兔抗孕酮抗体的制备及纯化

以１１α－羟孕酮半琥珀酸酯为原料，采用混合酸酐法合成了１１α－羟孕酮半琥珀酰－人血清白蛋白结合物。两批合成的产率分别为８７．３８％和６４．８８％；孕酮与人血清白蛋白的分子结合比率为１８：１和２３：１，达到Ｓｉｇｍａ同类产品标准。     

5,6α-环氧-16-孕甾烯酮的生物转化研究

首次以绿色木霉对5,6α-环氧-16-脱氢孕甾酮的生物转化进行了研究,得到了15β羟基化的多羟基甾体新化合物3β,5α,6β,15β-四羟基-16-孕甾烯酮。试验结果表明:以初始pH值6.5的马铃薯汁培养基进行菌种培养,在菌种生长40h后加入0.1%底物,发酵时间为4d,温度27℃,3β,5α,6β,15β-四羟基-16-孕甾烯酮的收率最高。     

两种贝壳杉烷型二萜2D－NMR研究

本文介绍了两种贝壳杉烷型二萜（３α，１６α，１７－三羟基贝壳杉烷Ⅰ和３α，１６α－二羟基贝壳杉烷－１７－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖甙Ⅱ）的二维核磁共振光谱（２Ｄ－ＮＭＲ）分析，通过采用高分辨核磁共振光谱（ＤＥＰＴ，￣１Ｈ－￣１Ｈｃｏｓｙ，￣１Ｈ－￣（１３）Ｃｃｏｓｙ）使一些相互掩盖的核磁共振信号得以确定。     

药用园林植物紫萼的化学成分

百合科玉簪属的紫萼 （Ｈｏｓｔａｖｅｎｔｒｉｃｏｓａ）常应用于园林造景、美化绿地,也是常用的室内观赏植物。作为一种药用植物,紫萼主要用于治疗吐血、崩漏、湿热带下、咽喉肿痛、胃痛、牙痛等。为全面了解和综合利用紫萼资源,笔者对其全草的化学成分进行了研究。运用 Ｄ１０１大孔树脂、ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ－２０和硅胶等柱层析及半制备 ＨＰＬＣ等分离手段,对其化学成分进行了分离纯化,根据波谱数据对其结构进行了鉴定。从紫萼７０％甲醇提取物中分离得到 ６个化合物,分别鉴定为 α－羟基香荚兰乙酮 （１）,７－羟基香豆素 （２）,反式对羟基桂皮酸 （３）,（２５Ｒ） －２α,３β－二羟基 －５α－螺甾 －９（１１） －烯 －１２－酮 （４）,（２５Ｒ） －２α,３β－二羟基 －５α－螺甾 －９（１１） －烯 －１２－酮 ３－Ｏ－ ｛Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基 － （１→２） －Ｏ－ ［β－Ｄ－吡喃木糖基 －（１→３）］ －Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基 － （１→４） －β－Ｄ－吡喃半乳糖苷｝ （５）和 （２５Ｒ） －３β－羟基 －５α－螺甾 －９（１１） －烯 －１２－酮 ３－Ｏ－ ｛Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基 － （１→２） －Ｏ－ ［β－Ｄ－吡喃木糖基 － （１→３）］ －Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基 － （１→４） －β－Ｄ－吡喃半乳糖苷｝ （６）。这些化合物均为首次从该种植物中分离得到。     

14α-羟基甾体衍生物的波谱学结构表征

利用总状毛霉对黄体酮进行生物转化得到14α-羟基-4-孕甾烯-3,20-二酮和7α,14α-二羟基-4-孕甾烯-3,20-二酮。利用IR、MS和2D-NMR实验技术（HMBC、HSQC、^1H-1H COSY）等波谱方法对生物转化产物的结构进行了详细研究,对14α-羟基甾体衍生物的^13C化学位移进行了归属。运用X-射线单晶衍射方法确定7α,14α-二羟基-4-孕甾烯-3,20-二酮的空间构型,并进行了晶体结构分析。     

