应用酶联免疫吸附法(ELISA)诊断家蚕微粒子病的研究

感染微粒子病的家蚕中肠壁匀浆作抗原,注射于家兔制备抗血清。用戊二醛简易法将辣根过氧化物酶与抗体蛋白交联,制成酶联免疫抗体。用ELISA直接法或双抗体(夹心)法均可将未发现孢子的患病中肠检出阳性反应。用分光光度计对聚苯乙烯塑料多孔板吸附免疫反应的读数(OD值)表示更则为准确。 酶联抗体—抗原点滴法试验(AST),将抗原滴于硝酸纤维薄膜,再加入酶标抗体,可获得肉眼判别阳性的斑点。     

斑点酶标快速联检牛羊四种寄生虫病技术的研究

血矛线虫、血吸虫、锥虫和肝片吸虫能同时混合牛羊,使病畜消瘦,甚至死亡,造成畜牧业巨大的经济损失。为了加快消灭或控制牛羊上述四种寄生虫病,作者研究解决了其快速联检技术。将血矛线虫、血吸虫、锥虫和肝片吸虫抗原各自定点在同一条硝酸纤维素膜上,研制成四种寄生虫联检膜.采用兔抗牛羊 IgG连接酶联 SPA,解决了酶联 SPA 与牛羊 IgG 不亲合性的技术关键.建立了斑点酶标快速联检牛羊血矛线     

基于核酸适配体检测赭曲霉毒素A方法与酶联免疫法的对比研究

[目的]比较基于核酸适配体检测赭曲霉毒素A(OTA)方法与酶联免疫法。[方法]建立核酸适配体检测OTA标准曲线,进行样品加标回收率试验,并与酶联免疫法进行比较。[结果]核酸适配体法检测OTA在0.05～10.00 ng/mL具有较好的线性,饲料样品中添加OTA的回收率为92.0%～93.5%,与酶联免疫法相比,2种方法之间具有较好的一致性。[结论]该研究建立的基于核酸适配体检测OTA方法灵敏度高、准确度好,为研究饲料中OTA的快速检测方法奠定基础。     

在线酶底物法检测地表水中粪大肠菌群的适用性分析

结合酶底物法检测粪大肠菌群的相关研究,运用酶底物在线监测系统对上海市某河段进行检测,用标准方法-多管发酵法进行同步检测,讨论在线酶底物法在地表水中检测粪大肠菌群的适用性。结果表明,2种方法的测定数据显著相关,没有统计学差异（P＞0.05）。相对于多管发酵法,在线酶底物法特异性强,检测时间短,自动进样,自动检测,二次污染少,可以实现地表水、饮用水等重要水源地的实时监测需求,对地表水的污染程度监控和卫生学质量评价具有重要作用。     

酶联免疫吸附法检测大米中黄曲酶毒素B1初报

黄曲霉毒素是常见霉菌黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株的代谢产物。由于其具有极强的毒性、致癌性以及在自然界中存在的普遍性，已成为各国食品安全严格限量的指标。我国大米安全质量国家标准对黄曲霉毒素的含量限制为小于10ppb。目前检测黄曲霉毒素的方法有薄层层析法、液相色谱法、酶联免疫吸附法。其中薄层层析法的样品处理繁琐，且分析时间长；液相色谱法则仪器昂贵，技术要求高；而酶联免疫吸附法具有灵敏度高、分析时间短的优点，能提高检测效率，适应社会需求。为此，本站开展了应用酶联免疫吸附法检测大米中黄曲酶毒素B1的方法测试。     

日本血吸虫病快速粪便毛蚴孵化法检测研究

本试验通过快速法、尼龙筛法和直孵法检测粪便毛蚴孵出率,结果表明快速法毛蚴相对孵出率为100%,而传统的尼龙筛法为81.2%～84.6%,直孵法为4.0%～36.9%.经生物学统计,快速法和尼龙筛法毛蚴孵出率极显著地高于直孵法(P<0.01),而快速法与尼龙筛法之间的毛蚴孵出率差异不显著(P>0.05).快速法比较简便实用.     

