RP-HPLC测定干姜中6-姜酚的含量

采用RP-HPLC法,使用依利特ODS色谱柱(Hypersil,4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈—0.1%醋酸水溶液(55∶45)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长280 nm,柱温35℃,检测干姜中6-姜酚的含量。结果表明,标准曲线线性相关系数R为0.999 8;连续进样5次,测定的峰面积RSD为0.47%;同一样品3次检测结果的最大相对偏差为4.4%;适合于作为干姜中6-姜酚含量的测定方法。     

DABS-Cl柱前衍生-HPLC测定稻米中γ-氨基丁酸方法优化

建立4-二甲胺基苯基偶氮苯磺酰氯柱前衍生-高效液相色谱测定稻米γ-氨基丁酸（GABA）含量的方法。样品采用80%的乙醇溶液提取后,1.0mL样液依次加入0.20mL碳酸氢钠和0.40mL DABS-Cl在70℃下衍生20min,利用C18色谱柱,乙腈-三水合乙酸钠溶液作为流动相在436nm波长下测定GABA含量。结果显示：GABA在糙米和精米的添加回收率大于87.60%,相对标准偏差小于9.07%;GABA在1.0~100.0mg/L内具有良好的线性关系,相关系数为r=0.9995（n=3）。用本方法测定了14种糙米和精米样品的GABA,其含量为6.38~108.7mg/kg,湖南精米和糙米中的GABA含量最高。     

高效液相色谱法测定果蔬中的甲醛

通过振荡提取法提取果蔬中的甲醛,提取出的甲醛与2,4-二硝基苯肼进行衍生化反应,采用高效液相色谱法定量检测。结果表明,振荡提取法最佳提取条件为:提取温度60℃,提取时间40 min,振荡速度200 r/min;最佳衍生反应条件为:反应温度60℃,反应时间20 min,衍生剂加入量1.0 m L;该方法线性关系良好,线性范围为1.71~114 mg/kg,检出限为0.456 mg/kg,在3个不同浓度的添加水平下,回收率为72.1%~95.2%,相对标准偏差为2.0%~5.1%。该方法操作简便,实用性强,可准确测定果蔬中的甲醛含量。     

黑豆皮中原花青素含量测定及抗氧化活性研究

建立黑豆皮中原花青素的含量测定方法,并且通过ABTS+清除试验来测试抗氧化活性。采用HPLC法测定黑豆皮中原花青素的含量,色谱柱采用Agilent Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.60 mm,5μm),流动相A相为2%冰醋酸水溶液,B相为甲醇,进行梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长280 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果表明,在5～500μg范围内线性关系良好,最低检出限1.0μg/m L,平均加样回收率为101.43%。黑豆皮中的原花青素的平均含量为104.14μg/g。体外抗氧化试验表明,黑豆皮中的原花青素对应的IC50值为13.62μg/m L,远小于维生素C 98.23μg/m L。该方法简便、快速、准确,具有良好的重复性和回收率,黑豆皮中原花青素具有较高的抗氧化活性。     

高效液相色谱法测定辣椒中的辣椒碱类成分

建立了高效液相色谱法同时测定辣椒中辣椒碱和二氢辣椒碱含量的方法。采用Ultimate AQ-C18型色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为水-甲醇(40∶60,V/V),流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长280 nm。辣椒碱和二氢辣椒碱在0.001~0.150 mg/m L质量浓度范围内线性关系良好(R~2=0.999 9);加样回收率均值分别为99.35%和98.26%,RSD分别为0.82%和0.73%(n=9);稳定性试验RSD为0.27%;中间精密度RSD低于3.79%(n=18)。该法准确度高、重现性好,能快速测定辣椒中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量。     

超高效液相色谱法测定发芽糙米中γ-氨基丁酸含量

为发芽糙米中γ-氨基丁酸的含量检测提供高效的方法,采用超高效液相色谱柱Waters BEH C₁₈(1.7 μm, 100 mm×2.1 mm),以60%的乙醇为提取剂,流动相组成为乙腈和纯水,以邻苯二甲醛为衍生剂提对γ-氨基丁酸含量进行测定。该方法确定了样品最佳衍生反应时间为2 min,衍生物可在室温条件下稳定时间24 h以上或4℃低温保存。在此条件下绘制了γ-氨基丁酸的标准曲线,线性关系良好,检出限为0.5 mg/L,回收率范围98.88%~99.2%,相对标准偏差为0.6%~2.2%。该方法准确、灵敏、省时,为发芽糙米中γ-氨基丁酸的含量测定奠定了有效可靠的方法基础,可广泛应用。     

