植物病原真菌及卵菌SNAREs基因功能研究进展

植物病原真菌和卵菌产生的效应蛋白在促进病原菌侵染、操纵寄主免疫方面有关键作用,这些效应蛋白在与寄主作用之前必须被分泌出去,SNARE蛋白家族作为真核细胞内囊泡转运及膜融合的关键组分,在分子转运中有核心调控作用。随着许多植物丝状病原菌基因组被破译,对SNAREs基因参与病原菌致病机制的研究取得了可喜进展。本研究简要概述了真核生物中SNARE蛋白的组成及分类和植物病原真菌及卵菌中SNARE蛋白基因的功能研究进展,并据此提出进一步开展SNARE蛋白基因功能分析的研究建议,以期为全面、深入研究植物病原真菌和卵菌中SNARE基因的功能、理解病原菌致病、效应蛋白分泌提供新的视野,为植物-病原物互作的分子机制研究提供参考。     

植物病原效应蛋白功能研究方法

植株病原会分泌一些与植物相互作用的效应蛋白,这些蛋白在病原菌与寄主植物互作过程中起着重要作用。结合几种细菌、真菌分泌的效应蛋白研究进展,介绍了用于病原菌效应蛋白研究的试验方法及其独特之处,包括图位克隆、异源表达分析等,提出研究一个单一效应蛋白需要多种分析方法。     

宁夏卵菌多样性分析

对隶属于藻物界卵菌门卵菌纲的宁夏卵菌进行了初步整理,共发现卵菌有1门1纲4目6科10属67种,分别寄生于176种植物上,引起植物病害或腐生于土壤中．同时发现国内新纪录的卵菌3种,新寄主植物12种．按照宁夏回族自治区农业地理区划对宁夏卵菌的种类和分布进行了初步多样性分析．宁夏卵菌种类补遗附后．     

我国卵菌病害化学防治概况

介绍了由卵菌引起的几类主要植物病害化学防治现状、存在问题 ,并结合我国的实际情况对卵菌病害的化学防治提出了一些建议     

植物病原真菌效应蛋白研究进展

真菌病原菌能分泌效应蛋白,影响真菌病原菌与植物的相互作用。本文概述了真菌病原菌的生活和侵染方式,以及效应蛋白的基因进化,指出真菌病原菌正是通过对基因组的区隔化完成效应蛋白基因的进化。重点讨论活体营养型、死体营养型、半活体营养型和共生营养型效应蛋白的作用机制和植物适应性,以及效应蛋白的转运、吸收和加工机制,可为研究真菌病原菌与作物的相互作用,并为未来作物抗病改良和病害防控策略的制定提供参考。     

植物病原真菌CFEM蛋白研究进展

病原真菌在侵染植物过程中,往往分泌效应因子增加致病性或被寄主抗病基因识别激发寄主强烈抗性,因此效应因子在植物-病原物的互作中发挥重要作用。CFEM(Common in Fungal Extracellular Membrane)蛋白是真菌中特有的一类位于细胞外膜的蛋白,往往起效应因子的作用。本文综述了植物病原真菌CFEM蛋白家族的结构特点,在不同物种中的表达和定位,CFEM蛋白对真菌胞内铁吸收和生长发育方面的调控作用,抑制寄主免疫反应和促进真菌寄生的作用机制以及CFEM蛋白起源和进化过程等方面的研究进展,同时对目前CFEM蛋白研究有待阐明的问题进行了讨论并展望了未来的研究方向。本文将有助于人们进一步了解植物-病原真菌互作分子机理以及CFEM蛋白的致病机理,为培育作物抗病品种和制定植物真菌病害防控策略提供参考。     

稻瘟病菌效应蛋白与水稻互作研究现状及展望

水稻是世界上最重要的粮食作物之一，水稻安全生产关乎食品安全问题。由稻瘟病菌引起的稻瘟病是一种世界性的真菌病害，给水稻生产造成严重损失。相较于药物防治，抗病品种的培育与应用是控制该病害最为经济有效的方法。然而，田间稻瘟病菌群体复杂多样、杀菌剂过量施用、气候环境变化等因素造成小种变异迅速，品种的抗性往往只能维持 3~5 年。稻瘟病菌通过无毒基因的变异产生新的生理小种，逃逸或抑制水稻的免疫系统，实现侵染致病。目前已在稻瘟菌中鉴定出 26 个无毒基因，其中 14 个已被克隆，其在病原菌的侵染、定殖和干扰寄主免疫反应过程中发挥重要作用，稻瘟菌效应蛋白和水稻抗性蛋白的互作分子机理研究也不断深入。研究稻瘟菌的致病机理及其与水稻互作的分子机制有助于更好地理解病原菌的作用途径和植物抗病基因响应的免疫反应，以制定更高效、绿色的防治措施。本文综述了近年来稻瘟病菌效应蛋白在水稻细胞转运和分泌的过程、效应蛋白与抗病蛋白互作的研究进展和效应蛋白的区域性分布，讨论和展望了当前研究面临的机遇和 挑战，以期为水稻与稻瘟病菌互作的分子机理研究、抗病育种及病害防控策略提供借鉴。     

