丹参地上部分丹酚酸A的抗炎活性及对p38MAPK通路的影响

为了观察丹参地上部分提取物丹酚酸A(SAA)对脓毒症的影响及对p38 MAPK通路的调控作用,试验采用脂多糖(LPS)诱导体内、外脓毒症模型,分为空白组(生理盐水或细胞培养液)、LPS(LPS 100 ng/mL)组、SAA各剂量(125,5,25,1μg/mL)组、阳性对照地塞米松(200μg/mL)组,采用MTT法检测SAA对RAW264.7细胞活性的影响,ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10的含量,H.E.染色法观察SAA对肺脏组织的影响,采用Western-blot方法检测其对p38 MAPK通路的调控作用。结果表明:与LPS组比,地塞米松组和SAA各剂量组细胞活性均有提高,差异显著或极显著(P0.05或P0.01),且呈剂量依赖性;与LPS组比,地塞米松组和SAA各剂量组TNF-α、IL-6含量显著或极显著降低(P0.05或P0.01),地塞米松组和SAA各剂量组(除SAA 5μg/mL组外)IL-10含量均极显著升高(P0.01);SAA能够减轻肺脏充血及肿胀情况;p38 MAPK通路在体内、外均被抑制。说明SAA能够改善LPS对细胞活性的影响,对脓毒症模型中TNF-α、IL-6的生成具有抑制作用,对IL-10的生成具有促进作用,其机制与p38 MAPK的表达有关。     

两种合成活性肽对肉鸡免疫功能的影响研究

本试验旨在研究两种合成活性肽对肉鸡免疫功能的影响。1440只1 d AA肉鸡随机分为8个处理,设置2个对照组(空白对照组及杆菌肽锌组),试验组饮水供给两种肽(均设置3个剂量:10、20、40μg/kg体重),每组设6个重复,试验期42 d。结果表明:40μg/kg体重肽I和肽Ⅱ可显著提高21 d肉鸡血清新城疫抗体效价(P0.05),显著提高21、42 d鸡血清Ig G水平(P0.05);3个剂量肽I可显著提高血清Ig M水平(P0.05),40μg/kg体重肽Ⅱ对42 d鸡亦有此作用(P0.05)。21 d时各试验组血清IL-2含量均显著高于两个对照组(P0.05或P0.01),42 d时40μg/kg体重肽I组和肽Ⅱ组血清IL-2及IFN-r含量显著提高(P0.01或P0.05)。40μg/kg体重肽I和肽Ⅱ可显著提高42 d鸡血清溶菌酶含量(P0.05),40μg/kg体重肽I可显著21 d鸡血清补体C3含量(P0.05)。20μg/kg体重肽Ⅱ和肽I分别显著提高了21 d鸡法氏囊指数和42 d鸡胸腺指数(P0.05)。可见,2种合成活性肽均有提高肉鸡免疫功能活性,均以饮水供给40μg/kg体重效果最好。     

低聚壳聚糖硒抵抗玉米赤霉烯酮诱导猪肠上皮细胞氧化损伤和内质网应激的作用研究

本试验旨在探究低聚壳聚糖硒拮抗玉米赤霉烯酮(ZEN)对猪肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)损伤的影响。试验设定为:对照组(C组)、 ZEN组(30μg/mL ZEN)、 ZEN+0.5 Se组(30μg/mL ZEN+0.5μmol/L低聚壳聚糖硒,以Se计)、 ZEN+1.5 Se组(30μg/mL ZEN+1.5μmol/L低聚壳聚糖硒,以Se计)、ZEN+3.0 Se组(30μg/mL ZEN+3.0μmol/L低聚壳聚糖硒,以Se计)。测定细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)活性、活性氧(ROS)含量、线粒体膜电位变化、氧化应激和内质网应激(ERS)相关蛋白的表达。结果表明:与对照组相比,添加ZEN显著增加LDH活性(P 0.05),极显著增加ROS含量(P 0.01),极显著降低线粒体膜电位(P 0.01),显著降低细胞存活率(P0.05);添加低聚壳聚糖硒可显著降低LDH活性(P0.05),极显著降低ROS含量(P0.01),显著增加线粒体膜电位(P0.05),极显著增加细胞存活率(P0.01);相比于对照组,添加ZEN显著降低转录因子E2相关因子(Nrf2)蛋白表达量(P0.05),添加低聚壳聚糖硒极显著降低Nrf2蛋白表达量(P0.01);相比于对照组,ZEN和ZEN+0.5 Se组血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达量显著降低(P0.05),ZEN+0.5 Se、ZEN+1.5 Se、ZEN+3.0Se组与ZEN组无显著差异(P0.05),但ZEN+1.5 Se、ZEN+3.0 Se组与对照组也无显著差异(P0.05);相比于对照组,添加ZEN显著或极显著增加葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)(P 0.05)、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶/蛋白激酶R样内质网激酶(P-PERK/PERK)(P 0.05)、转录激活因子4(ATF4)(P0.05)、C/EBP同源蛋白(CHOP)(P0.01)蛋白表达量;添加低聚壳聚糖硒可显著或极显著降低GRP78(P0.05)、P-PERK/PERK(P0.01)、ATF4(P0.01)、CHOP(P0.05)蛋白表达量。综上所述,低聚壳聚糖硒可缓解ZEN引起的IPEC-J2细胞氧化损伤和内质网应激。     

