闽粤栲种子和离体胚超低温保存效果研究

通过对闽粤栲种子和离体胚超低温（－１９６℃）保存后发芽率、电导率和脱氢酶活性的分析,对其长期保存的可行性进行研究。结果表明：含水量是影响闽粤规律性中子离体胚超低温保存的重要因素,超低温保存应进行适度脱水。当无防冻剂预处理,１５％ＭＣ＋ＭＦ－ＱＴ组合中,种子发芽率最高,膜伤害最小。与种子相比,用离体胚作为超低温保存材料效果要好,其超低温保存后脱氢酶活性基本上能够维持超低温保存前的水平,最佳组合为１５％ＭＣ＋ＭＦ－ＳＴ,若能够辅以防冻剂预处理,则超低温保存效果更佳,最佳组合为１５％ＭＣ＋ＱＦ－ＱＴ＋１５％二甲亚砜＋１０％蔗糖＋１０％聚乙二醇。     

LN2处理板栗种子和离体胚保存的效果分析

通过对板栗种子超低温保存前后种子发芽率和脱水耐性,以及其离体胚的脯氨酸含量和丙二醛含量的测定分析,来研究板栗种子的超低温保存技术,结果表明：含水量水平是影响板栗种子发芽率以及超低温保存效果的重要因素,超低温保存时板栗种子和离体胚应进行适度脱水,超低温保存宜采用20％～25％含水量范围;采取适当脱水方式和含水量水平,能够较好地保持板栗种子的发芽率。适当的超低温保存因素的组合有利于板栗种子活力的维持、离体胚脯氨酸的诱导和减少丙二醛含量的积累。     

超低温保存对苦槠种子和离体胚脱氢酶活性的影响

将苦槠种子、离体胚及离体胚防冻剂处理后用液氮(LN2)进行超低温保存,测定种胚内三苯基甲月s质量浓度,研究其超低温保存效果。结果表明:苦槠离体胚防冻剂处理的三苯基甲月s质量浓度最高,脱氢酶活性最大,其次是离体胚,最小的是种子。3种保存材料的保存效果均受含水量水平显著影响,而当离体胚含水量小于10%时,冷解冻方式对LN2保存效果不明显。对种子而言,12%-15%含水量是适宜的保存含水量,采用缓冻快解,三苯基甲月s质量浓度高,分别是24.93、27.43μg.mL-1;对离体胚而言,10%-15%的含水量是适宜的,但12%含水量水平保存效果最好。添加防冻剂处理后,15%-20%含水量离体胚的三苯基甲月s质量浓度最高,分别达36.98、31.58μg.mL-1;防冻剂在LN2保存过程中起到了明显的保护作用,用10%二甲亚砜处理效果最好。     

LN_2保存处理后苦槠种子的膜透性

研究了苦槠种子和离体胚在超低温保存过程中含水量、冷冻方式、解冻方式 ,以及离体胚冰冻保护剂对电导率的影响 .结果表明 :含水量是超低温保存成功的关键 ,适度脱水可大幅度降低苦槠种子和离体胚超低温保存过程中的质膜伤害 ;随着含水量的降低 ,其电导率的变化呈先降后升 ,15 %含水量的电解质外渗率最低 ;而在冰冻保护剂作用下 ,离体胚保存最佳含水量为 10 % ,其质膜所受的伤害比较轻 ,电解质外渗量较小 ,膜修复能力强     

LN2保存处理后苦槠种子的膜透性

研究了苦槠种子和离体胚在超低温保存过程中含水量，冷冻方式，解冻方式，以及离体胚冰冻保护剂对电导率的影响，结果表明：含水量是超低温保存成功的关键，适度脱水可大幅度降低苦槠种子和离体胚超低温保存过程中的质膜伤害；随着含水量的降低，其电导率的变化呈先降后升，15%含水量的电解质外渗率最低，而在冰冻保护剂作用下，离体胚保存最佳含水量为10%，其质膜所受的伤害比较轻，电解质外渗量较小，膜修复能力强。     

小叶锦鸡儿种子超干保存研究

采用硅胶室温干燥法,将陕西吴起县种源小叶锦鸡儿种子含水量由6.7降至5.5,4.6,4.1和3.7,对不同含水量小叶锦鸡儿种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数、相对电导率、脱氢酶活性和α-淀粉酶活性进行测定,并对小叶锦鸡儿种子老化(50℃,30 d)后发芽率和活力及生理生化指标进行测定.结果表明:小叶锦鸡儿种子含水量不低于4.6时,种子发芽率、脱氢酶活性、α-淀粉酶活性保持在相对较高的水平;超干燥种子抗老化能力强与自然干燥含水量种子无明显差异.试验证明:当含水量不低于4.6时,利用超干技术保存小叶锦鸡儿种子是可行的.     

