鳕鱼鱼鳔抗氧化肽制备工艺研究

本研究以鳕鱼(Gadus morhua)鱼鳔为原料,选用6种不同蛋白酶对其进行酶解,通过比较酶解液的水解度与对DPPH自由基的清除能力,筛选出最佳蛋白酶为复合蛋白酶。通过单因素实验与响应面优化实验,确定最佳提取工艺：酶解时间为6 h、pH为7.21、温度为58.56℃、酶添加量为200 U/ml。研究结果显示,DPPH自由基清除率为61.1%,与理论值62.0%接近。鳕鱼鱼鳔肽体外清除自由基能力实验发现,酶解产物对羟基自由基与超氧阴离子自由基具有一定的清除能力,同时,具有较好的亚铁离子螯合能力。体外模拟胃肠消化后多肽的抗氧化活性变化,结果显示,体外模拟消化产物水解度有增加,对自由基的清除能力与亚铁离子螯合能力有一定的下降,其可能原因为,经模拟胃肠消化后多肽的结构发生一定的变化,导致了抗氧化活性的变化。     

罗非鱼鱼鳞胶原寡肽制备

罗非鱼鱼鳞经水洗、酸浸、碱浸处理后,采用热水法提取胶原蛋白并对其进行酶解,以酶解液水解度为指标筛选适合的酶,研究酶添加量、酶解时间、底物浓度和酶解温度对水解度的影响。在单因素实验的基础上,通过正交实验优化鱼鳞胶原蛋白的酶解条件。实验结果表明:当酶添加量6 000 U/g、酶解时间8 h、底物浓度5%、酶解温度50℃时,鱼鳞胶原蛋白酶解液水解度最大,达到24.23%。此条件下制备的分子量小于1 000 Da胶原寡肽占82.40%。     

基于美拉德反应的狭鳕鱼排复配酶解工艺优化

为提高水产品加工副产物中蛋白质资源的综合利用率,采用复合蛋白酶和风味蛋白酶对阿拉斯加狭鳕鱼排进行复配酶解。以水解度为指标,考察初始p H、温度、料液比、加酶量、复配酶比例、时间对酶解液水解度的影响。在单因素试验基础上,采用Box-Behnken中心组合设计和响应面分析法,确定最佳的酶解工艺条件为:初始p H 7.0,温度47℃,料液比1∶2,加酶量3.0%,复合蛋白酶与风味蛋白酶比例1∶1,酶解时间3 h,此时酶解液水解度可达到38.74%。进一步的美拉德反应试验研究表明,在持续酶解9 h后,酶解液水解度、游离氨基酸含量增加趋势均趋于平缓,同时对美拉德反应产物的风味评价差异不显著,因此最终确定酶解时间为9 h。该研究可为利用狭鳕鱼排酶解液进行美拉德反应制备不同肉风味香料提供理论依据。     

不同水解工艺对鱼溶浆蛋白水解效果的影响

本研究采用单酶水解、复合酶水解、酸水解及酶酸耦合水解4种水解工艺对鱼溶浆进行水解,以水解度为标准确定最佳水解工艺.结果表明:单酶水解工艺中,在最优条件下(酶解温度50℃,初始pH 5,加酶量2000 U/g,固液比1:15)以中性蛋白酶酶解鱼溶浆,其水解度最高值为40.37％;复合酶水解工艺中,中性蛋白酶和碱性蛋白酶复...     

鳕鱼下颌肉水解蛋白制备工艺优化

通过单因素实验(蛋白酶种类、加酶量、料液比、水解时间、温度和pH值),对鳕鱼下颌肉进行酶解分析,以水解度(DH)为指标,确定最适蛋白酶为复合风味蛋白酶,其单因子最佳水解条件为:加酶量为1 400 U/g(相对于鱼糜质量)、料液比为1:3、水解时间为5 h、温度为43℃、pH 7.6。经正交试验验证,复合风味蛋白酶的最佳酶解工艺条件为:pH7.0,料液比1∶2,加酶量为1 400 U/g,水解8 h,DH可达42.62%。     

