西藏作物秸秆营养成分及体外发酵特性比较研究

本试验旨在比较西藏作物秸秆营养成分及体外发酵特性。本研究从西藏不同地区采集箭筈豌豆、黑豌豆、草木樨、紫花苜蓿和雪莎5种豆科秸秆和玉米、青稞、油菜、小麦和燕麦等12种禾本科秸秆,分别分析其粗蛋白质(CP)、粗脂肪(EE)、粗灰分(Ash)和纤维组分等营养成分和体外发酵特性。结果表明:5种豆科秸秆中山南紫花苜蓿秸秆CP含量最高,达到24.6%,而取自山南的黑青稞秸秆CP含量达12.10%,为禾本科秸秆中最高;黑豌豆和雪莎秸秆EE含量显著高于其他3种豆科秸秆(P0.05),取自林芝的油菜秸秆EE和Ash含量最高;箭筈豌豆秸秆含有最高的中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)和酸性洗涤木质素(ADL)含量,而黑豌豆秸秆ADF含量最低;取自林芝的冬青科秸秆NDF和ADF含量最高,显著高于其他秸秆(P0.05)。取自日喀则的燕麦秸秆ADL含量最高,显著高于其他秸秆(P0.05)。5种豆科秸秆中箭筈豌豆和黑豌豆秸秆体外瘤胃发酵液中总挥发性脂肪酸(TVFA)含量最高,而取自林芝的青稞秸秆体外瘤胃发酵液中TVFA含量为12种禾本科秸秆最高。紫花苜蓿、黑豌豆和草木樨3种豆科秸秆和取自林芝的燕麦秸秆48 h产气量分别显著高于其他豆科和禾本科秸秆(P 0.05)。因此,取自西藏不同地区的豆科秸秆和禾本科秸秆营养成分和体外发酵特性存在显著差异,但综合比较,豆科秸秆中取自山南的紫花苜蓿秸秆营养价值最佳,而禾本科秸秆中取自林芝的青稞和燕麦秸秆营养价值最佳。     

西藏地区不同牧草体外发酵特性研究

本文旨在利用体外产气法评定西藏地区不同牧草营养价值。选取西藏地区5种常见牧草,通过单因素试验设计,利用体外产气法评定5种牧草体外发酵48 h累积产气量、理论最大产气量(V_f)、初始产气速率(FRD_0)、达到最大产气量一半时所需时间(t_(0.5))、体外干物质消失率(IVDMD)、体外中性洗涤纤维消失率(IVNDFD)、p H、氨态氮(NH_3-N)浓度以及挥发性脂肪酸(VFA)产量。结果表明,体外发酵48 h后,苇状羊茅体外48 h累积产气量、V_f、FRD_0、IVDMD及甲烷(CH_4)、乙酸、丙酸、丁酸和总VFA产量均显著高于其他4种牧草(P0.05),但其体外发酵p H及乙酸/丙酸显著低于其他4种牧草(P0.05);紫花苜蓿体外NH_3-N浓度最高,显著高于其他4种牧草(P0.05)。综上分析,苇状羊茅体外发酵效果最佳,与其他试验牧草相比,更容易被瘤胃微生物降解利用。     

遮阴对三种豆科牧草光合特性和叶绿素荧光参数的影响

为了探讨豆科牧草在遮阴条件下生态适应性及寻求适度的遮阴比例,系统研究了不同程度的遮阴处理(0%,48%,70%,95%)对3种豆科牧草的光合特性和叶绿素荧光参数的影响。结果表明,随着遮阴强度的提高,白三叶的光补偿点和光饱和点减小,紫花苜蓿与草木樨在适度遮阴条件下可维持较低的光补偿点和光饱和点;3种豆科牧草叶片叶绿素a、叶绿素b和叶绿素a+b的含量逐渐降低,且相同遮阴处理下白三叶均高于其他2种豆科牧草,紫花苜蓿在Y3处理条件下表现为叶绿素a/b值最大;3种豆科牧草PSⅡ受到损伤的程度为紫花苜蓿＞草木樨＞白三叶;遮阴会使白三叶与草木樨的ΦPSⅡ和qP略有降低,但在Y3处理条件下,白三叶的ΦPSⅡ和qP会略有增加,而紫花苜蓿随着遮阴强度的提高,其ΦPSⅡ和qP呈先增加后减小的趋势。3种豆科牧草的耐阴强度顺序为:白三叶＞草木樨＞紫花苜蓿,其中,白三叶在70％以上的遮阴强度下仍然可以长势良好,而草木樨在48％的遮阴强度下有利于生长,紫花苜蓿则受遮阴影响较大。     

