秀珍菇多肽的制备及其抗氧化活性

以多肽得率为指标,酶解秀珍菇蛋白质制备多肽,通过正交试验优化制备工艺.正交试验结果表明,酶解各因素对秀珍菇多肽得率影响程度的大小为：pH>时间>温度>酶浓度;确定的最佳酶解工艺参数为：pH 11、时间1.5 h、温度55℃、碱性蛋白酶浓度6 000 U·g^-1,制备的多肽得率为70.96%;体外抗氧化能力测定结果表明：2.5 mg·mL^-1秀珍菇多肽对DPPH、ABTS⁺和羟基自由基的清除率分别为81.57%、99.81%、98.84%;SDS-PAGE检测结果表明,秀珍菇多肽的分子质量约为5.8 ku;氨基酸分析结果表明,秀珍菇多肽含有8种必需氨基酸,占氨基酸总量的43.2%.综上,在最佳酶解工艺下制备的秀珍菇多肽具有分子质量低且抗氧化能力强的特点.     

超声辅助酶解鹅肝蛋白的动力学和热力学及酶解物抗氧化性能

以鹅肝为原料,采用超声预处理鹅肝蛋白后,添加胰酶进行酶解,制备鹅肝多肽,研究超声辅助鹅肝蛋白酶解动力学和热力学,并比较常规酶解和超声辅助酶解制备鹅肝多肽的抗氧化性能。酶解时间为150 min时,与常规酶解相比,超声辅助酶解的水解度提高了16.05%。酶解时间为130 min时,与常规酶解相比,超声辅助酶解的鹅肝多肽得率提高了15.63%。酶解温度为20℃、30℃、40℃、50℃时,与常规酶解相比,超声辅助酶解动力学参数即反应速率常数k分别提高了214.00%、115.00%、64.00%、41.00%,其酶解反应的热力学参数Ea、△H、△S、△G分别下降了70.00%、79.00%、30.00%、2.00%,表明超声处理会导致蛋白质内部氢键破裂、氨基酸残基氧化修饰以及交联引发的聚合作用,降低其反应所需活化能,提高反应速率。抗氧化结果表明,超声辅助酶解产物中的多肽浓度为1 mg/ml时,其对2,2-二苯基-1-硝基苯肼(DPPH)自由基、2,2-联氮基双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氮盐(ABTS)自由基和羟自由基的清除率分别为51.20%、67.80%、61.70%,与常规酶解物相比差异显著(P0.05)。超声预处理破坏了鹅肝蛋白的非共价作用,包括氢键、范德华键和疏水性,鹅肝蛋白水解物能提供更多的单电子或氢的多肽,因此超声辅助酶解产物具有较高消除自由基的功能,表明超声辅助酶解制备的鹅肝多肽具有较高的抗氧化性能。本研究不仅为鹅肝抗氧化多肽的制备提供了科学依据,还为鹅肝蛋白精深加工及其附加值的提高奠定了理论基础。     

复合酶法提取金银花多糖及其抗氧化性

本文旨在优化金银花多糖的复合酶法提取工艺,并评价金银花多糖的抗氧化活性。以不同复合酶(纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶)配比、液料比、pH、酶解温度、酶解时间为试验因素,以金银花多糖得率为考察指标,正交试验筛选复合酶法提取的最佳工艺条件;采用自由基清除能力体系评价金银花多糖的抗氧化活性。结果表明,复合酶最佳配比为纤维素酶2.0%,果胶酶2.0%,木瓜蛋白酶0.5%;复合酶酶解金银花提取多糖的工艺条件为液料比25:1(m L/g)、pH为4.5、酶解温度50℃、酶解时间60 min,在此条件下金银花多糖得率为12.36%;金银花多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH和O2-·自由基的半数抑制浓度分别为0.811 mg/m L、1.363 mg/m L,但与维生素C比较,抗氧化活性较弱。金银花多糖提取工艺方便可行,得率较高,提取到的多糖具有较强的抗氧化活性。     

木瓜蛋白酶酶解核桃饼粕制备抗氧化多肽的研究

以核桃饼粕为原料,研究优化木瓜蛋白酶酶解核桃饼粕制备抗氧化活性多肽的工艺条件。通过研究酶解温度、酶解时间、底物浓度、酶添加量以及酶解pH值对酶解产物抗氧化活性的影响,正交优化酶解工艺参数,并将酶解物利用葡聚糖凝胶层析柱进行分离,测定其抗氧化活性。结果表明,当木瓜蛋白酶在酶解温度为60℃、酶解时间为3.5 h、底物浓度为2.5 g/100 mL、加酶量为6 500 U/g、pH值为6.5的酶解条件下,酶解物的抗氧化活性较好,酶解液对二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)和羟基自由基的清除率分别为52.24%和53.20%;酶解液经葡聚糖凝胶层析柱分离,酶解物分离多肽的分子量越大,抗氧化活性越低。     