芜菁中氯原酸提取方法及定量分析研究

对不同来源的芜菁中提取氯原酸进行讨论,提出采用高效液相色谱法进行氯原酸含量的测定。建立Agilent HC-C18色谱柱(4.6×250㎜,5-μm),柱温30℃,流动相为甲醇70%~0.5%H2PO330%,检测波长327 nm,流速1.0 m L/min。结果证明,该方法简便易行、处理方便、重复性好,线性关系良好,且测定数据稳定。本法可作为芜菁中氯原酸的定量分析方法。     

高效液相色谱测定D-阿洛酮糖3-差向异构酶酶活力

D-阿洛酮糖3-差向异构酶可以将D-果糖异构化生成D-阿洛酮糖。为建立D-阿洛酮糖3-差向异构酶酶活力测定方法,首先建立了高效液相色谱法测定产物D-阿洛酮糖含量的方法,进而测得D-阿洛酮糖3-差向异构酶酶活力。采用50 mg/L EDTA钙溶液作为流动相等度洗脱Waters Sugar-Pak I色谱柱(柱温90℃,流速0.3 m L/min,进样量10μL),采用示差检测器测定D-阿洛酮糖含量。结果表明,该方法测定酶反应产物D-阿洛酮糖含量得检测限为4.12 mg/L,定量限为10.3 mg/L,在0.5～5.0 g/L范围内线性度良好,R~2=1,重复性(RSD)小于1.0%,加标收回率为98.92%。在此基础上进一步确定D-阿洛酮糖3-差向异构酶酶活力测定时的酶反应最适温度45℃,最适pH值7.0,D-果糖底物质量分数24%,反应时间20 min。经检验,该酶活力检测方法的精密度RSD小于5.0%,达到酶活力检测要求。     

高效液相色谱法测定太太美容口服液中芍药苷含量

采用高效液相色谱法建立了太太美容口服液中芍药苷含量的测定方法,即色谱柱为intersil型ODS-3柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%冰醋酸(31∶69),流速为1.0 mL/min,检测波长为230 nm。结果表明,芍药苷的线性范围为0.098 9~0.989μg,R~2=0.999 9,平均回收率为100.2%(n=9),相对标准偏差为1.1%。该方法简便、快速、专属性好,可用于太太美容口服液的品质控制。     

HPLC-ELSD法测定啤酒糟酶解物中低聚木糖

为建立啤酒糟酶解物中低聚木糖HPLC-ELSD检测方法,将啤酒糟酶解物用纯水提取,色谱柱为COSMOSIL Sugar-D分析柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(69:31,V/V),流速为0.9 mL/min,柱温40℃,进样量3μL,Evaporator Temperature为78℃,载气流速为1.6 L/min,载气压力为0.5 MPa,采用峰面积外标法定量检测低聚木糖含量。结果表明,木二糖～木五糖分别在0.024～0.245 mg/mL质量浓度范围内呈良好的线性关系,检出限分别为0.0245、0.0245、0.02425、0.024 mg/mL,定量限分别为0.0907、0.0907、0.08981、0.8889 mg/mL,RSD分别为0.203%、0.224%、0.233%、0.252%,样品加标回收率为97.31%～99.83%。该方法具有灵敏度高、重复性好等优点,可用于啤酒糟酶解物中低聚木糖的检测。     

高效液相色谱法测定玉米幼苗叶片中4种酚酸类化合物

为研究干旱胁迫前后玉米幼苗叶片中4 种酚类物质的变化,采用高效液相色谱法(HPLC),以Thermo Scientific Syncronis C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)为分析柱,乙腈-0.5%乙酸溶液梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长280 nm,柱温30℃,对不同品种玉米幼苗叶片中的没食子酸、香豆酸、绿原酸、咖啡酸含量进行测定。结果表明,4 种酚酸化合物的浓度在1~100 mg/L范围内与峰面积线性关系良好,相关系数R2均大于0.999,加标回收率和精密度RSD 结果均满足分析要求;玉米幼苗叶片中香豆酸含量较高、没食子酸含量较少,干旱胁迫后除咖啡酸外其他3 种酚酸含量均有下降;不同品种玉米幼苗叶片中4 种酚类物质的含量不同,且干旱胁迫后酚酸的含量变化不同,与其对干旱的敏感程度有关。     

