抗除草剂转基因油菜向杂草诸葛菜的潜在基因漂移

以抗除草剂草甘膦和草丁膦转基因油菜为父本 ,诸葛菜为母本 ,在人工授粉条件下研究抗性基因向诸葛菜的潜在基因漂移。采用荧光显微镜观察转基因油菜花粉在诸葛菜柱头上的萌发生长情况 ,并与诸葛菜自花授粉的情况进行比较。结果显示 2种转基因油菜花粉在诸葛菜柱头上的萌发生长情况类似。花粉粘合的数量比自交时显著减少 ,出现粘合延迟现象 ;花粉在柱头上不能正常萌发生长 ,有的呈现明显的畸形 ,花粉管不能穿过乳突细胞 ,更不能进入花柱和胚囊发生受精 ,这些结果表明两者的亲和性较差。授转基因油菜的花粉后诸葛菜不能结实也进一步证明了两者的亲和性较差。上述结果表明抗除草剂转基因油菜的抗性基因向诸葛菜漂移的可能性较小。     

油菜诸葛菜属植物杂交亲和性研究

以雄不育系甘蓝型油菜Ad-2为母本,诸葛菜、湖北诸葛菜和铺散诸葛菜为父本,进行属间杂交结果表明,不同生态型诸葛菜与母本的亲和性基本一致。湖北诸葛菜与甘蓝型油菜杂交可能存在受精前障碍,铺散诸葛菜与甘蓝型油菜有较弱的亲和性,杂交种与其亲本与甘蓝型油菜的亲和性略有差别,父本的基因型对远缘杂交花粉萌发和花粉管的生长有一定影响。远缘杂交中可能存在受精延迟现象。蕾期授粉是克服属间杂交不亲和性的有效方法。     

冬季遮阳对诸葛菜生长发育的影响

为探讨冬季遮阳对诸葛菜生长发育的影响,以野生诸葛菜为材料,分析测定遮阳25%、50%和75%时植株的生长发育情况。结果表明,在不遮阳、25%和50%遮阳条件下,诸葛菜的叶片数、叶面积、叶片叶绿素含量以及叶片丙二醛含量都与不遮阳对照无显著差别;在遮阳75%条件下,诸葛菜叶片的叶绿素含量和丙二醛含量明显低于不遮阳对照。因此,遮阳25%和50%对诸葛菜冬季的生长发育没有显著影响,在遮阳75%时,诸葛菜的正常生理功能降低,出现逆境胁迫现象,不利于诸葛菜冬季的正常生长。     

诸葛菜与芸薹属间花粉与柱头相互作用的研究

用苯胺蓝染色法，在荧光显微镜下观察了诸葛菜的花粉在甘蓝型油菜、白菜型油菜和芥菜型油菜的柱头上的黏附、萌发及萌发花粉管在柱头和花柱中的生长、伸长情况．结果表明，诸葛菜花粉很难在3种类型油菜的柱头上黏附和萌发，同时在花粉黏附的部位及其附近柱头乳突细胞内产生大量胼胝质；萌发的少量花粉粒，其花粉管生长迟缓，且发生严重扭曲、肿胀等畸形现象，从而导致其进入柱头也比较困难；少数花粉管能穿过柱头进入花柱，但时常有异常胼胝质沉积在花粉管中．另外，诸葛菜花粉与3种类型的油菜柱头的相互作用不同，即亲和力不同，表明诸葛菜与芸薹属杂交，存在严重的生殖隔离障碍，而且主要是受精前障碍．     

诸葛菜的生长特性

经栽培试验观察，诸葛菜花期早，营养生长和生殖生长交替时间长，分枝数量是构成产量的主要因素。生育周期划分为出苗期，苗期，蕾苔期，开花期和角果成熟期。试验证明诸葛菜在本地栽培是可行的。     

诸葛菜的驯化栽培研究I.栽培措施对诸葛菜菌核病发生的影响

将诸葛菜作为油料作物在成都地区进行了驯化栽培,就栽培措施对诸葛菜菌核病发生的影响进行了分析研究。结果表明,播种期对诸葛菜菌核病的发生影响极为显著,三个播期间诸葛菜菌核病病情指数差民均达极显著水平,播种越早,发病越严重。密度、施氮量对诸葛菜菌核病发病影响不显著,但播期、密度和施氮量之间的交互作用显著。     

诸葛菜种子质量研究和不同浓度GA3及盐胁迫对萌发的影响

为推广诸葛菜在喀斯特山区的种植,通过对诸葛菜种子的净度、千粒重、含水量、发芽率、相对发芽率等指标的测定与统计分析,对诸葛菜种子质量进行了评价检验。同时采用培养皿发芽法研究GA_3、CaCl_2、NaCl处理对诸葛菜种子萌发的影响。结果表明:诸葛菜种子的发芽率随GA_3浓度升高而升高,发芽率和相对发芽率随CaCl_2、NaCl浓度的升高而降低且差异显著。各浓度中,CaCl_2胁迫处理的诸葛菜发芽率和相对发芽率高于NaCl处理。     