外源水杨酸对稻瘟病菌效应蛋白BAS4过表达菌株耐受性的影响

[目的]研究不同水杨酸(SA)浓度对稻瘟病菌菌株形态发育及受侵染水稻防御相关基因表达的影响,探究SA对稻瘟病活体寄生相关效应蛋白BAS4在稻瘟病菌与水稻互作中的作用机制,为生产上有效防控稻瘟病提供理论依据.[方法]利用不同浓度SA(50、100、200、500、1000和2000 μmol/L)处理稻瘟病菌过表达菌株(35S:BAS4/Mo-1)和野生型菌株(A1343R-7),统计分析SA对过表达菌株和野生型菌株菌落生长速率、产孢量及孢子萌发和附着胞形成等形态发育的影响.调查200 μmol/L SA处理稻瘟病菌菌株侵染水稻的发病率,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析受侵染水稻防御相关基因表达情况.[结果]不同SA浓度对过表达菌株菌落生长速率、产孢量、孢子萌发率和附着胞形成的影响低于SA对野生型菌株的影响,经200 μmol/L SA处理过表达菌株侵染水稻的发病率降低,但降低幅度小于200 μmol/L SA处理野生型菌株侵染水稻的发病率.200 μmol/L SA处理能提高过表达菌株侵染水稻病程相关基因PR1a早期上调表达及PR10a基因72 h时的高效表达;使SA途径PAL基因表达量下调,JA途径AOS2基因早期上调表达,LOX2基因各时间点下调表达;使PR5基因早期上调表达,后期急剧下调;HSP90基因早期上调表达,但低于野生型菌株侵染水稻的表达量.[结论]BAS4过表达菌株对外源SA刺激有较强的耐受性.     

TAL效应蛋白研究进展

介绍了TAL效应蛋白相关的研究进展,包括TAL效应蛋识别DNA,其在基因工程上的应用,TALENs中DNA结合域的设计和组装,并对未来发展趋势进行分析和展望,以期为TALENs技术的发展与应用提供参考。     

效应蛋白OhEF 2正调控拟南芥对橡胶树白粉菌的感病性

白粉菌通过在植物细胞内形成吸器,产生大量的效应蛋白,从而实现在寄主细胞内的侵染.前期有研究人员对Oidium heveae进行基因组和转录组测序分析,预测出133个潜在的效应蛋白.笔者克隆了其中的一个基因OhEP2 (Oidium heveae Effector Protein 2),并构建了OhEF 2基因在拟南芥C...     

三株拮抗菌对根结线虫卵和幼虫的抑杀效果

检测了LB2、Amb3、Apb三种拮抗菌对根结线虫的抑杀效果。盆钵试验显示，3个菌株对根结线虫卵均有一定的抑制作用，其中以LB2的效果最佳；室内毒力试验表明，LB2、Amb3、Abp对根结线虫的校正死亡率均达80％以上，尤以菌体＋无菌水处理的效果最佳。     

植物病原镰刀菌属突变技术及相关基因研究进展

综述近年来镰刀菌诱变技术及相关基因克隆的研究进展,列举代表性应用实例,并就镰刀菌分子生物学研究的重要性及分子生物学技术在镰刀菌研究中的广阔前景进行展望。     

卵菌对杀菌剂的抗药性及治理策略

介绍了目前用于防治卵菌病害的保护性杀菌剂和高效内吸性杀菌剂 ,同时讨论了卵菌对内吸性杀菌剂的抗药性现状、产生原因、抗药性机制及交互抗药性问题 ,最后对卵菌抗药性的治理策略提出探讨     

橘小实蝇、瓜实蝇和南亚实蝇卵共生菌多样性及差异分析

为探究橘小实蝇、瓜实蝇和南亚实蝇卵共生菌群落结构、多样性及其在不同种群间的差异,利用Illumina NovaSeq 6000测序技术分析3种实蝇不同种群卵共生菌的16S rDNA V3-V4高变区序列。结果表明,7个种群的实蝇卵共生菌序列共注释3 495个操作分类单元(OTUs),注释到界、门、纲、目、科和属水平的比例分别为96.08%、76.37%、74.48%、70.99%、61.09%和41.46%。放线菌门细菌主要在南亚实蝇卵中聚集,拟杆菌门细菌主要在橘小实蝇卵中聚集,而厚壁菌门和变形菌门细菌在3种实蝇卵中均有聚集。从3种实蝇实验室种群和橘小实蝇福州种群6～10代卵共生菌中筛选到相对丰度存在差异的细菌属为沙雷氏菌属、普罗威登斯菌属、漫游球菌属、Cosenzaea、米勒氏菌属、乳球菌属和肠球菌属,其中,沙雷氏菌属、普罗威登斯菌属、肠球菌属和乳球菌属为3种实蝇卵共生菌的优势属。此外,橘小实蝇安顺种群与橘小实蝇福州种群第10代、南亚实蝇安顺种群、南亚实蝇实验室种群的卵共生菌Simpson指数和Shannon指数差异显著。本研究可为3种实蝇引诱活性菌筛选及其功能研究提供参考。     