总状毛霉对17α-羟基孕甾-4-烯-3,20-二肟的生物转化

为了获得具有较强生物学活性或结构新颖的羟基甾体肟衍生物,利用总状毛霉对合成的17α-羟基孕甾-4-烯-3,20-二肟进行转化研究。转化产物经柱层析分离纯化后鉴定为7α,17α-二羟基-20-肟-孕甾-4-烯-3-酮(3)和11α,17α-二羟基-20-肟-孕甾-4-烯-3-酮(4)。目前微生物转化甾体研究领域对于甾体肟的转化研究少见报道,研究结果为甾体肟衍生物的发展奠定了基础。     

猪孕酮酶免疫分析及释放激素对猪孕酮含量的影响

应用孕酮单克隆抗体（ＰＭｃＡｂ）和孕酮－辣根过氧化物酶（Ｐ－ＨＲＰ）通过微量板对猪血清孕酮进行酶免疫分析。结果表明：１：２．５×１０￣４浓度的ＰＭｃＡｂ和１：５×１０￣４浓度的Ｐ－ＨＲＰ之间具有较强的亲和力，母猪在发情配种前注射释放激素类似物（ＬＲＨ－Ａ＿３）能提高怀孕早期的孕酮含量，怀孕母猪在怀孕１５天时的孕酮含量是未孕猪的近２倍，分别为１７．２４ｎｇ／ｍＬ和９．５０８ｎｇ／ｍＬ。     

3β,7α,11α-三羟基-孕甾-5-烯-20-酮-20-肟的合成

利用毛霉516对孕甾烯醇酮进行生物转化,得到了两个转化产物。通过IR、MS、1HNMR、13CNMR和2DNMR等波谱方法检测化合物结构,确证其结构分别为3β,7α,11α-三羟基-孕甾-5-烯-20-酮(2)和3β,7α,-二羟基-孕甾-5-烯-20-酮(3)。对生物转化产物(2)进行化学修饰,得到一个新化合物,通过波谱学方法,确证其结构为3β,7α,11α-三羟基-孕甾-5-烯-20-酮-20-肟(4)。     

3β,5α,6β,15β-四羟基-16-孕甾烯酮衍生物的合成与波谱分析

利用氧化还原反应,对生物转化的3β,5α,6β,15β-四羟基-16-孕甾烯酮进行了化学修饰,得到了四个新的化合物,以波谱方法进行结构表征。同时对3β,5α,15β-三羟基-16-孕甾烯-6,20-二酮的单晶进行了结构分析。     

3β,5α,6β-三羟基-16-孕甾烯酮的生物合成及晶体结构分析

利用绿色木霉对5,6α-环氧-3β-羟基-5α-孕甾-16-稀-20-酮进行生物转化得到3β,5α,6β-三羟基孕甾-16-烯-20-酮和3β,5α,6β,15β-四羟基孕甾-16-稀-20-酮。利用IR、MS和2D-NMR实验技术等波谱方法对生物转化产物的结构进行了详细研究,运用X-射线单晶衍射方法确定3β,5α,6β-三羟基孕甾-16-烯-20-酮的空间构型,并进行了晶体结构分析。     

一株滇重楼内生真菌的分类鉴定及转化孕酮的研究

本文首先结合形态学特征和ITS—r DNA序列分析,鉴定菌株YNCA1219为稻恶苗霉(Fusarium moniliforme Sheld.)。以菌株YNCA1219对孕酮进行生物转化研究,分离得2个转化产物,通过核磁共振(NMR)、质谱(MS)及红外(FTIR)等手段对孕酮转化产物进行结构鉴定,其结构为11α-羟基孕酮(Ⅰ)和11α,15β-二羟基孕酮(Ⅱ)。结果表明菌株YNCA1219转化孕酮具有一定的专一性。     