诸葛菜的研究现状与开发应用前景

介绍了诸葛菜的农艺性状、植株营养成分含量、种子含油量等特点以及诸葛菜杂交、转基因方面的研究和在绿化环境中的应用,并概述了诸葛菜的研究现状及其开发利用前景。     

诸葛菜种子抗真菌蛋白的提取及其抑菌活性

通过柱层析技术从诸葛菜种子中分离抗真菌蛋白,并采用纸片扩散法、琼脂平板稀释法和凹玻片法对抗真菌蛋白的抑菌活性和稳定性进行研究.结果表明:从诸葛菜种子中分离出一种分子质量约为10 ku的抗真菌蛋白,命名为Zp;经QE质谱鉴定,Zp蛋白可能是诸葛菜种子中的一种防御素蛋白.Zp蛋白对11种植物病原真菌均具有较强抑制作用,其中对尖孢镰刀菌生长的半抑制浓度(IC_(50))为54.36μg·mL~(-1),对其孢子萌发的IC_(50)为15.97μg·mL~(-1).Zp蛋白的抑菌活性在温度0～100℃和pH 1～14的范围内稳定,其对有机溶剂(15%甲醇、乙醇、异丙醇、乙醚和丙酮)和金属阳离子(50～250 mmol·L~(-1) Mg~(2+)、K~+、Mn~(2+)和Ca~(2+))也具有较强的耐受力.     

油菜品种奥罗与诸葛菜杂交后代株系的选育

诸葛菜作为一种新油料植物资源，具有油份品质优良和农艺性状较好的特点。本试验通过奥罗与诸葛菜的远缘杂交，希望把诸葛菜的部分优良性状转移到油菜中去，以获得优质、高产、抗病的油菜新品种。经检验，奥罗与诸葛菜杂并Ｆ３代种子的油份中，营养价值高的脂肪酸如的含量较高，而营养价值低的脂肪酸如的含量较低。     

安吉野生诸葛菜的主要性状及利用探讨

据调查研究,安吉山区发现少量野生诸葛菜群落,为促进安吉野生诸葛菜产业发展,介绍了其主要性状及利用价值,并总结了其保护与开发措施,以供参考。     

微波辅助萃取诸葛菜中的总黄酮研究

采用微波辅助萃取乙醇浸提法从诸葛菜中提取黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用紫外分光光度法测定其含量。结果表明,诸葛菜中总黄酮含量为0.380 7 mg/ml,回收率为97.79%,其纯度和产率均较高。该方法采用全物理过程,无任何污染,是提取诸葛菜中黄酮类物质的有效途径。     

诸葛菜试管苗的光合特性及其对CO2浓度升高的响应

用Li-840 CO2/H2O气体分析仪对诸葛菜试管苗的光合特性及其对CO2升高的响应进行研究。结果表明:诸葛菜试管苗的光合速率日变化不大,午间没有明显的“午休”现象。在不同光源下实际光合速率的比较,在相同的光强下LED-红光下的试管苗的光合速率最高,LED-蓝光次之。正常大气条件下,LED-蓝光在70μmol/(m2.s)光强下的诸葛菜试管苗的CO2饱和点为5 058μmol/mol,CO2补偿点为266μmol/mol。     

诸葛菜不同发育时期种子脂肪酸成分分析

诸葛菜是一种综合利用价值极高的新型油料作物,其种子中积累了丰富的不饱和脂肪酸。为了研究诸葛菜种子油的综合价值,利用气相色谱(GC)测定不同发育时期种子的脂肪酸成分及含量,并将其与几种常见十字花科植物种子脂肪酸成分和含量进行比较。结果表明,诸葛菜种子发育的早、中、晚3个时期脂肪酸组成结构差别不大,均是不饱和脂肪酸含量远大于饱和脂肪酸含量,其中,不饱和脂肪酸中含量最多的是亚油酸,饱和脂肪酸中棕榈酸含量最多;其组成结构与芥菜等5种十字花科植物的脂肪酸组成结构一致,且其总脂肪酸含量随着发育时间的延长而增长。研究结果可为提高诸葛菜种子油的利用率及综合利用价值提供理论依据。     