我国西北地区牧草种子生产现状及存在问题浅析

调查了牧草种子生产现状及存在问题。结果表明：我国西北地区的栽培牧草包括豆科、禾本科、藜科、菊科、苋科、紫草科、十字花科、鸢尾科等９科３６属５３种。其中：豆科牧草１３属２１种；禾本科牧草１６属２５种；其它科牧草７属７种。该区栽培牧草总面积约为１５０万ｈｍ＾２，其中主要豆科牧草占７１％，主要禾本科牧草占１０．５％。主要豆科牧草为紫花苜蓿、沙打旺、草木樨、箭舌豌豆、红豆草、柠条和小冠花。主要禾本科牧草为     

太行山丘陵区气候条件与牧草生长发育关系研究

对在太行山低山丘陵区引种的２９种牧草中能正常生长的１１种牧草的生长发育与气象条件关系分析的基础上，认为豆科牧草的沙打旺、扁豌豆适应性较差，不适于在此地区发展，红豆草也一定程度地表现出较差的适应性。表现最好的为禾本科牧草和豆科牧草的紫花苜蓿、其他苜蓿、黄花草木樨等。     

遮阴对5种豆科牧草形态和生理指标影响的初探

为研究豆科牧草的耐荫机理,在不同遮阴处理条件下对紫花苜蓿(Medicago sativa)、草木樨(Melilotus suaveolens)、白三叶(Trifolium repens)、沙打旺(Astragalus adsurgens)和百脉根(Lotus cornioulatus)的形态和生理指标进行测定。结果表明,随着光强减弱,5种豆科牧草的株高、分蘖数、最长节间长度、根长及叶绿素含量均降低,其中白三叶变幅最小,百脉根次之;在23%透光下,白三叶的可溶性糖含量显著高于其他牧草;百脉根的丙二醛含量明显增加,而白三叶变化较小;沙打旺出现死亡现象。5种豆科牧草的耐荫性为白三叶最强,百脉根其次,紫花苜蓿和草木樨较差,沙打旺最差。     

干燥方法对几种牧草营养价值和体外消化率的影响

研究了不同干燥方法对盛世紫花苜蓿、环峡南苜蓿、特高多花黑麦草营养价值和体外消化率的影响,结果表明:喷化学干燥剂和压扁茎秆结合喷化学干燥剂使两种豆科牧草茎叶干燥速度趋于一致,缩短了干燥时间,减少了营养物质损失,从而提高了干草的质量;喷化学干燥剂在缩短特高多花黑麦草干燥时间上无效,但在提高其体外消化率上效果显著;与自然晒干和阴干相比,压扁茎秆,喷化学干燥剂及两者结合使用有效提高了牧草的体外消化率。     

4种豆科栽培牧草根际土壤细菌群落分布特征研究

为探究高寒地区不同豆科栽培牧草的根际土壤细菌群落分布特征,本试验选取4种豆科栽培牧草扁蓿豆(Melissilus ruthenicus(L.)Peschkova(TrigonellaruthenicaL.))、紫花苜蓿(Medicago sativa L.)、红豆草(Onobry-chis viciifolia)、蚕豆...     

黄花棘豆在腐解过程中的化感作用及其土壤细菌群落结构分析

黄花棘豆属豆科棘豆属多年生草本植物,是我国西部草场广泛分布的主要毒草之一,为了探索黄花棘豆的危害机制,揭示其发生发展规律,本研究通过模拟黄花棘豆在土壤中的腐解过程,检测其对紫花苜蓿和黑麦草两种牧草的化感作用。结果显示当土壤中含有质量分数为5%的黄花棘豆时,黄花棘豆在腐解过程中就会对两种牧草的生长产生显著的化感抑制作用,其中对紫花苜蓿的化感作用更为明显。同时通过细菌16S rDNA测序对黄花棘豆根系土和非根系土中的细菌群落进行了比较,结果显示土壤细菌群落中的部分分类单元,如变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和酸杆菌门(Acidobacteria)的比例在两组中存在显著差异;同时,非根系土的细菌群落多样性高于根系土。以上结果相结合表明黄花棘豆可能通过化感作用改变其生长土壤的微生物环境,在促进自身生长的同时降低不良微生物对其自身的影响,并抑制其他共生植物生长。本研究为更好地寻找黄花棘豆的有效防控提供了一定理论依据。     

山东省北部滨海草场培育改良技术的研究

试验筛选出适于山东省北部滨海草生长的豆科牧草为紫花苜蓿、沙打旺、二年生草木樨、禾本科牧草为苇状羊茅、无荒雀麦、长穗冰草和中间冰草、饲料理作物为苋菜、小黑豆、涝豆苏丹草和御谷。封育应根据草场发退化程度采用全年封育、短期封育和主要牧草危机期封育的方式；补播宜在８月中旬至９月上旬进行，播前纵横切耙两遍，耙深７－１０ｃｍ，补播草木樨、沙打旺；封育；补播均可显著地提高草场产量，增加优质草比例。盐碱地人工草场     