牛日本血吸虫病5种血清学诊断技术比较

为找寻特异性强、敏感性高,且操作简便、费用低廉,并能大规模应用于临床的日本血吸虫病血清学诊断方法,以疫区黄牛为研究对象,应用环卵沉淀试验(COPT)、血清法间接血凝试验(sIHA)和血纸法间接血凝试验(bpIHA)、胶乳凝集试验(PAPS)、三联斑点酶联免疫吸附试验(三联Dot-ELISA)5种血清学诊断方法与粪检方法检测牛日本血吸虫病,并对5种血清学检测结果进行评价.检测分析结果表明,用血清学方法COPT,sIHA,三联Dot-ELISA对疫区黄牛进行血吸虫病检测,与三粪九检结果符合率高,具有灵敏度高、特异性好、简捷方便、费用低等特点,特别适用于疫区家畜血吸虫病的诊断、普查,是比较理想的现场检测方法,值得推广.血清学方法bpIHA和PAPS检测血吸虫病,尽管方法简便、费用低廉,但其灵敏度、特异性与三粪九检结果符合率低于血清学方法COPT,sIHA,三联Dot-ELISA,易造成漏检,假阳性,故在普查时,不建议采用.     

免疫酶组化法对病料中多杀性巴氏杆菌定型的研究

本文采用自制的 B、A、D、E 定型酶抗体及由其组成的全价酶标抗体,以免疫酶直接法染色检查了20株多杀性巴氏杆菌及10株其它对照细菌感染致死小鼠脏器标本触片.并与脏器标本触片的免疫酶间接法染色,常规染色法及细菌分离培养鉴定等方法作了比较.建立了多杀性巴氏杆菌诊断和定型的一种特异快速的方法.     

免疫酶组化法对病料中多杀性巴氏杆菌定型的研究

 本文采用自制的B、A、D、E定型酶抗体及由其组成的全价酶标抗体,以免疫酶直接法染色检查了20株多杀性巴氏杆菌及10株其它对照细菌感染致死小鼠脏器标本触片.并与脏器标本触片的免疫酶间接法染色,常规染色法及细菌分离培养鉴定等方法作了比较.建立了多杀性巴氏杆菌诊断和定型的一种特异快速的方法.     

发情周期圈养雌性林麝粪样孕酮的变化

本试验运用非损伤的取样方法,结合行为观察,通过酶联免疫法对雌性成年圈养林麝在分娩以后发情期粪便中的孕酮进行了测定,在此期间每2天采集粪样1次。结果显示,用酶联免疫法对林麝粪样中孕酮含量的分析来区别其发情周期中的黄体期和黄体间期是可行的。行为上的发情也是与其粪样中孕酮较低的含量相一致的。通过对5只林麝发情周期粪样孕酮含量的分析结果得出,林麝为季节性多发情动物,平均发情周期（n=10）是21.94d±1.2d。     

2种制备三聚氰胺酶标抗原方法的比较

[目的]对直接和间接法制备酶标记三聚氰胺抗原进行比较。[方法]2种方法均用辣根过氧化物酶和过碘酸钠法,但直接法是酶与三聚氰胺偶联,而间接法是用酶标记三聚氰胺与载体蛋白OVA的结合物。用上述方法分别制备了2种酶标抗原后,从酶活性、抗原性和效价方面对这2种酶标抗原做质量对比试验。[结果]间接法制备的HRP-OVA-MEL有抗原性,且效价达到1∶2 560以上,而直接法制备的HRP-MEL却没有抗原性,且效价较低。[结论]间接法制备的三聚氰胺酶标抗原的活性比直接法好。     

以直接斑点免疫结合测定法检测灰飞虱体内的水稻条纹病毒

利用过碘酸钠法用辣根过氧化物酶标记了水稻条纹病毒(RSV)的3株单克隆抗体,3株酶标抗体(HRP-3B9、HRP-2H2、HRP-2E5)的效价分别达到1:25600、1:1600、1:3200,直接ELISA方阵试验确定HRP-3B9的最佳工作浓度分别为1:5000.用HRP-3B9在硝酸纤维素膜上采用直接和间接斑点免疫结合试验(DIBA)对灰飞虱体内RSV进行了检测.结果表明,DIBA法可有效地用于检测灰飞虱的带毒率,直接DIBA法比间接DIBA法灵敏度更高.故采用直接DIBA法对采自江苏10个县、市的灰飞虱带毒率进行了检测.     

