杂种宠物犬的精液冷冻效果研究

选取本地常见的杂种宠物犬共计6只进行精液采集和冷冻试验,精液冷冻过程中分别采用一步稀释法和两步稀释法。结果显示,采用一步稀释法的颗粒冻精解冻后活力(0.37±0.01)与0.25m L细管冻精的解冻后活力(0.35±0.01)及0.5 m L细管冻精的解冻后活力(0.32±0.01)的均差异显著(P0.05),而0.25 m L细管冻精的解冻后活力(0.35±0.01)与0.5 m L细管冻精的解冻后活力(0.32±0.01)的差异极显著(P0.01);采用两步稀释法的颗粒冻精的解冻后活力(0.40±0.01)与0.25 m L细管冻精的解冻后活力(0.39±0.01)以及0.5 m L细管冻精的解冻后活力(0.36±0.02)的差异均不显著(P0.05)。结果表明,杂种宠物犬精液冷冻保存时采用一步稀释法颗粒冻精的冷冻效果比0.25 m L细管和0.5 m L细管均好,而两步稀释法对不同冻精剂型的影响不明显。     

犬冷冻精液技术的试验研究初报

介绍了犬微型细管(0.25 mL)冻精制作方法,优选出冷冻稀释液及稀释操作程序。制作结果:冷冻精液解冻活力达0.405±0.058,精子顶体完整率为(43.58±6.73)%,复苏率达54.6%。精子畸形率为(13.80±4.26)%;不同品种公犬鲜精和冻精品质差异不大,但个体差异显著,有的耐冻性很差;不同初始冷冻温度下,解冻效果各异,以-111~-130℃冷冻效果较好;冷冻时间10~15 min为好;稀释方法还待进一步探讨。     

Tris-柠檬酸添加不同植物蛋白粉冷冻奶牛精子实验研究

本文研究了Tris-柠檬酸缓冲液中添加大豆蛋白粉、花生蛋白粉、大豆和花生蛋白粉混合物,替代卵黄稀释液冷冻奶牛精子的效果。做了两方面的实验研究:(1)用3种Tris-柠檬酸蛋白粉和对照Tris-柠檬酸卵黄稀释液超低温细管冷冻奶牛精子,观察超低温冷冻奶牛精子活力的冷冻试验;(2)超低温冷冻奶牛细管冻精解冻后在4℃环境中保存的存活实验。研究结果表明,4种不同稀释液超低温冷冻奶牛精子后精子活力差异不显著(P0.05);4种不同稀释液冷冻细管冻精解冻后于4℃冷藏并连续观察,每天的精子活力变化差异显著(P0.05),第5天Tris-柠檬酸大豆和花生混合蛋白粉稀释液的活力最好,并且在显微镜下观察视野要比对照Tris柠檬酸卵黄稀释液清晰,不易滋长细菌。因此,混合大豆蛋白粉和花生蛋白粉的植物源稀释液可以替代动物源稀释液。     

中卫山羊细管冻精制作与种质资源保存初步研究

为了中卫山羊种质资源的保护、利用,试验采用细管冷冻技术对宁夏地方品种中卫山羊进行了冻精制作和保存,比较了稀释液、冷冻保护剂类型和浓度、稀释倍数及不同稀释法等对中卫山羊精液冷冻保存品质的影响。结果表明:解冻后的精液品质,3号稀释液精子活率高于1号、2号稀释液,差异极显著(P0.01);相同浓度的甘油和二乙醇,解冻后的精子活率甘油高于二乙醇,差异极显著(P0.01),当甘油浓度为5%时,解冻后精子活率显著(P0.05)高于3%和6%;2倍稀释解冻后精子活率最高,5倍稀释解冻后精子活率最低,但不同稀释倍数解冻后精子活率差异不显著(P0.05)。     