饼肥与无机肥的不同配比对白肋烟烟叶中的游离氨基酸的影响

建立了一种用于烟草中游离氨基酸测定的反相高效液相色谱法。实验采用超声波水解、邻苯二甲醛/3-巯基丙酸作为衍生剂进行柱前衍生。色谱柱为依利特C18柱(4.6mm i.d. ×250mm,5μm),流动相A为18mmol/L的醋酸钠溶液（pH7.2）含体积分数为0.002%的三乙胺和0.3%的四氢呋喃,流动相B组成为：100mmol/L的醋酸钠溶液（pH7.2）-乙腈-甲醇（体积比为1:2:2）,流速为1.0ml/min,柱温为40℃。荧光检测器,激发波长350nm,发射波长450nm。方法的回收率为95.3% ~100.7%,RSD为2.32%~9.24%(n=6)。该方法简便、准确、重现性好。测定不同肥料配比生产的白肋烟烟叶中17种游离氨基酸的含量。结果表明,不论有机肥与无机肥怎样配比,天冬氨酸的含量与各氨基酸相比都是最高的;随着饼肥的加入,大部分氨基酸的含量是先增加后逐渐降低的趋势, 15%饼肥+85%无机肥与30%饼肥+70%无机肥配比时,大部分游离氨基酸的含量接近,30%饼肥+70%无机肥配比时的游离氨基酸总量最高,综合考虑,30%饼肥+70%无机肥配比时的烟叶质量最好。     

不同种质及生长年限关黄柏中生物碱含量变化规律的研究

目的：采用反相高效液相色谱法对不同种质（北京、东北）,不同生长年限关黄柏中有效成分（小檗碱、巴马汀、药根碱）含量的变化规律进行研究。为科学地确定关黄柏采收期,保护关黄柏资源提供依据。方法：高效液相色谱法,色谱柱:Alltima HP C18（250×4.6mm,5μm）,流动相：乙腈-0.1%磷酸水溶液（40:60,含0.1%的十二烷基磺酸钠）,流速：1.0ml/min;柱温：25℃,检测波长：345nm。结果：北京种质2年生以上、东北种质（吉林通化）9年生以上的关黄柏中小檗碱含量可达到中国药典规定的含量要求。结论：不同种质,不同生长年限的关黄柏生物碱含量具有差异性,且变化趋势不同。     

柑橘属果实中类黄酮成分的高效液相色谱标准化测定方法

针对目前尚无柑橘属果实中黄酮类化合物标准化测定方法,建立了高效液相色谱同时测定柑橘属果实中类黄酮成分柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷含量的标准化方法。以Waters Atlantis T3- C18色谱柱 （4.6×150 mm,3μm）分离,柱温40℃;以乙腈-0.5%乙酸溶液（体积比为20:80）为流动相,流速为1.0 mL/min;采用二极管阵列检测器,检测波长283nm。柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的线性范围分别为1～500 μg/mL(r=0．9999),1～500 μg/mL ( r=1.0000),1～500 μg/mL (r=0．999 9),加标回收率都在95%以上。方法学考察结果显示符合测定要求,并适用于柑橘属果实的测定。该方法操作简便、快速,结果可靠,重现性好,可用来研究柑橘属果实中的类黄酮成分含量。     

HPLC同时测定花生壳中绿原酸3,4—二咖啡酰奎尼酸和木犀草素

建立了同时测定花生壳中绿原酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸和木犀草素3种有效成分含量的反相高效液相色谱方法。采用Kromasil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),乙腈和0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长340 nm,柱温27℃。在该色谱条件下,绿原酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸和木犀草素的质量浓度分别为3.75~60μg/mL(R2=0.999 9),3.63~58.08μg/mL(R2=0.999 9),17.25~276μg/mL(R2=0.999 7)内与色谱峰面积呈现良好的线性关系,平均加标回收率(n=5)为121.6%,97.79%,124.35%,RSD分别为0.71%,1.49%,0.44%。该分析方法快速准确、重现性好,可应用于花生壳资源产业开发中质量标准的建立和完善。     