单-双酶法制备苏麻饼粕多肽工艺的优化

为脱脂苏麻饼粕的开发利用提供参考,以可溶性氮含量及多肽提取指数为指标,考察原料处理方式、酶种类、酶底比、酶解方法等因素对苏麻多肽提取的影响,优化单-双酶法直接酶解苏麻饼粕制备苏麻多肽工艺。结果表明:碱性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶单独酶解的最佳工艺是酶底比分别为5%、7%和5%,料液比均为3%,50℃酶解6h,该条件下,碱性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶单独酶解的多肽提取指数分别为(49.05±0.91)%、(47.98±0.36)%和(44.22±0.87)%。双酶法酶解的最佳工艺为料液比5%,55℃条件下,先加3.5%的胰蛋白酶在pH8.0条件下酶解3h,调节pH为9.5后再利用3.5%的碱性蛋白酶酶解3h,该条件下,酶解液中可溶性氮含量较单酶酶解显著提高,苏麻多肽提取指数达(52.88±0.39)%。     

香港巨牡蛎中牛磺酸的超声、酶解提取工艺研究

以牛磺酸得率为考察指标,通过单因素和正交试验,研究了超声法、蛋白酶酶解法提取香港巨牡蛎中牛磺酸最佳工艺条件,并在最优工艺条件下进行超声辅助酶解提取.确定了超声法最佳工艺条件为超声时间40 min、功率825 W、温度70℃,牛磺酸得率为0.276(±0.013)％;碱性蛋白酶作为优选酶种,最佳工艺条件为加酶量4 000U/g、料液比1∶2、酶解时间6h,牛磺酸得率为0.746(±0.053)％,显著高于超声提取法;超声辅助酶解提取,牛磺酸得率为0.782(±0.023)％,高于碱性蛋白酶酶解法,可优选应用于牡蛎牛磺酸的提取.     

超声辅助酶法制备山杏仁多肽

本研究以山杏仁为原料,研究了蛋白酶种类、超声功率、超声时间、超声温度、加酶量、pH值、底物浓度对水解度和多肽得率的影响。结果表明:超声功率80 w、超声时间180 min、超声温度50℃、复合蛋白酶加量5000 U/g,pH值6.0,底物浓度40 g/L,山杏仁多肽得率达到最大。该条件下,山杏仁多肽得率为56.68±0.99%。     

超声辅助复配酶法制备黄姜中薯蓣皂素

[目的]探讨超声辅助酶法水解黄姜生产薯蓣皂素工艺。[方法]通过正交试验优化纤维素酶和蜗牛酶组成的复配酶水解黄姜,建立高效液相色谱法定量薯蓣皂素,计算得率。[结果]酶解温度对薯蓣皂素得率的影响最大;最佳酶水解条件是酶解时间为48 h,酶添加量为物料的8%,酶解pH为6.0,酶解温度为50℃,薯蓣皂素的得率为0.524 9%。采用超声破碎辅助复配酶解法,薯蓣皂素的得率为0.630 9%。[结论]利用超声辅助纤维素酶和蜗牛酶提取黄姜中薯蓣皂素比直接酶解法得率提高了25%,接近酸解法的得率,应用潜力大。     

羊肚菌抗氧化肽的制备、纯化和鉴定

以羊肚菌蛋白为原料,采用超声辅助复合酶法制备抗氧化多肽,通过单因素和响应面实验确定抗氧化多肽的最佳制备工艺。结果表明,以DPPH自由基清除率为抗氧化指标确定制备羊肚菌抗氧化多肽的最佳制备工艺为:酶解时间60 min、酶解温度55.69℃,酶解p H值7.95,加酶量4 000 U/g;在此条件下得到的酶解多肽的DPPH自由基清除率最大,为89.09%。将所得多肽依次经过超滤、DEAE-32、Sephadex G-25筛选得到DPPH自由基清除率最高的多肽组分,其清除率达到96.71%,经质谱鉴定,其氨基酸序列为FPLIPGH。     

大蒜秸秆可溶性膳食纤维的超声复合酶解提取及其抗氧化性分析

为了增强大蒜秸秆膳食纤维的生理功能,研究了不同提取方法对其可溶性膳食纤维(Soluble dietary fiber,SDF)含量的影响。以SDF含量为响应值,对比分析超声、酶解及超声复合酶解法的改性效果,研究固液比、超声时间、超声功率、加酶量和酶解时间等因素对SDF得率的影响,通过羟基(·OH)和1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(DPPH·)清除率评价SDF的体外抗氧化能力。结果表明,超声复合酶解法提取的SDF得率最高,通过单因素优化试验确定其最佳提取条件为固液比1∶30、超声功率300 W、超声时间15 min、加酶量5%、酶解时间4 h;SDF对·OH和DPPH·的清除率较强,其IC50(50%Inhibitory concentration,IC50)分别为1.41和0.64 mg/mL,且在一定浓度范围内,自由基清除率与SDF浓度呈现剂量效应线性关系,说明大蒜秸秆SDF是一种较好的抗氧化剂。     

