枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌对鲫鱼免疫机能的影响及其代谢产物的抑菌活性研究

为了检测枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌对鲫鱼免疫机能的影响及其代谢产物对小肠耶尔森氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌活性,试验将鲫鱼分成3组,分别为沼泽红假单胞菌组、等比例沼泽红假单胞菌和枯草芽孢杆菌的复合菌组和未加菌处理的对照组,在养殖水体中分别加入不同的微生物,在第30天静脉采血,测定血浆中碱性磷酸酶(ALP)、总超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LZM)的活性以及丙二醛(MDA)的浓度;利用超声波破碎细胞,旋蒸浓缩得到枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌胞内外代谢产物,采用牛津杯法以小肠耶尔森氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为指示菌株,测定代谢产物的抑菌圈直径。结果表明:沼泽红假单胞菌组与复合菌组的鲫鱼血浆中ALP的活性显著高于对照组(P0.05),LZM活性高于对照组,MDA的浓度低于对照组,SOD的活性与对照组的差异不显著(P0.05);两种菌的胞外代谢产物对金黄色葡萄球菌的抑菌活性较强,沼泽红假单胞菌胞内代谢产物对金黄色葡萄球菌的抑菌活性较强,枯草芽孢杆菌胞内代谢产物对小肠耶尔森氏菌抑菌活性较强。说明沼泽红假单胞菌和复合菌对鲫鱼的免疫机能有一定的增强作用,两种益生菌胞内外代谢产物对小肠耶尔森氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌均有抑制作用。     

防治家禽腹泻的复方中药筛选及其提取工艺研究

为筛选能够有防治家禽腹泻的复方中药,选择对大肠杆菌有抑菌效果的单味中药,配置14种复方,结合对金黄色葡萄球菌、致病性沙门菌的抑菌能力,筛选出一个复方中药,通过正交试验确定该复方中药最佳提取工艺。结果显示:筛选的复方中药乙醇提取物(1 g/mL,200μL)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鸡大肠杆菌、鸭大肠杆菌、鸡致病性沙门菌、鸭致病性沙门菌(指示菌浓度1×10^8cfu/mL)的抑菌圈直径分别为24.21mm、31.36mm、25.19mm、24.12mm、25.00 mm、25.49 mm;硫酸新霉素对上述致病菌的抑菌圈直径分别为23.61 mm、26.52 mm、14.69 mm、16.00 mm、24.11 mm、25.49 mm。经正交试验优化的最佳提取工艺为:15倍溶剂、提取时间60 mim、乙醇浓度90%、提取2次。优化后提取物体外抑菌试验(O78)的抑菌圈均值为26.65 mm。研究表明:筛选的复方中药对引起家禽腹泻的主要致病菌具有良好抑菌、杀菌作用,正交试验确定的提取工艺稳定可行。     

鼠李糖乳杆菌对三种细菌生长的抑制作用

为了研究鼠李糖乳杆菌对大肠杆菌、沙门氏菌和产气荚膜梭菌的抑菌作用,试验采用牛津杯法检测了鼠李糖乳杆菌与三种细菌共培养的细菌数、抑菌圈直径,并测定了细菌生长曲线。结果表明:共培养后三种细菌的数量均显著低于对照组(P0.05);鼠李糖乳杆菌发酵上清液和全菌裂解液与三种细菌共培养后,细菌对数生长期明显滞后或未出现对数生长期;鼠李糖乳杆菌发酵上清液和全菌裂解液对三种细菌的抑菌圈直径均显著大于对照组(P0.05),全菌裂解液对大肠杆菌和产气荚膜梭菌的抑菌圈直径显著大于上清液(P0.05)。说明鼠李糖乳杆菌对大肠杆菌、沙门氏菌和产气荚膜梭菌的生长具有明显的抑制作用,其中对产气荚膜梭菌的抑制效果最强,全菌裂解液的抑菌效果优于上清液。     

