硫酸软骨素提取与纯化方法研究

硫酸软骨素是来自动物软骨组织的一类天然的酸性黏多糖。介绍了硫酸软骨素的分布和物化性质,对现有的提取和纯化方法进行了综述,展望了其发展前景。     

吸附法制备大麻哈鱼硫酸软骨素的工艺优化

以去肉后的大麻哈鱼鱼头为原料,采用复合酶酶解提取硫酸软骨素,研究D958树脂分离纯化硫酸软骨素的效果;以解吸率为指标,研究吸附温度、时间及酶解液pH对硫酸软骨素纯化效果的影响。结果表明,采用D958树脂纯化大麻哈鱼鱼头硫酸软骨素的最佳工艺条件为:酶解液pH 6.0,4℃吸附3 h;此条件下硫酸软骨素的解吸率达87.66%,纯化效果最好。因此树脂吸附法能从大麻哈鱼鱼头酶解液中有效分离得到硫酸软骨素,为大麻哈鱼加工废弃物的高值化利用开辟了一个新途径。     

年产2t硫酸软骨素车间设计初探

选择鲟鱼鱼糜加工过程中废弃的鱼骨为原料,采用稀碱提取-酶解-醇沉工艺,获得具有多种药用价值的硫酸软骨素,并进行年产2t硫酸软骨素车间设计。按年产2t硫酸软骨素车间进行工艺流程、设备选型、物料衡算、关键点控制等方面进行设计,并绘制工艺流程图和车间平面图。设计为硫酸软骨素的生产提供参考依据。     

鲟鱼硫酸软骨素的制备工艺研究

以史氏鲟鱼软骨为原料,按碱提-酶解-乙醇沉淀工艺流程进行提取硫酸软骨素的各主要工序工艺的研究.通过单因素试验及正交试验,得出最佳碱提工艺为以两倍量6%的NaOH为溶剂,于40℃的水浴中搅拌提取4 h.通过正交试验,得出最佳酶解工艺条件是先将浸提液调节pH至8.6,加入胰酶0.5%,50℃保温水解3 h;后降温至40℃,调pH至5.7,加入胃蛋白酶0.3%,保温水解2h.通过单因素试验,得出最佳的乙醇沉淀工艺条件是将滤液pH调为6.5,加入95%的乙醇至醇沉浓度为70%,静置过夜.制备的硫酸软骨素经检测符合WS1-C3-0030-2000(硫酸软骨素口服片)和WS-10001-(HD-0892)-2002(硫酸软骨素注射品)标准的要求.     

鲨鱼硫酸软骨素及胶原蛋白复方改善小鼠骨关节炎作用研究

将源自鲨鱼软骨的高纯度硫酸软骨素和胶原蛋白以质量比2∶1配伍,得到鲨鱼硫酸软骨素胶原蛋白复方(SCC),并考察了该复方对骨关节炎(OA)的改善作用。在实验的第0、2、4、6天向小鼠膝关节腔定量注射Ⅱ型胶原蛋白酶,构建骨关节炎小鼠实验模型。同时每天分别以300、150 mg·kg^-1剂量灌胃小鼠给予SCC干预,持续4周。之后,取关节组织,测定肿胀程度,病理切片染色分析软骨损伤情况;通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-1β和IL-4表达水平。关节病理切片H&E染色结果显示,SCC 300 mg·kg^-1剂量对软骨细胞的修复优于150 mg·kg^-1剂量;Masson和天狼猩红染色结果显示,SCC 300 mg·kg^-1剂量补充胶原蛋白的能力高于150 mg·kg^-1剂量;番红-O染色结果显示,SCC 300 mg·kg^-1剂量对软骨的修复效果强于150 mg·kg^-1剂量;ELISA检测结果显示,SCC 300 mg·k...     

鲟鱼硫酸软骨素研究进展

硫酸软骨素（Chondroitin Sulfate,CS）是一种复杂,多硫酸基团的直链酸性黏多糖,属于糖胺聚糖（Glycosaminoglycan,GAG）的一个亚族。硫酸软骨素在我国主要被用于药品,形式有：片剂、胶囊、注射液、滴眼液等;而在美国,FDA（美国食品药品管理局）认定这类软骨保护剂为膳食补充剂,而非药品;在欧洲,其可作为处方药或非处用于治疗关节炎,     

