长顺绿壳蛋鸡OCX-32基因变异对蛋壳品质的效应研究

为了进一步了解蛋壳基质蛋白OCX-32基因对鸡蛋壳品质的遗传效应,试验以长顺绿壳蛋鸡为研究对象,在测定蛋壳质量后翅静脉采血提取DNA,采用PCR扩增并结合PCR产物直接测序法对OCX-32基因进行单核苷酸多态性(SNP)筛查及与蛋壳品质的关联分析。结果表明:在长顺绿壳蛋鸡OCX-32基因中检测到2个SNP位点,即位于外显子4的g.22 598 071 CT错义突变,产生2种基因型(CC和CT),其中C为优势等位基因,其频率为0.900,属于低度多态位点;位于内含子4的g.22 598 730TA突变,产生3种基因型(TT、TA和AA),T为优势等位基因,其频率为0.650,属于中度多态位点。关联性分析结果显示,g.22 598 071 CT位点对长顺绿壳蛋鸡蛋壳强度、蛋比重、蛋壳比例和蛋白高度有显著影响(P0.05),g.22 598 730 TA位点对长顺绿壳蛋鸡的蛋品质10个指标无显著影响(P0.05)。说明g.22 598 071 CT位点可能作为鸡蛋壳品质选择的一个遗传标记,OCX-32基因与长顺绿壳蛋鸡蛋品质存在一定的相关性,可作为发掘长顺绿壳蛋鸡蛋品质的分子育种标记。     

长顺绿壳蛋鸡mtDNA D-loop区遗传多样性分析

为更好地对长顺绿壳蛋鸡进行品种保护和利用,并从母系遗传角度深入阐明长顺绿壳蛋鸡的群体遗传背景,利用PCR直接测序法,测定了114只长顺绿壳蛋鸡的线粒体DNA(mt DNA)D-loop第1高变区568 bp片段序列。结果表明:在所分析的长顺绿壳蛋鸡mt DNA D-loop区序列中,A、C、G、T平均比例为27.1%、29.5%、13.4%、30.0%;共检测到核苷酸变异位点37个,核苷酸多样度为0.0111,24种单倍型,单倍型多样度为0.845,表明长顺绿壳蛋鸡遗传多样性较丰富,具有较好的选育潜力。聚类分析结果表明,长顺绿壳蛋鸡与红原鸡亲缘关系较近。     

质量性状的分子标记在长顺绿壳蛋鸡选育中的应用

分子标记辅助选择技术(MAS)是利用基因检测方法,从分子水平上快速准确地分析个体的遗传组成,从而实现对基因型的直接选择,进行分子育种。长顺绿壳蛋鸡是贵州省地方优良家禽品种,在外形外貌和生产性能上尚未进行系统选育。为了加快该品种的选育进展,可利用分子标记辅助育种,迅速提纯该品种蛋壳颜色性状,固定外观羽色。本试验利用分子标记辅助选育,经过两世代检测,已成功将长顺绿壳蛋鸡的绿壳率从75%提高到97.5%,效果显著。     

长顺绿壳蛋鸡IL8RB基因多态性检测

为了提升家禽抗逆性,为生产安全优质禽产品提供参考依据,试验选择长顺绿壳蛋鸡对其IL8RB基因多态性进行检测并采用混合基因池进行PCR扩增,结合直接测序法对IL8RB基因进行单核苷酸多态性(SNP)筛查。结果表明:在长顺绿壳蛋鸡IL8RB基因启动子区g. 22 589 018～g.225 895 571区域检测到5个SNPs位点(g.22 589 318,TC; g.22 589 424,TC; g.22 589 468,CG;g.22 589 477,TC; g.22 589 486,TC),基因型CC和等位基因C分别为优势基因型和优势等位基因,其多态信息含量(PIC)只有g.22 589 468一个突变位点呈低度多态,另外4个突变位点呈中度多态,且5个突变位点的等位基因数(Ne)均较为均匀。说明长顺绿壳蛋鸡在自然群体中的遗传多样性较为丰富,应在长顺绿壳蛋鸡的饲养管理、疾病防控、繁殖等方面加强保护,提升其抗逆性。     

长顺绿壳蛋鸡的初步选育

长顺绿壳蛋鸡是贵州省地方优良家禽品种,在外形外貌和生产性能上尚未进行系统选育。研究初步调研了该地方鸡种的概况,特别针对其公母鸡的选育提出了基本思路,并且以内源性逆转录病毒EAV-HP作为分子标记,重点选留绿壳纯合子公鸡,淘汰产粉壳的蛋鸡。相对于零世代,一世代基础群母鸡绿壳率提高10.1%,公鸡绿壳纯合基因型(LC/LC)频率提高11.22%。     