不同浓度乙醇洗脱沙葱黄酮对脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的抗炎作用

本试验旨在研究通过超声波法提取的35%和75%乙醇洗脱沙葱黄酮对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的抗炎作用。采用细胞计数试剂盒检测不同添加浓度(25、50、100、200、400μg/mL)的35%或75%乙醇洗脱沙葱黄酮对小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响;设空白对照组、LPS应激模型组、不同浓度乙醇洗脱沙葱黄酮组(分别加入25、50、100μg/mL 35%或75%乙醇洗脱沙葱黄酮溶液),采用Griess、实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附测定法检测不同浓度乙醇洗脱沙葱黄酮对小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子及炎性因子的影响。结果表明:与空白对照组相比,35%、75%乙醇洗脱沙葱黄酮在25～100μg/mL添加浓度内可极显著提高小鼠腹腔巨噬细胞活性(P0.01)。与LPS应激模型组相比,35%、75%乙醇洗脱沙葱黄酮均可极显著极显著降低小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮含量及诱导型一氧化氮合酶mRNA相对表达量(P0.01),并均呈剂量依赖效应,且75%乙醇洗脱沙葱黄酮作用效果优于35%乙醇洗脱沙葱黄酮; 35%乙醇洗脱沙葱黄酮可极显著降低小鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量(P0.01),极显著降低TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量(P0.01); 75%乙醇洗脱沙葱黄酮可显著或极显著降低小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α含量(P0.05或P0.01),极显著降低TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量(P0.01)。由此可见,35%、75%乙醇洗脱沙葱黄酮可通过提高小鼠腹腔巨噬细胞活性、调控细胞因子及炎性因子的分泌而发挥抗炎作用。     

灵芝多糖对长期运动大鼠巨噬细胞吞噬功能及NO和IL-1β表达的影响

探讨灵芝多糖(GLP)对长期运动大鼠巨噬细胞吞噬功能及NO、IL-1β表达的影响。分别用低剂量(4.5mg/mL)、中剂量(9mg/mL)、高剂量(18mg/mL)的GLP灌胃大鼠模型并给予持续30d游泳运动训练,正常组和对照组用生理盐水灌胃,正常组不进行运动训练。检测贴壁巨噬细胞分泌NO、IL-1β水平,Western blot检测巨噬细胞中iNOS水平,并检测巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力及巨噬细胞活性。结果表明,对照组中NO含量和巨噬细胞吞噬率显著低于正常组(P0.05),中剂量组和高剂量组NO水平显著高于对照组(P0.05);对照组巨噬细胞iNOS水平极显著低于正常组(P0.01),低、中、高剂量组巨噬细胞iNOS水平极显著高于对照组(P0.01);低、中剂量组巨噬细胞吞噬率显著高于对照组(P0.05),高剂量组巨噬细胞吞噬率显著高于对照组(P0.01);中剂量组巨噬细胞吞噬指数极显著高于对照组(P0.01);对照组巨噬细胞活性极显著低于正常组(P0.01),低、中、高剂量组巨噬细胞活性均极显著高于对照组(P0.01)。说明GLP能促进巨噬细胞分泌NO、IL-1β,提高巨噬细胞吞噬功能和巨噬细胞活性。     