鲟鱼硫酸软骨素对小鼠免疫器官肥大细胞的影响

为研究鲟鱼硫酸软骨素对小鼠免疫器官的影响,连续对小鼠灌胃不同剂量鲟鱼硫酸软骨素2周后,外科手术取出胸腺和脾脏,并依次进行称重、卡洛氏固定、石蜡包埋、组织切片、甲苯胺蓝染色,40倍物镜下观察鲟鱼硫酸软骨素对小鼠免疫器官肥大细胞数量的影响。结果表明：鲟鱼硫酸软骨素能促进小鼠免疫器官重量指数增大,并能显著促进免疫器官中肥大细胞数量的增长。其中,600 mg/kg剂量下小鼠胸腺指数显著( P<0．05)增大,胸腺中肥大细胞数量极显著( P<0．01)增加,60 mg/kg剂量下小鼠脾脏重量的增加最为明显( P<0．01),6 mg/kg剂量下小鼠脾脏中肥大细胞数量的增加最为明显( P<0．01)。     

鲟鱼硫酸软骨素的纯化及其特性

采用乙醇分级沉淀、柱层析等方法纯化了鲟鱼硫酸软骨素,并对提取纯化的鲟鱼硫酸软骨素(色谱纯)与Sigma的鲨鱼硫酸软骨素(色谱纯)进行了比较,探讨了二者在分子量、旋光度、硫酸基团含量和紫外可见光谱等方面的差异.结果表明,鲟鱼硫酸软骨素的重均、数均和Z均分子量、比旋光度、硫酸基团含量均与鲨鱼硫酸软骨素存在显著差异(P<0.05);在紫外可见光谱图中,鲟鱼硫酸软骨素的最大吸收波长在220nm,而鲨鱼硫酸软骨素则在230nm.这些差异表明,鲟鱼硫酸软骨素在生物活性和药用功能方面可能与鲨鱼硫酸软骨素存在区别,并推测鲟鱼硫酸软骨素可能具有较好的抗氧化活性和抗凝血活性.     

碱液浸提法制备硫酸软骨素的工艺优化

采用碱液浸提法对鱿鱼软骨中硫酸软骨素的提取工艺进行研究。以硫酸软骨素得率为评价指标,通过对影响硫酸软骨素得率的因素进行单因素试验和响应面优化试验确定最佳工艺参数。结果表明,碱液浸提的最佳工艺条件为：料液比1∶8( g/mL)、浸提温度50℃、浸提时间5．3 h, NaOH浓度3%。在此条件下,鱿鱼软骨中硫酸软骨素得率为62．89%。     

碱液对牦牛软骨提取硫酸软骨素工艺的影响

以牦牛软骨为原料,采用先高温蒸煮,后加稀碱与酶解相结合的方法提取硫酸软骨素。影响提取效果的因素主要有碱液浓度、碱提温度、碱提时间等,试验采用三因素三水平正交试验设计,对硫酸软骨素提取过程中碱液的影响进行研究,试验结果表明:碱液浓度5%,碱提取温度40℃,碱提取时间6h为牦牛硫酸软骨素提取的最佳碱液提取工艺参数,出品率可达10.03%,有效成分含量达91.67%。     

海蜇中明矾（铝）质量分数4种测定方法的比较

铝（Al）元素在海蜇产品中以明矾的形式存在,Al在人体内累积会对健康造成危害。当前海蜇中明矾（Al）质量分数测定方法较多,各种方法的操作及检测灵敏度均存在差异。研究比较了水煮滴定法、原子吸收光谱法、比色法和酸煮滴定法4种不同方法的检测效果,对各种方法中的前处理现象差异、检测结果、检测方法的准确度和精密度及方法的可操作性等方面进行对比。结果表明,酸煮滴定法前处理只需6min,煮沸后过滤速度快,其测定结果与原子吸收光谱法的结果相近。酸煮滴定法、比色法和原子吸收光谱法回收率介于103．81％～107．60％,平均回收率为104．70％,符合分析要求。对比各种测定方法的优缺点得出,酸煮滴定法操作简便快捷、花费少,适用于生产工厂及检测机构日常检测。     

微生物法检测水产品中粘杆菌素的残留

以支气管炎鲍特氏菌（Bordetella bronchiseptica）为检测菌种,样品经甲醇-0.1%甲酸水（体积比3∶7）超声提取,固相萃取柱净化,氮吹浓缩,用杯碟法测定水产品[草鱼（Ctenopharyngodon idellus）、斑节对虾（Penaeus monodon）、中华鳖（Pelodiscus sinensis）、日本鳗鲡（Anguilla japonica）和蟹（Brachyura）]肌肉中粘杆菌素的残留。结果显示,粘杆菌素在各水产品肌肉组织中0.4².4μg·m L^-1范围内药物浓度对数与抑菌圈直径的线性关系良好,相关系数R2>0.990 0;在0.20μg·g^-1、0.40μg·g^-1和0.60μg·g^-1的添加水平下,粘杆菌素的平均回收率为70.59%⁹3.39%,变异系数为3.22%¹4.01%。测定低限草鱼和对虾肌肉为100μg·kg^-1,鳖和鳗鲡肌肉为75μg·kg^-1,蟹肌肉为125μg·kg^-1。研究结果表明,运用微生物法检测水产品中粘杆菌素的残留是可行的,方法最低检测限达到农业部颁布的残留限量标准。 