复合酶法水解大麦虫蛋白制备酸性多肽及其抗氧化活性

采用复合蛋白酶(胰蛋白酶、碱性蛋白酶)对大麦虫蛋白进行控制酶解,研究酶解时间、酶活比、底物浓度、酶解温度、pH与加酶量等对酶解反应的影响;采用中心组合试验设计,优化酶解工艺;并对大麦虫酸性多肽清除自由基能力进行了测定评价.结果表明,酶解最佳条件为底物浓度5%,时间120 min,胰蛋白酶∶碱性蛋白酶1∶1,pH 8.71,温度48℃,加酶量16.91 mg/g.该酸性多肽对(O)_2~(-·))、DPPH·自由基有很好的清除作用,具有很强还原力.利用优化工艺制得酸性肽得率为79.05%.     

双酶分步酶解制备玉米多肽

在Alcalase酶水解玉米蛋白粉研究的基础上,以多肽得率为指标,从5种不同蛋白酶中筛选出Protex.7L酶作为最适水解酶继续酶解玉米蛋白Alcalase酶水解物.采用响应面分析法确定Protex.7L酶继续酶解制备玉米多肽的最佳工艺参数为加酶量1090 U·g-1,p H 7.6,反应温度42.0℃时,继续酶解60 min.在此条件下,体系最终的多肽得率可达(56.28±0.18)%,与理论预测值的相对误差为±1%,比单独应用Alcalase酶提高21.05%.     

单-双酶法制备苏麻饼粕多肽工艺的优化

为脱脂苏麻饼粕的开发利用提供参考,以可溶性氮含量及多肽提取指数为指标,考察原料处理方式、酶种类、酶底比、酶解方法等因素对苏麻多肽提取的影响;并优化单-双酶法直接酶解苏麻饼粕制备苏麻多肽工艺。结果表明：碱性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶单独酶解的最佳工艺是酶底比分别为5%、7%和5%,料液比均为3%,50℃酶解6 h,该条件下,碱性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶单独酶解的多肽提取指数分别为（49.05±0.91）%、（47.98±0.36）%和（44.22±0.87）%。双酶法酶解的最佳工艺为料液比5%,55℃条件下,先加3.5%的胰蛋白酶在pH8.0条件下酶解3 h,调节pH为9.5后再利用3.5%的碱性蛋白酶酶解3 h,该条件下,酶解液中可溶性氮含量较单酶酶解显著提高,苏麻多肽提取指数达（52.88±0.39）%。     

青叶胆多酚复合酶协同超声辅助提取工艺及抗氧化性研究

为确定复合酶协同超声辅助提取青叶胆多酚Swertia mileens polyphenols(SMP)的最佳工艺及其抗氧化活性，以青叶胆为材料，设计复合酶协同超声辅助提取工艺单因素试验，筛选影响显著因素，再利用Box-Benhnken中心组合设计响应面试验，确定最优工艺，并通过测定SMP对DPPH自由基(DPPH·)和亚硝酸根离子(NO₂^-)的清除能力来评价其抗氧化性。结果表明：复合酶协同超声辅助提取SMP最佳工艺条件为酶解温度40℃，酶解时间50 min，液料比35∶1 mL·g^-1，乙醇体积分数63%，超声功率300 W，复合酶用量6%(木瓜酶用量5%，纤维素酶用量1%，以青叶胆干粉质量为基准，下同)，在此条件下SMP提取量为17.50 mg·g-1;SMP对DPPH自由基、亚硝酸根离子有较强的清除能力，且随着多酚质量浓度的增大，清除能力增强；SMP质量浓度为0.007 mg·mL^-1时，对DPPH自由基和亚硝酸根离子清除率分别为80.3%和92.3%。响应面法优化的复合酶协同超声辅助提取青叶胆...     

