酶解辅助乙醇提取牡丹种皮中的木犀草素1）

以牡丹种皮为原料,在单因素实验基础上,利用正交试验法研究酶解辅助乙醇提取木犀草素的工艺条件。结果表明：在果胶酶0．05 g· L－1、酶解温度45℃、pH值4．5条件下进行酶解孵育180 min后,在m（牡丹种皮）∶V（乙醇）（料液比）＝1 g ∶10 mL、乙醇质量分数为80％、匀浆4 min条件下提取2次,木犀草素提取率最高可达3．241 mg· g－1,相对乙醇提取法木犀草素提取率提高了4．30倍。     

花生壳中木犀草素的超声提取工艺

采用单因素试验和正交试验,以总黄酮含量为考察指标,对影响总黄酮超声提取的因素进行研究。结果表明,花生壳中木犀草素的最佳提取工艺为30倍量70%乙醇,60℃下提取30min,其中乙醇体积分数对结果影响显著。     

木犀草素体内抗炎作用机制研究

目的探讨木犀草素（Lut）的体内抗炎疗效及作用机制。方法采用角叉菜胶致大鼠足爪肿胀模型,观察Lut对足爪肿胀度的影响;酶免疫测定法（EIA）测定炎足足跖部的渗出液前列腺素E2（PGE2）的含量;免疫组织化学法（IHC）及免疫印迹（Western blot）法检测角叉菜胶致炎大鼠足爪组织环氧合酶-2（COX-2）的表达情况。结果Lut可抑制角叉菜胶致炎的大鼠足爪肿胀。80、120 mg/kg Lut可显著降低足爪炎症组织前列腺素E2（PGE2）生成,并显著抑制炎足爪中COX-2的蛋白表达。结论Lut具有较强的抗炎作用,其机制可能与抑制COX-2的表达及PGE2的释放有关。     

纤维乙醇发酵残渣提取酶解木质素研究

采用微波辅助有机溶剂法从纤维乙醇发酵残渣中提取酶解木质素(EHL).利用单因素试验和响应面分析法研究微波功率、微波时间、丙酮体积分数、固液比对EHL提取效果的影响,并对所提取的EHL进行红外光谱分析.结果表明:EHL最佳提取工艺条件为微波功率为700 W、微波时间为40 nin、丙酮体积分数为65％和固液比为1 g∶ 10mL,在此条件下EHL提取率达到40.81％;红外光谱显示,该方法提取的EHL结构与磨木木质素相似.     

微波辅助酶解提取三七总皂苷

利用响应面试验设计分析,优选三七总皂苷的最佳提取工艺条件。通过单因素试验,研究原料粒度、底物浓度、酶的添加量、溶液温度、微波功率、提取时间等因素对三七总皂苷提取得率的影响规律;选取3个主要因素,通过3因素3水平响应面中心组合试验设计,获得微波辅助酶解提取三七总皂苷的工艺。结果表明:以水为提取剂,在三七底物浓度8%、中性纤维素酶添加量8%、粒度80目、微波功率540 W、溶液温度57℃、微波辅助酶解12 min的条件下,总皂苷得率为16.02%,实际值是预测值的98.95%,预测结果可靠。微波辅助酶解提取三七总皂苷具有效率高、节能省时、污染小等特点,为进一步开发三七总皂苷提供了参考。     

应用反相高效液相色谱法测定菊花中的木犀草素

首次用反相高效液相色谱法测定了菊花中的木犀草素，并对贵州省上市的不同菊花品种中的木犀草素进行了含量测定。色谱柱：ODS柱，流动相：甲醇、水、乙酸质量比为：45：55：0.4，检测波长：254nm，流速为1.0mL/min，柱温为室温。结果表明，木犀草素在0.02-0.20mg/mL范围内线性关系良好，相关系数r=0.9991，保留时间为15.50min，平均回收率为99.03%，精密度CV%≤0.05%，且放于冰箱4℃下7d内测定结果稳定。     

