基于COI基因的橡胶树六点始叶螨遗传多样性分析

六点始叶螨是橡胶树上的重要害螨之一,具有分布范围广、危害重等特点。为了研究其遗传多样性和遗传分化,本研究利用线粒体COI（mitochondrial cytochrome oxidase subunit I）基因序列对采自海南、云南、越南河内等地区橡胶树上的11个不同地理种群的165头样本进行了种群的遗传多样性分析。获得的六点始叶螨线粒体COI基因片段长度均为658 bp,分析发现可变位点30个,其中简约信息点15个,单变异位点15个,单倍型15种;种群间F_ST值为0.34698,Nm值为0.47,G_ST值为0.19660,表明11个种群的六点始叶螨存在一定的遗传分化。     

两种热雾剂防治橡胶六点始叶螨药效试验

使用15 %哒·阿维热雾剂和15 %克螨特热雾剂2种药剂进行防治橡胶六点始叶螨的药效试验结果表明：施药3 d后,克螨特热雾剂防效为76.68 %,哒·阿维热雾剂防效为89.33 %,处理间差异显著,哒·阿维热雾剂的速效性优于克螨特热雾剂;施药后7 d后,克螨特热雾剂防效为83.43 %,哒·阿维热雾剂的防效为87.62 %,处理间差异不显著;药后15 d,哒·阿维热雾剂还保持在85 %以上,而克螨特热雾剂的防效降至63.35 %,哒·阿维热雾剂的持效期显著优于克螨特热雾剂。     

不同生长期橡胶叶对六点始叶螨选择性及种群增长影响

为了探明不同生长期橡胶叶对六点始叶螨Eotetranychus sexmaculatus(Riley)选择性及种群增长的影响,在室内测定古铜期、淡绿期、稳定期、老化期的橡胶叶对六点始叶螨的产卵选择、取食选择、发育、存活及繁殖的影响。结果表明:六点始叶螨对不同生长期橡胶叶的取食选择和产卵选择由多到少依次为:古铜期、淡绿期、稳定期、老化期,说明该螨在转移为害过程中优先选择幼嫩叶片;世代发育历期以取食老化期的最长,为20.9 d,取食古铜期最短,为16.9 d。世代存活率、净生殖率(R0)、内禀增长率(rm)由大到小依次为:古铜期、淡绿期、稳定期、老化期。因此,古铜期的橡胶叶最适合六点始叶螨的发育、存活及种群增长,随着橡胶叶的老化越不利于该虫的生长发育及繁殖。     

温度对橡胶六点始叶螨Eotetranychus sexmaculatus(Riley)种群变动的影响

根据六点始叶螨在25,30,32,35±1℃及相对湿度70～95％条件下的生活史组建了生命表。其生命参数的变化,依上述温度条件,净生殖率(R。)分别为20.70,9.21,6.20及4.12;世代平均日数(T)为12.27,6.79,6.10及5.19天;自然内禀增殖率(rm)为0.247,0.327,0.299及0.273;增殖率极限(λ)为1.280,1.387,1.349及1.314;种群加倍所需的日数为2.81,2.12,2.32及2.54天。从生命表的资料比较说明,30℃是六点始叶螨生长发育和繁殖的比较适宜温度。     

六点始叶螨在7个橡胶树无性系上的生物学特性和药效试验

六点始叶螨（Eotetranychus sexmaculatuss）作为橡胶树的重要害螨,对橡胶树的生长发育产生巨大危害,严重影响橡胶树产量。为进一步明确六点始叶螨在不同橡胶树无性系上的发育和繁殖情况,以及不同螨态对杀螨剂的敏感程度。本研究以‘热研87-6-62’‘热研87-6-47’‘热研93-59’‘热研87-4-19’‘热研89-4-51’‘PR107’‘RRIM600’7个橡胶树无性系稳定期叶片作为六点始叶螨的寄主,分析了各螨态的形态特征、发育历期以及繁殖能力。同时,采用浸叶蝶法、叶片残毒法、玻璃浸渍法测定了4种杀虫剂对六点始叶螨各螨态的活性。结果显示,在(28±1)℃、RH(75±5)%、光照[16(L)∶8(D)]条件下,六点始叶螨在以上7个橡胶树无性系上各螨态发育时间从长到短为：成螨期>后若螨→成螨>前若螨→后若螨>卵→前若螨,六点始叶螨各螨态在‘RRIM600’无性系上的发育历期最短,在‘热研87-6-62’和‘热研87-6-47’无性系上的发育历期相对较长;六点始叶螨在7个橡胶树无性系上的单雌产卵量由多到少依次为：‘PR107’>‘RRIM600’>‘热研89-4-19’>‘热研93-59’>‘热研89-4-51’>‘热研87-6-47’>‘热研87-6-62’,其中‘PR107’上单雌产卵量最多,平均单雌产卵量为12.17个,‘热研87-6-62’单雌产卵量最少,平均单雌产卵量为7.33个。筛选不同化学药剂对六点始叶螨进行防效试验,结果表明4种药剂在药后15 d的校正死亡率均在80%以上,其中15%哒螨灵乳油和1.8%阿维菌素·高效氯氰菊酯乳油的速效性较好,在施药3 d后死亡率可达80%以上。     

