胶体金免疫层析技术在动物疫病诊断上的应用

胶体金免疫层析技术是在胶体金标记技术、免疫检测技术和层析分析技术基础上发展起来的一种新型免疫学诊断技术。因其具有简便、快速、无污染、不需特殊仪器、特异性强、敏感性高、结果判断直观等优点,成为当前广泛采用的动物疫病免疫学诊断技术。胶体金免疫层析技术在动物病毒病、细菌病、寄生虫病及水产动物疫病诊断方面都有非常广泛的应用,在未来的动物疫病诊断中将发挥越来越重要的作用。论文就胶体金免疫层析技术在动物疫病诊断上的应用进行综述。     

免疫胶体金层析技术在兽医临床诊断中的应用

随着动物医学不断发展创新,免疫胶体金层析诊断技术在不断发展,有效提高了临床应用上检出率与诊断的准确性。本文通过介绍免疫胶体金层析技术的原理、构造、分类应用及诊断来说明该技术在兽医临床诊断中的应用价值。     

胶体金免疫层析技术在疾病诊断中的应用

胶体金免疫层析技术是一种应用抗原抗体特异性反应建立起来的新型免疫检测技术,因其具有方便、快捷、廉价、易保存等优点日益受到人们的重视,并在人类、动物和植物的疫病检测中广泛加以应用。本文简要介绍胶体金免疫层析技术的基本原理及其在抗原、抗体及核酸检测方面的应用,并对其存在的问题及发展前景进行分析,为该技术的深入研究与进一步应用奠定基础。     

胶体金免疫层析技术在动物疫病诊断中的应用

免疫胶体金技术是人类医学中常用的标记技术。它具有独特的优势,可与葡萄球菌蛋白、免疫球蛋白和毒素相互作用,与糖蛋白、酶、抗生素、激素等的相互作用,非共价结合。近年来,免疫胶体已广泛用于人体医学领域,胶体金技术已被引入并广泛应用于生物医学领域。     

胶体金免疫层析技术在猪病毒病诊断中的应用与研究进展

胶体金技术是一种常见的标记技术,胶体金免疫层析试纸条因具有简便、快速、廉价、易操作、安全、稳定、不需特殊仪器、肉眼即可判断等优点,在动物疫病检测,特别是基层兽医人员以及大批量检测和大面积普查等方面得到了广泛应用,显示出了巨大的发展潜力和广阔的应用前景.本文就胶体金试纸条在猪病快速诊断上的应用现状及发展前景作一简要综述,...     

胶体金免疫层析技术研究进展

胶体金免疫层析检测技术是在荧光素、酶联免疫吸附试验、放射性同位素标记技术之后,于20世纪80年代发展起来的一种快速的免疫学检测技术。由于其具有稳定性好、安全、简便,且不需任何仪器设备等优点,被广泛应用于医学检测、农产品农药兽药残留检测、进出口产品病原微生物检测等领域。主要就其发展历程、技术原理和应用进行了综述,以期为相关研究提供参考。     

胶体金免疫层析技术在家禽生产中的应用

新城疫、鸡传染性支气管炎等家禽病毒类疫病具有传播速度快、感染力强等特点,给家禽养殖带来巨大挑战.因此,早期快速诊断并妥善处理染疫家禽是防治病毒类禽病的重中之重.胶体金免疫层析技术是一种以胶体金作为示踪标记物的快速检测技术,其凭借简便快速的优点,在基层和现场的快速检测中得到了广泛的应用.目前,已研制出了多种对家禽传染病抗...     

应用金免疫层析技术检测猪瘟抗体的研究

用金标免疫层析技术测试30份标准阳性血清和18份标准阴性血清，结果阳性，阴性符合率100％。用该方法与ELISA试剂、dot-ELISA试剂及正向间接血凝进行比对试验检测血清样品205份，结果阳性率ELISA为86．8％，金标层析法为85.4％，dot-ELISAO 81．5％，正向间接血凝为58.5％，结果显示该方法特异性强，敏感性高，操作简单，使用方便。既可用血清，也可以用全血测猪瘟抗体，可广泛应用于猪场和个体养猪户现场检测。     