水热-乙醇提取处理玉米秸秆促进酶解效率

针对水热预处理不能明显移除木质素、木质素在较高温条件下从细胞壁中分解游离并重新聚合的特点, 采用水热-乙醇提取处理玉米秸秆, 与水热预处理的效果进行了对比, 并对乙醇过程进行了优化。结果表明:水热-乙醇提取能够移除部分木质素, 提高预处理后固体中纤维素含量以及纤维素的酶解效率, 水热-乙醇提取后秸秆的木质素移除率随水热预处理温度的增加而增大。乙醇提取的较优工艺条件是液固比25、室温、120 r·min^-1,提取10 h.经210 ℃、20 min预处理的秸秆再经乙醇提取后, 酸不溶木质素含量由30.5%下降为18.2%,纤维素含量由62.2%提高到73.6%,酶解率为93.2%(15 FPU·g^-1纤维素),酶解时间由48 h缩短至24 h.     

大孔树脂富集金银花木犀草素研究

选用8种型号的大孔树脂富集金银花中的木犀草素,以树脂对金银花木犀草素的吸附鼍和解吸率作为考察指标,筛选适合富集纯化金银花木犀草素的大孔树脂,并确立富集纯化工艺参数.结果表明,101树脂吸附和解吸效果最佳,吸附pH值为5.0,解吸剂为pH 9.0、70%乙醇,经富集后的金银花木犀草素含量可提高4～5倍.     

葎草中总黄酮与木犀草素含量的季节动态变化

研究了葎草中总黄酮和木犀草素含量的季节变化规律。分别采用分光光度法和高效液相色谱法测定了重庆地区不同月份葎草中总黄酮与木犀草素的含量,结果表明:不同月份葎草总黄酮与木犀草素含量差异较大,且两指标成分含量的季节变化趋势基本一致,总黄酮与木犀草素的含量分别为14.74～23.83 mg·g~(-1)和0.25～1.11 mg·g~(-1),其中10月份总黄酮与木犀草素的含量均最高。     

微波辅助提取鸡眼草中的黄酮类物质

[目的]优化鸡眼草中黄酮类化合物的提取条件。[方法]以鸡眼草的总黄酮提取率为评价指标,通过单因素试验对微波辅助提取鸡眼草黄酮类化合物的工艺条件进行了研究,再运用正交分析法确定最佳提取条件。[结果]微波辅助提取鸡眼草中的黄酮类物质的最佳条件为:乙醇浓度为50%、料液比1∶30(W/V,g/ml,下同)、微波功率300 W,微波处理时间25 min;在此条件下,鸡眼草的总黄酮提取率为3.28%。[结论]微波辅助提取鸡眼草中的黄酮类物质,操作简单易行,提取率较高,是一种理想的提取方法。     

高效液相色谱法测定金银花中木犀草素含量

为了准确测定金银花中木犀草素的含量,通过摸索流动相、洗脱方式、保留时间和速度等条件,建立了高效液相色谱测定金银花中木犀草素含量的方法.采用SinoChrom ODS C18色谱柱(4.6 mm× 150 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.3% H3PO4溶液,流速为0.8 mL/min,梯度洗脱.检测波长350 nm,柱温25 ℃,木犀草素的线性范围0.032 5～0.39 μg/mL,回归方程为y =62.53x+10.88(r =0.999 0),平均回收率可达98.39%.测得金银花样品中木犀草素的含量为1.09%.     

