禽流感检测方法研究进展

禽流感不仅对世界养禽业带来巨大的经济损失，而且可以感染人，公共卫生意义重大。由于其病毒亚型众多，抗原性变异极快，毒株的致病性也相差很大，早期快速诊断和血清学检测就成为预防和控制禽流感的前提条件。禽流感病毒的传统诊断方法是分离病毒和检测抗体。近年来，又相继建立了血凝抑制试验、神经氨酸酶抑制试验、酶联免疫吸附试验等血清学诊断技术及分子诊断技术。文章对禽流感检测方法快速诊断进行了概述。     

牛瘟诊断技术规程中竞争法酶联免疫吸附试验的复核试验

为配合世界粮农组织（FAO）的全球牛瘟消灭计划，宣布我国为无牛瘟国家需要，对申报的《国家牛瘟诊断技术规程》（以下简称技术规程）中牛瘟血清学中竞争法酶联免疫吸附试验（c—ELISA）进行了复核检测，检测结果表明，进行检验用牛瘟抗体c—ELISA诊断试剂标准对照均在技术规程规定范围内；同时对13份健康未感染牛瘟的牛采集的血清进行了牛瘟抗体的测定，结果均为阴性。试验结果达到技术规程规定的技术标准。本文对牛瘟抗体血清学检查方法竞争法酶联免疫吸附试验进行了介绍，以供参考。     

检测布氏杆菌病的四种血清学方法比较及国际标准单位的应用

本研究通过布氏流产杆菌（Brucella abortus)国际标准参考血清（ISABS）的使用，对目的应用的补体结合试验（CFT）、酶联免疫吸附测定法（ELISA）、虎红平板凝集试验（RBPT）及试管凝集试验（SAT）等四种血清学检测方法的测定结果进行了校正和临界点的设定。并对42份不同抗体效价血清进行了测定，同时通过计算和应用标准参考血清校正系数，对不同方法间的测定结果如何换算成国际标准单位进行了研究和探讨。结果表明，该校准方法可对不同实验室间的布氏杆菌病检测结果校准到统一的国际标准上来，可作为血清学测定国际标准化一条途径。     

奶牛布鲁氏菌病与疑似疾病的检疫鉴别

我国“动物布鲁氏菌病诊断技术”规定动物布氏病试管凝集试验和动物布氏病补体结合试验适用于诊断羊种、牛种和猪种布鲁氏菌病（简称布氏病）感染的家畜。在2002年农业部办公厅印发的“布鲁氏菌病防治技术规范”中也指出“血清学正式试验中试管凝集试验阳性或补体结合试验阳性，判为阳性畜。判定时应注意排除其它疑似疾病和菌苗接种引起的血清学反应。作者在多年的实践中，用试管凝集试验对奶牛进行布病的检疫。曾碰到其它疑似疾病和菌苗接种引起的非特异性血清学反应。现分别报道如下：     

猪伪狂犬病实验室诊断技术研究进展

本文概述了伪狂犬病的生物学试验、血清学诊断技术与分子生物学诊断技术。在生物学诊断技术方面，其诊断方法主要有动物实验、细胞培养等。血清学诊断技术包括补体结合试验、血清中和试验（SN）、凝集试验、免疫扩散试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）、颗粒浓缩免疫荧光试验（PCFIA）、对流免疫电泳（CIE）、放射免疫试验（RIA）等。随着分子生物学的发展，对伪狂犬病的诊断从细胞水平发展到分子水平，国内外相继建立了伪狂犬病核酸杂交、聚合酶链反应（PCR）、核酸序列分析等分子生物学诊断方法。     

应用进口ELISA试剂盒检测鸡传染性支气管炎抗体

鸡传染性支气管炎（IB）是由传染性支气管炎病毒引起鸡的一种急性高度接触性的呼吸道传染病，是严重危害我国乃至世界养鸡业的重要疾病之一。已有多种血清学方法可用于IB抗体检测，我国目前常用的方法有琼脂扩散试验（AGP）、血清中和试验（SN）、间接血凝试验（IHA）等。国内很多学者先后建立了ELISA方法检测IB抗体均取得理想结果，但仅限于实验室检测，在基层推广应用还有一定困难。作者在加04年7月至2004年11月应用美国Affinitech-IB抗体检测试剂盒对山东几个规模化养鸡场送检的血清样品进行了检测，现报告如下。     