五种糖类对犬精液冷冻保存效果的研究

选取8只身体健康、性欲旺盛的比格公犬,采集其精液,对鲜精进行质量检测,主要包括颜色、射精量、精子活率、活力和pH。选取精子活率达到70%以上犬精液用于后续精液冷冻试验。分别将含有葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖和海藻糖的精液稀释液与精液按照1∶2的比例进行稀释。经冷冻解冻后,进行活率、活力、质膜完整性和顶体完整性的精子质量检测。通过对新鲜精液进行品质检测,结果显示5只合格用犬的平均射精量为2.85 mL,密度为2.01×10~8个/mL,pH为6.56。含有果糖的冷冻稀释液中精子活率和活力最高,分别达59.90%和54.00%;其次是添加葡萄糖和乳糖的稀释液中活率较高,分别为59.21%和56.73%,且两组稀释液中精子解冻后活力均为52.00%。进一步评估精子解冻后质膜完整率,结果显示葡萄糖和果糖组显著高于其他组,分别达48.73%和49.52%;而蔗糖添加组精子质膜完整率最低,为42.21%。稀释液中添加果糖的精子解冻后顶体完整率显著高于其他组,而添加蔗糖组顶体完整率最低。在比格犬的精液冷冻保存中,添加果糖的冷冻稀释液能显著提高精子的活率和活力,从而达到提高冻精质量的效果。     

2种稀释液对公猪精液冷冻保存效果的影响

试验为探究2种不同冷冻稀释液对公猪精液稀释冷冻效果的影响。试验采用手握法采集同一头公猪精液,将采集的精液分为2组,进行液氮熏蒸制作细管冻精,分别使用Ⅰ号冷冻稀释液和Ⅱ号冷冻稀释液对猪精液进行冷冻保存,24 h后检测2种冷冻稀释液细管冻精的活力。结果显示,Ⅰ号冷冻稀释液冷冻解冻后的精子活力显著高于Ⅱ号冷冻稀释液(P0.05),同一种稀释液距液氮面5 cm进行熏蒸冷冻的效果较距液氮面4 cm冷冻效果好,但差异不显著(P0.05)。研究表明,利用Ⅰ号冷冻稀释液在距液氮面5 cm处进行液氮熏蒸冷冻可获得较好的公猪冷冻精液。     

提高牛细管冻精精子活力的试验研究

本文从细管冻精的3个关键技术环节研究了稀释液的种类对精子活力与存活的影响,确定了细管冻精精子在液氮冷冻度过冰晶期对其损伤最小的最佳熏蒸高度（最佳冷冻温度）和最佳熏蒸时间,并且对成品冷冻的细管冻精不同解冻温度及时间进行研究。由柠檬酸钠和果糖组成的稀释液精子存活时间长,Tris稀释液冷冻后精子活力高于其他配方;牛细管冻精最佳熏蒸距离为2cm,时间影响不显著,7~9min均可;用50℃温水15s解冻精子的活力最高。     

不同剂型及稀释精液平衡时间对藏獒冻精品质的影响研究

为了探讨每剂含不同前进运动精子数(≥1 000万个和≥2 000万个)和稀释精液不同平衡时间(1 h、2 h、3.5 h)对藏獒冻精品质的影响,试验比较了0.25 m L细管剂型藏獒冻精解冻后精子活力、精子顶体完整率、精子畸形率、精子37℃存活时间。结果表明:每剂含前进精子数≥2 000万个与≥1 000万个相比,藏獒冻精解冻精子活力、精子顶体完整率、精子畸形率差异不显著(P0.05);而每剂含前进运动精子≥2 000万个组的藏獒冻精解冻后37℃存活时间优于每剂含前进运动精子数≥1 000万个组,且差异显著(P0.05)。藏獒稀释精液平衡2 h组的冻精活力显著高于平衡1 h组和3.5 h组(P0.05),而平衡1 h组和3.5 h组间差异不显著(P0.05)。冻精顶体完整率以平衡2 h组最高,为(41.00±1.47)%,与平衡3.5 h组间存在显著差异(P0.05)。平衡2 h组的冻精畸形率低于平衡1 h组和3.5 h组。说明藏獒0.25 m L细管剂型以每剂含前进运动精子数≥2 000万个,稀释精液平衡时间以2 h为宜,可获得较好的冷冻效果。     

拉布拉多犬冷冻精液宫腔内输精试验研究

比较2种不同的冷冻稀释液:Tris-果糖-柠檬酸钠(Ⅰ号)和葡萄糖-乙酸钠-柠檬酸钠(Ⅱ号)对拉布拉多犬冷冻精液宫腔内输精效果,并分析同一稀释液配方不同解冻温度效果,在此基础上,选取犬专用宫腔输精器开展人工授精。结果显示:Ⅰ号稀释液解冻后,精子活力为0.419±0.15,顶体完整率为(58.26±8.1)%,畸形率为(10.3±0.3)%;Ⅱ号稀释液解冻后,精子活力为0.368±0.04,顶体完整率为(55.4±6.3)%,畸形率为(11.1±0.2)%,前者的冷冻效果明显优于后者。同一稀释液配方解冻温度65℃(4~5 s)解冻后的精液品质明显优于40℃(10~12 s);冻精情期受胎率达90%,比自然交配受胎率高10.0%,差异显著(P0.05)。本试验已突破多年来一直困扰犬冷冻精液人工授精技术发展运用的瓶颈,开发出高效冷冻稀释保护液以及高受胎率的宫腔内输精方法。     