响应面优化花生壳中木犀草素超声提取工艺

本课题就超声法提取花生壳中木犀草素进行研究,对影响木犀草素提取率的因素进行考察,确定了超声提取法提取花生壳中木犀草素的最优提取工艺。具体为:乙醇体积分数为70%,液料比为20∶1,超声功率为180 W,时间为40 min,所得提取率为0. 43%。     

乙醇对右旋糖酐酶酶解作用的影响

现有的右旋糖酐原料药生产工艺中,用乙醇沉淀法将右旋糖酐发酵液中的高分子右旋糖酐分离为粗酐,不经干燥直接溶解为右旋糖酐溶液,盐酸水解分离纯化为药用右旋糖酐,水解液中有乙醇残留。因此用右旋糖酐酶替代盐酸水解右旋糖酐时,必须考虑乙醇对右旋糖酐酶作用的影响。进行了乙醇对右旋糖酐酶酶解反应、稳定性及右旋糖酐酶解的影响的研究。结果表明,在一定条件下,右旋糖酐溶液中乙醇含量30.0%以下对右旋糖酐酶酶解反应本身无影响。低温（4℃）条件下,右旋糖酐酶在30%以下的乙醇溶液中相对稳定。在热的乙醇溶液（50℃）中造成酶蛋白凝聚变性而失活,乙醇浓度越大,这种现象越严重,不同的乙醇浓度,右旋糖酐酶活力损失不同。乙醇对右旋糖酐酶解的影响因乙醇浓度的不同而不同,5.0%以下影响较小,7.5%～15.0%影响在同一水平,17.5%以上影响加剧,但是乙醇对右旋糖酐酶解的影响是可控的。     

牡丹种皮中芍药苷和丹皮酚的优化提取工艺

[目的]采用乙醇匀浆法优选牡丹种皮中芍药苷和丹皮酚的最佳提取工艺。[方法]在单因素试验基础上采用L9(34)正交试验设计,考察了乙醇浓度、料液比、匀浆时间、提取次数对芍药苷和丹皮酚提取得率的影响,以确定最佳提取工艺参数条件。[结果]最佳工艺条件为乙醇浓度60%、料液比1∶20、匀浆时间4 min、提取1次。[结论]采用乙醇匀浆正交试验法优化的提取工艺可以有效提高牡丹种皮中芍药苷和丹皮酚得率。     

香蕉皮原花色素的酶解辅助提取及稳定性研究

采用酶解辅助提取法对香蕉皮中原花色素的提取工艺进行优化,并对其稳定性进行研究。结果表明,酶解试验的最佳工艺为:酶添加量0.8%,酶解温度50℃,酶解时间45 min;提取试验的最佳工艺为:料液比1∶23(W/V,g/mL),提取温度65℃,提取时间75 min。在最佳的工艺条件下,原花色素的提取得率为1.702%。随着温度的升高和时间的延长,香蕉皮原花色素稳定性逐渐降低。抗坏血酸、柠檬酸和苹果酸对香蕉皮原花色素具有保护作用。Na+、Ca2+、K+、Cu2+和Fe3+等金属离子会对香蕉皮原花色素起破坏作用,其中Cu2+和Fe3+的影响最为显著。苯甲酸钠和山梨酸钾会降低香蕉皮原花色素的稳定性,但影响相对较小。     

近红外光谱技术快速测定雪菊提取过程中的木犀草苷含量

利用近红外光谱技术建立从雪菊(Coreopsis tinctoria Nutt.)中提取木犀草苷的检测模型,探讨木犀草苷含量的在线快速检测方法。在提取装置上在线采集雪菊提取液的近红外光谱,同时进行木犀草苷的HPLC检测,采用偏最小二乘法建立近红外光谱与HPLC的关联检测模型。最佳建模波段为5 445～10 922cm~(-1),模型相关系数(R)为0.997 6,校正均方差(RMSECV)为15.14,预测值与真实值的平均相对误差为3.7%。利用近红外光谱技术能够实现在提取过程中快速检测木犀草苷含量。     

高效液相色谱法测定忍冬藤中木犀草素的含量

[目的]测定忍冬藤中木犀草素的含量。[方法]采用高效液相色谱法测定,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为无水甲醇-浓度0.3%磷酸水溶液(47∶53,V/V);流速为1 ml/min;柱温为30℃;检测波长为为350 nm。[结果]木犀草素的线性范围为0.5～2.5μg/ml,相关系数R=0.999 6,平均回收率为100.71%,RSD为1.9%;3批药材中木犀草素的平均含量为24.05μg/g。[结论]该方法简单、快速、可靠,适用于忍冬藤药材的质量控制。     