脂肪酶对三丁酸甘油酯抑菌效果的影响研究

本试验旨在研究脂肪酶处理对不同浓度三丁酸甘油酯抑制大肠杆菌、沙门氏菌及金黄色葡萄球菌能力的影响。选用的脂肪酶浓度为3、6、9 mg/mL,三丁酸甘油酯浓度为20、40、60 mg/mL,抑菌效果以抑菌圈直径表示,抑菌圈直径越大表明抑菌效果越强。结果表明:三丁酸甘油酯本身不具备明显的抑菌能力,在被脂肪酶酶解后,其抑菌能力增强;当三丁酸甘油酯浓度为20 mg/mL时,酶解后其对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径由7.9 mm增大至11.6 mm(P0.05);对大肠杆菌的抑菌直径由10.0 mm增大至12.7 mm(P0.05);当三丁酸甘油酯浓度为40 mg/mL或60 mg/mL时,酶解后其对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果由低度或中度敏感提高至高度敏感,且脂肪酶浓度对抑菌效果无显著影响。结果显示,脂肪酶酶解能增强三丁酸甘油酯对大肠杆菌、沙门氏菌以及金黄色葡萄球菌的抑菌能力。     

牛膝多糖体外抑菌效果的研究

试验旨在研究牛膝多糖(ABPS)体外抑菌的效果。试验将牛膝多糖溶液分为1.000、0.500、0.250、0.125及0 g/mL 5组,探究其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径的影响。结果表明,牛膝多糖对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果与其剂量成正比,最低抑菌浓度为31.250 mg/mL,牛膝多糖在体外对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最佳抑菌剂量以1.000 g/mL剂量组效果最佳(P0.05)。由此可得,一定剂量的牛膝多糖在体外有抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的效果。     

酸马奶源发酵乳杆菌对致病性大肠杆菌O8的体外抑菌研究

为了探究天然发酵酸马奶中发酵乳杆菌对致病性大肠杆菌O₈（E.coli O₈）的抑菌机理,本试验从酸马奶中分离筛选出抑菌效果最佳的菌株,对其进行16S rDNA序列鉴定,经NCBI网站BLAST对比鉴定菌种;对菌株进行培养发酵,制备无细胞发酵上清液（CFS）;通过排酸、排过氧化氢（H₂O₂）、不同蛋白酶处理等方法初步确定CFS中的抑菌活性物质性质及其含量;采用牛津杯法和二倍稀释法确定CFS对致病性E.coli O₈ 24 h生长曲线的最佳抑菌浓度;试剂盒法测定CFS对致病性E.coli O₈的细胞膜和细胞壁通透性的影响。结果显示,从酸马奶中分离出22株对致病性E.coli O₈有抑制作用的菌株,对抑菌作用最好的菌株进行16S rDNA序列鉴定及系统进化树分析后确定其为发酵乳杆菌属;CFS中主要的抑菌物质为蛋白,含量为399.5 μg/mL;最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）分别为25.0和49.9 μg/mL;CFS能使致病性E.coli O₈的碱性磷酸酶（AKP）含量在1 h内快速升高,之后呈缓慢增长趋势,且使致病菌培养液中的蛋白含量明显升高。综上所述,发酵乳杆菌CFS的主要抑菌物质为蛋白,蛋白浓度越高抑菌能力越强;CFS通过破坏或改变致病性E.coli O₈细胞膜和细胞壁的通透性,使其释放出AKP和胞内蛋白,从而在短时间内起到抑制致病性E.coli O₈生长的作用。     