富含棉籽肽发酵棉粕对AA肉鸡生长性能和免疫功能的影响

试验旨在研究富含棉籽肽的发酵棉粕(枯草芽孢杆菌-1和扣囊复膜酵母Su 2019混菌发酵)对AA肉鸡生长性能和免疫功能的影响。试验选取240羽1日龄健康的AA肉鸡母雏,根据体重相近原则分为4组,对照组(CK,添加6%棉粕),试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(分别添加4%、6%、8%富含棉籽肽发酵棉粕),每组4个重复,每个重复15羽鸡。试验分为1～21和22～42日龄两个阶段,试验期42 d。每个阶段结束时,对肉鸡称重,采集血液样本,测定每个阶段肉鸡的生长性能和免疫功能指标。结果表明:①与CK相比,Ⅱ组肉鸡21 d平均日增重(ADG)极显著提高(P0.01),且显著高于Ⅰ组(P0.05);Ⅲ组肉鸡42 d平均日采食量(ADFI)显著提高(P0.05),且极显著高于Ⅱ组(P0.01);②与CK相比,Ⅲ组肉鸡21 d胸腺指数显著增加(P0.05),且其42 d胸腺指数显著高于Ⅰ组(P0.05);Ⅱ组42 d法氏囊指数极显著提高(P0.01);③Ⅲ组肉鸡21 d吞噬指数显著高于其他处理组(P0.05);试验Ⅰ、Ⅱ组42 d吞噬指数均显著高于CK(P0.05);④Ⅲ组肉鸡21 d的IL-2、IL-1β含量显著高于CK和Ⅰ组(P0.05),IL-6含量极显著高于CK(P0.01);与CK相比,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组42 d的IL-2含量均显著提高(P0.05),Ⅲ组IL-1β极显著提高,而IL-6含量极显著降低(P0.01),Ⅰ、Ⅲ组TNF-α含量极显著提高(P0.01);⑤与CK相比,试验Ⅲ组肉鸡21 d的IgM、IgA含量极显著提高(P0.01),Ⅰ组IgG含量极显著高于其他组(P0.01);Ⅱ组42 d的IgM和IgA含量均极显著提高(P0.01)。综上所述,肉鸡日粮中添加一定比例的富含棉籽肽的发酵棉粕,可以提高肉鸡的生长性能和免疫功能。     

甘肃棘豆黄酮抗氧化活性及免疫活性的研究

为研究甘肃棘豆黄酮的抗氧化及免疫活性,试验通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率测定其抗氧化活性,通过测定不同浓度甘肃棘豆黄酮对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力、白细胞介素2(IL-2)和免疫球蛋白G(IgG)抗体形成的影响研究其免疫活性。结果显示,甘肃棘豆黄酮对DPPH自由基清除率最高为32.23%,略高于维生素E(28.55%),低于维生素C(97.05%);对超氧阴离子自由基清除率最高为80.03%,高于维生素E(69.70%),低于维生素C(98.69%);对羟基自由基清除率最高为30.39%,低于维生素C(98.98%)、略低于维生素E(32.57%)。在小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验中,随着甘肃棘豆黄酮溶液浓度的提高,脾脏淋巴细胞相对增殖率也提高,当其浓度为200μg/mL时,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖率为23.40%;200μg/mL甘肃棘豆黄酮组IL-2水平极显著高于对照组(P0.01),50和100μg/mL甘肃棘豆黄酮组与对照组无显著差异(P0.05);各甘肃棘豆黄酮组IgG抗体水平均极显著高于对照组(P0.01),其中,50μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于100和200μg/mL甘肃棘豆黄酮组(P0.01),100μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于200μg/mL甘肃棘豆黄酮组(P0.01)。综上所述,甘肃棘豆黄酮具有较好的抗氧化活性及免疫活性。     