一种快速简便的传染性支气管炎病毒的诊断方法

目前国内用于传染性支气管炎病毒（IBV）的血清学诊断方法有琼脂扩散试验（AGP）、间接血凝试验（IRHA）[1]、酶联免疫吸附试验（ELISA）[2]、以及用鸡胚、气管环、肾细胞的血清中和试验（SN）[3-5]。AGP虽然操作比较简单，但用于免疫检测却不理想，因为疫苗免疫后血清中沉淀抗     

鸡传染性支气管炎的血清学检验方法比较

为测定IBV感染引起的抗体应答及鉴别诊断，人们已研究出多种血清学方法。由于这些方法检测的是鸡群感染IBV后产生的应答抗体，所以也用于评估禽群的免疫接种应答。遗憾的是，这些方法均不能对野毒感染疫苗免疫应答的抗体进行区分。因此，准确评估血检结果的途径是了解禽群的历史和疾病状况。     

支原体活疫苗的使用和监测

对于没有免疫过支原体活疫苗的鸡群来说，通过ELISA试验及早发现并控制感染来预防疾病传播是一个很有效的方法。最近对于曾免疫过支原体活疫苗的鸡群进行的血清学数据表明ELISA（酶联免疫吸附试验）方法可以用于监测免疫是否成功或者是否有田间感染。采用ELISA方法进行监测及控制的目的是预防因支原体感染引起的产蛋下降。     

口蹄疫检测技术的研究进展与应用

从生物学试验、血清学诊断技术和分子生物学检测技术等方面概述了目前口蹄疫检测技术的研究进展及其应用。其中生物学试验包括动物试验和细胞培养;血清学诊断技术包括补体结合试验、中和试验、凝集试验、酶联免疫吸附试验和免疫胶体金快速检测技术等;分子生物学检测技术包括反转录聚合酶链式反应、核酸探针、核酸序列分析和等电聚焦等。     

猪附红细胞体Dot-ELISA检测方法的建立

本试验建立了一种检测猪附红细胞体抗体的Dot—ELISA方法，并确定了试验程序中最适抗原包被浓度、被检血清最适稀释度等工作条件。特异性和重复性试验结果表明，所建立的Dot—ELISA不与猪瘟等常见猪病阳性血清发生交叉反应，且稳定性高；用所建立的Dot—ELISA与IHA对70头份被检血清进行平行检测，阳性率分别为90％和60％；对20份阳性血清进行检测，Dot—ELISA和IHA平均抗体滴度分别为1：1012和1：160。表明所建立的Dot-ELISA是一种比较敏感、特异和稳定的血清学检测方法，能用于猪附红细胞体的抗体检测和疾病诊断。     

斑点酶联A蛋白免疫吸附试验检测猪衣原体抗体方法的建立

动物衣原体感染的诊断主要是病原学检查和血清学试验。血清学试验方法主要有补体结合反应(CF)、间接补体结合反应(ICF)、琼脂免疫扩散试验(AGP)和间接血凝试验(IHA)等。Dot-ELISA是20世纪80年代出现的一项新技术,已广泛用于传染病和寄生虫病的快速诊断。文心田等[1-2]和陈红英等[3]已成功地将Dot-ELISA用于牛和猪衣原体抗体的检测。研究用辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白(PPA)作为标记物,建立了Dot-PPA-ELISA检测猪衣原体抗体的方法,现报道如下。1材料与方法1.1材料衣原体属特异性抗原,用德国衣原体标准株(B394)制备;待检…     

血凝抑制试验中应注意的几个问题

血凝抑制试验是禽流感、鸡新城疫等血清学监测中常用的监测方法。可用于禽流感、鸡新城疫抗体效价的检测,以及疫病的辅助诊断。尽管此监测方法操作简便、快捷、准确和实用,但是在实践中由于某些因素的影响,导致试验结果不准确,甚至无法判定。笔者根据多年的实践操作，将实验中容易出现的问题及其解决方法总结如下。     