酸马奶源发酵乳杆菌对致病性大肠杆菌O_8的体外抑菌研究

为了探究天然发酵酸马奶中发酵乳杆菌对致病性大肠杆菌O8(E.coli O8)的抑菌机理,本试验从酸马奶中分离筛选出抑菌效果最佳的菌株,对其进行16S rDNA序列鉴定,经NCBI网站BLAST对比鉴定菌种;对菌株进行培养发酵,制备无细胞发酵上清液(CFS);通过排酸、排过氧化氢(H2O2)、不同蛋白酶处理等方法初步确定CFS中的抑菌活性物质性质及其含量;采用牛津杯法和二倍稀释法确定CFS对致病性E.coli O824h生长曲线的最佳抑菌浓度;试剂盒法测定CFS对致病性E.coli O8的细胞膜和细胞壁通透性的影响。结果显示,从酸马奶中分离出22株对致病性E.coli O8有抑制作用的菌株,对抑菌作用最好的菌株进行16S rDNA序列鉴定及系统进化树分析后确定其为发酵乳杆菌属;CFS中主要的抑菌物质为蛋白,含量为399.5μg/mL;最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)分别为25.0和49.9μg/mL;CFS能使致病性E.coli O8的碱性磷酸酶(AKP)含量在1h内快速升高,之后呈缓慢增长趋势,且使致病菌培养液中的蛋白含量明显升高。综上所述,发酵乳杆菌CFS的主要抑菌物质为蛋白,蛋白浓度越高抑菌能力越强;CFS通过破坏或改变致病性E.coli O8细胞膜和细胞壁的通透性,使其释放出AKP和胞内蛋白,从而在短时间内起到抑制致病性E.coli O8生长的作用。     

丁香叶提取物对猪源性大肠杆菌的抑菌作用研究

丁香叶中不同的化学成分有抗菌、抗病毒、抗炎镇痛、保肝利胆及增强机体免疫力等药理作用。本试验测得丁香叶提取液浓度为0.2 g/ml时对猪体内采集的大肠杆菌K1的抑菌圈直径为10 mm,对猪体内采集的大肠杆菌K2的抑菌圈直径为13 mm;浓度为0.8 g/ml的丁香叶提取液对猪体内采集的大肠杆菌K1的抑菌圈直径为20 mm,对猪体内采集的大肠杆菌K2的抑菌圈直径为21 mm。试验结果表明,丁香叶提取物抑菌效果良好,并且浓度增加,效果更佳。丁香叶总黄酮提取液对猪源性大肠杆菌K1和K2的最低抑菌浓度值为1 000μg/ml。     

饲料油菜内生菌代谢产物抑菌作用的效果研究

试验研究了饲料油菜内生菌SY-N1代谢产物对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌与大肠杆菌等病原菌的抑菌效果。结果表明,SY-N1代谢产物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌有较强的抑制作用,且呈正相关,而对沙门氏菌的抑菌效果一般;SY-N1代谢产物浓缩样品与青霉素、强力霉素及庆大霉素的抑菌效果相近。结果提示,油菜内生菌SY-N1代谢产物具有特异性抑菌作用。     

武夷岩茶茶多酚抑菌作用的研究

用纸片法测定了1.0、2.5、5.0、10mg/mL 4种浓度的武夷岩茶茶多酚对大肠杆菌、致病性大肠杆菌、李斯特氏沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等4种菌的抑菌效果。实验结果表明,茶多酚对4种菌均有明显的抑菌作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强（P〈0.01）,4种浓度的抑菌圈分别为1.82±0.44～3.34±0.18（cm）;对李斯特氏沙门氏菌、大肠杆菌、致病性大肠杆菌的抑菌作用次之,抑菌圈分别为1.73±0.18～2.05±0.14（cm）;1.46±0.33～1.85±0.32（cm）;1.1±0.14～1.61±0.25（cm）。1mg/mL的茶多酚对4种菌的抑菌作用均小于同剂量的青霉素和庆大霉素（P〈0.01）。     

红树内生菌代谢产物抑菌作用的初步观察

观察红树内生菌CⅢ-1代谢产物对金黄色葡萄球菌、表面葡萄球菌、大肠杆菌以及沙门氏菌等常见动物病原菌的抑菌效果。结果表明,CⅢ-1代谢产物对金黄色葡萄球菌、埃希氏大肠杆菌有较强的抑制作用,且抑菌活性随代谢产物浓度的增加而增加;金黄色葡萄球菌、表面葡萄球菌和埃希氏大肠杆菌对8倍浓缩的CⅢ-1代谢产物高度敏感,但沙门氏菌呈中度敏感。CⅢ-1浓缩样品与几种常用抗生素的抑菌效果相当。     