提高奶牛细管冻精精子活力的试验研究

为了提高奶牛细管冻精精子的活力,试验探索了稀释液种类、最佳熏蒸距离、最佳冷冻温度、最佳熏蒸时间、不同解冻温度及时间对精子活力的影响。结果表明:精子在由柠檬酸钠和果糖组成的稀释液中存活时间长,在三羟甲基氨基甲烷稀释液中冷冻后精子活力高于其他稀释液;牛细管冻精最佳熏蒸距离为2.5 cm,时间影响不显著(5～10 min均可);用50℃温水解冻15 s的精子活力比其他解冻温度和时间时的精子活力要好。     

蓝狐细管冻精的研究

实验对蓝狐细管冻精的冷冻工艺进行了筛选。结果表明:4种以Tris-柠檬酸-甘油稀释液作为细管冻精稀释液效果良好,其中以葡萄糖代替果糖的A1配方及稀释方法效果最佳。常温和冷冻保存中结果发现,虽然乙二醇毒性较大,但含有6%乙二醇的防冻剂的精液解冻后活率最高。冻精平衡以0￣5℃和2 h为宜,初冻温度以-110￣-130℃的冷冻速度最好。解冻时,以38℃水浴中存活指数最高。冷冻过程使精子活率、畸形率、顶体完整率等指标受到明显影响。以A1为冷冻液的冻精人工授精受孕率为73.81%,每胎产仔数为5.81,与鲜精人工授精的结果差异显著(P<0.05)。     

稀释方法对绒山羊冷冻精液品质的影响

选取7只精液品质优良的雁门绒山羊种公羊,通过测定其冷冻精液解冻后的精子活率（0、4 h）、精子存活指数、顶体完整率及精清中透明质酸酶（HYD）、谷草转氨酶（GOT）、乳酸脱氢酶（LDH）酶活力,研究一步稀释法和二步稀释法对冷冻精液品质的影响。结果表明,二步稀释法解冻后的精子存活指数显著（P＜0.05）高于一步稀释法,其解冻后精清中透明质酸酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶的活力均显著（P＜0.05）低于一步稀释法。表明采用二步稀释法冷冻的绒山羊精液品质好于一步稀释法。     

多浪羊细管冷冻精液制作技术的研究

为保存和利用优秀地方品种多浪羊的遗传资源,试验在多浪羊原产地进行了细管冻精制作试验.用采集的多浪羊种公羊精液,比较5种冻精保存液配方的细管冻精冷冻效果,测定解冻后精子活力.结果表明:4.83%乳糖保存液解冻后精液的活率平均为36% ,优于其它4种保存液,且差异极显著(P<0.01),解冻后精子的畸形率也均低于其它4种稀释液,差异极显著(P<0.01).表明4.83%的乳糖保存液配方是理想的绵羊细管冻精稀释液.     

新型细管在冻精生产中的应用效果

饲养种公牛的目的是生产数量多、质量好的优质冻精。为此,除了加强对种公牛的选育和饲养管理,提高原精液活力、密度和射精量以及使用先进的稀释液配方、精液冷冻方法和改进冻精剂型外,使用同种剂型结构改进的新型细管,在冻精生产中也取得了很好的效果。1冻精剂型的发展自从开展牛的冷冻精液技术以来,其冻精剂型经过不断改进。从2 mL安瓶冻精、0.1 mL颗粒冻精、0.5mL中型细管冻精,发展到0.25 mL普通型微型细管冻精和0.25 mL新型微型细管冻精。每次不同剂型的改进或同种剂型结构的改进都不同程度地提高冻精的质量和产量。2细管结构和使用新…     