支原体活疫苗的使用和监测

对于没有免疫过支原体活疫苗的鸡群来说,通过ELISA试验及早发现并控制感染来预防疾病传播是一个很有效的方法。最近对于曾免疫过支原体活疫苗的鸡群进行的血清学数据表明ELISA（酶联免疫吸附试验）方法可以用于监测免疫是否成功或者是否有田间感染。采用ELISA方法进行监测及控制的目的是预防因支原体感染引起的产蛋下降。     

云南省楚雄州牛羊蓝舌病的血清学调查

应用琼脂扩散试验法，对采自云南省楚雄州４个县（市）的４１７份牛、４０６份羊血清进行了蓝舌病的血清学调查，结果血清抗体阳性率分别为１３．１９％和４６．３１％；对血清学检测呈阳性反应的１７头牛和３４只羊进行了临诊调查，结果未发现有关的病史、症状与病变，均呈隐性带毒状态。     

奶牛布鲁氏菌病血清学诊断方法的比较体会

本文主要就对三种奶牛布鲁氏菌病血清学诊断方法展开了对比分析,即比较了虎红平板凝集试验、快速诊断试纸卡检测、间接酶联免疫吸附试验在进行奶牛布鲁氏菌病血清学检测时的优点与缺陷.结果显示:虎红平板凝集试验方法操作简便且成本相对较低,对于阳性病牛有着较高的检出率,然而且缺陷则是特异性相对较差,且较易发生假阳性情况;快速诊断试纸卡检测和间接酶联免疫吸附试验血清学诊断方法相对比,在敏感性、特异性、阳性检出率等方面的比较均无明显差异,无统计学意义(P>0.05).在实际的奶牛布鲁氏菌病血清学诊断过程中还应具体结合以发病地区的实际情况,与自身条件来选取出适宜的检测方法.     

禽类疾病常规血清学检测结果判断的十项基本原则

基层动物疫病预防控制中心、个体诊疗机构和规模化的养禽场对禽类疾病的血清学检测通常采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、凝集反应(如HA、HI试验)、沉淀试验(如AGP、IEP)和补体结合反应。目前,在临床快速诊断技术中最常用的实验方法是ELISA试验和凝集反应。本文通过笔者多年的实验室和临床经验总结,提供禽类疾病血清学检测结果判断的10项基本原则以供基层兽医工作者参考。     

牛结核病诊断方法研究进展

牛结核病是一种严重的人畜共患病。给奶牛业造成了巨大的损失,还与人们的生命安全息息相关。结核病的早期诊断仍然是控制疫情的重要因素。近年来随着分子生物学和免疫技术的快速发展,在改善原有诊断技术的基础上也引入了多种新的结核病的诊断技术。新型培养技术缩短了细菌学检查和结核菌药敏试验的时间;分子生物技术的应用（比如PCR）使得快速诊断成为可能;血清学方法的改善以及噬茵体测定、γ-干扰素试验等新技术的引入给临床诊断带来了新的希望。本文就结核病的诊断技术进行综述。     

牛种布氏菌自然感染与19号苗免疫之间的血清学鉴别诊断

在间接酶联免疫吸附试验（ｉＥＬＩＳＡ）中，用牛种氏菌自然感染血清与布氏菌１９号苗免疫血清同时滴定强毒牛种布氏菌酶解抗原（ＰＫ抗原），选取最佳鉴别诊断抗原浓度建立了牛种布氏菌自然感染与１９号苗免疫血清学鉴别诊断方法，用该方法与常规抗原浓度ｉＥＬＩＳＡ补体结合试验（ＣＦＴ），试管凝集反应（ＳＡＴ）对６０份采自６头１９号苗免疫不同时期血清，１７５头份分离出牛种布氏菌牛血清进行了比较试验，证实本研究建立的     

评估诊断肥育猪地方性肺炎目的的精确临床试验价值的对比研究

在猪群水平上诊断猪地方性肺炎应根据各种检测方法的综合结果得出结论。目前,临床试验常被认为是一种低价值的方法,特别是与利用PCR技术检测肺部病变中猪肺炎支原体的直接检测方法相比。最近的研究对准确的临床试验（包括对咳嗽进行定量）、支气管肺泡灌洗液（Bronchoalveolar Lavage Fluid,BALF）的PCR试验和以诊断地方性肺炎为目的的血液样本血清学试验进行了比较。