超低温保存对玉蝉花种子生理生化特性的影响1）

以玉蝉花种子为试材,将种子自然含水量9．8％分别降至7．2％、5．0％、3．6％、1．9％,液氮保存超24 h后,采用自来水和室温两种方法化冻,测定种子电导率、发芽率、过氧化物酶活性等活力指标,探讨超低温保存对玉蝉花种子生理生化特性的影响及其超低温保存的可行性。结果表明：玉蝉花种子进行超低温保存是可行的,含水量和化冻方式是影响玉蝉花种子超低温保存效果的重要因素,超低温保存可以适度脱水,选择含水量3．6％的种子保存后有较高的发芽率;超低温保存后采用自来水化冻,玉蝉花种子的发芽率、可溶性蛋白质量分数、POD酶活性优于室温化冻,并且细胞膜结构及透性受损伤小。     

矮沙冬青种子的超干保存

采用硅胶干燥法对矮沙冬青种子进行超干保存的研究,结果表明将种子含水量降至5%以下,能显著提高抗老化能力。在同等老化处理条件下,对照种子发芽率和活力指数已大幅下降,而超干种子的发芽率和活力指数所受影响较小。对超干种子的电导率、脱氢酶活性的研究结果表明,含水量为3.35%的超干种子细胞膜通透性较低,脱氢酶活性较高。回湿处理是保证超干种子活力的关键因素,采用室内回湿24 h+饱和水蒸气回湿24 h可以显著提高矮沙冬青超干种子的活力。说明利用超干技术保存矮沙冬青种子是可行的。     

超低温保存对玉蝉花种子生理生化特性的影响

以玉蝉花种子为试材,将种子自然含水量9.8%分别降至7.2%、5.0%、3.6%、1.9%,液氮保存超24 h后,采用自来水和室温两种方法化冻,测定种子电导率、发芽率、过氧化物酶活性等活力指标,探讨超低温保存对玉蝉花种子生理生化特性的影响及其超低温保存的可行性。结果表明:玉蝉花种子进行超低温保存是可行的,含水量和化冻方式是影响玉蝉花种子超低温保存效果的重要因素,超低温保存可以适度脱水,选择含水量3.6%的种子保存后有较高的发芽率;超低温保存后采用自来水化冻,玉蝉花种子的发芽率、可溶性蛋白质量分数、POD酶活性优于室温化冻,并且细胞膜结构及透性受损伤小。     

液氮保存对苦槠离体胚内源SOD和α-淀粉酶活性的影响

测定不同含水量、冷解冻方式处理的苦槠离体胚内源SOD和α-淀粉酶活性,研究其超低温保存效果.结果表明:不同处理苦槠离体胚的SOD和α-淀粉酶活性差异显著,含水量水平是影响其液氮保存的关键因素,而冷解冻方式也是一重要因素.12%含水量和缓冻快解法处理,苦槠离体胚的超低温保存效果最好,SOD和α-淀粉酶活性最高,分别达212.77 U/h和4.764 mg/m in.     

超低温保存对贵州酥李种子生理生化特性的影响

以贵州酥李种子为试验材料,探讨了超低温保存不同解冻方式对酥李种子生理生化特性的影响。结果表明,慢速解冻和快速解冻降低脱氢酶、α-淀粉酶、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性以及增加丙二醛(MDA)含量,而缓慢解冻中脱氢酶活性和丙二醛含量均无显著性变化,其余酶活性降低。因此,适宜酥李种子超低温保存程序为缓冻缓解。     