茶树油对三种常见致病菌的体外抑菌活性研究

为了确定茶树油的体外抑菌敏感度和最低体外抑菌浓度,本试验抑菌剂选择茶树油,供试菌选择沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,进行体外抑菌试验,并测定茶树油原液的抑菌圈以及不同稀释度的茶树油和1.5×10⁸ cfu/ml菌悬液混合培养后在600 nm波长处的光密度值。试验结果表明,茶树油在3种细菌中对金黄色葡萄球菌最为敏感,对沙门氏菌和大肠杆菌次之,对3种菌的抑制培养最大突变区间分别为金黄色葡萄球菌2^-3×10^-1～2^-2×10^-1、沙门氏菌2^-4×10^-1～2^-3×10^-1和大肠杆菌2^-7×10^-1～2^-6×10^-1。     

抗鸡源大肠杆菌的枯草芽孢杆菌鉴定及代谢产物理化特性研究

本试验采用鸡源大肠杆菌O2作为指示菌,对29株芽孢杆菌的发酵产物进行了抑菌效果检测,获得了4株抑菌圈在15mm以上的芽孢杆菌;在此基础上,对其代谢产物进行了抑菌谱的测定及理化稳定性试验,发现其中一株芽孢杆菌对革兰氏阳性、阴性细菌及真菌均具有良好的抑菌和杀菌效果,理化性质稳定,对鸡源大肠杆菌抑菌圈达到20mm以上;生理生化鉴定及16S rDNA测序结果显示该菌为一株枯草芽孢杆菌,命名为枯草芽孢杆菌GD株。     

24味中药水提物对宠物犬源致病性大肠杆菌NJ-1株体外抑菌试验研究

为了研究24味中药水提物对吕梁地区宠物犬源致病性大肠杆菌(Escherichia coli)流行株NJ-1的体外抑菌效果,利用水提法提取24味中药有效成分,使其浓度为1 g/m L;利用牛津杯法和试管二倍稀释法分别测定24味中药水提物抑菌圈直径大小和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:宠物犬源致病性大肠杆菌NJ-1株对黄连、诃子、五倍子、五味子、苦参5味中药水提物高度敏感,抑菌圈直径在18.1~20.0 mm之间,MBC在7.80~15.63 mg/m L之间;其余的中药水提物对宠物犬源致病性大肠杆菌NJ-1株存在不同程度的敏感性。说明中草药可应用于犬源致病性大肠杆菌病的治疗。     

不同蒙药对牛源致病性大肠杆菌体外抑菌效果的筛选

为了探究不同蒙药对致病性大肠杆菌的抑菌效果,从而筛选出抑菌效果较好的药物进行试验。本研究选取了9味蒙药,通过牛津杯法、二倍稀释法以及小鼠致病性试验,测定不同蒙药对牛源致病性E.coli O78抑菌直径和最低抑菌浓度(MIC)。试验结果显示,除了柯子和多叶棘豆没有抑菌作用外,其余7味蒙药对致病性E.coli O78均有不同程度的抑制作用。其中黄连的体外抑菌效果最好,抑菌圈直径为22mm,表现为极敏,MIC为0.0039g/m L;姜黄的体外抑菌效果最差,抑菌直径为9mm,表现为低敏,MIC为0.5000g/m L。表明不同蒙药对致病性E.coli O78体外抗菌效果不同。黄连的抑菌效果最好,在较低药物浓度下对致病性E.coli O78有较强的抑制作用。本研究旨在筛选出对致病性E.coli O78抑菌效果较好的蒙药,从而为大肠杆菌病的防治提供科学的理论依据。     

乳酸菌及其培养物对鸡致病性大肠杆菌的抑菌试验

本试验研究了乳酸菌、乳酸菌上清液、抗生素及MRS对照液对鸡致病性大肠杆菌的体外抑菌作用.结果表明,乳酸杆菌菌液及培养后的无菌上清液都有较强的抑菌活性,其抑菌圈的直径显著大于对照组(P＜0.05);且随着乳酸菌培养时间的不同,乳酸菌培养液的pH值逐渐降低,对致病性大肠杆菌的抑制作用也逐渐增强.     