L-精氨酸对猪胎儿皮肤成纤维细胞免疫应激参数和β防御素基因mRNA表达的影响

本试验旨在研究L-精氨酸(L-Arg)对猪胎儿皮肤成纤维细胞(PFSF)免疫应激参数和β防御素基因mRNA表达的影响。采用培养至4～5代的PFSF,通过脂多糖诱导建立免疫应激模型,在DMEM/F12培养液中添加不同浓度(0、35、70、140、280和560μg/mL)的L-Arg,培养24 h后,检测培养液一氧化氮(NO)含量及乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)和溶菌酶(LSZ)活性;采用实时定量PCR法检测PFSFβ防御素1(pBD-1)、β防御素2(pBD-2)和β防御素3(pBD-3)基因mRNA表达量。结果表明:1)L-Arg能够降低培养液LDH活性,正常细胞和应激细胞分别在L-Arg浓度为70和140μg/mL时达到最低;2)L-Arg能够极显著提高培养液NO含量(P<0.01),正常细胞和应激细胞均在L-Arg浓度为140μg/mL达到最高;3)L-Arg能够显著或极显著增加正常细胞培养液NOS活性(P<0.05或P<0.01),而对应激细胞无显著影响(P>0.05),L-Arg浓度为35和70μg/mL时,应激细胞显著或极显著高于正常细胞(P<0.05或P<0.01);4)560μg/mL L-Arg可显著提高培养液LSZ活性(P<0.05);5)70μg/mLL-Arg可极显著提高正常细胞和应激细胞pBD-1和pBD-2基因mRNA表达量(P<0.01),140μg/mL L-Arg可极显著提高正常细胞和应激细胞pBD-3基因mRNA表达量(P<0.01)。结果提示,适宜浓度的L-Arg能够降低培养液LDH活性,提高NO含量以及NOS和LSZ活性,上调应激细胞和正常细胞β防御素基因mRNA表达;本试验条件下,L-Arg的适宜添加浓度为70～140μg/mL。     

山羊重组IL-17A克隆表达与生物活性分析

为了分析山羊白介素17A(IL-17A)对山羊单核、中性粒细胞功能的影响,采用RT-PCR方法对山羊IL-17A基因进行克隆,并在体外表达得到重组蛋白质(rIL-17A),以不同质量浓度的重组蛋白rIL-17A(5、10、20、40μg/mL)与单核细胞和中性粒细胞共孵育,测定rIL-17A对山羊单核细胞和中性粒细胞的迁移、中性粒细胞凋亡的免疫调节效应。结果显示:5、20、40μg/mL的rIL-17A能够极显著促进山羊单核细胞的迁移(P0.01),10μg/mL的rIL-17A也能显著促进山羊单核细胞的迁移(P0.05);与中性粒细胞共孵育时,10μg/mL(P0.05)和20、40μg/mL(P0.001)的rIL-17A能显著或极显著促进山羊中性粒细胞的迁移;20μg/mL(P0.05)、40μg/mL(P0.001)的rIL-17A能显著或极显著诱导山羊中性粒细胞的凋亡。结果表明:重组蛋白rIL-17A具有良好的生物学活性,能在体外不同程度地促进山羊单核细胞、中性粒细胞的迁移及中性粒细胞的凋亡。     

不同桉树精油添加水平对笼养白羽肉鸡生长性能、免疫机能和抗氧化机能的影响

本试验旨在探究饲粮中添加不同水平桉树精油对笼养白羽肉鸡生长性能、免疫机能和抗氧化机能的影响。选择300只1日龄爱拔益加肉鸡公雏,随机分为6组,每组5个重复,每个重复10只鸡。Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲粮;Ⅱ～Ⅵ组分别在基础饲粮中添加50、75、100、125和150 mg/kg桉树精油,试验期42 d。结果表明:1)1～21日龄,Ⅱ～Ⅴ组肉鸡21日龄时平均体重显著或极显著高于Ⅰ组(P0.05或P0.01),Ⅲ组和Ⅳ组肉鸡平均日增重极显著高于Ⅰ组(P0.01),Ⅱ～Ⅵ组料重比显著或极显著低于Ⅰ组(P0.05或P0.01),Ⅲ组、Ⅳ组料重比极显著低于Ⅵ组(P0.01);1～42日龄,Ⅳ组肉鸡42日龄时平均体重显著高于Ⅰ组(P0.05),Ⅳ组肉鸡平均日增重显著高于Ⅰ组(P0.05),Ⅳ组料重比显著低于Ⅰ组(P0.05)。2)各组之间肉鸡脾脏指数、法氏囊指数和血清新城疫抗体效价无显著差异(P0.05)。3)21日龄时,Ⅴ组肉鸡血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性显著或极显著高于Ⅰ～Ⅲ组(P0.05或P0.01),Ⅵ组肉鸡血清T-SOD活性显著高于Ⅰ组(P0.05);Ⅱ～Ⅵ组肉鸡血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著或极显著高于Ⅰ组(P0.05或P0.01);Ⅳ～Ⅵ组肉鸡血清丙二醛(MDA)含量极显著低于Ⅰ组(P0.01),Ⅴ组肉鸡血清MDA含量显著或极显著低于Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组(P0.05)。42日龄时,Ⅴ组肉鸡血清T-SOD活性最高,显著或极显著高于Ⅰ组和Ⅱ组(P0.05或P0.01),Ⅳ组和Ⅵ组显著高于Ⅰ组(P0.05);Ⅳ组肉鸡血清GSH-Px活性显著高于Ⅰ组(P0.05);Ⅳ组和Ⅴ组肉鸡血清MDA含量显著或极显著低于Ⅰ～Ⅲ组(P0.05或P0.01),Ⅲ组和Ⅵ组显著或极显著低于Ⅰ组(P0.05或P0.01)。4)回归分析显示,饲粮中添加95.25～105.00 mg/kg桉树精油,肉鸡生长前期(1～21日龄)生长性能最佳;饲粮中添加105.83～115.00 mg/kg桉树精油,肉鸡生长全期(1～42日龄)生长性能最佳;肉鸡抗氧化机能最佳的桉树精油添加水平,生长前期为151.13～205.60 mg/kg,生长后期(22～42日龄)为93.38～158.57 mg/kg。综上所述,在饲粮中添加适宜水平的桉树精油可显著提高笼养白羽肉鸡生长性能和抗氧化机能,饲粮中桉树精油适宜添加水平为105.00 mg/kg。     

