基础。以玉米秸秆为主要研究对象,通过降解纤维素菌株的富集培养、分离提纯及玉米秸秆的降解率和CMC酶活性测定方法,对采自新疆的26个土样在25℃±1进行富集培养30 d,初步得到能以秸秆为唯一碳源生长的34株霉菌,并对其进行分离提纯,得到14株霉菌,通过CMC酶活实验选出酶活最强的四株霉菌（M3〉M42〉M6〉M21）,并对其作出形态学初步鉴定。结果为：M6和M42属于青霉属,M3和M21属于曲霉属。试验表明筛选得到的菌株都具有较强的降解玉米秸秆所需要的酶系,并有较好的玉米秸秆生物降解的研究价值。     

高效降解纤维素菌株的筛选与鉴定

目前对农作物秸秆的利用还未达到令人满意的水平,其主要原因是缺乏对农作物秸秆这种天然纤维素完全降解的高活性菌株.因此,不断地分离和选育纤维分解高产菌株是一项重要而有意义的工作.     

一株高效木质素降解菌株LG-1的筛选、鉴定及酶活测定

试验筛选得到了一株对木质素具有较高降解作用的芽孢杆菌菌株LG-1。利用苯胺蓝平板脱色法从牛粪中初步筛选得到了14株降解菌株,利用管碟法复筛得到了1株对木质素降解活性较高的菌株LG-1,并对这株菌进行了菌落特征、菌体形态的观察及一系列生理生化试验和16S rDNA的序列测定,并对其产酶活性进行了测定。结果表明,菌株LG-1为一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),菌株LG-1在发酵60 h时,木质素过氧化酶达到1 773.3 U/l,锰过氧化酶达到610.8 U/l。对玉米秸秆发酵16 d后木质素降解率达到23.6%。枯草芽孢杆菌菌株LG-1是一株优良的木质素降解菌株。     

一株降解氨氮菌株的筛选

以硫酸铵为唯一氮源的选择性培养基,通过富集培养,从天然养鱼池塘中筛选出一株能够降解废水中高浓度氨氮的菌株A4,并能耐受废水中的重金属离子,在造纸废水中48 h的降解速率为44%,通过革兰氏染色、菌落形态和分子生物学鉴定为木糖氧化无色杆菌反硝化亚种。     

一株降解杀虫剂啶虫脒的细菌菌株分离鉴定及降解性能测试

桑园中残留的大量农药,有通过桑树富集最终对家蚕造成不良影响的潜在风险。采用富集培养和平板划线分离的方法,从长期被农药污染的桑园土壤中筛选分离到一株可降解对家蚕有极高风险性的杀虫剂啶虫脒的细菌菌株H2。对分离菌株H2进行形态和生理生化特征及16S r DNA序列分析,鉴定其为产碱假单胞菌(Pseudomonas alcaligenes)。该菌株对啶虫脒的最高耐受浓度为1 200 mg/L;菌株在含300 mg/L啶虫脒的无机盐培养基中培养,0~1 d为生长延迟期,1~4 d为对数生长期,4~6 d为稳定期,6 d后进入衰亡期;菌株在啶虫脒初始质量浓度为300 mg/L的无机盐培养基中培养9 d,对啶虫脒的降解率为62.7%。同时发现H2菌株在分别含1 000 mg/L吡虫啉、1 000 mg/L烯啶虫胺、1 000 mg/L噻虫啉和500 mg/L辛硫磷的无机盐培养基中也能够生长,说明H2菌株能有效降解多种烟碱类农药和有机磷类农药,有望进一步开发为桑园残留烟碱类及有机磷类农药的微生物降解制剂。     

一株纤维素降解菌的筛选、鉴定及对饲料粗纤维降解效果的研究

通过筛选高活性纤维素酶产生菌,为微生物纤维素酶制剂的开发提供理论依据。采用刚果红染色法从绵羊粪便中分离筛选纤维素降解菌,用DNS法测定酶活力,根据酶活力复筛后,分离得到一株能够产生高活力纤维素酶和β-葡萄糖苷酶的目的菌B5。通过形态学观察和16S rDNA序列测定,对B5菌株进行种属鉴定;应用B5菌株对四种纤维性饲料进行消化降解实验,探究菌株B5降解饲料粗纤维的特性。形态学观察确定B5菌落符合放线菌的特征;分子学鉴定其16S rDNA序列全长1 585 bp,在进化关系上与链霉菌属(Streptomyces sp.)聚成一簇,同源性高达99%。鉴定B5菌株属于链霉菌属成员。B5菌株对饲料粗纤维降解效率与酶活力显著相关,对饲料粗纤维降解效率与饲料中纤维素含量相关性不明显。     