长顺绿壳蛋鸡雌激素受体1基因SNP与蛋品质性状的相关性研究

为加快贵州长顺绿壳蛋鸡选育与开发利用,采用PCR-SSCP和DNA测序技术对124只长顺绿壳蛋鸡的雌激素受体1(estrogen receptor,ESR1)基因进行多态性分析,并与其蛋品质性状进行关联性研究。结果表明,长顺绿壳蛋鸡ESR1基因中出现AA、AC和CC 3种基因型,其由于A(-999)C 1个SNPs所导致,经χ²适合性检验,基因型分布偏离了Hardy-Weinberg平衡(P<0.05)。基因型与蛋品质性状关联性分析结果显示,3种基因型个体间的蛋重、蛋形指数、蛋黄比率、蛋白比率、蛋壳重差异不显著(P>0.05),而AA与AC基因型个体的蛋壳厚度差异显著(P<0.05),在不影响其它性状的情况下,选择AA基因型个体可得到良好的蛋壳厚度,从而增强蛋品质。     

黔南州长顺绿壳蛋鸡产业发展浅析

正为发展特色禽业,推动长顺绿壳蛋鸡本地资源优势向产业优势和经济优势转化,加快农业结构调整,促进生产方式转变,推进农业产业化进程。本文对黔南州长顺绿壳蛋鸡产业进行综合分析,提出进一步发展思路供同行借鉴。1长顺绿壳蛋鸡养殖状况长顺绿壳蛋鸡是黔南州较为古老的绿壳蛋鸡品     

绿壳蛋鸡ESR1基因与早期产蛋性能的关联性研究

为了提高绿壳蛋鸡的产蛋性能,筛选出有利的分子辅助标记,试验采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和DNA测序技术对124只长顺绿壳蛋鸡雌激素受体1(ESR1)基因进行多态性分析,并与其产蛋性能进行关联性分析。结果表明:绿壳蛋鸡群体ESR1基因In4片段出现CC、CD和DD 3种基因型,其中C为优势等位基因,该位点群体遗传处于Hardy-Weinberg非平衡状态(P<0.05),多态信息含量(PIC)为0.359 5,遗传杂合度(He)和有效等位基因数(Ne)分别为0.474 6,1.903 3。基因型与产蛋性能关联性分析显示,3种基因型个体间的开产体重、开产蛋重、平均连产天数差异均不显著(P>0.05),而CC与DD基因型个体的开产日龄和300日龄产蛋量均存在显著差异(P<0.05)。在该试验群体中,选择DD基因型个体可增加产蛋量,提高产蛋性能。     

70周龄长顺绿壳蛋鸡HO-1基因在不同组织中表达差异研究

为研究HO-1基因在70周龄长顺绿壳蛋鸡不同组织中的表达差异,选取70周龄长顺绿壳蛋鸡9只（每种基因型3只）,采集每只鸡的大脑、肝脏、肾脏、卵巢、输卵管和子宫组织,提取其总RNA进行反转录,利用实时荧光定量 PCR方法检测样品中HO-1基因的表达水平,比较同一组织不同基因型及同一基因型不同组织间HO-1基因mRNA 的表达差异。结果表明,在同一组织不同基因型及同一基因型不同组织间HO-1基因的表达存在差异;其中HO-1基因在肝脏中表达量最高,且3种基因型间肝脏表达量存在极显著差异（P< 0.01）;白壳蛋鸡子宫中HO-1基因表达量极显著高于其他两种（P< 0.01）,纯合绿壳蛋鸡与杂合绿壳蛋鸡无显著差异（P> 0.05）。     

长顺绿壳蛋鸡体尺体重、产蛋量、蛋壳色素测定及相关性分析

为研究长顺绿壳蛋鸡种质特性,对长顺绿壳蛋鸡的体尺体重、产蛋量和蛋壳色素进行测定和分析。结果表明:长顺绿壳蛋鸡5个月产蛋量与龙骨长呈极显著负相关(P0.01),与其他体尺指标间相关不显著(P0.05);体重与体斜长、胸角、胸深、龙骨长、胫围等相关极显著(P0.01);蛋壳中胆绿素色素含量与原卟啉色素含量呈极显著负相关(P0.01),与其它体重体尺指标相关均不显著(P0.05)。研究结果为长顺绿壳蛋鸡的品种选育提供了理论依据。     