胶体金免疫层析技术在兽医检测中的应用及其展望

胶体金免疫层析技术是固相标记免疫测定技术,以其简便、快速,可通过肉眼观察到显色结果,已成为当今主要的免疫分析方法。1在病毒检测中的应用据报道,有人建立的检测O型口蹄疫病毒(FMDV)抗原的胶体金免疫层析方法,检测53份试验     

纳米胶体金免疫标记技术在牛病检测中的研究和应用

作者综述了以胶体金免疫渗滤法和胶体金免疫层析法为代表的纳米胶体金免疫标记技术近年来在牛病检测方面的研究和应用进展,并分析和预测其应用前景,为该技术在牛病临床检测领域的进一步研究与应用提供参考。     

Study on Colloidal Gold Immunochromatographic Assay for Rapid Detection of Estradiol in Milk

In order to develop a sensitive and specific method for the detection of estradiol residues (E₂) in milk, a colloidal gold immunochromatographic method was established. Colloidal gold particles were prepared by trisodium citrate reduction method and labeled with rabbit polyclonal antibodies (PcAb) by physical adsorption method. After optimization of reaction conditions such as the amount of coating antigen and labeled antibody to assemble test strip, the sensitivity, specificity, repeatability and accelerated preservation of the test strip were determined. The estrogen analogue cross reaction and milk matrix interference reaction were also measured. The results showed that the optimized concentration of E₂-OVA antigen was 2 mg/mL and the optimized antibody concentration was 20 μg/mL, visual detection limits of E₂ was 10 μg/L in PBS within 10 min. The cross reaction rate of this method with estriol was 40%, there were no negligible cross-reactivities with other estrogen compounds including estradiol valerate, estradiol benzoate, estrone, diethylstilbestrol, quinestrol, ethinyloestradiol and nonylphenol. Milk samples only needed two times diluted before analysis, and the results could judge by naked eye after 10 min with cut-off of 20 μg/L. The results demonstrated that the developed method was suitable for rapid on-site screening of E₂ residues in milk samples.     

牛奶中雌二醇胶体金试纸条快速检测技术研究

为了建立快速、敏感、特异的雌二醇（E₂）残留免疫检测方法,本研究应用胶体金免疫层析技术,研究制备一种快速检测牛奶中E₂的方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,采用物理吸附法将E₂兔多克隆抗体偶联至胶体金,经过优化抗原包被量和多克隆抗体标记量等反应条件组装成检测试纸条,测定检测试纸的灵敏度、特异性、重复性和加速保存等参数,并对E₂类似物交叉反应和牛奶基质干扰反应进行了测定。结果表明,试纸条最优包被抗原浓度为2 mg/mL,抗体浓度为20 μg/mL。采用消线法判定结果,检测时间10 min,PBS缓冲液中E₂检测限为10 μg/L,该方法与雌三醇的交叉反应率为40%,与戊酸雌二醇、苯甲酸雌二醇、雌酮、己烯雌酚、炔雌醚、乙炔雌二醇、壬基酚等类似物均无可见交叉反应,牛奶样品经2倍稀释消除基质干扰直接用于检测,该方法在牛奶样品中的判定值为20 μg/L。本研究建立的E₂胶体金试纸条使用简单方便,适合现场快速检测牛奶中E₂残留。     

免疫层析快速诊断试纸条的制备及在动物疫病诊断上的应用

胶体金标记免疫层析技术作为一种新型的免疫学快速诊断和检测技术,具有微量、特异、简便等特点,非常适合基层使用。作者综述了免疫层析快速诊断试纸条的基本原理、制备方法及目前在动物疫病诊断上的应用情况。     

猪伪狂犬病病毒gE抗体胶体金免疫层析检测方法的建立及应用

以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)-猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为诊断抗原和胶体金标记物,以羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,制作检测猪伪狂犬病毒gE抗体的双抗原胶体金试纸条。利用方阵滴定试验筛选出金标抗原最佳工作浓度为17.6μg,检测线诊断抗原最佳标记量为1.76μg,血清最佳稀释度为1∶10,作用时间15 min,与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪布鲁菌(Brucella)阳性血清和PRVgE缺失疫苗接种的猪免疫血清检测线均不出现红色条带,与PRV标准阳性血清反应检测线出现红色条带。试纸条操作简单,肉眼于15 min内可判定结果;试纸条在室温保存6个月,其特异性和敏感性没有明显变化;与美国IDEXX和法国LSI gE-ELISA抗体检测诊断试剂盒检测结果比较,1 164份猪血清的符合率均为90.55%。制备的胶体金试纸条具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。     