Effects of oxygen tension in the gas atmosphere during in vitro maturation, in vitro fertilization and in vitro culture on the efficiency of in vitro production of mouse embryos

Effects of oxygen (O2) tension in the gas atmosphere during in vitro maturation (IVM), in vitro fertilization (IVF) and in vitro culture (IVC) on the efficiency of in vitro production of mouse embryos were examined. Mouse oocytes recovered from large antral follicles were subjected to IVM in Waymouth medium for 15, 16 and 17 hr under 5 or 20% O2 and then subjected to IVF and IVC under 5 or 20% O2 tension. Lowering the O2 tension in the gas atmosphere for IVM from 20 to 5% improved the cleavage rate after IVF when the oocytes were subjected to IVM for 15 hr; however, no improvement in the cleavage rate was observed when the culture period for IVM was extended to 16 and 17 hr. Lowering the O2 tension to 5% for IVM and IVC improved the development of the cleaved oocytes to the blastocyst stage, regardless of the culture period for IVM. However, the O2 tension for IVF had no remarkable effect on the subsequent embryonic development. These results demonstrate that 5% O2 is superior to 20% O2 for IVM and IVC, and suggest that 20% O2 for IVM may delay oocyte maturation and/or the acquisition of fertilizability and impair the developmental competence of oocytes.     

In vitro fertilization and development of in vitro matured bovine follicular oocytes

Bovine follicular oocytes matured in vitro were fertilized in vitro using epididymal spermatozoa from five different bulls and then cultured to the blastocyst stage in vitro. The fertilization rate, based on one pair of pronuclei and presence of one sperm tail, ranged from 55.2 to 64.3%. Embryo development (cleavage to blastocyst stage) ranged from 21.4 to 31.0% of the cultured ova reaching 8 cells at 3 to 4 d after insemination to 1.3 to 3.7% reaching hatched blastocysts at 9 to 10 d. It is concluded that individual variation among bulls is not a significant factor in fertilization and development rates of bovine follicular oocytes when epididymal spermatozoa are used.     

Ghrelin对水牛体外受精和孤雌激活胚胎体外发育的影响

本研究的目的是探讨Ghrelin对水牛体外受精和孤雌激活胚胎体外发育的影响.体外成熟的水牛卵母细胞经体外受精或离子霉素孤雌激活后.分别在舍0,0.5,5,50和500 μg/L Ghrelin的培养液中进行体外培养,观察各组胚胎的卵裂率和囊胚率.结果显示,在培养液中添加不同浓度的Ghrelin对体外受精和孤雌激活胚胎的卵裂率均无显著影响(P>0.05),但添加500 μg/L的Ghrelin显著提高体外受精胚胎的囊胚发育率(33.5% vs 13.7%,P<0.05),50 μg/L或500 μg/L的Ghrelin均显著提高孤雌激活胚胎的囊胚发育率(32.4%和34.6% vs 14.5%,P<0.05).结果表明,培养液中添加Ghrelin对胚胎的早期卵裂没有影响,但可促进水牛体外受精和孤雌激活胚胎囊胚的形成.     

两种方法对牛体外受精及体外发育的影响

本研究包括２个试验。试验１，采用由多种大分子物质组成的生物试剂Ｐｅｒｃｏｌ做成离心梯度，离心处理精液获得较高活率的精子。将其用于卵母细胞的体外受精，在使用４５μＬ大小的受精滴及２×１０６个／ｍＬ的最终受精精子浓度时，加入２０个或４０个卵母细胞，二者均获得较高的分裂率（％）８９．０±５．０、８８．１±３．８及囊胚率（％）５１．０±７．０、４６．３±１６．７。试验２，为了更接近胚胎在母牛体内发育的实际状态（动态），采用一种新的方法即将摇床振动培养引入牛早期胚胎的体外发育阶段，以期提高胚胎发育质量。结果表明，在早期胚胎基数及环境因素完全一致的前提下，振动培养组的囊胚发育率（％）及囊胚卵化率（％）分别为６１．１±１２．２、８２．６±６．８，而常规的静置培养组为６７．４±６．３、８８．０±７．４，方差计算表明二者无显著差异（Ｐ＞０．０５）。     