中药对猪源大肠杆菌O_8体外抑菌试验研究

为了探讨猪源大肠杆菌O8对黄连等10种中药的体外敏感性,采用琼脂扩散法和微量二倍稀释法对10种中药水提物进行体外抑菌试验,测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:黄连对大肠杆菌O8呈高度敏感,抑菌圈直径为21.3 mm,其MIC值为7.813mg/mL,抑菌效果最好;黄芩、五倍子呈中度敏感,其MIC值为31.25mg/mL;而苦参不敏感,其MIC值为500mg/mL,抑菌效果差。     

益生乳酸杆菌抑制大肠杆菌的研究

本试验在分离选育出一批抗逆性较强的乳酸杆菌之后 ,测定了从胃粘膜分离筛选出的三株乳酸杆菌的乳酸产量、乳酸杆菌前期代谢产物的抑菌作用和乳酸杆菌及其代谢产物的协同抑菌作用。结果表明 ,乳酸杆菌代谢产物中乳酸不是唯一起抑菌或灭菌作用的代谢物。乳酸杆菌代谢产物对不同血清型大肠杆菌的抑制效果和乳酸杆菌及其代谢产物联合对大肠杆菌的抑菌作用相似 ,即抑制或杀灭大肠杆菌K88和K99较强 ,而对 987P的抑制作用较弱。同时 ,乳酸杆菌的菌体及其代谢产物对大肠杆菌具有一定的协同抑制作用。     

添加酸马奶源乳酸杆菌对犊牛肠道菌群和短链脂肪酸含量的影响

选取刚出生的健康荷斯坦犊牛20头,随机分为酸马奶组、正常组、腹泻组和抗生素组,每组5头。除正常组外,其他3组在相同哺乳的基础上均口服100 mL致病性E.coli O1菌悬液(2.5×10¹¹ CFU/mL)建立腹泻模型,抗生素组添加环丙沙星0.5 mg/kg,试验期15 d。结果表明：酸马奶组犊牛肠道微生物丰富度与多样性显著高于其他3组(P<0.05)。酸马奶源乳酸杆菌干预后显著提高了肠道内厚壁菌门、普雷沃氏菌科、毛螺菌科未确定菌属和拟普雷沃菌属的相对丰度,降低了拟杆菌门、变形菌门、梭杆菌门、放线菌门的相对丰度;酸马奶组犊牛粪便中乙酸、丙酸和丁酸含量显著高于其他3组(P<0.05)。由此可见,犊牛日粮中添加酸马奶源乳酸杆菌可显著提高肠道微生物多样性,增加肠道中有益菌的丰度,降低有害菌的丰度,并显著提高其粪便中乙酸、丙酸和丁酸的含量。     

卤水中耐酸耐盐产细菌素乳酸菌的筛选

为筛选出适合作为微生物饲料添加剂且有抑菌活性的乳酸菌，以贵州省黔东南苗族侗族自治州农家生产卤水为试验对象，筛选耐酸、耐盐且有抑菌活性的乳酸菌。采用琼脂扩散法，对其生长曲线、产酸能力、耐酸能力和耐盐能力进行研究，经过观察其生长特性、生理生化鉴定、16S r DNA测序分析对菌种进行鉴定，并通过排酸试验、排过氧化氢试验和蛋白酶敏感试验对其抑菌物质种类进行初步分析。结果显示：从卤水中初步分离出的155株菌，筛选得到1株MMB-09，对金黄色葡萄球菌、腐败希瓦氏菌、大肠杆菌以及蜡样芽孢杆菌有良好的抑菌效果，其中对腐败希瓦氏菌的抑菌效果最显著，抑菌圈直径达（14.3±0.42）mm；该菌株在8 h时OD600达到2.0以上，在12 h进入生长稳定期；有较好的产酸能力，8 h时其pH就已经降至4.2；具有较好的耐酸性和耐盐性，在pH为3和盐含量80 g/L时仍生长良好。对菌株进行形态学特征、生理生化鉴定和16S r DNA测序分析鉴定其为植物乳杆菌。该菌株在pH为6时还保留50.15%的抑菌活性，对过氧化氢酶不敏感以及蛋白酶处理后抑菌效果下降明显（P <0.05），表明其抑菌成分中包含蛋白类...