几株家蚕蛹油降解细菌的分离鉴定与降解能力测定

利用稀释培养法从缫丝废水中分离到5株可降解家蚕蛹油的细菌,采用紫外分光光度法测定了其对家蚕蛹油的降解能力,H73、H23、H1、H5和H43菌株在72 h内对家蚕蛹油的降解率分别达到76.36%、62.04%、60.58%、53.85%和51.20%。通过形态特征、生理生化特性测定和16S rDNA序列系统发生分析对各菌株进行鉴定,其中H23、H1和H43为芽孢杆菌属(Bacillus sp.),H5为微杆菌属(Microbacterium sp.),H73为肠杆菌属(Enterobacter sp.)。     

一株高效降解蚕蛹蛋白的菌株筛选与初步鉴定

筛选、鉴定能高效降解缫丝蚕蛹蛋白的菌株,用于提高缫丝蚕蛹生产食品和动物饲料的营养价值。从蚕蛹储藏车间及周围的土壤中收集细菌,经富集培养、干酪素平板初筛和发酵蚕蛹蛋白复筛,获得一株产蛋白酶活性较高的菌株,命名为CY21。该菌株在32℃、pH 7.0条件下培养60 h后所产蛋白酶的比活力可达到272.7 U/mg。通过形态学观察、经典生理生化试验以及16S rDNA序列系统发育分析,初步确定该菌株为芽孢杆菌属(Bacillus)与解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)亲缘关系很近的一个菌株。     

瘤胃4株纤维降解细菌的分离鉴定及其纤维降解特性

作者从蒙古绵羊瘤胃内容物中筛选出四株纤维素降解细菌并进行鉴定,将其编号为H1、H2、N1、N2,对菌株生长特性和纤维素酶活力进行测定,以期为后续试验提供试验材料。通过生理生化特征、DNA序列分析对分离菌株进行鉴定,比浊法测定细菌生长曲线,用还原糖法测定四株细菌的滤纸酶活、羧甲基纤维素酶活、水杨苷酶活和微晶纤维素酶活力。结果表明:经鉴定,四株菌中H1、H2为黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens),N1、N2为链球菌(Streptococcus);生长曲线测定表明菌株H1生长延迟期为4h,H2、N1、N2均为3h,黄色瘤胃球菌最大菌体浓度出现在28h,链球菌为14h;四株细菌均具有良好的纤维降解特性,其中H2滤纸酶活力、羧甲基纤维素酶活力、微晶纤维素酶活力显著高于菌株H1、N1、N2(P0.05),H1滤纸酶活力最低,为0.08μmol·(mL·min)-1。本试验利用hungate滚管法分离出4株具有纤维素酶活力的细菌,可以满足后续试验需要。     

一株产脂肪酶菌株的分离筛选及鉴定

采用梯度稀释涂布法及平板筛选法从松树林下分离到12株产脂肪酶菌株.复筛到一株产脂肪酶性能较好的菌株TS-2,在30℃、180rpm条件下培养48h脂肪酶活为4.8U/mL.综合菌落形态、生长特性镜检形态及5.8S rDNA-ITS区序列系统进化分析证明所分离的菌株TS-2为解脂耶氏酵母酵母(Yarrowia lipol...     

一株蚕沙纤维素降解菌的鉴定及产酶优化和生物强化效果

为了提高蚕沙生物转化资源化处理效率,从蚕沙废弃物中筛选出1株高效纤维素降解菌株DC-15,优化产酶条件并评估其对蝇蛆生物转化蚕沙体系的强化作用,以期为蚕沙高效资源化处理提供优质菌株。采用羧甲基纤维素钠(sodium carboxymethyl cellulose, CMC-Na)平板法和刚果红染色法进行筛选,通过形态学观察、生理生化试验和16S rRNA基因序列系统发育分析进行种属鉴定,利用DNS法(3,5-二硝基水杨酸法)测定菌株DC-15的纤维素酶活力,并优化其产纤维素酶条件。结果表明,获得的高效纤维素降解菌DC-15鉴定为特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis),该菌株最优生长及产酶碳源和氮源为羧甲基纤维素钠(CMC-Na)和蛋白胨;最适接种量、产酶温度和pH分别为2%、37℃和7。优化后菌株DC-15的纤维素内切酶(CMCase)、滤纸酶(FPase)、纤维素外切酶(CBH)最高酶活力分别可达11.66、11.62、10.01 U/mL;菌株DC-15回补蝇蛆生物转化蚕沙体系后(6 d),蚕沙纤维素降解率为71.2%,显著高于对照组的59.6%。获得的菌株DC...     