浅谈卵清蛋白在日常生活中的作用

卵清蛋白是在鸟类卵清中大量存在的一种功能未知的蛋白。令人惊讶的是,卵清蛋白属于丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)家族,尽管它缺乏任何的抑制活性。卵清蛋白是鸟类卵清中最主要的蛋白,也是最早分离提纯的蛋白之一。由于它具有可迅速大量制备的性质,因此,在蛋白结构性质研究以及过敏实验模型中得到广泛的应用。卵清蛋白在鸡输卵管中的合成以及它受到类固醇激素的调节,为蛋白合成与分泌研究提供了一个模型。     

植物内生菌研究进展

现有研究表明植物内生菌及其次级代谢产物具有多种生物学功能,是一种潜在的药物开发的新型资源库。该综述针对近年来有关内生菌分离纯化方法及次级代谢产物的生物活性作用等方面的研究进展进行总结概括,以期为植物内生菌资源的开发和利用提供帮助。     

稻瘟病菌无毒效应因子Avr-PikD与水稻蛋白OsDjA9的互作鉴定

【目的】对从水稻cDNA文库中筛选出的一个候选互作蛋白OsDjA9与Avr-PikD的互作关系进行鉴定,以期获得稻瘟病菌无毒效应因子Avr-PikD的水稻靶标。【方法】通过酵母双杂交、pull-down、Co-IP、荧光素酶互补成像试验及水稻原生质体中的共定位分析来验证Avr-PikD与OsDjA9的互作关系,并进一步借助酵母双杂交鉴定OsDjA9中参与互作的关键结构域。【结果】Avr-PikD在体外及体内条件下均能与OsDjA9发生相互作用,且OsDjA9所含DnaJ结构域是其与Avr-PikD互作所必需的。【结论】在稻瘟病菌侵染水稻的过程中,水稻OsDjA9蛋白是稻瘟病菌无毒效应因子Avr-PikD的一个作用靶标。     

卵清蛋白特异性免疫耐受的诱导及鉴定

【目的】建立对卵清蛋白(OVA)免疫耐受的Babl/c小鼠模型。【方法】分别设立A、B、C、D、E、F试验组及相应对照组。A、B组小鼠口服OVA,隔天1次,共服5次,口服剂量分别为50或100μg/只;C、D、E、F组小鼠经尾静脉注射OVA 1次,剂量分别为5,10,50和100μg/只;分别于口服完成7 d后或尾静脉注射5 d后免疫小鼠,免疫后15 d,MTT法测定小鼠OVA特异性淋巴细胞增殖情况,间接ELISA测定小鼠血清抗OVA的IgG水平。C、D组小鼠分别进行二、三次免疫并检测抗体。【结果】A、B组小鼠淋巴细胞增殖的刺激指数(Simulate index,SI)分别为0.603±0.03和0.715±0.08,增殖效果不佳;C、D组小鼠SI值分别为0.096±0.01和0.083±0.01,淋巴细胞不增殖;E、F组小鼠淋巴细胞增殖效果与正常小鼠无差异。第一次免疫后,各组小鼠OVA抗体效价与相应对照组小鼠的OVA抗体无显著差异;C、D组在二免、三免后抗体水平持续下降,不呈现再次应答规律。【结论】小鼠口服小剂量OVA可以建立不完全细胞免疫耐受,经尾静脉注射小剂量OVA可以建立完全免疫耐受。     

与Rab2互作布鲁菌株效应蛋白HSP70的鉴定

以Rab2作为诱饵钓取布鲁菌效应蛋白,通过RT-PCR获得鼠Rab2基因,利用基因克隆方法构建表达载体pGEX-4T-1-Rab2及其2个突变体pGEX-4T-1-Rab2[N119I]和pGEX-4T-1-Rab2[Q65L];然后IPTG诱导GST-Rab2、GST-Rab2[N119I]和GST-Rab2[Q65L]融合蛋白的表达,使用琼脂糖亲和介质分离纯化融合蛋白;最后将纯化的融合蛋白与超声破碎的野生布鲁菌或Δvirb2缺失布鲁菌株上清互作,利用SDS-PAGE电泳和银染确定差异蛋白,质谱分析差异蛋白。结果表明:所鉴定出的布鲁菌株效应蛋白为热休克蛋白HSP70。这为未来研究HSP70如何调节布鲁菌胞内寄生奠定基础。