沙蜇饮料基料酶解液酶解工艺的研究

以水解度为指标,选用胰蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和胃蛋白酶对沙蜇进行单酶水解,确定胰蛋白酶为水解用酶。通过正交实验确定胰蛋白酶的水解条件为：温度45℃、时间5．5小时、料液比1：4．5、加酶量255U／ml、pH7．5。实验表明,适宜条件下水解度为24．59％。水解液选用柠檬酸为除腥剂,处理后的水解液腥味和涩味都有大幅度降低。     

紫菜降血压肽酶法制备工艺的优化

摘要：降血压肽又称为血管紧张素转化酶抑制肽,是具有降血压活性的生物活性肽,对高血压患者有显著疗效。为探讨从紫菜中制备降血压肽的酶法工艺,本实验选用AS．1398中性蛋白酶、胰蛋白酶、复合酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶等6种蛋白酶分别对紫菜进行酶解,通过对其酶解液的ACE抑制活性和水解度的比较,发现采用AS．1398中性蛋白酶酶解的产物ACE抑制活性最高。对AS．1398中性蛋白酶的酶解工艺进一步优化,确定其最佳酶解工艺为：温度50℃、pH值7．5、加酶量E／S10000U·g^-1。在此条件下,酶解4h和10h的酶解产物抑制活性最高均达70％以上,并发现紫菜酶解液的ACE抑制率与水解度的增长不成显著的线性关系。     

复合酶提取牡蛎抗氧化肽的工艺研究

以牡蛎为原料,首先从木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶中筛选出胰蛋白酶为内切酶,以水解度为指标,得到最佳的酶解工艺条件:时间4h,温度50℃,pH8.0,料水比1∶2,加酶量3％(7 500 U/g),水解度为49.50％;同时以水解度为指标,得到外切酶风味蛋白酶的最佳酶解工艺:时间5h,温度50℃,pH8.0,料水比1∶2,加酶量3％ (450 U/g),实际水解度50.95％.最后,以清除羟自由基能力和水解度为指标,探讨内切酶(胰蛋白酶)和外切酶(风味蛋白酶)不同复合酶解方式的抗氧化能力.最终确定,复合酶解制备牡蛎抗氧化肽效果最好,其酶解条件为胰蛋白酶为3％(7 500 U/g)、风味蛋白酶加酶量为3％ (450 U/g),pH8.0,时间5h,料水比1∶2,温度50℃时,水解度高达53.94％,体外清除·OH的EC50为0.56 mg/mL.     

鳙鱼骨胶原多肽的制备及其性质分析

为提高鳙鱼骨的高值化利用,以鳙鱼骨为原料,胶原多肽得率为指标,筛选最佳水解蛋白酶,进行骨胶原多肽的工艺优化,并对骨胶原多肽的氨基酸组成、相对分子质量、粒径、电位、显微结构等理化性质进行分析。结果显示,胰蛋白酶为最佳水解酶,骨胶原多肽的最佳酶解工艺为：初始pH 8,酶添加量2.5%,酶解时间5 h,酶解温度50℃,料液比1:10 g/mL,胶原多肽得率为52.19%。骨胶原多肽由17种氨基酸组成,总含量为76.15 g/100 g,其中酸性氨基酸含量较高,可能具有较强的钙结合能力。鳙鱼骨胶原多肽相对分子质量主要在5 000 u以下,占比高达97.81%,表明主要为小分子肽,并且其平均Z-粒径为399.90±2.70 nm,多分散指数(PDI)为0.40±0.01,表明物质分布较均匀,骨胶原多肽粒子表面呈负电荷状态,具有疏松多孔的结构。研究表明,鳙鱼骨胶原多肽营养物质较丰富,其小分子肽易于人体吸收,疏松多孔的结构也有利于肽钙螯合物的制备,该研究不仅为鳙鱼骨类产品的精深加工提供理论依据,也为新型钙制剂的制备提供优良原料。     

海参多肽的研究进展

1海参多肽的制备 1．1 酶解工艺目前用于海参多肽提取的酶解蛋白种类很多,按其来源大致可分为动物来源、植物来源和微生物来源三类。不同的蛋白酶对同一种底物的水解效率是不同的,而且不同的蛋白酶由于酶切位点及酶切作用方式的不同,其酶解产物中营养成分多肽的肽段分子量大小和游离氨基酸的组成上存在非常大差异。     