辣椒病毒的酶联免疫吸附法检测

辣椒病毒的酶联免疫吸附法检测程秉铨，周俊，孙晓陆，肖英，彭湘儒，刘文朴（新疆农科院中心实验室，乌鲁木齐，８３００００）（乌鲁木齐市蔬菜研究所）酶联免疫吸附试验技术（ＥＬＩＳＡ）是７０年代发展起来的用于检测抗原或抗体的新方法。１９７１年由瑞典的Ｅｎｇｖ...     

山羊蠕形螨病的早期诊断及防治

山羊蠕形螨病是贵州山羊常见的外寄生虫病,因山羊蠕形螨虫寄生于皮下的毛囊和皮脂腺内,造成山羊生长缓慢、皮张质量严重下降甚至失去使用价值.山羊蠕形螨病的早期诊断较为困难,一般药物治疗效果不佳,给养羊业造成较大经济损失.对432只山羊采用斑点酶联免疫吸附试验法进行早期免疫学诊断,对诊断阳性病例(53只)使用皮复康缓释注射剂+伊维菌素擦剂联合用药治疗,用药结束后150 d进行免疫学检查,全部表现为阴性.     

不同方法测定牛奶中环丙沙星的残留

采用微生物法、酶联免疫法、高效液相色谱法同时测定鲜奶中环丙沙星的残留,结果表明:微生物法适合牛奶收储时抗菌药物残留的初筛;酶联免疫法能够较精确地测定奶中环丙沙星的残留,但其费用昂贵,高效液相法适合质监部门和大型企业应用。     

酶底物法与多管发酵法测定水中粪大肠菌群的对比分析

通过测定各类水质,对酶底物法与多管发酵法用于水中粪大肠菌群检测进行了方法验证与分析,结果表明院两者在结果一致性方面无统计学意义上的显著性差异。在置信度95%的情况下差异可以被接受,且满足环境监测要求。酶底物法可以作为评价水质微生物污染的标准方法。     

应用斑点ELISA技术检测副溶血弧菌

研究了应用斑点酶联免疫吸附试验(Dot-Enzym e L inked Immunosorbent Assay,Dot-ELISA)技术检测副溶血弧菌Vibrio parahaem olyticus的方法。根据棋盘试验,确定副溶血弧菌免疫血清最佳工作浓度为1∶200,酶标抗体最佳工作浓度为1∶100,以出现明显清晰斑点者判定为阳性。用该方法检测时,副溶血弧菌呈阳性,哈维氏弧菌V.harveyi、嗜水气单胞菌Aerom onas hydrophila、河流弧菌Vf.luvialis biotype、溶藻弧菌V.alginolyticus、大肠杆菌Escherichia coli均呈阴性。斑点ELISA方法不仅具有快速、经济的特点,而且可用肉眼直接判定结果,适合在基层单位应用推广。     

63株传染性法氏囊病病毒分离株单抗反应谱分析

利用 1 2株不同来源的抗传染性法氏囊病病毒 (IBDV)单克隆抗体 ,采用斑点酶联免疫吸附试验方法 ,对 1 992～1 999年从全国不同地区收集的 63株 IBDV毒株进行单抗反应性检测 ,建立各分离毒的单抗反应谱 ,以分析各毒株的抗原性。根据各分离株的单抗反应谱 ,可将 63个分离毒株分成 1 0组     

三抗体间接法Dot—ELISA检测牛副结核病IgG_1抗体的研究

本试验建立了检测副结核病牛血清中特异性抗体的一种新的免疫学诊断方法——三抗体间接法斑点酶联免疫吸附试验(Dot一ELISA)。并与粪便培养法,常规 ELISA,补体结合反应(CFT)及二抗体间接法 Dot一ELISA 进行了比较,试验结果表明,三抗体间接法Dot——ELISA 比常规 ELISA、CFT 和二抗体间接法 Dot——ELISA 显著敏感,而且快速、简易、经济,适用于大规模的现场检疫。     

应用斑点酶联免疫吸附试验检测鸡产蛋下降综合症(EDS-76)

检测鸡产蛋下降综合症的诊断方法除了原有的血凝抑制试验和竞争性酶联免疫吸附试验,在此基础上又建立了斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)来检测EDS-76。该法是以硝酸纤维膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板,保留了ELISA的优点,而且还具有节省材料,操作更简便,不需特殊仪器,结果清晰的特点。