玉米赤霉烯酮对小鼠脾淋巴细胞增殖及分泌细胞因子的影响

采用MTT法、细胞因子ELISA法来分析玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)对离体培养的小鼠淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响。结果表明,不同浓度ZEN对LPS、ConA活化的脾脏T/B淋巴细胞的增殖均具有极显著的抑制作用(P＜0.01),且这种增殖抑制表现出剂量依赖性;低浓度ZEN(1 μg/mL)能显著促进脾脏淋巴细胞分泌IL-10(P＜0.05),而高浓度ZEN(10、25 μg/mL)均能极显著抑制脾脏淋巴细胞分泌IL-10(P＜0.01),并表现出剂量依赖性;不同浓度ZEN(1、10、25 μg/mL)均能显著或极显著抑制脾脏淋巴细胞分泌IFN-γ(P＜0.05或P＜0.01),并表现出剂量依赖性。     

海北牦牛内脏中活性物研究

对海北8头成年牦牛的内脏中活性物进行了测定。结果为:海北牦牛肝脏中L-肉碱含量为30.45mg/g,比普通黄牛高7.33mg/g,且差异极显著(P0.01);肺脏L-肉碱含量为6.42mg/g,比普通黄牛高1.14mg/g,且差异显著(P0.05);心脏和肾脏中差异不显著。海北牦牛肝脏中含牛磺酸7.02mg/g,比普通黄牛高0.96mg/g,且差异极显著(P0.01);肺脏中含牛磺酸4.62mg/g,比普通黄牛高0.64mg/g,且差异显著(P0.05);心脏和肾脏中差异不显著。海北牦牛心脏和肺脏中分别含肝素钠74.33mg/kg和310.60mg/kg,比普通黄牛相应脏器高35.36mg/kg和111.12mg/kg,且差异极显著(P0.01)。海北牦牛肝脏中谷胱甘肽的含量为0.16mg/g,极显著的低于普通黄牛(P0.01);肾脏中含量为0.18 mg/g,显著的低于普通黄牛(P0.05)。     