鸡绿壳蛋基因分子鉴定方法在湖北地方鸡育种群体中的检测应用

采用分子标记检测方法,对湖北3家育种企业的绿壳蛋鸡核心育种群体进行绿壳基因检测,结果:在XB、JT、和AX 3个商业育种群体公鸡中,绿壳基因O基因型频率分别为63.7%、59.5%和58.3%,将经过分子鉴定的纯合青壳公鸡与母鸡测交,O/O基因型公鸡F1代母鸡所产蛋壳颜色均为绿壳。试验表明:分子鉴定的方法准确、快速、简便,能够提高育种效率,加速选育进展。     

长顺绿壳蛋鸡快慢羽品系的建立与自别雌雄配套系的研究

本研究以长顺天农绿壳蛋鸡实业有限公司原种场保种长顺绿壳蛋鸡纯种自繁群体为素材选育长顺绿壳蛋鸡快慢羽品系,对长顺绿壳蛋鸡原种鸡研究表明,快羽占77.3%,慢羽占22.7%,说明长顺绿壳蛋鸡原种群主要以快羽为主。通过1日龄出苗快慢羽鉴别出快羽群体和慢羽群体,饲养至32周龄通过分子检测和测交等方法建立长顺绿壳蛋鸡快慢羽纯系。将建立起来的长顺绿壳蛋鸡快慢羽纯系进行纯繁,其后代快慢羽比例分别达到了99.86%和99.96%。自别雌雄杂交鸡群准确率达到99%以上。     

卢氏绿壳蛋鸡壳色性状的AY493302标记

卢氏鸡是我国唯一片羽型的可产绿壳蛋的地方鸡种,壳色有绿壳和褐壳2种颜色。本研究采集131只卢氏绿壳蛋鸡,45只卢氏褐壳蛋鸡及18只地方白壳蛋鸡的血液,提取基因组DNA,用微卫星AY493302标记探讨了这3种壳色的基因型差异。结果表明,微卫星AY493302在卢氏绿壳蛋鸡、卢氏褐壳蛋鸡以及地方白壳蛋鸡之间基因型分布差异极显著,基因型AA（225bp/225bp）在卢氏鸡中的频率为0.396 9,且只在卢氏绿壳蛋鸡中出现。其A基因频率在卢氏绿壳蛋鸡、卢氏褐壳蛋鸡和地方白壳蛋鸡中分别为0.698 5,0.500 0,0.500 0。进一步进行测序发现,卢氏绿壳蛋鸡AA基因型在19bp处碱基和217bp处碱基均为G,但卢氏绿壳蛋鸡AB基因型在19bp处碱基却为C,在217bp处碱基与绿壳蛋鸡AA基因型同为G。卢氏褐壳蛋鸡AB基因型和地方白壳蛋鸡的AB基因型则表现在19bp处碱基为C,217bp处碱基为T。AA基因型的序列与NCBI数据库中红色原鸡比较,达99%同源的序列有V00425.1、J02015.1和NW_003763484.1,均位于鸡的1号染色体上。该微卫星标记的群体杂合度、群体多态信息含量在卢氏绿壳蛋鸡中都低于卢氏褐壳蛋鸡和地方白壳蛋鸡。尽管在所研究的卢氏绿壳群体中只有39.7%的个体表现为纯合AA基因型,但卢氏褐壳蛋鸡和地方白壳蛋鸡中没有该基因型,故而认为微卫星AY493302的纯合AA基因型可以作为对卢氏绿壳蛋鸡进行分子标记辅助选择的基因型。     

“长顺绿壳蛋鸡”育雏管理

“长顺绿壳蛋鸡”是我县重点打造的特色品牌，2008年通过贵州省农业厅无公害农产品产地认证及产品认证。2009年，“长顺绿壳蛋鸡”被国家农业部列入地方遗传资源保护品种一《中华人民共和国农业部公告》（第1278号）。2012年11月27日，获有机农产品认证证书。     

新杨无鱼腥味基国突变体绿壳蛋鸡配套系的选育

为了选育无鱼腥味基因突变体绿壳蛋鸡品系,试验采用分子标记辅助选择技术对绿壳蛋鸡及其配套白壳蛋鸡进行联合育种.结果表明:建立的检测方法能够有效检测并剔除不利等位基因T,育成了新杨无鱼腥味基因突变体绿壳蛋鸡配套系,提高了鸡蛋品质.     