15%哒·阿维热雾剂的配制及其对橡胶六点始叶螨的药效

通过选用合适的原药、助剂、工艺,配制了闪点高、粘度适中、低毒、冷热贮稳定性好且可用于喷烟、喷雾及超低量喷雾的15%哒.阿维菌素多功能热雾剂,并测定热雾剂对橡胶六点始叶螨的毒力与药效。热雾剂对雌成螨的毒力回归方程为Y=5.738 3+2.285 6x,LC50为0.475 3μg/mL,幼螨LC50为0.190 4μg/mL,卵LC50为0.921 3μg/mL。苗圃防治试验持效期达35 d以上。施药量为3 000 mL/hm2时,小区试验药后15 d防效达90.28%。经过7 a的大田防洽试验,表明15%哒.阿维热雾剂对橡胶六点始叶螨有良好的控制作用。当高峰前期每百片胶叶害螨达30头以上时,采用热雾剂2 250~3 000 mL/hm2进行预防性施药,防治效果达81.2%以上,全年施药1次可控制害螨的发生。     

抗、感橡胶树种质对六点始叶螨发育与繁殖的影响

在温度(28±1)℃、RH(75±5)%、光照周期14(L)∶10(D)的条件下,研究了经抗、感性初步筛选获得的5份抗性和5份敏感橡胶树种质对六点始叶螨发育与繁殖的影响。结果表明:抗、感橡胶树种质对六点始叶螨的发育历期、产卵量、后代卵孵化率、性比和成螨寿命均存在显著影响;抗性橡胶树种质对六点始叶螨的发育与繁殖具有显著的抑制作用。取食抗性橡胶树种质IRCI12后,六点始叶螨不能完成发育与繁殖,取食后成螨存活率仅为6.80%,且最多可存活7.40 d;平均每雌产卵量为4.90粒,且不能孵化。与取食敏感种质RRII103、RRII105、IAN2887、IAN2904和桂研77-11-23(多)相比,取食抗性种质热研87-6-5、IAN717、RRIM600和RRIC52后,六点始叶螨各龄螨的发育历期均显著延长,产卵量显著减少,后代孵化率和雌性百分率显著降低,成螨寿命显著缩短。该结果为深入开展橡胶树抗螨性机理和橡胶树抗螨种质的挖掘及其利用研究以及充分发挥抗性种质在橡胶树害螨防控中的主导作用提供理论基础。     

六点始叶螨[Eotetranychus sexmaculatus (Riley)]对7种寄主植物的选择性研究

用室内离体叶片饲养方法,研究了分别取食橡胶(Hevea brasiliensis)和7种目前常见的与橡胶间套种的作物[木薯(Manihot esculenta)、甘蔗(Saccharum officinarum)、菠萝(Ananas como sus)、椰子(Cocos nucifera)、杧果(Mangifera indica)、木瓜(Chaenomeles speciosa)和变叶木(Codiaeum variegatum)]后,六点始叶螨(Eotetranychus sexmaculatus)的存活、发育与繁殖情况差异。结果表明,取食木薯、甘蔗、菠萝、椰子和杧果后,六点始叶螨各龄均不能存活;而取食橡胶、木瓜和变叶木叶片后,其幼螨、前若螨、后若螨及卵到成螨的存活率均表现为橡胶(均为100%)变叶木(68%、69%、77%和71%)木瓜(53%、65%、54%和57%),存在显著差异(p0.05);从卵到成螨的发育历期表现为橡胶(12.05 d)变叶木(14.67 d)木瓜(15.61 d),但三者间没有显著差异(p0.05);平均每雌产卵量为橡胶(32.20粒)木瓜(8.00粒)变叶木(7.00粒),橡胶与木瓜和变叶木间存在极显著差异(p0.01);F1代卵孵化率为橡胶(100%)变叶木(97.53%)木瓜(94.42%),仅橡胶与木瓜间存在显著差异(p0.05);后代雌性百分率为橡胶(88.20%)变叶木(75.40%)木瓜(66.30%),三者间存在显著差异(p0.05);成螨寿命为橡胶(19.58 d)木瓜(19.33 d)变叶木(17.00 d),仅橡胶与变叶木间存在显著差异(p0.05)。研究结果表明,木薯、椰子、杧果、菠萝和甘蔗不适于六点始叶螨生存、发育与繁殖,因此为预防六点始叶螨的发生与危害,这5类作物可作为橡胶的间作套种作物;而变叶木和木瓜虽然影响六点始叶螨的发育与繁殖,但六点始叶螨仍可完成世代发育和繁殖,因此其亦为六点始叶螨的嗜好寄主,不适宜与橡胶间作套种。     