黑沙蒿不同溶剂提取物活性成分及抗氧化活性分析

为了研究不同提取溶剂对黑沙蒿提取物得率、主要活性成分含量及其对自由基DPPH清除的影响,试验设5个处理,每个处理3个重复,各处理按1∶15(g/mL)料液比分别加入蒸馏水、乙醇、乙酸乙酯、乙醚和丙酮,通过超声波辅助法提取黑沙蒿中的生物活性成分;以维生素C为阳性对照,采用DPPH法来测定黑沙蒿不同溶剂提取物的抗氧化活性。结果显示:①与其他提取剂的提取物相比,蒸馏水提取物的得率最高(P0.05),且其多糖和黄酮含量也最高(P0.01),而乙醚提取物中多酚的含量最高(P0.01)。②同种溶剂提取物不同浓度相比,水提取物浓度为1 mg/mL时,对DPPH清除率极显著高于浓度为0、0.2和0.4 mg/mL时的清除率(P0.01);乙醇提取物浓度为0.4和0.6 mg/mL、乙酸乙酯提取物浓度为1 mg/mL、乙醚提取物浓度为0.8 mg/mL、丙酮提取物浓度为0.6 mg/mL时,对DPPH的清除率均极显著高于浓度为0和0.2 mg/mL时的清除率(P0.01)。③与其他溶剂提取物相比,当提取物浓度为0.2 mg/mL时,无水乙醇提取物对DPPH的清除率极显著高于其他4种提取物对DPPH的清除率(P0.01);提取物浓度为0.4和0.6 mg/mL时,水提取物对DPPH的清除率显著低于其他4种提取物对DPPH的清除率(P0.01);浓度为0.8和1 mg/mL时,乙酸乙酯提取物对DPPH的清除率极显著高于其他4种提取物对DPPH的清除率(P0.01)。综上,黑沙蒿水提取物得率及多糖和黄酮含量最高,乙醚提取物中多酚含量最高,而无水乙醇和乙酸乙酯提取物抗氧化效果最好。     

VE对4℃保存娟珊牛精液品质的影响

为研究维生素E对4℃保存娟姗牛精液品质和抗氧化保护作用的影响,用假阴道法采集体格健硕的娟姗牛精液,在稀释液中分别添加0 mg/mL、0.01 mg/mL、0.03 mg/mL、0.05 mg/mL、0.07 mg/mL、0.09 mg/mL的维生素E,将新鲜精液稀释至1.47×10~6/mL,于4℃环境下保存48 h,以评价精子活力、精子顶体完整率、谷胱甘肽还原酶(GR)和过氧化氢酶(CAT)活性等精液品质指标。结果显示:娟姗牛精液4℃保存至48 h时,维生素E 0.03 mg/mL添加组娟姗牛精子活力显著高于0.05 mg/mL维生素E添加组(P0.05),极显著高于对照组和其他试验组(P0.01);维生素E 0.03 mg/mL添加组牛精子顶体完整率极显著高于对照组和其他试验组(P0.01);GR酶活性维生素E 0.03 mg/mL添加组牛达71.55 U/L,较0.05 mg/mL维生素E添加组和0.07 mg/mL维生素E添加组高,且差异显著(P0.05),较对照组和其他添加组差异极显著(P0.01);维生素E 0.03 mg/mL添加组牛精子CAT值达5.68 U/mL,极显著高于对照组和其他添加组(P0.01)。说明在精液稀释液中添加0.03 mg/mL的维生素E可明显提高4℃环境保存娟姗牛精液的品质。     

富硒益生菌和亚硒酸钠对羔羊生产性能和抗氧化及IL-6水平的影响

本试验旨在对比富硒益生菌和亚硒酸钠对羔羊生产性能、抗氧化和血浆IL-6水平的影响。将30只健康羔羊随机均分成对照组、富硒益生菌组和亚硒酸钠组:对照组饲喂基础饲粮,富硒益生菌组、亚硒酸钠组分别在基础饲粮中添加富硒益生菌和亚硒酸钠,其剂量以硒计均为0.1 mg/kg饲粮,试验期56 d。试验过程中记录生产性能相关指标;试验0、28、56 d测定血浆总抗氧化(T-AOC)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和白细胞介素6(IL-6)水平。结果表明:富硒益生菌组羔羊平均增重显著高于对照组和亚硒酸钠组(P0.05),而富硒益生菌组羔羊饲料增重比显著低于对照组和亚硒酸钠组(P0.05)。28 d和56 d时,富硒益生菌组和亚硒酸钠组羔羊血浆T-AOC水平和SOD活性均显著或极显著高于对照组(P0.05或P0.01);而富硒益生菌组和亚硒酸钠组羔羊血浆T-AOC水平和SOD活性之间均无显著差异(P0.05)。28 d和56 d时,富硒益生菌组羔羊血浆MDA含量均极显著或显著低于对照组和亚硒酸钠组(P0.01或P0.05),而亚硒酸钠组羔羊血浆MDA含量较对照组也极显著降低(P0.01)。28 d时,富硒益生菌组羔羊血浆IL-6浓度显著高于对照组(P0.01);56 d时,富硒益生菌组和亚硒酸钠组羔羊血浆IL-6浓度均极显著或显著高于对照组(P0.01或P0.05);而富硒益生菌组羔羊血浆IL-6浓度也显著高亚硒酸钠组(P0.05)。由此可见,富硒益生菌能够提羔羊生产性能、抗氧化能力和血浆IL-6水平,效果优于亚硒酸钠。     