超声波辅助乙醇提取咖啡因工艺优化

乙醇作溶剂从茶叶中提取咖啡因,以咖啡因产率为评价指标,采用先超声、后采用浸提提取工艺,考察乙醇体积分数、料(茶叶)液(乙醇)比、超声频率、超声时间、后浸提温度和后浸提时间影响。结果表明:在乙醇体积分数95%,料液比1∶12,超声频率25.00 kHz,超声时间10 min,后浸提温度70℃,后浸提时间100 min时,得到产率为34.81%、熔点为236℃的白色针状晶体。     

高效液相色谱法测定珠毛蟹甲草中木犀草素的含量

为建立高效液相色谱法测定珠毛蟹甲草中木犀草素含量的方法,采用zorbaxSB-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水(0.04%H3PO4)=45:55,流速为1.0mL·min-1,检测波长360nm,柱温30℃。木犀草素在0.011~0.176μg范围内线性关系良好,回归方程为Y=702.5X-68.42(r=0.9998),平均回收率可达100.91%,RSD=2.47%。本方法方便、准确,可以用于珠毛蟹甲草药材的质量控制。     

木犀草素对对乙酰氨基酚诱导肝损伤的保护作用

【目的】基于内质网应激（ERS）和氧化应激途径,探讨木犀草素（luteolin）对对乙酰氨基酚（APAP）诱导的肝损伤的保护效果及其潜在的作用机制。【方法】将48只昆明小白鼠随机分为6组,分别为正常对照组（NC）、木犀草素对照组（MD）、APAP肝损伤模型组（APAP）以及木犀草素低、中、高剂量组（ML、MM、MH）,每组8只小鼠,NC和MD组腹腔注射生理盐水,其余各组小鼠按300 mg/kg的剂量腹腔注射APAP注射液,每天2次,连续注射4 d,给药4 d后NC组和APAP组灌胃生理盐水,MD、ML、MM、MH小鼠分别按照100,25,50,100 mg/kg的剂量灌胃木犀草素药液,每天2次,连续灌胃3 d,最后一次灌胃12 h后,分别检测小鼠血液中的谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）活性以及肝脏中的氧化应激指标（超氧化物歧化酶（SOD）活性及过氧化氢（H₂O₂）、谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量）,在显微镜下观察各组小鼠肝组织的病理变化,并采用探针药物法测定肝脏微粒体细胞色素P450 2E1酶(CYP2E1)活性,采用qRT-PCR检测CYP2E1 mRNA表达水平,用Western Blot检测肝组织葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、增强子CCAAT结合蛋白同源蛋白（CHOP）、CYP2E1蛋白表达水平。【结果】与NC组相比,APAP模型组的ALT和AST活性极显著升高,MD组上述2种酶活性无显著变化。与APAP模型组相比,MM、MH组ALT和AST活性显著或极显著下降。与APAP模型组相比,ML、MM、MH组的GSH含量和SOD活性均明显增加,MDA和H₂O₂含量均明显降低。小鼠肝组织病理形态显微观察结果表明,MM、MH组可以改善APAP导致的肝索消失以及肝细胞排列散乱和细胞核溶解等病理症状。探针药物法测定结果显示,0.1,0.01和0.001 mg/mL的木犀草素可以显著降低CYP2E1活性。qRT-PCR和Western Blot结果显示,木犀草素可以显著或极显著降低CYP2E1基因及其蛋白的表达水平,极显著降低GRP78和CHOP蛋白表达水平。【结论】木犀草素具有明显的抗APAP诱导的肝损伤作用,其作用机理可能是通过抑制CYP2E1的表达、减轻氧化应激和内质网应激水平,从而减轻APAP诱导的肝损伤。