不同添加剂及剂型对猪冷冻精液品质的影响

试验旨在研究咖啡因、维生素E、超氧化物歧化酶(SOD)及剂型对猪冷冻精液品质的影响。采用添加了不同浓度咖啡因、维生素E、超氧化物歧化酶(SOD)的冷冻稀释液和3种剂型的冻精管进行精液冷冻。3种添加剂对冻精解冻后的精液品质都有一定的促进作用,试验中其添加最适浓度分别为:咖啡因为0.2 mg/mL,维生素E为0.4 mg/mL,SOD为300 IU/mL;0.25mL剂型的冻精解冻后精子品质最好。咖啡因、抗氧化剂及冻精管剂型对冷冻精液的效果有一定的影响。     

几种处理方法对鸡精液冷冻保存效果的影响

本文从冷冻保存主要环节的几种处理方法对鸡精液冷冻保存的效果进行了探讨，结果显示：采用液氮熏蒸法的冻后活力和复苏率均显著高于直接投入液氮法；采用细管冷冻的冻后活力和复苏率均显著高于颗粒冷冻；采用两步稀释法的冻后活力和复苏率均显著高于一步稀释；精液平衡O．5h、lh、2h精子冻后活力和复苏率均差异不显著；熏蒸时间为lOmin的冻后活力和复苏率均显著高于5min，且略高于15rain但差异不显著；37-40℃解冻后精子活力和复苏率显著高于20。25℃。但与55-60℃差异不显著。     

不同稀释液对波尔山羊冷冻精液保存效果的研究

通过比较三种冷冻精液保存稀释液对冻后精子活力的影响,采用设定的工艺流程制作细管冻精.结果表明,其精子的解冻活力稀释液Ⅲ保存效果极显著优于稀释液Ⅰ的保存效果（P＜0.01）,稀释液Ⅱ保存效果极显著优于稀释液Ⅰ的保存效果（P＜0.01）,稀释液Ⅲ与稀释液Ⅱ的保存效果差异不显著（P〉0.05）.总存活时间稀释液Ⅱ保存时间明显长于稀释液Ⅲ的保存时间.     

稀释液中添加维生素E对宠物犬精液冷冻效果的影响

在宠物犬冷冻精液稀释液中添加质量浓度为0,200,400,600μg/mL的维生素E,以观察对精液冷冻效果的影响。结果表明:冷冻精液稀释液中添加维生素E 400μg/mL时,解冻后精子活力显著高于对照组(P0.05);畸形率极显著低于对照组(P0.01),各浓度维生素E组精子解冻后体外存活时间均极显著高于对照组(P0.01),解冻后精子顶体完整率和冻后精子运动速率(VAP、VSL、VCLL)较对照组都有所提高,但差异不显著(P0.05)。综合各项指标后表明以质量浓度为400μg/mL维生素E组的效果最好。     

组织培养液M199在庆阳驴细管精液中的应用

为了研究M199对庆阳驴细管鲜精和细管冻精活力及保存时间的效果影响。在鲜精稀释液中,添加不同浓度的M199,在低温保存下,观察不同时间段精子活力;在冻精稀释液中,添加1%的M199,采用液氮熏蒸制作冻精,解冻后观察冷冻效果。结果显示,在低温保存中,稀释液中添加1%的M199,48h后精子活力仍然在0.35以上,与其他试验组和对照组差异极显著(P0.01)。在冻精稀释液中添加1%的M199,试验组与对照组冻后精子活率分别为30.83%和31.33%,两者之间差异不显著(P0.05),但试验组精子有效存活时间显著高于对照组。通过在庆阳驴精液稀释液中添加M199,均能很好的延长精子保存时间。     

稀释方法、孵育温度和时间对冷冻—解冻后猪精液质量的影响

试验以精子冻后活率、质膜完整率和顶体完整率三项指标评价了一步稀释法(Ⅰ组)和两步稀释法(Ⅱ组),以及不同保存温度和时间对解冻、稀释后的猪精液质量的影响。结果表明,采用两步稀释法对解冻后的猪细管冻精进行稀释,精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别达到82.6%、89.4%和90.3%,极显著高于一步稀释法(P0.01)。用两步法稀释后的精液36℃保存5 min、10 min和15 min时精子活率分别为81.2%、80.8%和80.9%(P0.05),40 min时为50.1%;精子质膜完整率和顶体完整率未见显著下降(P0.05);17℃保存15 h时精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别为81.1%、88.9%和91.4%(P0.05);60 h时分别为50.4%、61.4%和61.6%,均极显著低于初始的各项指标(P0.01)。