活化Nrf2缓解热应激致肉鸡心肌细胞氧化损伤的研究

【目的】 探究活化核因子红系2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）对热应激肉鸡心肌细胞氧化损伤的缓解作用及其机制。【方法】 利用差速贴壁法结合化学纯化法制备肉鸡原代心肌细胞。将心肌细胞随机分为对照组（Control组）、热应激组（HS组）和Nrf2激活剂叔丁基对苯二酚（tert-butylhydroquinone,TBHQ）预处理热应激组（TBHQ+HS组）。对照组心肌细胞正常培养不做任何处理,HS组心肌细胞置于高温（43 ℃）培养箱处理2 h,TBHQ+HS组心肌细胞用50 μmol/L TBHQ预处理12 h,再进行热应激处理。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定各组心肌细胞相对活力;用比色法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量和细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性;用实时荧光定量PCR检测Nrf2、血红素氧合酶-1（heme oxygenase 1,HO-1）、谷氨酰半胱氨酸连接酶（glutamate cysteine ligase catalytic,GCLC）和NAD （P） H：醌氧化还原酶1（NAD （P） H：quinone oxidoreductase 1,NQO1） mRNA表达水平;用蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测Nrf2总蛋白和HO-1蛋白表达量。【结果】 与对照组相比,热应激组肉鸡原代心肌细胞形态发生改变,出现空泡网状结构,心肌细胞的相对活力和SOD活性极显著降低（P<0.01）,MDA含量极显著升高（P<0.01）,细胞培养液中LDH活性极显著升高（P<0.01）,Nrf2/抗氧化反应原件（ARE）信号通路下游NQO1和GCLC mRNA表达升高,但差异不显著（P>0.05）,Nrf2和HO-1 mRNA表达显著增加（P<0.05）,但Nrf2总蛋白和HO-1蛋白表达量增加不显著（P>0.05）;与热应激组相比,TBHQ预处理热应激组心肌细胞内空泡网状结构减少,心肌细胞的相对活力显著升高（P<0.05）,SOD活性极显著升高（P<0.01）,MDA含量显著降低（P<0.05）,细胞培养液中LDH活性极显著降低（P<0.01）,Nrf2/ARE信号通路下游NQO1和GCLC基因的表达水平显著上调（P<0.05）,Nrf2基因和总蛋白表达量显著增加（P<0.05）,HO-1基因和蛋白表达量极显著增加（P<0.01）。【结论】 活化Nrf2可以上调Nrf2/ARE信号通路下游相关抗氧化基因和蛋白表达,提高热应激肉鸡心肌细胞的抗氧化能力,缓解热应激诱导的氧化损伤,提示Nrf2可能是肉鸡心肌细胞抗热应激氧化损伤的有效分子靶点。     

稀释液中添加维生素E对宠物犬精液冷冻效果的影响

在宠物犬冷冻精液稀释液中添加质量浓度为0,200,400,600μg/mL的维生素E,以观察对精液冷冻效果的影响。结果表明:冷冻精液稀释液中添加维生素E 400μg/mL时,解冻后精子活力显著高于对照组(P0.05);畸形率极显著低于对照组(P0.01),各浓度维生素E组精子解冻后体外存活时间均极显著高于对照组(P0.01),解冻后精子顶体完整率和冻后精子运动速率(VAP、VSL、VCLL)较对照组都有所提高,但差异不显著(P0.05)。综合各项指标后表明以质量浓度为400μg/mL维生素E组的效果最好。     