斑点叉尾鮰鱼骨胶原多肽螯合钙的制备及其特征

以斑点叉尾〖XCF5H.TIF〗鱼骨酶解胶原多肽液和氯化钙为原料,螯合率为指标,在一定条件下制备胶原多肽螯合钙,并考察温度、pH、时间、多肽与钙的质量比对螯合率的影响。在单因素实验结果的基础上,采用BoxBehnken中心组合设计和响应面分析法,确定最佳螯合工艺条件为温度60 ℃、pH 5.4、时间1.5 h、质量比2∶〖KG-*2〗1,此条件下,螯合率达82.53%。紫外吸收和傅里叶变换红外光谱扫描的结果表明,骨胶原多肽与钙形成了螯合物,且其氨基酸组成符合典型的胶原样蛋白特征。     

响应面法优化末水坛紫菜蛋白酶解工艺及其酶解液抗氧化活性研究

为实现末水坛紫菜(Porphyra haitanensis)的高值化利用,研究了末水坛紫菜的蛋白酶解工艺及其酶解液的抗氧化活性。以酶解产物水解度和还原力为指标,分别采用单因素和响应面优化实验筛选出最适蛋白酶和最佳酶解工艺参数;通过测定酶解液还原力对1,1-二苯基-三硝基苯肼(DPPH)自由基、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O_2^-·)的清除作用,研究了最高水解度下的酶解液的抗氧化性活性。结果表明,中性蛋白酶是6种蛋白酶中的最适用酶;最佳酶解条件为:底物质量浓度35 g·L^-1、加酶量31 200 U·g^-1、温度45℃、pH 7.6、酶解时间5 h,在此条件下坛紫菜水解度达31.37%;酶解液还原力为2.2,对DPPH、·OH和O_2^-·自由基清除率分别为56.26%、85.84%和72.73%。结果表明,中性蛋白酶可以有效水解末水坛紫菜,水解后的酶解产物具有较好的抗氧化能力和应用前景。     

海参多肽的制备工艺优化及其抗氧化测定

本文对海参酶解工艺条件进行优化,提取液经超滤和冷冻干燥获得海参多肽,并测定其组成及抗氧化活性。结果显示,中性蛋白酶对海参最佳的酶解工艺为：加酶量1800U／g,酶解温度为55℃,酶解pH值为7．5,酶解时间为3h。经超滤与冷冻干燥后,多肽得率为6．9％,蛋白质含量达94．9％。且在抗氧化方面具有较好的清除羟自由基和超氧自由基能力。     

酶法制备鲢鱼蛋白抗氧化肽研究

为制备具有良好抗氧化活性的鲢鱼蛋白肽段,选择了5种蛋白酶在相同酶活力下水解鲢鱼鱼肉蛋白,通过三硝基苯磺酸法(TNBS法)和分光光度法分别测定了鲢鱼鱼肉蛋白的水解度及酶解产物的抗氧化活性,并分析了水解度与抗氧化各指标间的相关性.结果表明:鲢鱼鱼肉蛋白的5种酶解产物中,碱性蛋白酶酶解鲢鱼鱼肉蛋白5 h后的水解度最高;清除DPPH自由基能力和还原力较强的是胃蛋白酶酶解产物,其清除DPPH自由基能力最高达到了61%,还原力最高达到了1.6;酶解产物的水解度和还原力分别与亚铁离子螯合力具有显著的相关性(P﹤0.05).酶的种类对鲢鱼蛋白的水解度和酶解产物的抗氧化活性有较大的影响.     

3942中性蛋白酶酶解中国毛虾蛋白制备血管紧张素转移酶抑制肽

采用3942中性蛋白酶酶解中国毛虾(Acetes chinensis)蛋白，制备具有抑制血管紧张素转移酶(ACE)活性的多肽。采取正交实验研究料水比、酶量、反应温度、反应时间4个因素对酶解中国毛虾蛋白产物的ACE抑制活性的影响。结果显示，在料水比1：3(体积比)，酶量0．5％，温度45℃，时间8h的水解条件下得到的酶解产物F7的ACE抑制活性最高，其抑制率达到92．86％。用层析柱Sephadex G-25、SP-Sephadex C-50对F7进行分离纯化，选取ACE抑制活性最高的峰进一步用反相高压液相色谱进行纯化，得到单一组分FⅠ。经飞行时间质谱和碰撞诱导裂解分析确定，FⅠ为新型的ACE抑制肽Ser-Pro，IC50值为272μmol／L。     