刺槐种子超低温保存研究

[目的]为实现刺槐种质资源超低温保存提供理论和实践依据。[方法]研究了刺槐种子的含水量、不同化冻方式及不同程度的机械撞击对超低温保存后刺槐种子的发芽率、电导率和脱氢酶活性的影响。[结果]当刺槐种子的含水量从7.1%增加到9.1%,发芽率和TTCH含量明显降低,而电导率上升。这说明在保持种子活力的前提下,低含水量有利于刺槐种子的超低温保存。对于超低温保存后的刺槐种子,40℃温水化冻比慢速室温解冻更为适宜。机械撞击对处于超低温保存下的刺槐种子有一定的影响,故应尽量避免剧烈震动。[结论]含水量对超低温保存后刺槐种子的发芽率影响显著。40℃温水化冻5min的化冻方式对超低温保存后刺槐种子的活力影响较小,种子发芽率较高。     

哺乳动物胚胎冷冻保存研究进展

[目的]介绍哺乳动物胚胎冷冻保存技术的最新研究进展。[方法]从冷冻原理、防冻剂种类、冷冻方法、解冻方法等方面综述了哺乳动物胚胎冷冻保存技术的最新研究进展。[结果]胚胎冷冻保存的原理是阻止冷冻、解冻过程中细胞内形成致死冰晶;防冻剂的种类大致分为低分子量渗透性防冻剂、低分子量非渗透性防冻剂、大分子物质、生物活性物质;胚胎冷冻方法主要有常规慢速冷冻法、玻璃化冷冻法和快速冷冻法;解冻方法主要介绍了快速解冻。[结论]胚胎冷冻保存技术的应用愈加广泛,将对胚胎生物工程和其他生物技术产生推动作用。     

Dependence of the quality of embryos on the physiological state of cows

Embryos obtained from healthy cows with an average milk productivity are of higher quality and viability. Optimal results of cryopreservation of embryos from the highly productive and problem donor cows can be obtained only by traditional freezing technology. The quality and effectiveness of cryopreservation of embryos from cows with an average productivity does not depend on the technological method of cryopreservation. In addition to visual methods for assessing quality, a method for determining the viability of embryos by cultivation is used. This method is used both for freshly obtained and for thawed embryos of bovine animals. According to the results of our studies, the need to confirm the viability of thawed embryos by the cultivation method has been revealed, which will reduce the costs caused by the possibility of transplantation of nonviable embryos by 1/3.     

乙烯对春石斛类原球茎玻璃化超低温保存存活率的影响

[目的]为探究乙烯对PLBs超低温保存存活率的影响,以期为提高其存活率开拓思路.[方法]以春石斛'红梦幻'类原球茎(PLBs)为材料,分别在其玻璃化超低温保存的预培养和装载阶段添加外源乙烯供体乙烯利和乙烯合成抑制剂硝酸钴,测定PLBs超低温保存过程中内源乙烯前体1-氨基环丙烷羧酸(ACC)含量、ACC氧化酶(ACO)活...     

胚胎冷冻技术及其在转基因小鼠中的应用

随着生物工程技术的发展,出现了许多生物工程小鼠品系,促使胚胎冷冻技术得到了广泛应用。胚胎冷冻技术不仅为转基因动物提供可用胚胎,还使胚胎移植不受时间、地域限制,简化引种过程,防止疾病传播,为建立优良动物的胚胎库提供了条件。综述了几种常用的胚胎冷冻方法及其在转基因小鼠中的应用研究,指出了胚胎冷冻方法存在的主要问题,并展望了其发展前景。     

实验大鼠、小鼠胚胎的缓慢冷冻和玻璃化冷冻的比较

对3日龄小鼠胚胎和5日龄大鼠胚胎进行了玻璃化低温保存和缓慢冷冻保存的比较研究,从经过超数排卵的小鼠和大鼠中收集到了1897个8－16细胞的胚胎,经筛选后将I级和Ⅱ级胚计1738个（91．62%）分别进行两种低温保存试验,并对其中的881个冷冻胚胎分阶段进行复苏,复苏率分别为65．03％（小鼠69．59％,大鼠60．46％）和68．45％（小鼠72．61％,大鼠64．29％）,两者间无显著性差异（P＞0．05）。在复苏在胚胎中,选择其中的488个胚胎进行移植试验,结果,玻璃化冷冻保存胚胎的移植的受孕率为39．47％（89／222）,缓慢冷冻保存胚胎的移植的受孕率为42．56％（115／266）,两种低温保存方法经方差检验也无显著性差异（P＞0．05）。