胶体金免疫层析法测定动物组织中氯霉素残留

应用胶体金免疫层析法对动物组织中的氯霉素残留进行检测,研究该方法的灵敏度、假阳性率、假阴性率及特异性。结果表明,用胶体金免疫层析法测定猪肉、鸡肉、鱼、虾中的氯霉素,检测限均为0.3g/kg,假阳性率和假阴性率皆为0%;方法的特异性较好,对其他抗生素无交叉反应;检测加标样本的结果与液相色谱-串联质谱法基本一致。可见,该方法简便、快速、准确、稳定,可作为动物组织中氯霉素残留现场快速检测的一种有效手段。     

柱状黄杆菌胶体金免疫层析快速检测方法的建立

为建立一种通过胶体金免疫层析技术快速检测柱状黄杆菌的方法,试验采用柠檬酸三钠还原法制备粒径为20 nm的胶体金颗粒,将其标记纯化的抗柱状黄杆菌单克隆抗体(McAb)制备出金标抗体结合垫。纯化的兔抗柱状黄杆菌多克隆抗体(PcAb)和羊抗鼠IgG分别包被在硝酸纤维素膜的检测线(T)与质控线(C)上,制备出胶体金免疫层析试纸条,并对试纸条的灵敏度、特异性及稳定性进行测定。结果显示,该试纸条检测灵敏度为1×10³ CFU,检测时间为3.5 min,制备的试纸条与迟钝爱德华氏菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌均无交叉反应,且稳定性好。本研究首次成功建立了柱状黄杆菌胶体金快速检测方法,所制备的试纸条具有灵敏、特异、稳定、快速等优点,可用于柱状黄杆菌的检测。     

氟喹诺酮类药物胶体金试纸的研制

用针对抗氟喹诺酮类(fluoroquinolones,FQs)药物的广谱性单克隆抗体建立了可以同时检测11种FQs药物的胶体金免疫层析方法。该试纸条用20 nm的胶体金标记单抗,将诺氟沙星－卵清蛋白喷涂在检测线上,羊抗小鼠二抗喷涂在质控线上。该胶体金试纸对猪肉和虾中环丙沙星、恩诺沙星和氧氟沙星的检测限都是30 ng/g,对诺氟沙星、培氟沙星、依诺沙星、麻保沙星、洛美沙星、达氟沙星、沙拉沙星和二氟沙星8种药物在以上两种样品中添加浓度为100 ng/g时都可被检出,整个检测过程包括样品前处理的时间可在20 min内完成。试验结果表明符合对这11种FQs药物在鸡肉和虾中残留现场大量筛查的要求。     

猫瘟热病毒胶体金快速检测试纸的研究

利用双抗体夹心和胶体金免疫层析技术的原理,在玻璃纤维膜、硝酸纤维膜的检测线(T)和对照线(C)上分别喷上胶体金与猫瘟热病毒(FPV)单克隆抗体(3C4)的偶联物、FPV多克隆抗体和羊抗鼠IgG单克隆抗体,制成检测FPV抗原的猫瘟热病毒胶体金快速检测试纸,对临床26份虎粪便样本进行检测,并与PCR检测法及韩国(ASAN ...     

未知病毒检测方法在动物病毒病诊断中的应用

近年来,新发动物疫病多以病毒病为主,往往具有不可预测性且对畜牧业生产造成重大损失,因此如何快速诊断其主要病原成为防控新发疫病的关键因素。对新发疫情的传统诊断,往往需要依靠经验,逐步排除已知病原后才能确定疫情的主要因素,随着分子生物学及测序技术的发展,临床上出现了很多直接从病料中检测未知病毒的方法,这些方法逐渐成为确诊未知疫情的主要手段。作者主要阐述近年来应用于发现未知病毒的检测方法。