甘蓝型油菜与诸葛菜的属间新杂种

从甘蓝型油菜与诸葛菜属间杂种自交后代中，鉴定出一个新杂种植株。该新杂种在表型上为亲本中间型，且雄性不育。将其与甘蓝型油菜回交时，通过幼胚培养获得８个回交第一代植株。所有回交后代植株均可育，在花粉母细胞中形成２２个二价体。来自诸葛菜的６条染色体可被全部丢失或部分进入末期核，也可在后期Ⅰ运动至细胞一极。首次获得的新材料可用于培育甘蓝型油菜与诸葛菜的附加系，并为研究诸葛菜的染色体组结构提供新信息。     

诸葛菜的细胞遗传学研究

本文报导诸葛菜的细胞遗传学研究结果。     

诸葛菜中黄酮类化合物提取方法和抗氧化性研究

研究诸葛菜中黄酮类化合物的提取方法及其抗氧化性。用3种方法提取诸葛菜中的黄酮类化合物,比较3种方法的提取效率及含量,从而得到最佳的提取方法,同时对诸葛菜中黄酮类化合物抗氧化性进行了研究。在3种提取方法中,微波辅助70%乙醇浸提法的提取物颜色最浅,总黄酮量最大,为86.30 mg/g;总黄酮提取率最高,为16.8%。它的实验条件为:固液比1 g∶10 ml,乙醇浓度70%,微波功率600 W,时间4 min。3种方法的提取物对猪油的抗氧化能力为:微波辅助70%乙醇浸提法>70%乙醇冷浸法>水浸提法。微波辅助萃取70%乙醇浸提法是较好的提取方法。诸葛菜黄酮对猪油具有较强的抗氧化作用,并与黄酮溶液浓度具有剂量效应关系。     

诸葛菜的驯化栽培研究Ⅱ.栽培措施对诸葛菜籽粒产量的影响

诸葛菜(Orychophragmus violaceus)是野生十字花科油料植物,主产于中国,其种子油含亚油酸53.17%,棕榈酸14.31%,芥酸0.94%［1,2］,而甘蓝型油菜种子油含亚油酸17.40%,芥酸26.75%［3］。亚油酸又称维生素E,是人体必需脂肪酸之一［4］。根据李义文等的结果［5］,诸葛菜适宜在四川西北部种植,因此我们在温江进行了诸葛菜的栽培试验,以探讨诸葛菜的适宜栽培措施。 1 材料和方法 诸葛菜L2群体由四川大学植物遗传研究室提供。1995～1996年在成都温江进行诸葛菜驯化栽培,设3种密度(120 000株／ha,150 000株／ha,180 000株／ha);3种播期(10月8 日、18日、28日),3种施氮水平(尿素225kg/ha,300kg/ha,375kg/ha)。正交设计,3次重复,随机区组,共9种处理,27个小区,每小区20.01m2。正交设计见表1。1996～1997年重复1次,另外根据1995～1996年试验结果于10月18日播种进行高密度试验,设4种密度(180 000株／ha,225 000株／ha,270 000株／ha,315 000株／ha),施尿素225kg/ha。诸葛菜成熟时每处理考种2个重复,每重复考种10株,考种标准参考刘后利［5］。各小区诸葛菜种子单独收获计产。将正交试验和高密度试验结果进行方差分析,分析方法参考荣廷昭的［6］     

重金属对油菜·诸葛菜的碳酸酐酶抑制作用

用铜、铅和钴3种重金属处理油菜和诸葛菜叶片,研究了重金属对油菜、诸葛菜的碳酸酐酶的抑制作用。结果表明:3种重金属对植物碳酸酐酶活性都具有一定的阻碍作用,但抑制常数不同,其中铜最小,铅次之,钴最大;且植物碳酸酐酶比动物碳酸酐酶对重金属敏感,这对优化自然界的食物链具有重要意义。     

甘蓝型油菜和诸葛菜属间杂种高世代材料形态学和细胞学分析

[目的]进一步揭示甘蓝型油菜和诸葛菜属间远缘杂种高世代(F8～F10)材料的遗传变异规律。[方法]以甘蓝型油菜和诸葛菜属间杂种高世代群体为材料,对甘蓝型油菜和诸葛菜远缘杂交后代表型偏白菜型油菜变异群体进行形态、细胞学方面的研究。[结果]形态学分析表明,杂种后代叶型、叶色、株型、早花性状偏向白菜型油菜,而二级分枝数、角果长度和千粒重与甘蓝型油菜Oro更为接近;细胞学研究表明,这些杂种高世代材料细胞中已不含诸葛菜染色体,多数植株都为少于38条染色体的亚倍体;与白菜型油菜杂种的减数分裂配对结果显示,这些亚倍体后代细胞中丢失的可能是来自C基因组的染色体,随着世代的增加,体细胞染色体数目都有向甘蓝型油菜2n=38升高和回归的趋势。[结论]该研究为揭示杂种后代亚倍体中丢失染色体的来源及形态学改变的原因奠定基础。