5个绿壳蛋鸡群体中EAV-HP在SLCO1B3基因5'-非编码区插入整合频率和类型的研究

本试验旨在测定和比较5个绿壳蛋鸡群体中EAV-HP在溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员1B3(solute carrier organic anion transporter family member 1B3,SLCO1B3)基因的5'-非编码区插入整合的频率和类型。所选5个绿壳蛋鸡群体包括3个北京地区的商业群体(北京-LK、北京-LF和北京-YM)、贵州长顺绿壳蛋鸡群体和四川省地方品种旧院黑鸡;采用双重PCR对EAV-HP的插入整合进行检测,并利用DNA测序的方法判断EAV-HP的主要突变位点。结果表明,5个绿壳蛋鸡群体均拥有一定数量的EAV-HP插入整合的个体,表现为杂合(LC/N)和纯合(LC/LC)基因型,均可产绿壳蛋,其中旧院黑鸡的绿壳蛋频率最低,仅为28.90%,其次是北京-LF群体,为46.94%,其他3个群体的绿壳蛋频率为83.33%~84.62%;经卡方检验,北京-LF和旧院黑鸡群体符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),而其他3个群体则极显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.01)。DNA测序结果显示这5个绿壳蛋鸡群体中EAV-HP插入整合的序列与之前报道的东乡绿壳蛋鸡的KC632577.1完全一致。地方品种旧院黑鸡的绿壳蛋频率较低,建议利用双重PCR检测的分子标记辅助选择方法加以提高。     

利用微卫星标记分析长顺绿壳蛋鸡的遗传多样性

利用8对微卫星引物对长顺绿壳蛋鸡遗传多样性进行检测。结果表明,该群体的平均有效等位基因数为3.585 6个,平均多态信息含量为0.659 7,平均期望杂合度为0.713 1,平均基因杂合度为0.710 2,表明长顺绿壳蛋鸡群体遗传变异较大,遗传多样性较为丰富。研究结果为长顺绿壳蛋鸡品种资源合理保护与开发利用提供了科学依据。     

百宜黑鸡与兴义矮脚鸡、长顺绿壳蛋鸡的遗传变异研究

测定了12只百宜黑鸡、13只贵州兴义矮脚鸡、8只长顺绿壳蛋鸡共33只鸡个体线粒体DNA控制区部分序列。结果:3个鸡群共33只个体线粒体DNA控制区部分序列为570 bp,共发现38个变异位点,占分析位点总数的6.67%,其中观测到转换23个,颠换15个。百宜黑鸡与其他2种鸡的遗传距离分别0.024 1和0.031 2,表明百宜黑鸡与兴义矮脚鸡、长顺绿壳蛋鸡是不同的种。     

富里酸硒对长顺绿壳蛋鸡产蛋率、哈氏单位、蛋硒含量及白壳率的影响

试验采用单因子完全随机试验设计,将190日龄健康、体重和产蛋率相近的长顺绿壳蛋鸡150羽随机分为5组,每组3个重复,E组为对照组,A、B、C、D组饲料分别添加10 m L浓度为14.31、16.07、17.93、19.70 mg/kg(以硒计)富里酸硒添加液。预饲期14 d,正式试验60 d。试验期第7天、第14天、第21天、第30天、第45天和第60天随机采样检测。结果表明,在饲料中添加富里酸硒可以提高长顺绿壳蛋鸡产蛋率,各处理组均能提高产蛋率且与对照组差异显著(P0.05);试验B组产蛋率提高最多,且与其他试验组差异显著(P0.05),添加量以16.07 mg/kg为宜,添加量过大产蛋率有下降趋势;可显著提高长顺绿壳鸡蛋的哈氏单位,添加量以16.07 mg/kg为宜(P0.05),添加量过大哈氏单位反而呈现下降趋势;能提高鸡蛋中的硒含量,添加浓度越大,蛋硒含量越高,但与对照组差异不显著(P0.05);可以显著提高长顺绿壳蛋鸡绿壳蛋率,试验组白壳率显著低于对照组(P0.05),以试验B组白壳率最低。     

贵州地方鸡种——长顺绿壳蛋鸡

<正>长顺绿壳蛋鸡是贵州省特有的一个珍稀鸡种,属于蛋肉兼用型,以产绿壳蛋著称。1长顺绿壳蛋鸡的产区及自然条件1.1中心产区及分布区主产于贵州省黔南州长顺县南部鼓扬镇马场村、岩纳村、格道村一带,分布于相邻的交麻乡、中坝乡、营盘乡、种获乡、长寨镇和代化镇等6个乡镇。