用茎尖观察葡萄染色体

我们以葡萄茎尖为试材,卡宝品红染色,采用常规压片对葡萄染色体进行了观察。认为茎尖取材容易方便,只要在适于葡萄生长的条件下切取茎尖制片,分裂相多,效果很好。现将其实验方法介绍如下。     

不同制片方法对草莓染色体观察效果的影响

通过在草莓根尖、茎尖和嫩叶等不同部位进行取材,然后经过不同的制片过程,进行了染色体数目观察方法的研究。结果表明:取材部位以根尖效果最好;不同的制片方法中,以用对二氯苯饱和水溶液进行预处理2~3h(小时),改良的卡诺氏固定液固定2h(小时),1mol/L的HCl于60℃下解离10min(分钟),并以改良的卡宝品红染色效果较好。同时探讨了影响草莓染色体观察的因素。     

小花吊兰染色体制片优化与核型分析

以小花吊兰根尖为试材,采用常规压片法制备染色体玻片标本,研究了取材时间、预处理方法、解离方法以及染色时间对小花吊兰根尖细胞染色体制片效果的影响,优化制片技术并进行核型分析,以期为小花吊兰建立更加稳定、明晰的品种鉴定方法。结果表明:于8:00取小花吊兰根尖,0.05%秋水仙素预处理3h,卡诺氏液固定,1.0mol/L盐酸60℃下解离15min,改良卡宝品红染色15min,所得小花吊兰染色体制片效果较好。对小花吊兰体细胞染色体数目进行统计,核型分析表明,细胞染色体数为2n=2x=16,中部着丝粒染色体(m)为3对,近中部着丝粒染色体(sm)为4对,近端部着丝粒染色体(st)1对,核型公式为2n=2x=16=6m+8sm+2st,核型属2A型,核型不对称系数为64.39%。     

红肉火龙果气生根染色体制片优化及核型分析

以红肉火龙果的气生根为试材,研究气生根长度、采样时间、预处理方法、解离时间和染色方法等对红肉火龙果气生根根尖细胞染色体制片效果的影响,以优化的制片技术制片并进行核型分析。结果表明:10:30时段取长度5mm以下的幼嫩气生根,用0.1%秋水仙素常温预处理2h,应用双低渗法使染色体分散,常温下1mol/L HCl解离50min或60℃下解离20min,20%改良苯酚-品红染色液染色20min,可以得到最佳的制片效果,用中性树脂制成永久装片。染色体核型分析表明,红肉火龙果的染色体数目为11对,最长染色体/最短染色体为1.63,核型公式为2n=2x=22=22m,核型不对称系数为54.29%,核型属1A类型。     

紫叶小檗茎尖染色体制片技术初探

通过对压片法预处理环节的多次比较试验后认为,对0.5cm长的紫叶小檗茎尖预处理3.5~4.0h、固定4.0h,解离20min后,可以得到细胞染色体处于分裂中期的切片,并首次拍摄得到紫叶小檗染色体照片。     

大理长叶兰染色体制片技术研究

大理长叶兰花型优美，具有很高的观赏价值和经济价值，市场前景广阔。为给长叶兰的分类鉴定、细胞学和遗传学研究提供借鉴，以大理长叶兰组培生根苗的根尖为材料，通过常规压片法对其染色体制片过程中预处理、固定、解离、染色、压片的各环节进行研究。结果表明，长叶兰根尖在室温下用0.004mol/L 8-羟基喹啉溶液预处理6h后，放入预冷的卡诺固定液（冰醋酸∶无水乙醇=3∶1）中，在0℃下处理30min，经37%HCl∶45%冰醋酸=1∶1的解离液处理5min，用卡宝品红染色15min，压片时复染5min，能得到良好的镜检效果，并且确定长叶兰体细胞的染色体数目为2n=2x=40。     

射干染色体制片技术的探索

以射干种子为试验材料,比较不同预处理液、预处理时间、解离方法、解离时间对射干根尖细胞中期分裂相、染色体收缩程度和分散度的影响。结果表明,用0.1%秋水仙素溶液在室温下处理根尖8 h,混合酶液(2%纤维素酶和0.5%果胶酶)37℃酶解60 min,压片法制片的染色体分散性好,背景干净,着丝点比较清晰,效果最佳;射干的染色体数目为2n=32。     