木瓜蛋白酶水解鸡骨泥制备短肽工艺优化

为了探究酶解鸡骨泥制备抗氧化肽的最佳工艺,研究了以木瓜蛋白酶酶解鸡骨泥时各因素对短肽得率的影响,以及制备的抗氧化肽对羟自由基、超氧阴离子自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除能力。试验探究了酶解过程中不同底物质量分数、加酶量、反应温度和反应时间对短肽得率的影响。采用响应曲面优化得到了以短肽得率为目标的木瓜蛋白酶酶解鸡骨泥的最优工艺,反应条件为:底物质量分数11.44%,加酶量211.11 mg·g~(-1),反应温度57℃,反应时间3 h,在该条件下酶解液短肽得率预期为59.20%,实测为58.87%±0.51%。采用优化工艺制备的抗氧化肽,在达到32 g·L~(-1)时与维生素C清除羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基的能力相近,说明鸡骨泥肽具有一定的抗氧化活性。     

超声波辅助酶解鲭鱼制备抗氧化肽的研究

针对鲭鱼鱼肉蛋白质含量相对较高的特点,利用超声波辅助酶解制备抗氧化肽。以双缩脲法测得多肽含量,以对DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基的清除率为指标,探究制备鲭鱼抗氧化肽的最佳工艺条件。结果表明,最佳的酶解制备条件为:中性蛋白酶加酶量3%、酶解温度50℃、底物浓度4%、超声波辅助酶解时间2.5 h,在此条件下,得到的多肽抗氧化能力较强,对DPPH自由基的清除率达到89.33%,采用中性蛋白酶在超声波辅助下酶解鲭鱼蛋白制备抗氧化肽是可行的。     

响应面法优化酶解鹿角冒渣制备抗氧化活性肽工艺

以游离氨基酸含量和抗氧化活性为试验指标,分别采用5种蛋白酶酶解制备鹿角冒抗氧化多肽,对鹿角冒渣为原料制备鹿角冒抗氧化活性肽的工艺进行了研究。结果表明,碱性蛋白酶产物的游离氨基酸含量和抗氧化活性均较高,因此水解用酶选择碱性蛋白酶。通过单因素和响应面回归试验对酶解工艺参数进行优化,得出最佳酶解条件:加酶量6%、底物浓度15%、pH8.5、温度53℃、反应时间4 h,制备的鹿角冒渣抗氧化肽对DPPH·的清除率预测值为74%,验证试验所得实测平均值为(74.65±1.24)%,实测结果与预测值符合良好。     

响应面法优化酶解辅助-超声提取菥蓂中的黑芥子苷

为从菥蓂种子中高效提取高得率的目的活性成分黑芥子苷,采用酶解辅助-超声提取法,并利用高效液相色谱测定其含量。在单因素试验的基础上,以酶添加量、酶解温度和酶解时间为关键因素,以黑芥子苷得率为响应值,应用Design-Expert V11软件,Box-Behnken Design响应面法优化菥蓂种子中黑芥子苷酶解辅助-超声提取工艺;并与单独超声、索氏提取2种提取法的黑芥子苷得率进行比较。结果表明,采用Agilent HCC18柱(25 mm×4.6 mm×5μm),流动相A和B分别为甲醇和0.5%磷酸水溶液,检测波长215 nm,柱温25℃,流速1 mL·min^-1,进样量10μL,在等度洗脱10 min下,获得的分离效果和峰型较好。以筛选出的碱性蛋白酶为酶制剂,最佳提取工艺条件为：酶解温度49℃,酶用量2.90%,酶解时间18 min;在此条件下,菥蓂种子中黑芥子苷得率为2.679 mg·g^-1,经方差分析与理论值(2.687 mg·g^-1)差异不显著,但显著高于单独超声提取(2.036mg·g^-1)...     

超声辅助酶解嫩化淘汰蛋鸡鸡胸肉的工艺优化

为超声辅助酶解应用于嫩化淘汰蛋鸡肉质的改善提供依据,以淘汰蛋鸡鸡胸肉为原料,肌肉剪切力、pH、色泽、保水性等为指标,研究超声辅助酶处理对淘汰蛋鸡肉品质的影响,并在此基础上筛选对鸡肉嫩度影响较明显的因素,以肌肉剪切力为响应值,优化超声辅助酶处理嫩化淘汰蛋鸡鸡胸肉的工艺条件。结果表明:超声和酶处理主要改善鸡肉的嫩度和保水性;超声辅助酶嫩化鸡胸肉的最佳工艺条件为木瓜蛋白酶浓度45U/g,酶处理时间和温度分别为50.3min和31℃,超声功率700W,在此嫩化条件下鸡胸肉的剪切力为(26.50±0.41)kgf,较未处理鸡胸肉降低50%左右。     

藏鸡蛋卵白蛋白酶解制备抗氧化肽及其体外抗氧化活性

采用碱性蛋白酶水解藏鸡蛋卵白蛋白,制备抗氧化活性肽,以水解度和超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除率为指标,通过单因素试验和正交试验确定最佳酶解参数,并对酶解多肽的体外抗氧化活性进行测定。结果表明:碱性蛋白酶酶解的最适条件为底物质量分数2%、酶解时间5 h、酶添加量7 000 U/g;在最适条件下,碱性蛋白酶酶解所得抗氧化肽的O_2~-·、DPPH自由基、羟基自由基(·OH)清除率分别为71.75%、56.47%、84.46%;还原力、抗脂质过氧化能力分别为0.87、82.83%。