鲢酶解物对羟自由基的清除作用

通过测定酶解物对Fenton体系产生的羟自由基的清除效果，从胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶和复合蛋白酶5种酶中，筛选出木瓜蛋白酶和胰蛋白酶作为酶解鲢制备具有较高清除羟自由基活性酶解物的理想水解酶；用正交试验L9(3^4)对两种酶的水解条件进行了优化，并对最佳酶解条件下得到的酶解物进行Sephadex G-25凝胶柱分离，洗脱液分别在波长280nm处比色，测定酶解物中主要抗氧化活性肽的分子量分布。结果表明，木瓜蛋白酶在温度50℃、酶解时间15min、pH=6．5、酶质量分数1．50％、底物：水=1：2的水解条件下，酶解物对羟自由基清除效果较好，清除率为88．2％；胰蛋白酶在温度55℃、酶解时间60min、pH=8．0、酶质量分数0．25％、底物：水=1：2的水解条件下，酶解物对羟自由基清除效果较好，清除率为84．2％。木瓜蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时有最大羟自由基清除率峰，清除率为95．1％，在最大峰处酶解物中活性肽的分子量为2．2kDa；胰蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时也有最大羟自由基清除率峰，其清除率为89．6％，该峰处活性肽的分子量为14．2kDa。     

沙丁鱼下脚料酶解物功能性及抗氧化性

利用Alcalase酶水解沙丁鱼下脚料,制备沙丁鱼蛋白水解物,分析不同水解度的蛋白水解物的功能性及抗氧化性。结果表明沙丁鱼蛋A水解物的溶解性随着水解度的增加而增加,水解度为10．16％的水解物在pH6～10的范围内,具有极好的溶解性。而其乳化性和起泡性随着水解度的增加而降低。不同水解度的沙丁鱼蛋白水解物都体现出高于50％的抑制亚油酸的过氧化活性。水解度为10．16％的沙丁鱼蛋白水解物具有较高的DPPH清除能力,DPPH自由基清除能力达到43％。酶解处理是利用沙丁鱼下脚料的一种有效方法。     

木瓜蛋白酶在制取斑鰶鱼蛋白中的应用

为确定木瓜蛋白酶酶解斑鰶鱼的条件。研究了酶解温度、酶浓度、酶解时间、加水量、pH值对斑鰶鱼氨基氮含量和总氮得率的影响。结果表明：温度小于55℃。随着酶解温度的提高、酶浓度的增加、酶解时间的延长斑鰶鱼酶解液氨基氮含量和总氮得率均增加;pH值对水解效果及氮回收率影响不大。综合考虑,最佳水解条件为：温度55℃。加酶量6．0‰。酶解时间1．5h．原料：水=1：2．5,pH值6．8。此时。氨基氮生成率达26．7％。总氮得率2．28％。     

海地瓜中具吸湿保湿特性的胶原蛋白肽提取工艺研究

本文研究了海地瓜（Acaudina molpadioides）胶原蛋白多肽的提取工艺。利用氯化钠溶液去除海地瓜中的非胶原蛋白,通过单因素实验得出去除非胶原蛋白氯化钠的最佳浓度和体积：浓度为9％,体积为10倍海地瓜质量的氯化钠溶液,浸泡24h,可除去的非胶原蛋白占总蛋白的11．5％。通过单酶实验,选择AS．1398中性蛋白酶为实验用酶。以吸湿性和保湿性为指标,在单因素水平的基础上,采用正交实验对制备海地瓜胶原蛋白多肽的条件进行了优化,获得最佳工艺条件为：料液比为1：2、温度40℃、加酶量2400U／g、pH7．5、时间3h,胶原蛋白多肽的吸湿率和保湿率分别为6．11％和81．23％。     

鱼鳞酶解工艺的研究

应用正交实验优选鱼鳞蛋白酶解的最佳条件,结果表明,鱼鳞酶解宜采用条件温和的枯草杆菌中性蛋白酶,用醋酸作软化的预处理,可使鱼鳞蛋白得到较高程度的水解,酶解时最佳温度为５０℃,酶量宜采用１．５％,酶解的最佳时间为６ｈ底物浓度宜选择２０％。