巨大口蘑菌丝染色体分离制片方法初探

研究各种处理对巨大口蘑菌丝染色体制片的影响。方法:以菌丝为试验材料,0.075 mol/L的KCl和0.6 mol/L的山梨醇为洗涤剂,考察不同酶解时间与不同秋水仙素处理时间对巨大口蘑菌丝染色体制片效果的影响。结果:用KCl和山梨醇洗涤处理的巨大口蘑菌丝,在25℃下酶解1~4 h,酶解后用秋水仙素处理10~60 min都能使巨大口蘑菌丝染色体解离出来;酶解4 h,秋水仙素处理60 min,菌丝染色体分散好,形态清晰,染色效果好。     

无籽刺梨染色体制片技术及染色体数目研究

以无籽刺梨组培苗根尖为材料,探讨其染色体制片技术。结果表明,无籽刺梨根尖在常温下用8-羟基喹啉溶液0.003mol/L预处理6~8h或8-羟基喹啉溶液0.004mol/L预处理4~6h后,在预冷的卡诺固定液(冰醋酸∶无水乙醇=3∶1中)0℃下处理15min,经95%乙醇∶15%HCl=1∶1的解离液处理6min或无水乙醇∶(36%~38%)HCl=1∶1处理5min,然后用卡宝品红染色15或20min,其镜检效果较佳;无籽刺梨的染色体数目为2n=2X=14。无籽刺梨染色体制片技术研究及其染色体数目的确定对其遗传改良工作有着重要的意义。     

山药染色体制片技术的优化

山药(Dioscorea opposite Thunb.)为药食兼用的常见蔬菜,而其染色体的研究相对滞后。以根尖为试验材料,分别考察不同的取材方式、预处理试剂、预处理方法以及解离方式对山药染色体制片效果的影响,筛选优化制片的关键技术,以期为今后细胞学研究打下基础。结果表明:室内基质培养块茎(或零余子)的方式获取的根尖中中期分裂相个数最多,且染色体分散良好的中期分裂相占的比例最高;适合于山药核型分析的预处理试剂为8-羟基喹啉同秋水仙素的混合液、8-羟基喹啉溶液,其中8-羟基喹啉溶液预处理后染色体缢痕更清晰,为最好的预处理试剂;预处理方法以低温4℃下2 mmol/L的8-羟基喹啉预处理2 h最好;采用酸解加酶解的方式解离效果明显好于单用酸解的方式,并且得到的制片中染色体形态清晰,96.3%的中期细胞的染色体分布于同一个水平面上。     

两种五加科园林植物染色体制片优化与核型分析

以五加科的掌叶梁王茶和八角金盘未展开幼叶叶尖为试材,采用常规压片法制片,研究了优化染色体制片条件和核型分析,以期为供试物种的育种工作开展提供依据。结果表明:掌叶梁王茶的最佳预处液为0.002 mol·L~(-1) 8-羟基喹啉和0.04%放线菌酮混合液,八角金盘则为0.001 mol·L~(-1) 8-羟基喹啉。2个物种其余的最佳制片方法相同,具体为09:00—09:30取样、V_(无水乙醇):V_(冰醋酸)=3:1卡诺固定液处理12～24 h、V_(无水乙醇):V_(浓盐酸)=1:1解离液处理13 min、改良苯酚品红染色液处理10 min。掌叶梁王茶染色体核型为2n=48=28m+18sm+2st,不对称系数61%,2B核型;八角金盘为2n=48=34m+14sm,不对称系数60%,2A核型。与已报道的五加科植物核型进行比较,2个物种进化程度不高,研究结果丰富了对供试物种遗传组成的认知。     

二乔刺槐染色体核型分析及有丝分裂过程观察

利用茎尖压片法对二乔刺槐染色体的数目进行了统计,并进行了核型分析,观察了细胞有丝分裂过程.结果表明:二乔刺槐单倍体染色体数为2n=22,核型公式为2n=2x=22=4m+10sm+2st+6t;属于"3B"型;核型不对称系数为72.14%.二乔刺槐有丝分裂前期染色体逐渐浓缩变粗,中期染色体清晰可见,后期染色单体发生分离并向相反的两极移动,末期形成新的子核.     