体外培养条件对延边黄牛受精卵体外发育的影响

从延边黄牛卵巢中采集未成熟的卵母细胞进行体外成熟培养、体外受精及受精卵体外培养。结果表明 :1将卵子用 2种不同的培养液进行体外成熟培养和受精卵体外培养 ,TCM199组的卵裂率 (5 6 .3% )极显著高于 D- PBS组(33.6 % ) (P<0 .0 1) ;TCM199组的囊胚发育率和孵化率 (15 .1%、13.7% )虽高于 D- PBS组 (10 .5 %、8.7% ) ,但 2个组之间无显著差异 (P>0 .0 5 )。2以 TCM199作为基础培养液 ,分别用含激素培养液和不含激素培养液进行成熟培养和受精卵体外培养 ,添加激素组的卵裂率、囊胚发育率及囊胚孵化率 (81.2 %、17.5 %、15 .3% )高于没有添加激素的对照组 (75 .8%、12 .1%、10 .5 % ) ,但 2个组之间无显著差异 (P>0 .0 5 )。 3体外受精卵与单层颗粒细胞共培养组的卵裂率、囊胚发育率及囊胚孵化率 (78.0 %、11.5 %、9.9% )显著高于非共培养组 (6 8.1%、5 .4 %、3.6 % ) (P<0 .0 5 )。     

Effects of ghrelin on in vitro development of porcine in vitro fertilized and parthenogenetic embryos

The objective of the present study was to investigate the effect of addition of ghrelin to in vitro culture medium on preimplantation development of porcine in vitro fertilized and parthenogenetic embryos. In Experiment 1, we sought to compare the in vitro developmental competence of IVF and parthenogenetic embryos. No significant (P<0.05) differences were detected for cleavage rate or blastocyst rate between the in vitro fertilization (IVF)- and parthenogenetic activation-derived embryos. In Experiment 2, parthenogenetic embryos were cultured in Porcine Zygote Medium-3 containing various concentrations of ghrelin. The blastocyst rate was remarkably (P<0.05) increased when 5 ng/ml (PA-5) and 500 ng/ml (PA-500) of ghrelin was added to in vitro culture medium compared with the other groups. Total cell number per blastocyst was slightly promoted in the ghrelin treatment groups compared with the controls. However, the ratio of inner cell mass (ICM) cell number/total cell number was significantly reduced in the PA-50 group compared with the controls (P<0.05). In Experiment 3, we cultured in vitro fertilized embryos in Porcine Zygote Medium-3 supplemented with ghrelin at different dosages. The rate of blastocyst formation was markedly (P<0.05) elevated when 500 ng/ml ghrelin was added to culture medium (IVF-500) compared with the controls. Increased total cell numbers (P<0.05) were observed when in vitro fertilized embryos were cultured in IVF-50 and IVF-500 compared with the controls. However, the ratio of ICM cell number/total cell number was decreased in the ghrelin treatment groups compared with the controls (P<0.05). Taken together, the results suggest that ghrelin can enhance blastocyst formation of porcine in vitro fertilized and parthenogenetic embryos while exerting a negative effect on the structural integrity of the blastocysts.     

不同浓度EGCG对山羊卵母细胞成熟受精的影响

将从屠宰场采回的山羊卵巢在3 h内带回实验室,从卵泡中抽取卵母细胞,取外观形态正常的卵母细胞分成5组,分别添加0、10、15、20、25 μmol/L浓度的EGCG经27 h体外成熟培养后受精,探索不同浓度EGCG对山羊卵母细胞成熟和受精的影响.结果表明EGCG添加浓度为15 μmol/L时对卵母细胞的成熟和受精都有明显的促进效果.     

非经典细胞焦亡体外模型的构建

旨在深入研究非经典细胞焦亡的激活机制,本研究在体外构建非经典细胞焦亡模型,利用PCR方法扩增人源目的基因Caspase-4、hGSDMD-FL和hGSDMD-p30,使用无缝克隆的方法连接到相应的载体中,构建重组真核表达质粒pCMV-MYC-Caspase-4、p3XFLAG-hGSDMD-FL和pcDNA3.1-hGSDMD-p30-MYC,利用VigoFect试剂转染到HEK293T细胞后,采用Western blot方法验证各蛋白的表达情况;通过质粒共转染的方法构建非经典的细胞焦亡模型,分别检测细胞上清中LDH的释放、GSDMD有无被切割为有活性的N端p30片段和荧光观察PI染色情况来确定非经典细胞焦亡模型是否构建成功。结果显示：pCMV-MYC-Caspase-4、p3XFLAG-hGSDMD-FL重组质粒均成功构建,各蛋白于HEK293T细胞内均成功表达,质粒共转染后LDH分泌显著升高,Caspase-4将GSDMD全长片段切割为有活性N端GSDMD-p30片段,荧光显微镜观察到明显的PI染色,表明非经典细胞焦亡模型体外构建成功。非经典细胞焦亡模型在体外的成功构建,为进一步研究其激活机制奠定了基础。