     

水产品等食品中磺胺类抗生素残留分析与预处理方法的研究进展

对水产品等食品中磺胺类抗生素常用的分析方法和预处理方法进行了综述,归纳和比较了毛细管电泳法、微生物方法、液相色谱-质谱法、免疫法、气相色谱法、分光光度法、高效液相色谱法等特点。其中高效液相色谱法由于操作简便、快速、灵敏、准确的特点,是当前检测磺胺类抗生素的主要方法。同时,对包括固相萃取、分子印迹等预处理方法进行了综述。     

拟穴青蟹两种养殖模式的比较

以拟穴青蟹为主养品种,比较半封闭式养殖模式与传统开放式中水体理化生因子、放养品种的存活率和产量,以探索汕头牛田洋的适宜青蟹养殖模式。经过10个月的养殖试验,半封闭式养殖模式水体理化指标、污染物指标、菌体指标等总体优于开放式养殖模式。半封闭式养殖模式青蟹存活率高出开放式养殖模式66.22%,其他养殖品种的存活率和产量也均高于开放式养殖模式。研究结果表明,与传统的开放式养殖模式相比,半封闭养殖模式能有效降低水体污染指标,提高养殖产量,较为适合在汕头牛田洋青蟹养殖区进行推广。     

液相色谱质谱联用法测定水产品中泰乐菌素残留方法的研究

为了建立鱼、虾中泰乐菌素残留量的液相色谱串联质谱检测方法,文章通过对液相色谱和质谱条件、预处理、分离、纯化方法的探讨,确定了以罗红霉素为内标,先用乙腈提取,中性氧化铝柱净化,加异丙醇旋转蒸发至于,定容,过膜,上机测试。所建立的分析方法,泰乐菌素在1．0～500ng·mL。质量浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数均大于0．998,检出限为0．5μg·kg-1,定量限为1．0μg·kg-1。经过验证,在鲫（CarassiusauFatus）、对虾（Penacusorientalis）和草鱼（Ctenopharyngodonidellus）3种样品中的加标试验,3个不同质量浓度水平的加标回收率为82．40％-100．70％,相对标准偏差为0．86％～5．82％,符合对水产品中药物残留检测的技术要求。     

WSSV和IHHNV对虾病毒的胶体金免疫层析快速检测

为了快速、方便地检测出这2种病毒,研究将PCR核酸扩增的高灵敏度和胶体金免疫层析技术快速、简便、直观的优点结合起来,建立了同时检测2种对虾病毒(WSSV和IHHNV)的同步PCR-胶体金免疫层析检测方法。采用了生物素标记和地高辛(Digoxigenin)标记引物。PCR扩增产物利用胶体金免疫层析技术进行检测。胶体金免疫检测试剂条的检测线(T线)处的层析膜处点上地高辛的单抗,经地高辛标记的PCR扩增产物可在T线上被检测到,在10 min内即可得到检测结果。同时,在PCR过程中使用UNG(尿嘧啶-DNA糖基酶),极大地控制了遗留污染。通过此方法检测对虾WSSV和IHHNV病毒的灵敏度均可达到10~100个拷贝,高于国家标准PCR检测法10~100倍。此检测方法让工作人员避免了接触有毒和诱导突变的试剂,免除基层检测实验室购买电泳设备和荧光检测系统的投资。     

Comparison between surface-reading and cross-section methods using sagittal otolith for age determination of the marbled sole <Emphasis Type="Italic">Pseudopleuronectes yokohamae</Emphasis>

To find an appropriate method for age determination in the marbled sole Pseudopleuronectes yokohamae in Tokyo Bay, Japan, sagittal otoliths of 1,343 individuals were observed by surface-reading and cross-section methods and the results were compared. Opaque zones occurred once a year and were regarded as annuli in both methods. The surface-reading method sometimes provided a lower count of the number of annuli than the cross-section method, and the frequency of this discrepancy was highest in older fish (males above 5 years, females above 4 years). The oldest female fish was estimated to be age 10 years by the cross-section method but 8 years by the surface-reading method. The cross-section method could provide a more accurate estimate of age and is therefore likely to be indispensable to estimations of longevity. In contrast, the surface-reading method is superior in terms of cost and time efficiency but is likely to underestimate the ages of older fish. However, growth equations based on age estimated by the surface-reading method were sufficiently accurate if males ≥5 years and females ≥4 years were combined as specific, single age groups of 5+ and 4+, respectively.