乌拉尔甘草叶中黄酮类化学成分研究

采用聚酰胺柱层析法，用不同浓度乙醇洗脱，自乌拉尔甘草（ＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｕｒａｌｅｎｓｉｓＦｉｓｃｈ．）叶中分离得到１０余种化合物，就其含量较高的组分Ⅳ和组分Ⅴ，经光谱（ＵＶ、ＦＢ—ＭＳ、′Ｈ＿ＮＭＲ）分析，分别鉴定为５，７－二羟基－３′，４′－二甲氧基二氢黄酮醇－３－Ｏ－阿拉伯糖－鼠李糖甙（Ⅳ）和３，４′，５－三羟基－３′－甲氧基二氢黄酮醇－７－Ｏ－葡萄糖甙（Ⅴ），是两种新化合物     

鸡促性腺激素释放激素对鸡卵泡颗粒细胞孕酮分泌的影响

用不同剂量鸡促性腺激素释放激素（ｃＧｎＲＨ－Ｉ和ｃＧｎＲＨ－Ⅱ）单独或与鸡ＬＨ（ｃＬＨ）协同处理短期（３ｈ）培养的鸡卵泡颗粒细胞，以观察鸡ＧｎＲＨ对颗粒细胞孕酮分泌的影响。结果表明：随着卵泡的成熟，孕酮分泌量逐渐增加，到Ｆ１卵泡时增加最明显；在本实验所用细胞孕酮分泌都有明显促进作用，ＧｎＲＨ－Ⅱ使Ｆ２至Ｆ４卵泡颗粒细胞孕酮分泌量有增加，而对Ｆ３卵泡颗粒细胞作用量明显，用鸡ＧｎＲＨ－Ⅱ的促进作用更明     

17α-羟基孕酮对性早熟中华绒螯蟹主要体征和卵巢发育影响的初步观察

通过观察性腺指数、性腺颜色和卵母细胞长径的变化来评价17α-羟基孕酮对性早熟中华绒螯蟹卵巢发育的影响.分别用10-5mg/g和10-1mg/g剂量17α-羟基孕酮注射性腺发育即将启动的性早熟中华绒螯蟹(九月初),共注射2次,间隔时间为15 d.研究发现:17α-羟基孕酮对性早熟中华绒螯蟹外部特征(壳长和壳宽)没有明显影响,但较高剂量组10-1mg/g剂量组能明显促进性早熟中华绒螯蟹卵巢的早期发育(15 d),卵巢指数和卵母细胞长径均比对照组有显著性增高(P<0.05).本实验结果表明,外源给予孕酮能促进性早熟中华绒螯蟹性腺的早期发育.     

17α-羟基孕酮对性早熟中华绒螯蟹主要体征和卵巢发育影响的初步观察

通过观察性腺指数、性腺颜色和卵母细胞长径的变化来评价17α-羟基孕酮对性早熟中华绒螯蟹卵巢发育的影响.分别用10-5mg/g和10-1mg/g剂量17α-羟基孕酮注射性腺发育即将启动的性早熟中华绒螯蟹(九月初),共注射2次,间隔时间为15 d.研究发现:17α-羟基孕酮对性早熟中华绒螯蟹外部特征(壳长和壳宽)没有明显影响,但较高剂量组10-1mg/g剂量组能明显促进性早熟中华绒螯蟹卵巢的早期发育(15 d),卵巢指数和卵母细胞长径均比对照组有显著性增高(P<0.05).本实验结果表明,外源给予孕酮能促进性早熟中华绒螯蟹性腺的早期发育.     