高效液相色谱法同时分析五倍子提取物中的没食子酸和鞣花酸

采用五倍子提取物为原料,建立了一种同时快速准确分析五倍子提取物中没食子酸和鞣花酸含量的方法;通过全波长扫描确定检测波长、考察各因素对检测结果的影响,确定最佳检测条件,从方法学角度考察检测方法的可行性。采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈和1%冰乙酸,梯度洗脱（0→10 min:18%乙腈,10→15 min:18%→20%乙腈）,柱温35℃,检测波长为248 nm,洗脱流速为1 mL/min,没食子酸和鞣花酸分别在0.44μg~1 mg、0.08~8μg内与峰面积呈现良好的线性关系,R2值均为0.9995,平均回收率分别为96.74%、97.10%,相对标准差分别为0.89%、1.53%。应用此方法能够在15 min内同时快速准确分析五倍子提取物中的没食子酸和鞣花酸含量,缩短了五倍子的高值化利用研究过程中的检测时间,提高了工作效率。     

不同烘干温度对金银花叶绿茶主要功能性成分含量的影响

以茶叶加工工艺制作的金银花叶片绿茶,测定在制茶工艺过程中,不同烘干温度对制作金银花叶绿茶中总黄酮和绿原酸的含量,采用紫外-可见分光光度计法测定总黄酮含量,采用高效液相色谱法测定绿原酸含量。实验建立了总黄酮和绿原酸的标准曲线,测得50、80、110、140℃温度下金银花叶绿茶总黄酮含量分别为0.39%、0.33%、0.30%、0.19%,绿原酸含量分别为1.44%、1.42%、1.27%、1.22%,平均回收率分别为98.2%和99.6%。随着烘干温度的升高,样品中总黄酮和绿原酸含量呈下降趋势,在80℃条件下烘干,烘干时间短,样品中总黄酮和绿原酸含量高。该方法可有效测定不同烘干温度金银花叶绿茶中总黄酮和绿原酸含量,不同烘干温度金银花叶绿茶中总黄酮和绿原酸含量差异较大,80℃为最佳的烘干温度。     

Determination of Phytic Acid in Cottonseed Kernels by Ion Chromatography

Cottonseed meal is an important plant protein resource of feed industry and breeding industry, although it contains many antinutritional factors. Phytic acid, as one of the mainly antinutritional factor, cannot be digested easily by monogastric animals, such as fowls and pigs, consequently results in the decreased bio-availability of material elements and leads to the environment pollution by the phytate in excreta. Thus far, study of breeding cottons containing low phytic acid gradually becomes the hotspot, and the method of fully extracting phytic acid from cotton seeds and precise measurement is becoming more and more important and necessary. A new method for the rapid extraction and determination of phytic acid in cottonseed kernels by ion chromatography was developed in this study. After the diethyl ether treatment of dry cottonseed kernel powder, the samples were suspended in 10ml 0.66 mol·L^－1 HCl and boiled for 1 hour. Then the samples were shaken at 4 ℃ for 12 hours and centrifuged. The supernatant was diluted and purified for loading. To analyze the sample, DIONEX ICS-2000 ion chromatography, AG11-HC Guard (4 mm×50 mm) protection column and AG11-HC Guard (4 mm×250 mm) separation column were used in controlled conditions (washing buffer: 30.0 mmol·L^－1 KOH; ream speed: 1.0 mL·min^－1; collecting time: 25 min; 75 mA current; temperature: 30 ℃; loading amount: 20 μL). The results showed that R2 of linear regression is 0.999, which means the regression relation is great. In addition, the standard deviations of all the indexes are within 5% and the average recovery rate is 98.64%-102.31%. The detection limit, showing the minimum detectable concentration of analyte in the sample, is 0.059 μg·mL^－1, and the quantitation limit, showing the minimum amount of analyte in a sample can be quantitatively determined, is 0.196 μg·mL^－1. This method is easy and accurate with great reproducibility, showing a strong application value.