裕民无刺红花染色体制片优化及核型分析

比较了不同预处理和解离方法对裕民无刺红花染色体制片的影响,观察500个根尖细胞,比较不同部位中期细胞和适宜核型分析的中期细胞所占比例。结果表明:用0.002 mol/L8-羟基喹啉与0.1%秋水仙素按1∶1混合8 h,1 mol/L盐酸常温解离6 min制片所得染色体分散效果最佳。核型公式为2n=2X=24 m,核型不对称系数(As.k%)为58.25%,属于1 B类型,核型对称性程度高,表明裕民无刺红花在进化中处于比较原始类型。     

李属植物幼叶染色体观察方法初报

<正> 一、引言 目前,国内外从事果树染色体研究者日益增多。以往观察果树染色体多用常规压片——铁矾苏木精染色法和Giemsa染色法。虽然铁矾苏木精染色法染色效果好,但取材须用根尖,局限性较大。同时由于细胞壁存在,原生质不易充分铺开,染色体易重叠,     

辣椒根尖细胞微核制片方法的探讨

为了建立辣椒根尖微核技术,对辣椒种子萌发条件和辣椒根尖解离时间等环节进行了探索。结果表明:52℃和室温浸泡利于辣椒种子萌发,可以得到状态良好的根尖材料;在60℃1N HCl中解离7 min,细胞分散和染色效果较好;利用辣椒根尖细胞可以获得理想的微核制片。     

利用几种园艺作物卷须制片鉴定染色体数目的研究

 以几种园艺作物的卷须为材料研究染色体制片方法, 发现卷须制片预处理和盐酸解离等环节的要求比根尖制片严格。利用所确立的卷须制片程序, 验证了Cucumis属种间杂交新种Cucumis×hytivus Chen & Kirkbride 的体细胞染色体数为2n = 38 , 表明在根尖不易获取或材料珍贵稀少的情况下, 卷须制片法是研究有卷须类植物染色体数目的有效方法。     

一种高效稳定的甘蓝染色体制片新方法

介绍一种高效稳定的甘蓝根尖染色体制片新方法,该方法结合传统的压片法和去壁低渗法优点,制片取得了良好的结果:染色体中期分裂相多,染色体分散良好,形态特征清晰,背景干净.制片可应用于染色体核型分析、分带、荧光原位杂交,以及显微切割等细胞遗传学操作.     

柑橘染色体制片技术及其在遗传背景研究中的应用

细胞遗传学的建立和发展，是以染色体制片技术的创新和应用为先导的(李懋学，1996)，Belling(1921)创用的乙酸洋红染色压片法，带动了以研究染色体数目、结构、行为与遗传变异的关系的细胞遗传学和细胞分类学的发展。染色体是基因的载体，染色体的数目、形态和结构，决定着细胞减数分裂中染色体的配对行为；配对行为的正常与否，决定着植物大小孢子育性的高低。因此，染色体的结构和行为支配着植物的生殖过程和繁育行为，研究染色体的数目、结构以及细胞学行为，对于了解植物的遗传背景具有重要的意义。     

菊花茎尖玻璃化法超低温保存技术研究

以菊花品种"神马"为试材,采用单因素逐级优化试验设计方法,研究了蔗糖浓度、预培养时间、装载时间、玻璃化处理时间、茎尖大小以及冻存时间对茎尖存活率的影响。结果表明:菊花茎尖玻璃化超低温长期保存最佳处理组合为预培养蔗糖浓度0.25mol/L,预培养时间3d,装载处理温度25℃、40min,玻璃化处理温度0℃、60min,菊花茎尖大小1.5~2.0mm。采用此体系保存菊花茎尖180d后,经卸载及恢复培养,存活率可达71.33%。     

大蒜离体快繁及脱毒

利用0.2—0.9mm的茎尖离体培养获得了‘紫皮’和‘白皮’大蒜的无病毒苗。无病毒苗移植大田可100％存活。茎尖培养以补加 2mg/l BA和0.6mg/l NAA的MS培养基为最佳。‘紫皮’蒜的繁殖效率可达600/200天,‘白皮’蒜为524/200天,都较常规繁殖高。大蒜茎尖再生植株经形态比较观察和染色体压片检查未发现异常现象,证明其遗传性稳定。