林生毛霉对孕甾烯醇酮的生物转化研究

利用林生毛霉对孕甾烯醇酮进行生物转化,得到了三个转化产物。经波谱学方法(IR、MS和2D NMR)分别鉴定为3β,7α-二羟基孕甾-5-烯-20-酮(2)、3β,7α,11α-三羟基孕甾-5-烯-20-酮(3)和3β,7α,9α-三羟基孕甾-5-烯-20-酮(4)。通过2D NMR技术对产物13C NMR数据进行了全归属,详细地解析了化合物4的结构。     

孕酮辣根过氧化物酶标记物的制备和鉴定

孕酮辣根过氧化物酶标记物既可用于孕酮的酶免疫测定(EIA),又可用于激素受体的定量或组织学定位分析。据报道,将类固醇激素分子中引入一个羧基,在碳化二亚胺或氯甲酸异丁酯作用下生成活化酯衍生物,然后与蛋白质分子中的游离氨基缩合成共价的酰胺键,可制备类固醇激素的抗原或酶标记物。基于这一原理,本研究试图用11α-羟孕酮半琥珀酸酯通     

苦丁茶香气的化学组成

采用改进的ＳＤＥ装置萃取后应用气相色谱和色－质联用技术,分析了苦丁茶香气的化学提成,结果在苦丁茶精油的１４６个色谱峰中鉴定出９１种化学成分,占该精油总量的８５．９３％,含量较高的十六碳酸,９,１２－十八碳二烯酸,１,２－苯二甲酸二异辛酯,１,２－苯二甲酸双（１－甲基）庚酯,邻苯二甲酸二辛酯,１－甲基－４－（１－甲基乙烯基）环己烯,丁基－羟基甲苯和２－香豆酮。     

从重组人Bcl-2质粒中制备pBluescript Ⅱ KS(-)载体

目的：从重组人Ｂｃｌ－２质粒中制备对基因重组和ＤＮＡ测序等有用的ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体。方法：先将重组人Ｂｃ１－２质粒转化ＤＨ５α菌株,小规模制备此质粒ＤＮＡ,然后从低熔点琼脂糖凝胶中回收其中用ＥｃｏＲⅠ酶切的线性ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体,用Ｔ４ＤＮＡ连接酶催化连接并再次转化ＤＨ５α细菌,并用限制酶切鉴定,最后进行冻存和大量制备及纯化。结果：限制酶切分析证明两次转化的细菌分别是含重组人Ｂｃｌ－２质粒和ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体的工程菌。实验还大量制备了这两种质粒或载体ＤＮＡ,并用聚乙二醇沉淀法进行了纯化。结论：利用分子生物学技术成功地从重组人Ｂｃｌ－２质粒制备出ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体。     

落叶松林地土壤4种酚酸对水曲柳幼苗生长的影响1）

通过测定不同季节水曲柳－落叶松混交林4种落叶松根际和非根际土的酚酸（2,4－二羟基苯甲酸、7－羟基香豆素、阿魏酸和松香酸）的质量分数,研究了酚酸对水曲柳幼苗生长、根系活力和菌根侵染率的影响。结果表明：（1）施加落叶松根际土的处理中,7－羟基香豆素＋阿魏酸组合的处理对水曲柳幼苗生物量及根系活力均起促进作用,但非根际土中的7－羟基香豆素＋阿魏酸组合处理却产生抑制作用。（2）根际土与非根际土中的2,4－二羟基苯甲酸＋松香酸、7－羟基香豆素＋松香酸、7－羟基香豆素＋阿魏酸＋松香酸组合均显著抑制水曲柳幼苗生物量;2,4－二羟基苯甲酸＋7－羟基香豆素、2,4－二羟基苯甲酸＋7－羟基香豆素＋阿魏酸组合均显著抑制水曲柳幼苗根系活力,而2,4－二羟基苯甲酸＋阿魏酸组合却显著促进根系活力。（3）根际土与非根际土中的2,4－二羟基苯甲酸＋7－羟基香豆素＋阿魏酸均促进菌根侵染率;根际土的2,4－二羟基苯甲酸＋7－羟基香豆素促进菌根侵染率,而非根际土的2,4－二羟基苯甲酸＋7－羟基香豆素却抑制菌根侵染率。