短时高温胁迫对六点始叶螨繁殖能力和子代适合度的影响

为明确短时高温胁迫对六点始叶螨雌成螨发育繁殖特性和子代适合度的影响,本研究以33、36、39、42、45℃高温处理六点始叶螨雌成螨1、2、4 h,观察并统计各短时高温处理下雌成螨的寿命、产卵量、子代发育历期和性比。结果显示：经33～42℃高温胁迫1、2、4 h及45℃高温胁迫2、4 h后六点始叶螨的产卵期延长,单雌产卵量增加;其中39℃高温胁迫对六点始叶螨的种群增长最有利,39℃胁迫1 h后其产卵期最长,为12.67 d,单雌产卵量最高,为32.65粒,39℃胁迫1、4 h后其实验种群内禀增长率最高,为0.29,种群倍增时间较短,分别为2.42、2.38 d;短时高温胁迫对六点始叶螨子代性比无显著影响。45℃高温胁迫1 h六点始叶螨的存活率降低,单雌产卵量减少,寿命延长,内禀增长率减小,因此六点始叶螨经45℃高温胁迫1 h会抑制其种群发展。     

基于RNAi技术研究六点始叶螨转录因子Nrf2调控抗氧化酶的功能

转录因子Nrf2对脊椎动物抗氧化酶的调控起关键作用,然而当前Nrf2对害虫(螨)抗氧化酶调控功能的相关研究报道较少,本研究拟克隆六点始叶螨转录因子EsNrf2,并分析采用RNAi沉默EsNrf2对六点始叶螨取食感螨橡胶树种质'IAN2904'和抗螨橡胶树种质'IRCI12'后抗氧化酶EsSOD、EsCAT基因表达水平和...     

短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX超氧化物歧化酶基因的克隆及原核表达

短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX具有抑菌、抗褐变和保鲜功能。以短短芽胞杆菌菌株FJAT-0809-GLX总DNA为模板,采用PCR扩增超氧化物歧化酶(Supseroxide dismutase,SOD)基因,将该片段纯化回收后与p MD18-T连接并转入大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,进行序列测定,结果显示SOD基因序列长度为609 bp(Gen Bank登录号:KM255665),编码202个氨基酸残基。将SOD基因片段与同样酶切的表达载体p ET-28a连接,构建重组表达载体p ET-28a-SOD,转入大肠杆菌BL-21,采用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)进行诱导表达。SDS-PAGE结果表明,在菌体中存在约25 ku的蛋白表达产物,与该基因ORF预期大小接近。以上结果为进一步研究该酶的生理生化特性奠定了基础。     

Differential Expression of Two Cytosolic Ascorbate Peroxidases and Two Superoxide Dismutase Genes in Response to Abiotic Stress in Rice

Superoxide dismutase (SOD) and ascorbate peroxidase (APX) play central roles in the pathway for scavenging reactive oxygen species in plants, thereby contributing to the tolerance against abiotic stress. Here we report the responses of cytosolic SOD (cSOD; sodCc1 and sodCc2) and cytosolic APX (cAPX; OsAPX1 and OsAPX2) genes to oxidative and abiotic stress in rice. RNA blot analyses revealed that methyl viologen treatment caused a more prominent induction of cAPXs compared with cSODs, and hydrogen peroxide t...     

杂交稻旗叶衰老过程中超氧自由基与超氧物岐化酶活性的变化

The O₂^- production, scavenging capacity, photooxidation, protein content, and SOD activity were studied in leaves of Yayou 2 (indica-japonica hybrid rice) and Shanyou 63 (indica hybrid rice) at filling stage. It was shown that protein content decreased gradually with days of heading in two varieties in natural condition, and the decrease in Shanyou 63 was more than that in Yayou 2. The rate of O₂^- production and SOD activity increased from heading to 20 days after heading, then decreases but still maintained certain levels until 30 days after heading in two varieties. O₂^- production rate in Shanyou 63 was more than that of Yayou 2, but SOD activity was contrary in two varieties. In addition, the change of O₂^- and SOD under photooxidation condition was consistent with the tendency above under natural condition. It was also shown that there was negative correlation between protein degradation and O₂^- / SOD in the process of senescence in flag leaves after 20 days of heading. It is suggested that O₂^-/SOD could be used as an index of scavenging ability for O₂^- during senescence in rice.     

实时荧光定量PCR筛选稻曲病菌内参基因

 通过实时定量PCR分析了稻曲病菌中5个传统内参基因18S rRNA、GAPDH、ubiquitin、β actin、α tubulin的mRNA差异表达情况,并利用geNorm软件分析了它们在4个发育时期和NaCl胁迫处理中的表达稳定性。结果表明,在菌龄为7 d、8 d、9 d、10 d的稻曲病菌中,α tubulin 2和β actin表达稳定;在0.4 mol/L  NaCl溶液处理0 h、4 h、8 h、12 h、16 h后,β actin和α tubulin 2表达稳定。因此,当利用荧光定量PCR分析比较稻曲病菌基因表达差异时,可选择α tubulin和β actin作为内参基因。