黑果枸杞花青素对H9c2大鼠心肌细胞抗氧化能力、炎性因子及能量代谢作用的影响北大核心

试验旨在探究青海柴达木黑果枸杞花青素(AC)对H9c2大鼠心肌细胞氧化应激损伤的影响,选用H9c2大鼠心肌细胞为研究对象,设立常氧组、常氧+AC组、低氧组和低氧+AC组,利用ELISA法检测各组细胞中过氧化物酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、血红素加氧酶-1(HO-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)以及能量代谢相关因子Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶的变化。结果显示,与常氧组相比,常氧+AC组大鼠心肌细胞MDA、TNF-α、IL-6的含量均显著降低(P<0.05),CAT、HO-1、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶活性显著升高(P<0.05),GSH-Px、SOD活性和IL-10含量均极显著升高(P<0.01);低氧组大鼠心肌细胞GSH-Px、HO-1、Na^(+)-K^(+)-ATP酶活性显著降低(P<0.05),CAT、SOD、Ca^(2+)-ATP酶活性和IL-10含量均极显著降低(P<0.01),MDA、TNF-α、IL-6含量均极显著升高(P<0.01)。与低氧组相比,低氧+AC组大鼠心肌细胞MDA、TNF-α、IL-6含量均极显著降低(P<0.01),CAT、GSH-Px、SOD、HO-1、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶活性和IL-10含量均极显著升高(P<0.01)。研究表明,AC能够通过减轻H9c2大鼠心肌细胞氧化应激损伤,增强低氧下心肌细胞的能量代谢,抑制低氧诱导的炎症发生,进而缓解H9c2大鼠心肌细胞的低氧损伤。     

五味子醇提物对TNBS致小鼠肠道炎症的损伤修复作用

为研究五味子醇提物对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)致小鼠肠炎的治疗效果,本试验将18只健康的雄性小鼠随机分为对照组(C组)、致病组(TNBS组)和治疗组(S+TNBS组),采用TNBS法建立小鼠肠炎模型,对S+TNBS组小鼠进行为期10 d的五味子醇提物(1 g/mL,0.2 mL/只)治疗。结果显示:血清和肠组织中促炎症细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,S+TNBS组显著低于TNBS组(P0.05),极显著高于C组(P0.01),S+TNBS组抑制炎症细胞因子白细胞介素10(IL-10)的含量极显著高于TNBS组(P0.01),显著高于C组(P0.05);血清与肠组织中抗氧化指标总超氧化物歧化酶(T-SOD)的含量,S+TNBS组极显著高于C组和TNBS组(P0.01),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化力(T-AOC)的含量S+TNBS组极显著高于C组(P0.01),显著高于TNBS组(P0.05),S+TNBS组中丙二醛(MDA)的含量显著低于TNBS组(P0.05),显著高于C组(P0.05)。表明S+TNBS组小鼠促炎症细胞因子分泌降低,抑制炎症细胞因子分泌升高,抗氧化能力增强,小鼠剖检观察肠道损伤减轻。五味子醇提物在浓度为1 g/mL时对TNBS致小鼠肠炎的损伤修复起到较好的治疗作用。     

硫酸化银耳多糖和党参多糖对鸡T淋巴细胞增殖及白细胞介素-2mRNA表达水平的影响

为研究硫酸化银耳多糖(sTPS_(70c))和硫酸化党参多糖(sCPPS_(50c))增强免疫作用机理,本试验以未修饰银耳多糖(TPStp)为对照,采用噻唑蓝(MTT)法和实时荧光定量PCR法测定了sTPS_(70c)和sCPPS_(50c)对鸡T淋巴细胞增殖及白细胞介素-2(IL-2)mRNA表达水平的影响。结果表明,多糖单独加入到外周血淋巴细胞时,sTPS_(70c)和sCPPS_(50c)几乎所有浓度均可显著刺激T淋巴细胞的增殖(P0.05),而TPStp仅在浓度为3.125μg/mL时显著刺激T淋巴细胞增殖(P0.05);多糖与植物血凝素P(PHA-P)同时加入到外周血淋巴细胞时,sCPPS_(50c)在浓度为0.3911.563μg/mL时显著刺激T淋巴细胞增殖(P0.05);sTPS_(70c)和sCPPS_(50c)在浓度为1.563μg/mL时可提高T淋巴细胞IL-2 mRNA的表达水平(P0.05),其中sTPS_(70c)对IL-2 mRNA的促表达作用显著强于TPS_(tp)(P0.05),且在浓度为1.563μg/mL时的作用最强。结果提示,硫酸化修饰可以提高多糖的淋巴细胞增殖活性及显著增强IL-2 mRNA的表达,且以sTPS_(70c)的作用较强,这与取代度有一定的相关性。