羊源芽孢纤维素降解菌的筛选与H-7菌株鉴定

采用梯度稀释涂布平板法,以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为唯一碳源,刚果红染色法(透明圈法),CMC和FPA酶活检测,明确其产酶活性,滤纸崩解试验,确定其降解纤维素的能力,并进行形态特征的观察和生理生化试验及16S rDNA序列分析,确定其相应种、属。结果表明,从羊瘤胃液分离得到的H-7菌株和暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)在所构建的系统发育树上的同一分支上,相似性超过99%,初步确定其为暹罗芽孢杆菌,其菌圈直径为2.01 cm,CMC酶活最高为0.18 U/ml,FPA酶活最高为0.44 U/ml,降解的滤纸条在第3 d就接近糊状。表明H-7菌株具有很强的产纤维素酶的能力。     

一株牛瘤胃耐酸纤维素降解细菌的筛选、鉴定及酶学特性分析

通过对夏南牛瘤胃样本进行微生物富集培养,筛选、获得一株纤维素高效降解细菌ZJ08,分子鉴定确定该菌属于假黄单胞菌属,其纤维素酶活的最适温度为55℃,最适p H为5.0,是一株具有较强耐酸特性的纤维素降解菌株,具有潜在的应用价值。     

不同来源纤维素降解菌的分离及其降解纤维能力的比较

为筛选出一株对纤维素降解能力强的菌株,以绵羊瘤胃、腐败的树叶、深层的土壤和堆肥的牛粪为分离源分离纤维素降解菌。通过测定纤维素酶活,对4株不同来源的纤维素降解菌降解纤维的能力进行比较。结果表明,4株纤维素降解菌对纤维素都有不同程度的降解作用,其中来源于腐败的树叶的纤维素降解菌降解纤维的能力最强,其纤维素酶酶活可达到35.62 IU/ml,极显著高于其他菌株(P0.01)。     

2株兼具除臭功能的纤维素降解细菌的分离鉴定

研究旨在筛选高效纤维素降解菌,用于提高养殖废弃物堆肥效果和利用价值。利用羧甲基纤维素钠选择性培养基结合革兰氏碘液水解圈测定法,初步分离纤维素降解菌;经纤维素酶(滤纸酶FPA、内切葡聚糖苷酶Cen、外切葡聚糖苷酶Cex、葡萄糖苷酶BG)活性测定,筛选到2株(X-1、X-6)具有高效纤维素降解能力的细菌,其中X-1的纤维素酶活力较高,震荡培养4d后其FPA、Cen、Cex和BG的酶活分别为77.97、105.58、135.64和109.87IU/mL。结果表明,X-1、X-6对H_2S和NH_3的清除能力分别达到40%以上。经菌落形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析,鉴定菌株X-1为类芽孢杆菌属中的灿烂类芽孢杆菌(Paenibacillus lautus),菌株X-6为芽孢杆菌属中的烟酸芽胞杆菌(Bacillus niacini)。     

4株牦牛瘤胃产纤维素菌株的分离培养与初步鉴定

为了研究牦牛瘤胃中的厌氧产纤维素菌的生长特性,笔者对采自牦牛瘤胃液样品的4株产纤维素菌株进行分离培养。结果表明:4株产纤维素菌株能够在相应的氮源、碳源、p H值以及表面活性剂存在下正常生长;4株产纤维素菌株分别为SK11株、B2-1株和1株新菌株。     

一株放线菌对丝素纤维的降解作用

探讨了一株从土壤中分离到的放线菌(C3菌株)对丝素纤维的降解特性。结果表明,C3菌株在28～37℃范围内对蚕丝纤维均具有较强的降解活性;培养基中的碳源能抑制C3菌株的降解活性,而氮源基本无影响,即在缺乏碳源和氮源或单独缺乏碳源的培养基中降解活性增强。在以丝素粉作为唯一碳源和氮源的色氨酸培养基中,C3菌株在28℃下培养6 d左右降解速度最大,并延续至第12天左右。电镜观察表明,培养基中接种C3菌株14 d时,菌丝体已经大量繁殖,丝素纤维出现降解凹陷,部分丝素纤维出现断裂;培养42 d时,丝素纤维已完全降解。